CRESCIMENTO MICELIAL DE Fusarium oxysporum EM DIFERENTES MEIOS DE

CULTURA

SOUZA, Bruna de Paula; 2 FERREIRA, Claudecir Antunes; DA SILVA, Cleberson Paulo;

STOFALETI, Fernando; 5 NOZAKI, Marcia De Holanda.

Graduando em Engenharia Agronmica, Pontifcia Universidade Catlica do Paran (PUC/PR),

Toledo, PR, e-mail, bruna.souza@cvale.com.br; 2Graduando em Engenharia Agronmica,
Pontifcia
Universidade
Catlica
do
Paran
(PUC/PR),
Toledo,
PR,
claudecir_antunes@outlook.com; 3Graduando em Engenharia Agronmica, Pontifcia
Universidade Catlica do Paran (PUC/PR), Toledo, PR, clebinhotrx@hotmail.com; 4Graduando
em Engenharia Agronmica, Pontifcia Universidade Catlica do Paran (PUC/PR), Toledo, PR,
fernando.stofaletti@hotmail.com; 5Professora adjunto da Pontifcia Universidade Catlica do
Paran (PUC/PR), Toledo, PR, marcia.nozaki@pucpr.br.

RESUMO
O fungo Fusarium oxysporum responsvel por vrias doenas que vai de manchas a morte
celular pode ocorrer em diferentes hospedeiros, objetivou-se com este trabalho avaliar o crescimento
micelial de Fusarium oxysporum em diferentes meios de cultura. O fungo foi cultivado utilizando quatro
meios de cultura (gua gar, batata dextrose gar, gar nutriente, gua gar e caldo de batata) durante o
perodo de incubao de sete dias, a temperatura ambiente de 25 C. O ensaio foi conduzido em
delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial (4x4), com quatro repeties. Discos de 5
mm de dimetro, retirados da borda da colnia cultivada em meio BDA, foram transferidos para o centro
de placas de Petri contendo 100 mL de cada meio. Determinou-se o crescimento micelial por meio da
medida do dimetro das colnias em dois sentidos diametralmente opostos. Foram observadas variaes
significativas na produo de massa micelial nos diferentes meios de cultura testados, sendo que guanutriente e gua-gar-caldo de batata-doce induziram maior crescimento micelial. Enquanto que no meio
Batata Dextrose Agar e gar-gua ocorreu s menores taxas de crescimento micelial.
PALAVRAS-CHAVE: Fisiolgica, Doenas, Incubao, Dimetro.

INTRODUO
Fungos so classes extremamente verstil de microrganismos que compreende na
maioria das vezes saprfitas que vivem em matria orgnica. Fusarium oxysporum um fungo
altamente onipresente, anamrfico que infecta uma ampla gama de hospedeiros que causam
vrias doenas, como murcha vascular, amareles, podrido do rizoma, podrido da raiz, e
tombamento. Sua disseminao ocorre por meio de sementes contaminadas, pelo vento e
gua de irrigao que transportam partculas de solo infestado e condios (GORDON TR ,1997;
COELHO, 2001). uma saprfita abundante e ativo na do solo e da matria orgnica, com
algumas formas especficas que so patognicas para os vegetais, flores e culturas de campo.
(SMITH, 1988).
O gnero Fusarium, segundo a classificao taxonmica, constitui um estado anamorfo
da ordem Hypocreales do Filo Ascomycota (SEIFERT, 1996). A taxonomia do gnero Fusarium
no est bem estabelecida (DUGGAL et al., 1997). Dentro do gnero Fusarium, h uma srie
de variaes de caractersticas morfolgicas e patognicas, resultando em uma classificao
complexa dividida em sees, formae speciales e raas (OLIVEIRA & COSTA, 2002).
Apesar da importncia econmica imensa deste fitopatgeno, poucos trabalhos
relataram estudos de crescimento deste gnero em meios de cultura. (FAROOQ S, 2005).
Alm disso, as mudanas induzidas pelo fungo na cultura, como as alteraes no pH e o
padro de utilizao do substrato tambm no foram trabalhados. Do mesmo modo, a maioria
dos pesquisadores avaliaram o teor de protena fungica em meio de crescimento e meio

ambiente natural (MARUYAMA Y 1962), mas alteraes em outros parmetros de crescimento

ao longo de um perodo de tempo tm sido largamente ignorado. A presente pesquisa foi
conduzida para estudar o padro de alteraes no crescimento micelial de Fusarium
oxysporum.

MATERIAL E MTODOS
O experimento foi realizado no Laboratrio de Fitopatologia da Pontifcia Universidade
Catlica do Paran- PUC/PR, localizada no municpio de Toledo-PR. Neste experimento, foi
avaliada o crescimento micelial de Fusarium oxysporum em quatro meios de cultura. O isolado
de Fusarium oxysporum foi obtido a partir de exemplares da biblioteca de fungos (micoteca)
desta instituio.
Os meios de cultura testados foram: gar-agua (AA) (2 g de gar e 100 mL gua
deionizada), Batata-dextrose-agar (BDA) (3,9 g BDA e 1000 mL de gua deionizada), AgarNutriente (AN) (2,8 g de Agar, 28 g de Nutriente e 100 mL de gua deionizada), Agar-AguaCaldo de Batata (AACb), o meio agar, agua e caldo de batata doce foi preparado, utilizando
200 g de batata, 1,7g de gar e 100 mL de gua deionizada. Aps o preparo, todos os meios
foram autoclavados a 120 C por 20 minutos. Da cultura pura do isolado, foram retirados discos
de 5 mm de dimetro e depositados no centro de cada placa de Petri com 100 ml de seus
respectivos meios testados.
A avaliao do crescimento micelial constitui da leitura, em 48h, 96h, 144h e 168h, do
dimetro da colnia em dois sentidos diametralmente opostos, com auxlio de uma rgua
milimetrada definindo uma mdia de quatro leituras. As leituras foram concludas quando o
crescimento da colnia cobriu completamente o dimetro da placa em um dos tratamentos,
determinando-se a velocidade mdia de crescimento do fungo.
O experimento seguiu delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4x3,
com quatro repeties, onde cada parcela foi representada por uma placa de Petri de 90 mm
de dimetro. Foi utilizado o teste de Tukey ao nvel de 5 % para a comparao das mdias.
Utilizou-se o programa estatstico SASM - Agri v. 8.2 para anlise dos dados (CANTERI, 2001).

RESULTADOS E DISCUSSO
O crescimento micelial de Fusarium oxysporum ocorreu em todos os meios de culturas
submetidos, no entanto, segundo os resultados da anlise de varincia (Tabela 1), houve
diferena significativa para os diferentes meios de cultura avaliados. O gnero Fusarium
composto de vrias espcies que possuem ampla adaptao em diferentes ambientes
(BURGESS et al., 1994). Dessa maneira, a taxa de crescimento micelial pode variar entre as
diferentes espcies.
Tabela 1 Efeito do crescimento micelial, em (mm), de Fusarium oxysporum em diferentes
meios de cultura.

Tratamento
gar-gua
BDA
gar-Nutriente
gar-gua-caldo batata doce
C.V.
Mdia

48h
1,9 a
1,9 a
2,0 a
1,9 a
3,99%
1,92

Taxa crescimento micelial

96h
144h
168h
3,7 b
5,4 b
6,4 b
4,0 b
5,0 b
5,7 b
5,5 a
8,1 a
8,8 a
5,3 a
7,4 a
8,3 a
5,62%
5,49%
6,64%
4,62
6,5
7,3

Mdia
4,3 b
4,1 b
6,1 a
5,7 a

* Mdias de quatro repeties por tratamento. Mdias seguidas das mesmas letras minsculas
(colunas) no diferem estatisticamente entre si pelo teste de Tukey, ao nvel de 5% de
probabilidade.

O fungo apresentou rpido desenvolvimento, completando seu crescimento em toda

placa e finalizando a avaliao no perodo de sete dias.
Diferente das 48 horas de avaliao no houve diferena estatstica significativa entre
os tratamentos. As avaliaes realizadas a partir das 96 horas mostram diferena do
crescimento micelial do fungo em meio gar-nutriente gar-gua-caldo de batata, sendo
significativamente diferentes dos demais tratamentos, proporcionando maior crescimento do
fungo at o trmino das avaliaes.
Obteve-se resultados diferentes neste trabalho, aos de NOZAKI, (2004) constataram
que Diaporthe citri apresenta maior crescimento micelial em meio aveia gar,
DA SILVA et al. (2012), no qual obteve maior crescimento de Fusarium solani nos
meios BDA, pois este proporcionou maior velocidade de crescimento micelial diferindo
estatisticamente dos outros meios nos regimes de luz contnua e fotoperodo de 12h, sendo
que os dados diferem deste trabalho, onde os meios gua-gar e gua-gar-caldo de batata
apresentou o maior crescimento.

CONCLUSO
1. Existe diferena entre os tratamentos testados referentes ao meio de cultura.
2. O meio de cultura gar-nutriente e gar-gua-caldo de batata doce mostrou maior eficincia
para a crescimento micelial de Fusarium oxysporum em comparao aos demais meios de
cultura estudados.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
BURGESS, L.W.; SUMMERELL, B.A.; BULLOCK, S. GOTT, K.P.; BACKHOUSE, D. Laboratory
manual for Fusarium research, Sydney, University of Sydney.1994.
CANTERI, M. G., ALTHAUS, R. A., VIRGENS FILHO, J. S., GIGLIOTI, E. A., GODOY, C. V.
SASM - Agri : Sistema para anlise e separao de mdias em experimentos agrcolas
pelos mtodos Scoft - Knott, Tukey e Duncan. Revista Brasileira de Agrocomputao, V.1,
N.2, p.18-24. 2001.
COELHO, R. S. B. Doenas fngicas do caupi. In: REUNIO NACIONAL DE PESQUISA DO
CAUPI, 5., 2001, Teresina. Anais... Teresina: Embrapa Meio Norte, 2001. p. 321- 322.
DA SILVA, J.L.; TEIXEIRA R.N. V Esporulao e crescimento micelial de Fusarium solani em
diferentes meios de cultura e regimes de luminosidade Revista Agro@mbiente On-line, v. 6,
n. 1, p. 47-52, 2012
DUGGAL, A.; DUMAS, M.T.; JENG, R.S.; HUBBES, M. Ribosomal variation in six species of
Fusarium. Mycopathologia, v.140, p.35-49, 1997
FAROOQ S, IQBAL SM, RAUF CA. Physiological studies of Fusarium oxysporum F.sp. Ciceri.
Int J Agric Biol. 2005.
GORDON TR, MARTYN RD. The evolutionary biology of Fusarium oxysporum. Annu Rev
Phytopathol. 1997.
MARUYAMA Y, ALEXANDER M. Distribution of protein and nucleic acids in hyphae and
microconidia of Fusarium. Arch Mikrobiol. 1962.
NOZAKI, M.H.; CAMARGO, M.; BARRETO, M.Caracterizao de Diaporthecitri, em diferentes
meios de cultura, condies de temperatura e luminosidade. Fitopatologia Brasileira. v.29,
n.4, p.429-432, 2004.

SMITH IM, DUNEZ J, PHILLIPS DH, LELLIOTT RA, ARCHER SA. European handbook of plant
diseases. Oxford: Blackwell Scientific Publications; 1988.