Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy

NOE (Nuclear Overhauser Effect): Alterao da intensidade da magnetizao longitudinal pelo acoplamento dipolar entre spins. NOESY: Experimento de RMN bidimensional que detecta acoplamento dipolar entre spins atravs do espao. O experimento NOESY de fundamental importncia na determinao da estrutura espacial da molcula. O propsito do experimento NOESY estabelecer conectividades entre spins via relaxao cruzada, pela transferncia de magnetizao longitudinal. As quatro fases que usamos para descrever um experimento 2D so ento:
Esquema experimental para de 3 experimentos bsicos em RMN homonuclear. Para os experimentos 2D, as linhas pontilhadas indicam os limites das etapas envolvidas.

Preparao: analogamente ao experimento COSY, com a magnetizao em equilbrio ao longo de Z, aplica-se um pulso de 90, para a criao de magnetizao transversa. Evoluo: neste estgio a magnetizao evolui sob ao da precesso de Larmor durante um tempo t1 e so portanto, marcadas com seus deslocamentos qumico I e S. Aqui, supomos que no existe acoplamento escalar entre estes spins. Na sequncia aplica-se um pulso de 90x para gerar a magnetizao longitudinal. Como um pulso de 90x transfere a magnetizao Y para Z e no afeta a magnetizao X, um subseqente experimento onde se aplica um pulso de 90-x realizado. Este pulso transfere a magnetizao Y para Z e no altera a magnetizao X. A subtrao dos dois sinais obtidos cancela, portanto a magnetizao em X, mantendo somente a magnetizao longitudinal em Z. Mistura: durante este perodo, as magnetizaes longitudinais Iz e Sz evoluem de maneira dependente, regido pela equao de Solomon, como vimos anteriormente, por um perodo determinado tm. Ao fim deste perodo um novo pulso de 90 aplicado para gerar a magnetizao detectvel.

Deteco: nesta fase o sinal evolui sob ao da precesso de Larmor e detectado durante um tempo t2. Aps a FT o primeiro e o terceiro termos geram os picos diagonais (I, I) e (S, S). O segundo e o terceiro termos do origem aos picos de correlao no espectro NOE. Para tm no muito longo, a intensidade dos picos proporcional s taxas de relaxao cruzada RIS=RSI. A informao estrutural do espectro NOE vem do fato de as taxas de relaxao cruzada RIS ser proporcional ao inverso da sexta potncia da distncia internuclear entre I e S. tese vf

COSY: picos entre hidrognios covalentemente ligados por um ou dois tomos. NOESY: Picos entre hidrognios espacialmente separados por menos de 5 .

Assinalamento sequencial.

Identificar a maior quantidade de NOEs. Integrar picos e converter volumes em distncias.

Aproximar volume pela intensidade do pico (curvas de nvel).

Wthrich-Classificar as distncias de acordo com seu valor, em fracas, mdias e fortes. fracas:3.5at4.5 mdias:2.5at3.5 fortes:1.8at2.5