POP- AULA PRTICA DE HEMOGRAMA

(ERITROGRAMA)
Prof.Archangelo
Material Necessrio
Seringa 5ml com agulha 25x7
Alcool 70% (iodado)
Garrote
Tubo vacuun EDTA ( tampa roxa )
microscpio
lminas para microscopia
laminulas
tubo capilar (sem heparina)
carto para leitura de Ht
tubo de ensaio
pipeta volumtrica de 10 volumes
pra para aspirao
reagentes Drabkin- Hayen
corante pantico
Becker p/ descate para materiais
micropipetas com ponteiras
cmara de neubauer

banho maria
bico de Bunsen
microcentrfuga
espectrofotmetro + cubetas
gua destilada
Descarpack

Noes bsicas:
lcool 70% - Iodado
Puno garrote - bizel
Micropipetas - 1 e 2 estgio
Ponteiras excesso- descarte- lavagem
Menisco de pipetas volumtricas
Canara de neubauer lamnula micropipeta
Capilar bico de Bunsen
Microscpio macro e micromtrico lentes - chariot

Ordem para a realizao do Hemograma Completo:

-Hematcrito
-Dosagem de Hemoglobina
-Contagem de glbulos brancos e vermelhos
-Contagem e diferencial dos leuccitos com observao da srie vermelha
-Clculo dos ndices Hematimtricos (VCM, HCM, CP.CM)
-Contagem de plaquetas e reticulcitos quando solicitados
-Velocidade de Hemossedimentao (VHS) quando solicitado.

Hematcrito:
Preencher do volume do tubo capilar, vedar uma das extremidades ( com massa de
modelar ou queimando).
Em seguida colocar o tubo na microcentrfuga (colocando a parte vedada para fora),
centrifugar a 10.000 RPM por 5 minutos.
Realizar a leitura em tabela apropriada.

Valores de referncia:
Homens: 40% a 50%
Mulheres: 35% a 45%
Crianas at um ano: 34% a 40%
Recm-nascidos : 50% a 60%
Interpretao: Valores abaixo indicam anemia ou hidratao excessiva (gravidez), e valores
acima indicam desidratao ou policitemia.

Dosagem de Hemoglobina:
Mtodo da cianometahemoglobina:
Para dosagem de Hb necessrio:
Usarmos padres de concentraes conhecidas,
geralmente utiliza-se as concetraes de 5, 10 e/ou 15g/dl.
Lquido de Drabkin:
Bicarbonato de Sdio - 1,0g
Cianeto de Potssio - 52,0mg
Ferrocianeto de Potssio - 198,0mg

gua destilada - 1000,0ml

Em um tubo de ensaio pipetar 5,0 ml de reativo de Drabkin e colocar 20l de sangue
total (homogenizado).
Incubar 10 minutos temperatura ambiente e fazer a leitura em esprectrofotmetro em
540 nm zerando o aparelho com Drabkin .
Calculo:
Deternina-se a densidade tica (DO) do padro e posteriormente um fator que nos
fornecer a concentrao de cada amostra quando medidas com mesmo reagente.
Portanto:

.[]P = F

DO P
Assim:
Fator: concentrao do fator
leitura do padro

Ento : [ ] da Hb da amostra = DO amostra x F

Assim: Leitura x fator = Hb g /dl

Valores de referncia:
Homens: de 14 a 18 g/dl
Mulheres: de 12 a 16 g/dl
Crianas at um ano:11 a 12 g/dl
Recm-Nascido: de 14 a 19 gIdl

Interpretao: A dosagem de Hb est relacionada diretamente com o contedo e colorao

do eritrcito sendo de grande auxlio no diagnstico das anemias.
Valores baixos correlacionam-se processos anmicos

Contagem de hemcias:
Contagem de clulas:

Mtodo do Hemocitmetro em Cmara de Neubauer

Contagem de glbulos vermelhos: determinao de eritrcitos por mm de sangue.

Em tubo de ensaio pipetar 4,0 ml de soluo de Hayen (diluidor isotnico

contendo um fixador para conservao das clulas) e 20l de sangue total (diluio 1:200).
0,02 ml X 3,98ml
Soluo diluente:
Citrato de sdio - 3,8g
Fornol a 40% -2,0 mI
gua destilada q.s.p. - 100,0mI

Fixar a lamnula sobre a cmara de Neubauer e preencher-la com o sangue diludo e

contar os cinco quadrados indicados na imagem abaixo. Para esta contagem pode ser
utilizada a objetiva microscpica de 10x.

Multiplicar o nmero de hemcias encontradas nos cinco quadrados por 10.000.

Resultado em mm.
Valores de referncia:
Homens: ],5 a 5,5 milhes/mm
Mulheres: 4,0 a 5,0 milhes/mm
Recm-nascidos: 5,5 a 7,0 milhes/mm
Interpretao: Valores aumentados so encontrados nas policitemias e os valores
diminudos relacionam-se aos processos anmicos de diversas etiologias.
A contagem em cmara de Neubauer oferece grande variabilidade de erro e dispndio de
tempo, portanto sempre que possvel prefervel a contagem em aparelhos automatizados.

ndices hematimtricos:

Contagem de reticulcitos:
Em um tubo de ensaio colocar 2 gotas de sangue e 2 gotas de azul de cresil brilhante,
incubar 15 minutos em banho- Maria 37 C.
Fazer o esfragao e contra corar com Pantico ou Leishman.
Observar de 1000 a 2000 relatando a porcentagem de Reticulcitos encontrados.
Calculo:
N de hemcias por mm x reticulcitos encontrados
N de hemcias contadas
V. R. 50 a 150 mil mm ou de 0,5 a 1,5%