[29/07/2010]

Smen sexado: histrico

e atual status da
tecnologia

Henderson Ayres
Departamento de
Reproduo Animal,
FMVZ-USP; Department
of Animal Science,
Gainesville, UF-USA

Rafael Sisconeto
Bisinotto
Department of Animal
Science, Gainesville, UFUSA

A seleo do sexo na concepo (produo direcionada de machos ou fmeas) possui uma longa histria, na qual ocorreram
grande descobertas e tambm muitas desiluses. Isso se deve falta de compreenso dos princpios bsicos que regem a
determinao do sexo em mamferos. Um exemplo clssico ocorreu na Grcia em 470-402 aC, quando Demcrito sugeriu que o
testculo
direito
produziria
apenas
machos,
enquanto
o
esquerdo
produziria
apenas
fmeas.
O smen sexado se tornou comercialmente disponvel em 2006, utilizando-se o mtodo de citometria de fluxo para a separao
de clulas. At os dias de hoje, nenhum outro mtodo provou ser eficaz para a sexagem de smen. Vrios milhes de doses de
smen sexado j foram produzidos e as empresas tem garantido aproximademente 90% de eficcia do produto. A proporo de
animais nascidos com o sexo desejado poderia exceder 95%, porm o impacto no custo de produo tornaria a dose de smen
muito
cara.
A separao dos espermatozides para a produo de machos (cromossomo Y) ou fmeas (cromossomo X) possvel devido
diferena no contedo de DNA dessas clulas (o espermatozide que gera fmea possui 4% mais material gentico que o
espermatozide que gera macho). Com o uso da citometria de fluxo para separao de clulas possvel separar os dois tipos de
espermatozides com alta confiabilidade. O citmetro de fluxo associa a emisso de raios laser com colorao diferencial dos
espermatozides viveis e no viveis e com as foras hidrodinmicas que direcionam o espermatozide durante o processo de
separao
dos
espermatozides
X
e
Y.
Mamferos produzem smen de forma que 50% dos espermatozides carregam o cromossomo X e 50% carregam o cromossomo
Y. Muitas diferenas tericas entre o espermatozide X e Y tm sido sugeridas (por exemplo, differenas de tamanho, peso e
densidade, dentre outras). Entretanto, essas diferenas so to pequenas que atualmente impossvel medir a maioria deles de
forma precisa. Assim sendo, os espermatozides so, na prtica, idnticos quanto ao tamanho, peso, velocidade, etc.
Garner e colaboradores demonstraram em 1983 que a abordagem por citometria de fluxo foi capaz de determinar com preciso as
diferenas no contedo de DNA entre espermatozides contendo cromossomos X e Y no smen de bovinos, ovinos, sunos e
coelhos. No entanto, os espermatozides foram mortos durante o processo de torn-los permeveis ao corante fluorescente que
possibilita
a
separao.
Nos primeiros usos do smen sexado para inseminao artificial em bovinos foi utilizado smen resfriado. Este smen era
coletado na central, processado, sexado e enviado para o centro onde se encontravam as fmeas aptas a serem inseminadas. Para
isso, era necessrio um conjunto de transporte bem coordenado e sincronizado. Quando as inseminaes foram feitas dentro do
prazo mximo de 12 h do processo de sexagem, as taxas de concepo foram prximas a 50%. Entretanto, Seidel e colaboradores
(1997) constataram que a fertilidade diminuiu consideravelmente quando as inseminaes ocorreram 17 h ou mais aps o inicio
do
processo
de
sexagem.
Assim, a disponibilidade de smen sexado foi severamente limitada pela dificuldade de coleta e sexagem de um nmero
suficiente de espermatozides (20 milhes de espermatozides) para inseminao e pela dificuldade de enviar o smen resfriado
para longas distncias. Para isso iniciaram-se estudos de criopreservao de smen sexado. O primeiro relato de sucesso na
criopreservao de smen bovino sexado demonstrou que os mtodos de criopreservao utilizados em smen convencional
funcionaram bem. Este avano permitiu que a realizao da inseminao em locais afastados do centros de coletas.

Estudos relacionados ocorrncia de aborto, durao da gestao, mortalidade neonatal, dificuldade de parto e diferenas de peso
ao nascimento ou desmama demonstraram que o uso de smen sexado no alterou nenhum destes parmetros quando
comparado ao uso do smen convencional. Um relatrio recente do uso comercial de smen sexado mostrou que as taxas de
aborto em novilhas inseminadas com smen sexado (1,4%, n = 5.495) no diferiu daquelas observadas aps o uso de smen
convencional
(1,9%,
n
=
4.902).
Considerando-se as perdas de transformao e outras questes logsticas, a concentrao de 2 milhes de espermatozides por
palheta tornou-se a dose padro da indstria, balanceando custo e fertilidade. Foi verificado que ao dobrar o nmero de
espermatozides sexados por dose, a taxa de prenhez aumentou em apenas 2 a 4% para a maioria dos touros. Assim sendo,
animias submetidos a IA utilizando-se smen sexado com esta dose padro tem apresentado de 70 a 90% da concepo do
observada em animais que recebem smen convencional. Com relao ao uso de smen sexado em programas de superovulao,
os nmeros de embries recuperados tem sido reduzidos pela metade quando comparado ao uso de smen convencional.
Entretanto, a taxa de prenhez por embrio produzido com smen a mesma do embrio originado a partir de smen
convencional.
importante salientar que existe grande variao individual na fertilidade de touros submetidos ao processo de sexagem, o que
deve ser levado em considerao no momento da escolha do reprodutor para programas de inseminao artificial e de
transferncia
de
embries.
O
maior
desafio
ser
melhorar
a
fertilidade
do
smen
sexado.
Bibliografia
D.L. Garner, G.E. Seidel Jr. History of commercializing sexed semen for cattle. Theriogenology 69 (2008), pp. 886-895.
D.L. Garner, B.L. Gledhill, D. Pinkel, S. Lake, D. Stephenson and M.A. Van Dilla et al., Quantification of the X- and Ychromosome-bearing sperm of domestic animals by flow cytometry, Biol Reprod 28 (1983), pp. 312-321.
G.E. Seidel Jr., C.H. Allen, L.A. Johnson, M.D. Holland, Z. Brink and G.R. Welch et al., Uterine horn insemination of heifers
with very low numbers of nonfrozen and sexed sperm. Theriogenology 48 (1997), pp. 1255-1264.