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DEPARTAMENTO DE QUMICA COORDENAO DE ENSINO TCNICO Disciplina Labora !rio Q"#$ica Or%&nica ' T"r$a( )* Mo+"lo ,noi -.

-. T/ Pro012( Cleverson Al"nos( Maxmilliam De Souza Martins Patrcia Andrade Antunes Samuel Pessoa

Da a +a pr3 ica( 15/05/2013

Cromatogra ia em !a!el "!rinci!ais erros#

4-lo 5ori6on 7* S-$-s r- /87)

71

In ro+"9:o1 A cromatogra ia $ um m$todo sico%&umico de se!ara'(o dos com!onentes

de uma mistura) realizada atrav$s da distri*ui'(o desses com!onentes em duas ases) &ue est(o em contanto ntimo+ ,ma das ases !ermanece estacion-ria) en&uanto a outra se move atrav$s dela+ Durante a !assagem da ase m.vel so*re a ase estacion-ria) os com!onentes da mistura s(o distri*udos !elas duas ases de tal orma &ue cada um deles $ seletivamente retido !ela ase estacion-ria) o &ue resulta em migra'/es di erenciais desses com!onentes+011 2este contexto est- inserida a cromatogra ia em !a!el) a!er ei'oada !or Consden 3ordon e Martin em 1455) $ uma t$cnica sim!les) utiliza !e&uena &uantidade de amostra) tem *oa ca!acidade de resolu'(o e a!lica%se) de !re er6ncia) na se!ara'(o e identi ica'(o de com!ostos !olares+ 7 classi icada como cromatogra ia de !arti'(o) em raz(o de a ase estacion-ria e a ase m.vel serem l&uidas+ 011 A se!ara'(o ou distri*ui'(o dos com!onentes de uma mistura) na cromatogra ia l&uido%l&uido em !a!el) relaciona%se com as di erentes solu*ilidades relativas desses com!onentes nas ases m.vel e estacion-ria+ 8s com!onentes menos sol9veis na ase estacion-ria tem uma movimenta'(o r-!ida ao longo do !a!el) en&uanto os mais sol9veis na ase estacion-ria ser(o seletivamente retidos) tendo uma movimenta'(o mais lenta+ 011 :sse mecanismo de se!ara'(o !ode ser ex!licado !elo ato do !a!el ser constitudo !or mol$culas de glicose anidra) ligadas !or -tomos de oxig6nio+ ;&uidos !olares como a -gua tem grande a inidade com as <idroxilas das mol$culas de glicose) ormando liga'/es de <idrog6nio) icando retido e uncionando como ase estacion-ria) e os l&uidos menos !olares s(o re!elidos !or esta estrutura e uncionam como ase m.vel+ 011 :ste m$todo cromatogr- ico $ muito 9til !ara a se!ara'(o de uma mistura e !ara a an-lise &ualitativa de seus com!enentes em un'(o dos atores de reten'(o "= #+ 011 2a cromatogra ia em !a!el se marca no !a!el com um l-!is o !onto de !artida da amostra a ser a!licada no !a!el &ue $ colocado em uma cu*a cromatogr- ica com solvente su iciente !ara mol<ar a!enas a !arte in erior do !a!el) n(o tocando a amostra+021

8 ator de reten'(o "= # $ a raz(o entre a dist>ncia !ercorrida !elo com!osto "do local de a!lica'(o ao centro da manc<a# e a dist>ncia !ercorrida !ela ase m.vel) ou se?a) 021

A cromatogra ia $ muito utilizada !ara an-lise) se!ara'(o e !uri ica'(o "em !es&uisa e em escala industrial# de numerosos !rodutos naturais@ anti*i.ticos) vitaminas) <ormAnios) corantes) etc+ Seu uso mais con<ecido) no entanto) $ o da an-lise) localiza'(o e identi ica'(o de microgramas de su*st>ncias em meios *iol.gicos "exames Banti do!ingB e de medicina legal em geral#+ A realiza'(o desta !r-tica tem como o*?etivos con<ecer os m$todos !ara !r-tica de cromatogra ia em !a!el) *em como entender a in lu6ncia das di erentes ases m.veis na cromatogra ia) al$m de identi icar os !rinci!ais erros de execu'(o "erros cl-ssicos# na !r-tica de cromatogra ia em !a!el e o*servar os meios !ara evit-%los+

Ma -riais; -<"ipa$-n os - r-a%-n -s " ili6a+os nas an3lis-s1 )17 Ma -riais

5 C$&uer 50)0 m; Su!orte !ara tu*os de ensaio Diras de !a!el E<atman 1 tesoura escolar Pi!eta de !asteur 1 l-!is !reto nF 2 1 tu*o ca!ilar G tu*o de ensaio 1 !laca de !etri

1 r$gua

)1/ E<"ipa$-n os

Ca!ela de exaust(o

)1)

R-a%-n -s Hlcool etlico 45I de !ureza "CJ3CJ28J# % K:D:C Jexano 4G)5I de !ureza CJ3"CJ2#5CJ3 % DL2MMLCA Cloro .rmio 44)GI de !ureza "CJ3Cl3# N K:D:C Hgua

=1 EPI>s Ooram utilizadas luvas !ara evitar &ual&uer irrita'(o ou alergia !elo contato direto dos reagentes a !ele+ : ?aleco !ara evitar o contato dos reagentes com a vestimenta do aluno+ Al$m de .culos de !rote'(o !ara evitar a !ro?e'(o de !artculas ou l&uidos nos ol<os do aluno+ Ooi utilizada ca!ela de luxo laminar) como e&ui!amento de !rote'(o coletiva) !ara evitar o contato do t$cnico e do am*iente com os gases li*erados !or alguns com!ostos) &ue !odem causar danos ao organismo <umano+ 2(o oram necess-rios outros e&ui!amentos de seguran'a al$m desses) !ois os reagentes n(o a!resentam grandes riscos P sa9de+

?1 M- o+olo%ia - r-s"l a+os Para o !re!aro da !r-tica) recortou%se Q tiras de !a!el ligeiramente mais estreitas e maiores &ue os tu*os de ensaio e uma tira mais larga do &ue o tu*o) !ara &ue essas ossem as cromato!lacasR

2a *ase de cada cromato!laca) tra'ou%se uma lin<a numa altura de 2 cm e na outra !onta da mesma) uma lin<a de 1 cmR

2a tira de numero S) cortou%se um !eda'o na dire'(o diagonal na *ase da cromato!lacaR na tira de numero Q cortou%se a cromato!laca rente P lin<a demarcadaR

Preenc<eu%se uma micro!i!eta com corante vermel<o de congo !reviamente de!ositado em uma !laca de PetriR

Pi!etou%se a amostra na lin<a in erior de cada cromato!lacaR 2a tira 5 !i!etou%se amostra em excesso) en&uanto na tira G !i!etou%se v-rios !ontos !r.ximos uns aos outrosR

Colocou%se cada cromato!laca em suas res!ectivas cu*asR 2a tu*a 1 colocou%se a ase m.vel com!osta !or <exano@ n(o <ouve elui'(o da manc<a+

2a tu*a 2 colocou%se como ase m.vel o cloro .rmio@ 2(o <ouve elui'(o da manc<a

2a tu*a 3 colocou%se etanol como ase m.vel@ <ouve uma !e&uena elui'(o da manc<a

2a tu*a 5 colocou%se uma mistura de 1@1 agua%etanol@ <ouve elui'(o total da manc<a+

2a tu*a 5 colocou%se uma mistura de 1@1 agua%etanol@ cromato!laca+

<ouve elui'(o da

manc<a em orma de *orr(o) devido excesso da amostra colocado na

2a tu*a S colocou%se uma mistura de 1@1 agua%etanol@ Por ela estar cortada na diagonal a ase movel eluiu mais de um lado do &ue do outro+

2a tu*a Q colocou%se uma mistura de 1@1 agua%etanol @ 2a Q a amostra entra em contato com a ase movel) sendo diluida !ela mesma+

2a tu*a G colocou%se uma mistura de 1@1 agua%etanol@ Jouve uma elui'(o !ouca e im!recisa) devido a a!lica'(o em v-rios !ontos+ ,m !r.ximo ao outro+

@1 Disc"ss:o - Concl"s:o @171 Disc"ss:o +- R-s"l a+os Cro$a oplascas 7; / ; ) - =

Com resultados o*tidos na !r-tica de cromatogra ia oi !ossvel veri icar &ue &uando n(o se t6m cautela e concentra'(o ao realizar as !r-ticas de cromatogra ia os resultados o*tidos !odem n(o ser !recisos e/ou exatos+ 2a !r-tica em &uest(o oi veri icado) atrav$s do resultado o*tido na

cromato!laca 1) &ue amostra "corante vermel<o# a!resentou mais a inidade com a ase estacion-ria) &ue nesse caso $ a -gua adsorvida na celulose do !a!el) &ue com a ase m.vel) &ue !ara a cromato!laca 1 oi o <exano+ Lsso oi o*servado) !ois a amostra n(o elui com o <exano+ :sse enAmeno !ode ser ex!licado) !ois a intera'(o entre a amostra e a ase estacion-ria oi mais intensa &ue as intera'/es entre a amostra e o <exano &ue neste caso $ a ase m.vel+ T- na cromato!laca 2 a amostra elui muito !ouco) nesta situa'(o se o*servou &ue a amostra teve certa a inidade com o cloro .rmio) &ue oi a ase m.vel utilizada+ Mas ainda) !ossui maior a inidade com a ase estacion-ria+ Com isso veri icou%se &ue as intera'(o intermoleculares entre a aze estacion-ria e a amostra oram mais intensas &ue as intera'/es com a ase m.vel utilizada+ 2a cromato!laca 3 a amostra n(o elui) ou se?a) a mostra interagiu mais com a ase estacion-ria do &ue com a ase m.vel "etanol#+ 2a cromato!laca 5) em &ue a ase m.vel oi o uma mistura de -gua e etanol 1@1) a amostra elui *astante+ 2este caso a amostra mostrou grande a inidade com a ase m.vel+ Lsso revelou &ue as intera'/es intermoleculares entre a amostra e a ase m.vel oram mais intensas &uando com!arada com as intera'/es intermoleculares entre a amostra e a ase estacion-ria+

@1/1 Concl"s:o cro$a oplacas 7; /; ) - = Com esses resultados e essas o*serva'/es) oi concludo &ue a amostra em &uest(o !ossui !ro!riedades) ma?oritariamente !olares) !ois interagiu mais intensamente com su*st>ncia !olares+ 6

@1)1 Disc"ss:o cro$a oplacas ?; @; A - B

Com a realiza'(o desta !arte da !r-tica oi !ossvel veri icar os !ossveis erros &ue !odem ocorrer !or alta de aten'(o do t$cnico ao realizar a t$cnica de cromatogra ia em !a!el+ 2a cromatro!laca 5 se o*servou &ue &uando se colaca uma &uantidade muito grande amostra na cromatro!laca a elui'(o !ode ormar um e eito U ogueteV di icultando a leitura dos resultados e tam*$m !odendo iter erir em outros resultados &ue estiverem na mesma cromatro!laca+ Por esse motivo o t$cnico &ue estexecutando a !r-tica deve se ater a colocar uma &uantidade !e&uena da amostra+ 2a cromatro!laca S oi o*servado &ue a amostra elui em dire'(o ao lado es&uerdo da cromatro!laca+ Lsso ocorreu) !ois a cromatro!laca estava mais imersa do lado es&uerdo do &ue do direito+ ra!idamente do lado de maior imers(o+ 2a cromatro!laca Q n(o <ouve elui'(o da amostra) !ois a amostra entrou em contato com a ase m.vel &ue a dissolveu+ Lsso ocorreu) !ois se colocou a amostra muito !r.xima a extremidade &ue entra em contato com a ase m.vel+ T- na cromatro!laca G <ouve !ouca elui'(o) !ois as intera'/es entre as mol$culas da amostra e as intera'/es da amostra com a ase estacion-ria oram mais intensas) devido a grande &uantidade e extens(o de a!lica'(o da amostra+ Lsso di icultou as intera'/es entre a amostra e a ase m.vel+ Lsso az com &ue a ase m.vel eluia mais

@1= Concl"s:o cro$a roplacas ?; @; A - B

A!.s a o*serva'(o dos resultados e as considera'/es na discuss(o) oi concludo &ue ao se realizar uma !r-tica de cromatogra ia v-rios erros sistem-ticos !odem ocorrer) di icultado a leitura dos resultados ou ainda !re?udicando a exatid(o e

!recis(o dos mesmos+ Portanto o t$cnico deve se ater ao !rocedimento !ara n(o cometer tais erros+ Al$m de tais conclus/es oi !ossvel con<ecer as t$cnicas de cromatogra ia em !a!el) seus !rinci!ais erros de execu'(o e as medidas !ara evit-%los+

Cloro0!r$io MolCc"la polar

D%"a MolCc"la $"i o p!lar

E anol $olCc"la co$ par - polar - o" ra par - apolar

A REEERFNCIAS 4I4LIOGRDEICAS 011 N Collins) Carol JR Craga) 3il*erto ;+R Conato) Pierina S+) Oundamentos de Cromatogra ia) !-g 1Q) 5Q e 5G) ed+ ,nicam!) Cam!inas 200S+

021 N Crito) Marcos Aires deR 3on'alves) O-*io PeresR 3esser) Tos$ Carlos) ex!eri6ncia 5@ cromatogra ia em !a!el) ,niversidade Oederal de Santa Catarina N De!artamento de Wumica) 2011