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VII.

Gentica Microbiana
As bactrias no tm reproduo sexuada, mas trocam informao
Trs processos bsicos de transferncia gnica
Transformao
Transduo
Conjugao
Troca unvoca: um d, outro recebe DNA
Troca de plasmdeos DNA extra
Antes da sequenciao do DNA era difcil de detectar

Procurar alteraes no metabolismo celular


S se detectava o que se procurava: perda ou ganho de uma funo
A maioria das alteraes passava despercebida
Actualmente temos melhor tcnicas para detectar variaes no DNA. Mas,
sabemos o que significam?

1. Gentica Microbiana

Plasmdeos: pequenas molculas de DNA independentes do cromossoma


Vrios tamanhos
Muito importantes na engenharia gentica
Em geral na clula somente um plasmdeo est activo, mas podem coexistir
vrios
Podem-se encontrar em 20 a 60% dos ambientes

Existem vrios tipos de plasmdeos:


Factores Metablicos (factor M) que conferem funes metablicas pouco
usuais clula receptora (ex: degradao de hidrocarbonetos);
Factor Fertilidade (factor F) que transportam os genes para a ocorrncia da
conjugao;
Factores de Resistncia (factor R) que codificam a sntese de protenas que
protegem as bactrias (ex: resistncia aos antibiticos e aos metais pesados)
Factores Colinognicos (factor Col) que contm genes para a sntese de
bacteriocinas
Factores Virulentos (factor V) que codificam caractersticas virulentas (ex:
formao da cpsula)

2. Gentica Microbiana

1. Transformao
Na transformao, os genes so transferidos entre as clulas quando
fragmentos de DNA ou plasmdeos so tomados do meio ambiente por
uma clula
No necessita contacto fsico entre as clulas
Necessrio fenmeno de competncia
Fase de crescimento
Presena de clcio no meio
Sntese do factor de competncia

Estes fragmentos podem recombinar-se ou no com o cromossoma da


clula hospedeira
Integrao
Degradao

Elevadas concentraes de DNA facilitam a transformao


Clulas transformveis clulas competentes
A presena de DNAse inibe a transformao

3. Gentica Microbiana

Descoberta da Transformao

4. Gentica Microbiana

5. Gentica Microbiana

Ligao

Hidrlise

Integrao

Factor de
competncia
(travessia)

6. Gentica Microbiana

2. Conjugao
Na conjugao uma bactria liga-se a outra, passando-lhe fragmentos de
DNA cromossmico ou plasmdeos
Necessita contacto fsico entre as clulas: pilus produzido pela clula
dadora
O DNA transferido atravs de uma ponte citoplasmtica: tubo de
conjugao
Uma vez no interior da clula receptora, combina-se com os seus
genes homlogos
No afectada pela presena de DNAse
Na maioria das vezes somente o plasmdeo F transferido: a conjugao
F+ x F As outras conjugaes so raras:
Hfr x F F x F-

7. Gentica Microbiana

Evidncia da Conjugao

8. Gentica Microbiana

9. Gentica Microbiana

Integrao do plasmdeo F

Clulas diferentes ligam o


plasmdeo a locais distintos do
cromossoma

10. Gentica Microbiana

11. Gentica Microbiana

3. Transduo
Envolve um vrus (bacteriofago) como portador de DNA bacteriano
Pode dar-se de diferentes maneiras
Transduo generalizada
Transduo especializada
Mecanismo de troca gentica muito comum entre as bactrias
Na transduo o DNA bacteriano combina-se com o DNA cromossmico do
hospedeiro, alterando a sua informao gentica

12. Gentica Microbiana

Transduo
Generalizada
Ocorre durante o ciclo ltico
viral
As partculas transducentes
perdem capacidade de induzirem
o ciclo ltico no hospedeiro
Difcil de detectar

13. Gentica Microbiana

Transduo
Especializada

Ocorre durante o ciclo


exciso do DNA incorrecta

lisognico:

Evento muito raro


Clulas
lisognicas
adquirem
caractersticas toxina diftrica
Os fagos transducentes s se replicam
com a ajuda dos fagos helper

14. Gentica Microbiana

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