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RESISTNCIA A FUNGICIDAS

Paulo Srgio J. dos Santos


Presidente FRAC-BR RTD SIPCAM ISAGRO

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CONCEITOS IMPORTANTES

Resistncia: uma alterao herdvel e estvel em um fungo em resposta aplicao de um fungicida, resultando numa reduo da sensibilidade ao produto.

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CONCEITOS IMPORTANTES
Resistncia cruzada: ocorre quando populaes de patgenos que desenvolvem resistncia a um fungicida tornam-se, automaticamente e simultaneamente,

resistentes a outros fungicidas que so afetados pela mesma mutao gnica e pelo mesmo mecanismo de resistncia.

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CONCEITOS IMPORTANTES

Resistncia mltipla: a resistncia de linhagens patognicas que apresentam mecanismos de resistncia separados para dois ou mais fungicidas no relacionados.

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CONCEITOS IMPORTANTES
Resistncia qualitativa: a perda de efetividade do fungicida de modo repentino e marcante pela presena bem definida de populaes de patgenos que apresentam suscetibilidade e resistncia com respostas que variam amplamente.

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CONCEITOS IMPORTANTES

Resistncia quantitativa: tanto o declnio no controle da doena como a diminuio da suscetibilidade das populaes do patgeno, demonstradas por teste de monitoramento, se manifestam gradualmente, so

parciais e ocorrem em graus variveis.

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ORIGENS DA RESISTNCIA

Falha Controle

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ORIGENS DA RESISTNCIA

MECANISMOS DE RESISTNCIA Desenvolvimento de via metablica alternativa; Degradao metablica do fungicida; Excluso ou expulso do fungicida; Decrscimo na permeabilidade da membrana; Aumento na detoxificao; Falha Controle Alterao bioqumica do stio alvo.

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ORIGENS DA RESISTNCIA
10-6 a 10-8 No detectvel

10-1 a 10-2

Detectvel

Quantas amostras seriam necessrias para que houvesse 95% de chance de detectar resistncia na freqncia de 1%?

Tcnicas de PCR (10-4 10-6)

300 amostras

Resistncia qualitativa

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ORIGENS DA RESISTNCIA

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ORIGENS DA RESISTNCIA

DNA Transcrio
Exon Intron Exon Intron Intron Exon

hnRNA

Processamento mRNA Traduo Protena Funo enzimtica Substrato Produto Final

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ORIGENS DA RESISTNCIA
Mutaes afetam a seqncia de bases nitrogenadas do DNA podendo produzir um novo alelo. 1 - Substituio de bases:

Forma Tautomrica

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ORIGENS DA RESISTNCIA
1 - Substituio de bases: DNA 3AGC5
Mutao

mRNA 5UCG3 Serina

3AGG5

5UCC3

Serina

Mutao Silenciosa

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CDIGO GENTICO

ORIGENS DA RESISTNCIA
1 - Substituio de bases: DNA 3AGC5
Mutao

mRNA 5UCG3 Serina

3AAC5

5UUG3

Leucina

Mutao de Sentido Errado

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ORIGENS DA RESISTNCIA
1 - Substituio de bases: DNA 3AGC5
Mutao

mRNA 5UCG3 Serina

3ATC5

5UAG3

Terminao

Mutao Sem Sentido

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ORIGENS DA RESISTNCIA
2 Adio ou deleo de bases 5ATG-CCG-ACG-TAT-CAG-TAA3 3TAC-GGC-TGC-ATA-GTC-ATT5 5AUG-CCG-ACG-UAU-CAG-UAA3 5Met-Pro-Tre-Tir-Glu3 5ATG-CCA-GAC-GTA-TCA-GTA-A3 3TAC-GGT-CTG-CAT-AGT-CAT-T5 5AUG-CCA-GAC-GUA-UCA-GUA-A3 5Met-Pro-Asp-Val-Ser-Val-3 DNA mRNA Cadeia Polipeptdica DNA mRNA Cadeia Polipeptdica

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AO MULTI-STIO

AO STIO ESPECFICO FUNGICIDAS PROTETORES

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OCORRNCIA DE RESISTNCIA
TABELA FRAC www.frac.info

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MODO DE AO DOS FUNGICIDAS


Poster FRAC www.frac.info

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MODO DE AO DOS FUNGICIDAS


Mitocndrias Estrobilurinas

Ncleo Benzimidazis

Membranas Triazis

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS

Inibio da mitose e diviso celular

1. Inibio da biossntese de tubulinas Ex: Benzimidazoles, Tiofanatos, Benzamida 2. Inibio da diviso celular Ex: Feniluria

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS


Modo de Ao Os fungicidas benzimidazis afetam especificamente a diviso celular pela inibio da biossntese de tubulinas, que uma protena que compe os microtbulos. Assim, a formao dos microtbulos distorcida no ocorrendo a diviso do ncleo e a conseqente separao.

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS

Alvo dos benzimidazis que atuam nos microtbulos Clulas resistentes sobrevivem e continuam a se multiplicar

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS


RESISTNCIA: 1) Vrios patgenos em diversas culturas (www.frac.info); 2) Resistncia qualitativa (populaes 100-1000x menos

suscetveis que as originais); 3) A resistncia de Neurospora spp a carbendazim deu-se pela substituio do a.a. fenilalanina por tirosina no stio alvo da tubulina (cdon 200); 4) Mutaes de ponto em 10 locais diferentes no gene da tubulina, porm somente duas so encontradas na prtica.
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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS


5. Cdon 198, apresenta resistncia moderada a alta dependo do a.a. substituto (forma selvagem c. glutmico) 6. Resistncia cruzada negativamente entre benzimidazis e diethofencarb em Botrytis cinerea.
LINHAGENS SELVAGENS SENSVEL INSENSVEL CARBENDAZIM DIETHOFENCARB

LINHAGENS MUTANTES RESISTENTE SENSVEL CARBENDAZIM DIETHOFENCARB

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MODO DE AO DOS TRIAZIS Interrupo das funes da membrana celular Inibio da biossntese de esteris
a) Inibidores da demetilao do C14 (DMIs) Ex: Triazol, Imidazol, Pirimidinas, Piridinas e Piperazinas b) Inibidores de 8,7 isomerase e 14 redutase Ex: Morfolinas

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MODO DE AO DOS TRIAZIS

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MODO DE AO DOS TRIAZIS

Modo de Ao Os fungicidas triazis atuam inibindo a biossntese do ergosterol, substncia importante para manuteno da

integridade da membrana celular dos fungos.

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MODO DE AO DOS TRIAZIS

Triazol Lanosterol
Acetil-CoA

Ergosterol

Rompimento da membrana Extravasamento de solutos inicos

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MODO DE AO DOS TRIAZIS


RESISTNCIA: 1) Mecanismos de resistncia no compreendidos totalmente; 2) Mutaes no gene cyp51 tem sido identificadas em patgenos de cereais e relacionado a perda de sensibilidade aos triazis; 3) Mutaes V136A, Y137F, I381V no stio alvo.

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MODO DE AO DOS TRIAZIS

Patgenos com resistncia de campo aos fungicidas DMIs.


Patgeno Botrytis cinerea Erysiphe graminis f.sp. tritici hordei Puccinia horiana Sphaerotheca fuligenea Uncinula necator Mycosphaerella fijiensis Mycosphaerella graminicola Venturia inaequalis Hospedeiro Vrios Trigo e Cevada Crisntemo Pepino Uva Banana Trigo Maa

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS


Inibio da respirao
1. Inibio do complexo II (succinato desidrogenase) Ex: Anilida e Carboxanilida 2. Inibio do complexo III (citocromo bc1 ubiquinol oxidase no stio Qo) Ex: Estrobilurinas, Imidazolinona e Oxazolidinadiona 3. Inibio do complexo III (citocromo bc1 ubiquinona redutase no stio Qi) Ex: Cianoimidazoles 4. Interrupo da fosforilao oxidativa Ex: Dinitrofenol e Fenilpiridinilamina 5. Inibidores da fosforilao oxidativa ATP sintase Ex: Organoestnicos
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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS

Modo de Ao Ocorre atravs da inibio da respirao mitocondrial, que bloqueia a transferncia de eltrons entre o citocromo b e o citocromo c1, no stio Qo, interferindo na produo de ATP.

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS


RESISTNCIA Substituies de aminocidos no citocromo b que governa a resistncia aos QoI.

Glicina Fenilalanina Glicina

Alanina Leucina Arginina

Posio 143 ( G143A ) Posio 129 ( F129L ) Posio 137 ( G137R )

Resistncia Qualitativa

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS


RESISTNCIA Fator de resistncia (FR) = DL50 da linhagem resistente DL 50 da linhagem sensvel

Os fatores de resistncia associado as mutaes F129L e G137R esto entre 5 15. Resistncia Parcial Os fatores de resistncia associado a mutao G143A >100 Resistncia Completa

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MODO DE AO DAS ESTROBILURINAS

Patgenos com resistncia de campo aos fungicidas QoI.


Patgeno Alternaria solani Blumeria graminis f.sp. tritici e hordei Colletotrichum graminicola Erysiphe necator Colletotrichum gloeosporioides Mycosphaerella fijiensis Mycosphaerella graminicola Plasmopora vitcola Venturia inaequalis Pseudoperonospora cubensis Hospedeiro Batata Trigo e Cevada Gramas Uva Morango Banana Trigo Uva Maa Cucurbitceas Distribuio USA EU USA USA e UE Japo Amricas Central ,Sul EU EU EU EU e sia Tipo de resistncia F129L G143A G143A G143A G143A G143A G143A G143A e F129L G143A G413A

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MODO DE AO DOS BENZIMIDAZIS

Benzimidazis Dicarboximidas Fenilamidas QoI (Estrobilurinas) Carboxamidas SBI (Triazis) Anilinopirimidinas Fenilpirroles Fosforotiolatos Fungicidas multi-stios (ditiocarbamatos, cpricos, enxofre) Ftalimidas Indutores (SAR)

ALTO (3)

MDIO (2)

BAIXO (1)

1
BAIXO (1)

2
MDIO (2)

3
ALTO (3)

AO FUNGICIDA

RISCO

DE DOENA

Patgenos sementes (Pyrenophora spp. Ustilago spp.) Patgenos solo (Phytophthora spp.) Ferrugens Rhizoctonia spp. Tapesia spp.

Septoria tritici Rhynchosporium secalis

Erysiphe graminis Botrytis cinerea Penicillium spp Magnaporthe grisea Venturia inaequalis Mycosphaerella fijiensis Phytophthora infestans

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MONITORAMENTO
Objetivos: 1) Obter aviso precoce de uma situao de resistncia eminente (resistncia quantitativa); 2) Verificar se as estratgias de manejo da resistncia apresentam resultados positivos; 3) Verificar se a resistncia a causa da ausncia de controle da doena.

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AVALIAO DE RISCO

Qual o risco de surgir populaes resistentes de Phakopsora pachyrhizi aos fungicidas

atualmente em uso?

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AVALIAO DE RISCO
Fatores que podem acarretar o surgimento de isolados de Phakopsora pachyrhizi resistente aos fungicidas. 1) Utilizao de fungicidas como nica forma de controle; 2) Utilizao em reas extensas; 3) Utilizao de fungicidas stio especfico (Anexo); 4) Manuteno da dose recomendada; 5) Aplicaes repetitivas do mesmo produto; 6) Utilizao erradicante do produto; 7) Caractersticas inerentes ao patgeno (no geraes, esporulao).

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AVALIAO DE RISCO Produto A Estrobilurina Produto AB 10-6 Estrobilurina + Triazol 10-6 Produto B Triazol

10-12

DMI ou QoI + Protetor

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ESTRATGIAS DE MANEJO

1) Utilizar misturas de fungicidas (Sistmico-Protetor); 2) Restrio do nmero de aplicaes por safra; 3) Manuteno da dose recomendada pelo fabricante; 4) Utilizar o manejo integrado de doenas; 5) Evitar uso erradicante; 6) Aumentar a diversidade qumica

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ESTRATGIAS DE MANEJO

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ORIGENS DA RESISTNCIA
EFICCIA AGRONMICA
SS SS S S S S S S S S S RSSS R S S S R S SR S R SS RS S SS S R S S S S S S SS S SS S S S S SR S S S SR S S S S S S RS S S

PRODUTO 98%

SS S S R S S S

S S R

SS S S S SS PRODUTO 90% S S S R S S S S S S S S S

S S R S S S

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FRAC-Internacional

Fundado em 1981 em Wageningen Holanda; originrio do Comit de Agricultura e Meio Ambiente


(AGRECO) e da Federao Global de Proteo de Plantas (GCPF); reconhecido como organismo consultor pela Organizao de Agricultura e Alimentao (FAO) e pela Organizao Mundial de Sade (WHO) das Naes Unidas;

FRAC-Internacional

Comit

central

com

grupos

de

trabalho

(Anilinopirimidinas, Fungicidas QoI, Fungicidas SBI e o grupo Banana); Fruns (Benzimidazis, Dicarboximida e Fenilamida); Reunies regulares; Levantamentos e Pesquisas; Publicaes anuais (Site: www.frac.info).

O que o FRAC-BR?

O FRAC-Brasil, sub-grupo do FRAC Internacional, pessoa

jurdica

de

direito

privado

sem

fins

lucrativos,

dedicado ao fomento pesquisa e desenvolvimento de trabalhos com produtos fitossanitrios na rea de resistncia.

Fundado em 1999 em Jaguarina, So Paulo

Membros do FRAC-BR
ARYSTA BASF BAYER CHEMINOVA DOW AGROSCIENCES DUPONT FMC IHARABRAS MILENIA SIPCAM ISAGRO SYNGENTA

Diretria FRAC-BR (2005-2007)

Presidente: Paulo Srgio J. Santos Sipcam Isagro Vice Presidente: Nilceli F. Buzzerio - Syngenta Secretrio: Mrcia K. K. Pala - Iharabras Tesoureiro: Joo B. Cason - Dow AgroSciences

Objetivos do FRAC-BR

1. Identificar os problemas existentes ou potenciais;

de

resistncia

quer

sejam

2. Buscar informaes existentes; 3. Gerar novas informaes; 4. Elaborar recomendaes para uso dos fungicidas, visando minimizar o risco de ocorrncia de resistncia; 5. Comunicar os resultados das informaes e recomendaes aqueles envolvidos na utilizao fungicidas. as de

Atividades do FRAC-BR
1. Educacional Treinamento de tcnicos, consultores, distribuidores, estudantes e demais pessoas ligadas a utilizao de fungicidas. Site FRAC-BR www.frac-brasil.org.br Publicaes 2. Projetos em andamento Soja (Ferrugem Asitica) Algodo (Ramularia)

Atividades do FRAC-BR

Projeto Soja - Ferrugem Asitica

Colaboradores

Erlei Melo Reis Universidade de Passo Fundo (UPF) Ricardo Balardin Universidade Federal de Santa Maria (UFSM)

Atividades do FRAC-BR

Projeto Soja - Ferrugem asitica Metodologia/Produtos. Estrobilurinas bioensaio in vitro de germinao de uredsporos Azoxistrobina (Priori) Picoxistrobina (Acanto) Piraclostrobina (Comet) Trifloxistrobina (Twist)

Atividades do FRAC-BR

Projeto Soja - Ferrugem asitica Metodologia/Produtos. Triazis bioensaio in vivo em placas de petri com folhas primrias inoculadas. Ciproconazol (Alto 100) Epoxiconazol (Opus) Flutriafol (Impact) Metconazol (Caramba) Miclobutanil (Systane) Tebuconazol (Folicur) Tebuconazol (Orius) Tetraconazol (Domark)

Atividades do FRAC-BR

Projeto Algodo - Ramularia

Colaborador

Yeshwant Ramchandra Mehta - IAPAR

Atividades do FRAC-BR

Projeto Algodo - Ramularia Metodologia/Produtos. Estrobilurinas bioensaio in vitro de germinao de condios Azoxistrobina (Priori) Piraclostrobina (Comet) Trifloxistrobina (Twist)

Atividades do FRAC-BR

Projeto Algodo - Ramularia Metodologia/Produtos. Triazis bioensaio in vivo. Difenoconazol (Score) Epoxiconazol (Opus) Flutriafol (Impact) Tebuconazol (Folicur) Tebuconazol (Orius) Tetraconazol (Domark)

Benzimidazol bioensaio in vivo Carbendazim (Delsene) Tiofanato Metlico (Cercobin)

Atividades do FRAC-BR

3. Projetos Futuros Cereais (Doenas foliares) Banana (Sigatoka Negra) Maa (Sarna)

Fungicidas

se

tornaram

uma

parte

integral

da

produo eficiente de alimentos. A perda de um fungicida na agricultura por causa de resistncia um problema que afeta a todos nos...

MUITO OBRIGADO

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