PROTOCOLO DE SOLICITAO DE AULAS PRTICAS E DE MATERIAIS PARA ESTGIOS

NDICE

Nmero da Aula AULA 01

Tema Preparo de meios de cultura

Pg !a 06

CURSO" Farmcia DISCIPLINA" Microbiologia Clnica PRTICAS No#$" Preparo de meios de cultura. DATA DE REALI%AO" De inir LOCAL" Con irmar PRO&ESSOR" !"iago Marconi Cardoso $' AULA #$ Preparo de meios de cultura. $'$ INTRODUO" #s microrganismos possuem um ciclo natural na gua$ solo$ ar$ na nossa super cie corporal e de outros animais etc. %stes microrganismos conseguem sobre&i&er ' custa de materiais org(nicos e inorg(nicos e)istentes nestes ambientes. # ciclo arti icial *meio de cultura+ , o modo -ue empregamos em laborat.rio para culti&armos os microrganismos. C"amamos de meio de cultura ao con/unto de subst(ncias necessrias ao crescimento e multiplica01o dos microrganismos 2o ciclo arti icial tentamos reprodu3ir as condi04es naturais ornecendo5 Su()*+!, a) !u*r * -a) em concentra04es ade-uadas$ -ue de&em ser&ir como5 - fonte de energia - fonte de nitrognio - fonte de carbono - fonte de sais e ons - fonte de enxofre e fsforo - fatores de crescimento 6 doador de eltrons - receptor de eltrons Co!d ./e) am( e!*a ) 0a-or-e )" 6 temperatura *term. ilos$ mes. ilos e psicr. ilos+ 6 umidade 6 p7 *de 8 a 9+. 6 atmos era de incuba01o *aerobiose$ microaero ilia$ anaerobiose+ T1,! ,a) 2ara a e3e,u.4o do) me o) de ,ul*ura" 16 Usar somente subst(ncias -umicas ou ingredientes de boa -ualidade. 86 Fa3er a pesagem corretamente. :6 Usar &idraria seca e limpa. ;6 Usar apenas os ingredientes da .rmula. <6 =e necessrio$ iltrar. 66 A/ustar o p7 do meio ap.s a iltra01o$ antes de /untar o agar. >6Para manter a e ici?ncia dos meios depois de prontos$ conser&ar em lugar rio$ escuro e em recipientes "ermeticamente ec"ados.

E)*ado 05) ,o 6,o!) )*7!, a8" #s meios podem ser classi icados em5

16 L-uidos5 utili3ados para crescimento em massa *n1o promo&em a orma01o de col@nias$ mas sim$ crescimento por dispers1o+. 86 =emi6s.lidos5 para &eri ica01o de motilidade *0$<A de agar6agar+. :6 =.lidos5 para a3er isolamento$ de&ido a orma01o de col@nias *1$< A a 8A de agar6agar+. & !al dade5 6Meios de enri-uecimento5 aumentam a possibilidade de crescimento da esp,cie dese/ada$ -uando a mesma se encontra em pe-ueno nBmero. 6Meios indicadores *ou di erenciais+5 re&elam uma propriedade bio-umica$ permitindo uma identi ica01o presunti&a. 6Meios seleti&os5 impedem o crescimento de determinados grupos num in.culo misto$ mas permite o desen&ol&imento de outros. 6Meios seleti&os6indicadores5 re&elam selecionam grupos de bact,rias. uma propriedade bio-umica e

6Meios de triagem5 empregados para separar bact,rias da mesma amlia. 6Meios de transporte5 garantem por mais tempo a &iabilidade dos microrganismos -ue n1o podem ser semeados logo ap.s a coleta e -ue poderiam morrer. Com2o!e!*e) () ,o) do) me o) de ,ul*ura" 6%)tratos5 de carne e de le&edura. Concentrados a-uosos desidratados -ue ser&em como onte de5 carboidratos$ &itaminas$ compostos org(nicos nitrogenados e sais. 6Peptonas5 deri&ados da "idr.lise cida ou en3imtica de protenas de origem animal ou &egetal *peptona de casena$ peptona de so/a+ -ue ser&em como onte de 2 org(nico$ &itaminas$ carboidratos$ en)o re$ .s oro$ clcio e magn,sio. 6Agar6agar5 polissacardeo obtido a partir de algas rodo ceas. Fun01o5 agente solidi icante$ cu/o P.F.C 9<D C e o P.=.C ;<D C. 21o tem un01o nutriti&a. 62aCl5 mant,m o e-uilbrio osm.tico do meio e ser&e como onte dos ons 2a e Cl. 6 Egua5 umidade e ontes de ons.

I)olame!*o de um m ,rorga! )mo"

# isolamento consiste na obten01o de uma cultura pura *col@nias isoladas de um Bnico microrganismo$ separando6o de outros -ue se encontram no mesmo material+. Finalidades do isolamento5 Fdenti ica01o de um microrganismo. A simples obser&a01o de caracteres mor ol.gicos n1o , su iciente para a identi ica01o e classi ica01o dos microrganismos. Para isto lan0amos m1o da anlise de uma s,rie de caractersticas destes como5 caractersticas bio-umicas$ sorol.gicas$ de patogenicidade. # estudo destas caractersticas est na depend?ncia do microrganismo -ue se pretende identi icar. ' Semeadura" Consiste no plantio de um microrganismo em um meio de cultura$ a partir de um material contaminado -ual-uer. ' Re2 9ue" Consiste na trans er?ncia de um microrganismo de um meio de cultura para outro. $': O;<ETI=O" !,cnica para a e)ecu01o dos meios de culturaG tipos de meios empregados para o isolamento e identi ica01o de microrganismos *bact,rias e ungos+. :' MATERIAIS H Placas de Agar =angue <A H Placas de Agar C"ocolate H Placas de %MI ou MacConJeK H Iico de bunsen H Al0a bacteriol.gica >' E?UIPAMENTOS H %stu a bacteriol.gica H C(mara de capn. ilia H Lela H Ma3e est,ril @' REGENTES E SOLUAES H 78# destilada e autocla&ada.

B' PROCEDIMENTO

Semeadura ou re2 9ue de (a,*1r a) em 2la,a) de Pe*r " # material a ser semeado de&er conter poucos microrganismos por-ue o in.culo para o isolamento de&e ser le&e. Lembrar -ue cada col@nia ormada na super cie de um meio s.lido , originada de um ou alguns microrganismos. Nuando maior o nBmero$ menor possibilidade de isolamento e maior probabilidade de crescimento con luente. Nuando o in.culo or obtido a partir de meio s.lido *in.culo pesado+$ este poder ser diludo em salina est,ril ou ser utili3ada a t,cnica de esgotamento ade-uada. # in.culo obtido a partir de uma cultura em caldo ou de uma dilui01o da cultura em meio s.lido , eito da seguinte maneira5 1. Oetiramos o in.culo do tubo com a al0a / lambada e ria. 8. Abrimos a placa$ de modo -ue a tampa orme um c"ap,u com a placa. :. Colocamos o in.culo /unto a parte superior da placa$ espal"ando6o a seguir atra&,s de estriamento *-ue poder ser contnuo ou descontnuo+. # estriamento poder se eito de maneiras &ariadas$ tomando6se sempre o cuidado de nunca passar a al0a duas &e3es no mesmo local. # estriamento permite o esgotamento dos microrganismos -ue se encontram na al0a. Nuando passamos a mesma 8 &e3es no mesmo local$ promo&emos o recarregamento do local$ dei)ando ali mais bact,rias$ o -ue di icultar o seu per eito isolamento. Durante o estriamento$ ap.s termos semeado metade da placa$ de&eremos cessar o mesmo. A seguir lambamos a al0a$ esperamos es riar e continuamos o estriamento no&amente$ carregando a al0a na Bltima estria -ue reali3amos. Ap.s terminado o estriamento$ ec"ar a placa e identi icar$ le&ando6a a seguir para incuba01o na estu a$ com a tampa &oltada para bai)o. ;. Flambar a al0a utili3ada$ esperar es riar e guardar no suporte apropriado. <. Fncubar em estu a a :>PC por 8;6;Q "oras *A= e %MI+ e at, >8 "oras *AC+ em capn. ilia. E)*r ame!*o em 2la,a"

#I=5 Para a reali3a01o da semeadura utili3ando6se in.culos pesados n1o diludos$ a t,cnica , a mesma -ue a descrita anteriormente$ s. -ue ao in&,s de

interrompermos o processo uma &e3 para lambarmos a al0a$ o aremos duas &e3es. MICRO;IOLOGIA ;SICA C RELATDRIO #$ 2#M%6RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR!UOMA6RRRRR DA!A6 RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR Disserte sobre a import(ncia dos meios de cultura -uanto ao isolamento primrio dos microorganismos.