Terapia Gnica: O que ? Quais so os benefcios?

ESFA - 4 Perodo - Cincias Biolgicas

Disciplina: Biologia Molecular
Professora: Sarah Vargas
Por: Alex Motta Lorencini, Vagner Venturini

Introduo
Desde a sua fundao, pelo monge Johann (Gregor) Mendel no sculo XIX,
aos dias de hoje, a gentica evoluiu extraordinariamente e conquistou um
lugar de destaque entre as cincias.
Em 14 de Abril de 2003, foi completado o sequenciamento do genoma
humano. (Lander et al., 2001; Venter et al., 2001), um feito grandioso que
promete acelerar o progresso da biologia e da medicina nas prximas
dcadas.
A medicina moderna acrescenta, a cada dia, descobertas importantes em
reas de investigao destinadas ao desenvolvimento de novos
procedimentos de tratamento para doenas ainda incurveis.

Introduo

Para a expectativa da cura de doenas genticas:

Necessrio a identificao de genes responsveis por sua patognese
O avano das tecnologias de DNA recombinante, ou engenharia gentica, que permitem a
manipulao do genoma de forma cada vez mais eficiente e segura (Watson et al., 2006).

Apesar de sua aplicao ainda estar em fase experimental, J em 1990, uma

equipe mdica norte-americana inseriu um gene sadio no organismo de uma
menina doente e a criana melhorou aps esse tratamento.

Comeava uma nova era:

A era da terapia gnica (ou terapia gentica), ou seja, o procedimento

destinado a introduzir em um organismo, com o uso de tcnicas de DNA
recombinante, genes sadios (nesse contexto denominados genes
teraputicos) para substituir, manipular ou suplementar genes inativos ou
disfuncionais (Linden, 2008).

Modalidades de Terapia Gnica

Modalidades de Terapia Gnica

A ideia de usar as tcnicas de DNA recombinante para corrigir o genoma
foi inspirada nas doenas causadas por mutao em um nico gene
(DOENAS MONOGNICAS).

Nesse caso, a ideia substituir ou suplementar a expresso do gene

disfuncional, mediante a insero de uma ou mais cpias do gene
teraputico (Porteus et al., 2006; OConnor & Crystal, 2006; Brinkman et
al.,2006).
Mas as DOENAS MONOGNICAS no so o nico alvo da Terapia Gnica.
A medicina moderna luta contra muitas doenas complexas, cujas causas
primrias ainda no so conhecidas e para as quais h, na melhor das
hipteses, apenas tratamentos paliativos.
Em certos casos, possvel planejar uma interveno por meio de terapia
gnica, visando reduzir ou evitar a progresso da doena. (Cardone, 2007;
Flotte, 2007).

Modalidades de Terapia Gnica

As principais estratgias so:

aumentar a resistncia celular
estimular sistemas de reparo ou regenerao,

No caso de tumores, o principal objetivo a induo de morte celular seletiva em

populaes celulares proliferativas (Bauzon & Hermiston; Cattaneo et al.; Ribacka et
al., 2008).

Finalmente, h uma forma peculiar de terapia gnica denominada vacina de DNA.

Nessa, ao invs da utilizao de uma protena ou um vrus completo inativado, como se
faz nas vacinas convencionais, o paciente recebe o gene que codifica uma protena
tpica do agente agressor.

Dessa forma, o organismo do paciente passar a fabricar permanentemente a

protena exgena, estimulando seu prprio sistema imune.

Essas vacinas podem ter finalidade preventiva, de forma semelhante s vacinas

clssicas, ou curativa, levando o sistema imune a atacar os agentes agressores j
instalados no organismo (Atkins et al., 2008, Sykes, 2008; Silva et al., 2009).

Modalidades de Terapia Gnica

Modalidades principais de terapia gnica

Terapia gnica restaura audio em rato com surdez congnita

Um grupo de pesquisadores da Califrnia , liderados por Lawrence Lustig, conseguiu pela

primeira vez, atravs de terapia gnica restaurar a audio de camundongos que tm surdez
congnita causada pela ausncia de uma protena. O estudo foi publicado na revista Neuron
e o resultado, sem dvida, msica para todos aqueles que podero no futuro beneficiar-se
dessa pesquisa. (Mayana Zatz 08/08/2012)
http://veja.abril.com.br/blog/genetica/sem-categoria/terapia-genica-restaura-audicao-em-camundongo-com-surdez-congenita/

Vetores para Terapia Gnica

A base da terapia gnica consiste na introduo de genes em clulas. Porm, a

entrada de DNA puro atravs da membrana plasmtica de clulas eucariticas
extremamente rara (Vellai & Vida, 1999).

Essa dificuldade , naturalmente, benfica para o organismo, pois dificulta

alteraes esprias do metabolismo celular e at mesmo transformaes
semelhantes s que se observam na evoluo das espcies.

Por conseguinte, de modo geral, h necessidade de um carreador que facilite

a entrada do DNA nas clulas vivas. Esse veculo denominado vetor.

H trs classes principais de vetores atualmente em desenvolvimento:

PLASMDEOS
VETORES VIRAIS
VETORES NANOESTRUTURADOS

Vetores para Terapia Gnica

PLASMDEOS
So sequncias de DNA relativamente simples, porm eficazes para expresso
de genes, nas quais possvel inserir um gene teraputico por tcnicas de
DNA recombinante (Voss, 2007; Clanchy & Williams, 2008; Gill et al., 2009).

Mas, para vencer a resistncia das clulas introduo de plasmdeos,

preciso fragilizar a membrana celular, o que pode ser obtido por diversos
mtodos, como o emprego de choques eltricos ou substncias que fragilizam
quimicamente a membrana celular (Dass, 2004; Cemazar & Sersa, 2007;
Favard et al., 2007; Wu & Lu, 2007).

Essas tcnicas so, entretanto, muito limitadas. Por exemplo, improvvel seu
uso para introduzir genes em rgos de difcil acesso, como o crebro. Assim,
o emprego de vetores plasmidiais limitado a algumas circunstncias, tais
como sua introduo por injeo intramuscular, como no caso das vacinas de
DNA ou no msculo cardaco, ou ainda em estudos experimentais em animais.

Essa tecnologia pode ter aplicaes importantes, por exemplo, para introduzir
o gene sadio em clulas isoladas e combinar terapia gnica com terapia
celular.

Vetores para Terapia Gnica

VETORES VIRAIS
Em contraposio resistncia da membrana celular entrada espontnea de
DNA em uma clula, os vrus so micro-organismos especializados exatamente
em invadir clulas e nelas introduzir material gentico. Contm cido nucleico
(DNA ou RNA) cercado por uma capa de protena e, em alguns casos, de um
envelope adicional de protena e lipdeos e seu ciclo de vida implica liberao
do cido nucleico viral na clula hospedeira. Essa propriedade explorada
para introduzir genes teraputicos nas clulas, por meio de tecnologias de
DNA recombinante.

Os vrus da famlia dos retrovrus, que inclui o HTLV causador de um tipo de

leucemia e o HIV causador da Aids, que pertence subfamlia dos lentivrus,
os quais vm sendo muito estudados como fonte de vetores para terapia
gnica. Ainda outros vetores so derivados de vrus da famlia dos adenovrusassociados, que no so patognicos para seres humanos. O princpio da
produo de vetores de origem viral para terapia gnica consiste em remover
os genes envolvidos nos mecanismos patognicos e de proliferao viral,
mantendo apenas o necessrio para invaso das clulas sem multiplicao,
seguida da insero de um gene teraputico no que resta do DNA viral
(Machida, 2002).

Vetores para Terapia Gnica

VETORES NANOESTRUTURADOS
Outra forma de introduzir DNA em clulas est sendo desenvolvida a
partir de preparados obtidos por tcnicas avanadas de nanotecnologia
(sanvicens & Marco, 2008). a se incluem polmeros que formam
verdadeiras redes que prendem um gene e soltam sua carga quando
penetram nas clulas, bem como vesculas de lipdeos contendo o dna,
capazes de fundir com a membrana das clulas, liberando seu contedo
no interior destas ltimas.
Esses vetores podem ser enriquecidos com molculas que ajudem a
especificar em que tipos de clulas o contedo poder penetrar, ou ainda
permitam guiar ou transferir seletivamente os vetores de um
compartimento para outro, por exemplo, do sangue para o crebro
(Pardridge, 2005, 2007.
Esta ltima tcnica importante, pois facilitar a terapia gnica cerebral
sem a necessidade de uma neurocirurgia para introduzir o vetor, bastando
injees endovenosas

Vetores para Terapia Gnica

VETORES NANOESTRUTURADOS

Modelo de vetor no viral combinado com molcula de endereamento. A figura usa como exemplo um imunolipossomo para transduo gnica
cerebral (Pardridge, 2005). Como a parede dos vasos sanguneos cerebrais muito resistente penetrao de frmacos, incluindo o DNA,
provenientes do sangue, o vetor composto de uma vescula formada por lipdeos, que contm no seu interior o DNA com o gene teraputico. Na
superfcie da vescula, so inseridos anticorpos contra o receptor de transferrina que reconhecem esse receptor na superfcie de clulas da parede
dos vasos sanguneos cerebrais e de neurnios. Assim, quando o vetor injetado na circulao, ele adere fortemente parede dos vasos
sanguneos cerebrais, o que facilita sua penetrao no tecido cerebral e, consequentemente, a introduo do gene teraputico nos neurnios.
Uma tcnica como essa pode ser usada para enderear vetores para o destino adequado, com base na escolha do anticorpo inserido na superfcie
do vetor, que dever ser seletivo para vasos sanguneos do rgo a ser tratado.

Terapia Gnica na Atualidade

As terapias gnicas so procedimentos novos que ainda se encontram em
fase experimental. O conhecimento bsico vem sendo adquirido em
laboratrios de pesquisa fundamental por meio de testes em modelos
experimentais e ensaios pr-clnicos.
Esses estudos validam o potencial de eficcia de uma estratgia
teraputica bem como permitem detectar potenciais riscos a seres
humanos, antecipando modificaes dos vetores e outros componentes
da estratgia teraputica que aumentem a segurana para uso humano.
A pesquisa fundamental em terapia gnica intensa e crescente no
mundo.

Terapia Gnica na Atualidade

Frequncia anual de publicao de artigos cientficos classificados sob o termo

significativo terapia gnica, registrados na base de dados do National Center
for Biotechnology Information (PubMed), no perodo 1980-2009

Concluso
Como em outras reas de investigao de novos mtodos teraputicos, a
aprovao de um produto ou processo de terapia gnica depende da
realizao de uma srie de ensaios clnicos.
Progressivamente e sempre acompanhados de vigilncia quanto a efeitos
adversos, destinam-se a testar a eficcia do novo produto ou mtodo em
amostras crescentes de pacientes, frequentemente distribudos em
mltiplos centros de pesquisa.
A realizao desses ensaios clnicos de terapia gnica depende de
aprovao prvia por comits de tica locais e nacionais, como a Comisso
Nacional de tica em Pesquisa (Conep) e Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana (CTNBio) no Brasil ou a Food and Drug Administration (FDA)
e o comit especfico do Instituto Nacional de Sade (NIH, do ingls
National Institutes of Health) nos EUA, que devem autorizar
procedimentos envolvendo DNA recombinante.

Concluso

Distribuio geogrfica dos pases-sede de ensaios clnicos de terapia gnica.

Reproduzida da pgina do Journal of Gene Medicine.

Referncias Bibliogrficas:
Terapia gnica: o que , o que no e o que ser Rafael Linden
estudos avanados 24 (70), 2010
http://www.scielo.br/pdf/ea/v24n70/a04v2470.pdf