Testes Catalticos Utilizando Biomassa de Aspergillus niger e

Rhizopus oryzae na Transesterificao em Meio Aquoso de leo

de Soja para Obteno de Biodiesel
Introduo e Objetivos
A utilizao do biodiesel derivou-se da procura de fontes alternativas de energia e de processos sustentveis que reduzam a poluio do meio ambiente e as perspecti-
vas do aquecimento global
1
.No entanto, o aumento na produo deste combustvel limpo acarreta a uma maior produo de resduos no aproveitveis formados na
reao de transesterificao, independente do gro oleaginoso utilizado
2
.O emprego de catalisadores enzimticos apresenta uma relao atrativa ambientalmente, pois
seu uso diminui a produo de efluentes, porm a mesma catalise apresenta desvantagens quanto alto custo na produo industrial da enzima utilizada
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Objetivos: -Obteno de biomassa de Asergillus niger e Rhizopus oryzae com potencial cataltico.
-Desenvolvimento de metodologia de produo de biodiesel utilizando lipase provinda de biomassa fngica.
Metodologia
Obteno da Biomassa de Asp. niger e Rhizopus Oryzae
Para a obteno da biomassa dos fungos, cultivou-se os mesmos em meios lquido caractersticos para a tima produo de lipase.
Asp. niger
4
(%g/mL): peptona (1,00); ureia (0,50); sacarose (0,50); MgSO
4
.7H
2
O (0,05); KH
2
PO
4
(0,10); Na
2
HPO
4
(0,30); leo de oliva (1,00)
R. oryzae
5
(%g/mL): peptona (7); MgSO
4
.7H
2
O (0,05); NaNO
3
(0,1) ;KH
2
PO
4
(0,1);leo de oliva (3)
Antes da inoculao de ambos os fungos, emulsificou-se os meios lquido atravs de processo de agitao em shaker, por 24h, a 130rpm e 35 C , a fim de aumentar
o a superfcie de contato leo/meio de cultura. Aps o crescimento dos microorganismos realizou-se o processo de filtragem , obtendo-se assim a biomassa para a reao.
Cultivo Meio Lquido Filtragem do Fungo
Inicializao da Reao em
Agitador Magntico
Anlise em Cromatografia de
Camada Delgada
Elaborao da Reao de Transesterificao
Fungo Selecionado
Anlise das Reaes de Transesterificao utilizando Biomassa de Aspergillus niger e
Rhizopus oryzae
Dividiu-se as anlises de acordo com o emprego do pr-tratamento enzimtico, j que algu-
mas reaes de cada fungo foram realizadas sem a utilizao desta tcnica, para comprovar a
eficcia da mesma.Obteve-se os seguintes resultados:
Aspergillus niger: todas as reaes (com ou sem o emprego de pr-tratamento enzimtico)
mostraram resultados positivos para a formao de biodiesel.
Rhizopus oryzae:apenas as reaes nas quais se empregou o pr-tratamento enzimtico
apresentaram resultados positivos quanto formao de biodiesel, tendo todas as reaes
realizadas sem a utilizao de pr-tratamento da enzima apresentado resultados negativos para
a formao de biodiesel.
Pr-Tratamento Enzimtico*
Reao de Transesterificao utilizando Biomassa de Aspergillus niger e Rhizopus oryzae
Aps a obteno da biomassa, utilizou-se amostras (1g) das mesmas juntamente com 5g de leo de soja e 2mL de meio
de cultura lquido no pr-tratamento enzimtico em ultrassom por 5 min
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. Aps este processo foi adicionado em cada
mistura 0,5 mL de metanol, obtendo a relao estequiomtrica de 1:10 do lcool para o leo de soja.Aps a adio do lcool
iniciou-se a reao em agitador magntico por sete dias.Posteriormente realizou-se as anlises das reaes por cromatografia
de camada delgada, utilizando como eluente: 4 ml de hexano, 1 ml ter etlico e 0,1ml de acido actico .
Fig. 2(a) Cromatografia de camada delgada de duas amostras de reaes utilizando biomassa
de Asp. niger (A1;A2) (b) Cromatografia de camada delgada de amostra padro das reaes
com biomassa de Asp. niger (A1). ( c) Cromatografia de camada delgada de duas amostras de
reaes utilizando biomassa de R. oryzae. (R1;R2)(d) Cromatografia de camada delgada de
amostra padro das reaes com biomassa de R. oryzae (R1) -Retngulo vermelho indica a
mancha caracterstica do leo de soja (OS), retngulo preto indica a mancha caracterstica do
biodiesel em relao ao padro (P).
Com os resultados obtidos nos procedimentos, acredita-se que a
reao de transesterificao enzimtica catalisada pela lpase encontrada
na biomassa preparada a partir do fungo Aspergillus Nger e Rhizoupus
oryzae, bem como a metodologia para a anlise do potencial cataltico
de biomassa fngica so viveis Contudo estudos futuros sero
realizados para a determinao quantitativa da reao. Paralelamente
tambm ser estuda a porcentagem ideal de meio liquido adicionada
reao.
Resultados e Discusso
Concluses e Perspectivas
Anlise da Metodologia Desenvolvida

De acordo com os resultados obtidos, observa-se que a metodologia cons-
titui-se dos seguintes processos:
1.LEUNG,Dennis Y.C.,WU,Xuan,LEUNG, M.K.H.. A review on biodiesel production using catalyzed transesterification. Applied Energy 87 (2010) 10831095.
2.BAJAJ,Akhil,LOHAN,Purva,JHA,Prabhat N.MEHROTRA,Rajesh. Biodiesel production through lipase catalyzed transesterification: An overview. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic 62 (2010) 914.
3.G. FALONY et al. Production of A. niger Lipase.Food Technol. Biotechnol. 44 (2) 235240 (2006).
4.N.PAL,S., et al. Influence of Culture and Nutritional Conditions on the Production of Lipase by Submerged Culture of Aspergillus niger. Journal of fermentation technology 56(6), 593-598, 1978.The Society for Biotechnology, Japan.
5.HAMA, S., et al. Lipase Localization in Rhizopus oryzae Cells Immobilized within Biomass Support Particles for Use as Whole-Cell Biocatalysts in Biodiesel-Fuel Production, Journal of Bioscience and Bioengineering, v. 1001,(2006).
6.Shweta Shah and Munishwar Nath Gupta, The effect of ultrasonic pre-treatment on the catalytic activity of lipases in aqueous and non-aqueous media. Chemistry Central Journal 2008,
Guilherme Koch Schmitz (IT)-Acadmico em Engenharia em Energia;Prof.Dr. Joo Alifantes (PQ)
Referncias Bibliogrficas
Fig 1-Cultivo Celular de Aspergillus niger