Vol. No.

Rev. Bras. Fisiot. 4, I (1999), 19-25

@Associação Brasileira de Fisioterapia

AÇÃo DO ULTRA-SOM TERAPÊUTICO SOBRE A VASCULARIZAÇÃO PÓS-

LESÃO MUSCULAR EXPERIMENTAL EM COELHOS

Dionísio, V. C. I e Volpon, J. B. 2
I
Departamento de Ortopedia e Traumatologia, Universidade de Ribeirão Preto, UNAERP
2
Departamento de Cirurgia, Ortopedia e Traumatologia, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, USP
Correspondência para: Valdeci Carlos Dionísio, Rua Iguape, 1261, ap. 14, Jardim Paulistano,
CEP 14090-090, Ribeirão Preto, SP
Recebido: 07/10/98 - Aceito: 09/08/99
RESUMO
Foi analisado o efeito da aplicação do ultra-som terapêutico na vascularização do músculo após ser provocada uma lesão experimental.
Foram utilizados 10 coelhas da raça Nova Zelândia, com peso médio de 2,5 kg. Os animais foram submetidos à lesão por esmagamento
do músculo reto femoral em ambas as coxas de acordo com o modelo cirúrgico de Allbrook (1962), e após 24 horas, um dos lados foi
tratado com ultra-som terapêutico e, o outro, serviu como controle. A freqüência utilizada foi de 1 MHz e intensidade de 0,5 W/ cm2
por 5 minutos, durante 10 dias consecutivos. Após 48 horas do término do período de tratamento, os animais foram sacrificados.
Realizou-se a lavagem do sistema vascular com solução fisiológica e depois fez-se a injeção de uma solução de sulfato de bário e tinta
da China por meio de um cateter introduzido na aorta abdominal. Os músculos do fêmur foram ressecados e submetidos ao processo
de diafanização, de acordo com a técnica de Spalteholz. Depois que as peças foram fatiadas e tornaram-se transparentes, foram
examinadas por microscópio cirúrgico. Os resultados não mostraram diferenças no padrão da vascularização (artérias e arteríolas)
entre os lados tratados e não-tratados, sugerindo que o ultra-som terapêutico não provocou mudanças no padrão vascular após aplicação
precoce em lesão muscular.
Palavras-chave: ultra-som, neovascularização, músculo esquelético, lesão muscular.

ABSTRACT
The effects of therapeutic pulsed ultrasound was investigated on experimental muscular lesions of rabbits. Ten white New Zealand
rabbits weighing 2,5 kg were operated on and a crush injury of the rectus femoris on both hind limbs was performed according to the
Allbrook technique. Twenty-four hours later therapeutic ultrasound was applied on one side and the other side was kept as a control.
The following parameters were used: frequency 1 MHz, intensity 0,5 W/cm2 , treatment time 5 minutes and a whole of IO sessions
were completed. Two days after completion of the treatment the animals were killed and the arterial system of the hind limbs was
injected with a mixture of barium sulphate and Indian ink. The quadriceps was harvested and processed according the Spalteholz
technique. The vasculature of the specimens, specially in the local of thc injury was studied. The results showed no difference in the
vascular pattern between treated and untreated sides.
Key words: ultrasound, angiogenesis, skeletal muscle, muscular lesion.
INTRODUÇÃO da permeabilidade celular (Dyson & Suckling, 1978),
aumento da síntese protéica e de DNA (Pospisilová, 1976),
As ações biológicas do ultra-som têm sido aumento do trânsito de íons cálcio e metabolitos através da
investigadas desde a introdução deste recurso terapêutico, membrana celular (Roche & West, 1984), aumento da
há mais de 50 anos. Os efeitos considerados térmicos são atividade fibroblástica, desgranulação dos macrófagos
o aumento da elasticidade de estruturas colagenosas, (Young & Dyson, 1990a) e a angiogênese (Young &
diminuição da rigidez articular, diminuição da dor e do Dyson, 1990b), todos em benefício do processo de
espasmo muscular e aumento do fluxo sangüíneo (Dyson, reparação.
1987). Os efeitos tidos como não-térmicos são o aumento

20 Dionísio, V. C. e Volpon, J. B. Rev. Bras. Fisiot.

 As lesões musculares por sua vez, têm alta incidência,
sejam no indivíduo sedentário, atletas ocasionais ou de
competição que buscam recuperação rápida e de qualidade,
de modo a recuperar a condição pregressa. O processo de
reparação muscular apresenta uma seqüência básica de
eventos, que inicia-se pela degeneração da fibra lesada,
observada entre 6 e 24 horas pós-Iesão (Crisco et al., 1994),
ativação de células satélites e intensa inflamação entre 24 e
48 horas pós-Iesão (Lehto & Jãrvinen, 1991) e ativação de
fibroblastos depois de 24 a 36 horas (Fisher et al., 1990). O
colágeno tem o importante papel de regular o crescimento
da fibra muscular (Allbrook, 1962) e as células satélites,
após ativadas, diferenciam-se em mioblastos e fundem-se
aos miotubos e aí são produzidas as proteínas musculares
específicas para finalizar o processo de reparação.
Todo esse processo é dependente da vascularização,
que fica intensificada do 3 0 até 0 122 dia pós-Iesão (Józsa
et al., 1980). Esta vascularização é necessária à chegada de
elementos celulares e suprimento de sangue, que tornam o
meio ambiente inicialmente anaeróbio em um meio
aeróbio, que parece ser o mais propício para a reparação
muscular (Lehto & Jãrvinen, 1991).
Embora o ultra-som seja muito utilizado para
tratamento da lesão muscular, há muitos questionamentos
quanto a sua eficácia. Gam & Johannsen (1995), em revisão
bibliográfica sobre o ultra-som no tratamento das desordens
músculoesqueléticas, mediante meta-análise, encontraram
em apenas nove trabalhos evidências de que o ultra-som
tenha sido o responsável pelos achados e concluíram que o
tratamento ultra-sônico está baseado em atitudes empíricas.
Todavia, a necessidade de um gradiente hipóxico
inicial para ocorrer o crescimento do capilar sangüíneo
(Knighton et al., 1981) e a possibilidade de diminuição na
pressão de oxigênio no tecido muscular após irradiação
ultra-sônica (Rubin et al., 1990), sugerem que o ultra-som
pode ser benéfico à reparação muscular. Assim, este
trabalho propõe a investigação da possível associação direta
do efeito do ultra-som e angiogênese na lesão muscular.
MATERIAL E MÉTODO
Foram utilizadas dez coelhas adultas, albinas da raça Novaliberada (Williams, 1983). O cabeçote foi movimentado
Zelândia, com peso médio de 2,5 kg. Para a realização da lesãopara evitar a geração de calor excessivo.
muscular foi empregado o modelo cirúrgico de Allbrook
(1962), com algumas modificações que consistiram na mudançaTécnica de Injeção de Vasos
do músculo a ser lesado e menor tempo de esmagamento
muscular. Os animais foram anestesiados endovenosamente
com pentobarbital sódico, na dose de 40 mg/kg de peso corporal
e administradas doses adicionais conforme a necessidade de
manutenção do plano anestésico. Ambas as coxas foram
tricotomizadas, os coelhos colocados em decúbito lateral e o
joelho em 90 0 de flexão. A anti-sepsia foi feita com álcool-
iodado 4%. A incisão foi realizada na face externa da coxa,
longitudinal, retilínea e com aproximadamente 2,5 cm de
comprimento. A pele foi afastada e divulsionada para permitir a
visualização da massa muscular do quadríceps e identificar o
septo entre os músculos reto femoral e vasto lateral (Figura Ia).
Em seguida,
foi feita a divulsão muscular pelo mesmo septo e separados
os dois músculos até a face medial da coxa (Figura 1 b).
Depois, com régua milimetrada, foi determinada uma
distância de 3,0 cm do pólo superior da patela, com o joelho
em 900 de flexão.
Nessa localização foi introduzida uma pinça
hemostática do tipo "Kelly", de modo que o músculo reto
femoral ficasse preso entre suas extremidades (Figura IC).
O limite de introdução foi padronizado com uma marca na
própria pinça que foi a mesma utilizada em todos os
animais. Assim que posicionada, foi efetuado o
esmagamento muscular com o fechamento da pinça até o
primeiro dente da cremalheira, por 30 segundos (Figura Id).
A pinça foi retirada e a lesão produzida inspecionada
(Figura le). Em seguida, a pele foi suturada (Figura ID e
aplicado novamente álcool-iodado 4%. O mesmo
procedimento foi realizado na coxa oposta. As incisões, em
ambas as coxas foram suturadas e permaneceram expostas
sem que houvesse a realização de curativos.
Aplicação do Ultra-som
A primeira aplicação do ultra-som ocorreu 24 horas
após a produção da lesão e repetida por dez dias
consecutivos, no mesmo período do dia. O ultra-som foi
usado no modo pulsado a 50% (1 :2), freqüência de 1,0
MHz, intensidade de 0,5 W/cm2 (SATA) e tempo de cinco
minutos por aplicação. Antes de cada lote de animais o
aparelho era calibrado com dosímetro de precisão. Os
animais de numeração par tiveram as coxas esquerdas
tratadas e, os de numeração ímpar, as coxas direitas. A
aplicação deu-se na face anterior da coxa e sobre a região
da lesão. Foi utilizado gel como meio aplicador e o
cabeçote foi modificado para adequar o transdutor ao
tamanho da coxa do animal. O cabeçote tinha formato
cônico que, por meio de dois refletores planos, direcionava
a onda e provocava a diminuição do comprimento de onda
e o aumento de sua amplitude, sem modificar a energia
Dois dias após o término do tratamento os animais
foram sacrificados com dose letal endovenosa de
pentobarbital sódico. A parede abdominal foi seccionada
com uma incisão xifopúbica e a aorta abdominal abordada,
dissecada e canulada, no sentido proximal para distal, com
cateter de oxigênio no 6, fixado por fio cirúrgico 50. A veia
cava inferior também foi seccionada de modo que seu
conteúdo pudesse refluir livremente. Em seguida, foi feita
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a lavagem do sistema vascular com solução fisiológica, fixação e o membro posterior do animal foi amputado
injetada com uma seringa de vidro conectada ao cateter, proximalmente ao osso ílio e distalmente no terço médio
até que o refluxo estivesse límpido (cerca de 500 ml). da perna. A peça resultante foi colocada em solução de
Depois, foi injetada uma solução de sulfato de bário 70% formalina (formol a 10%) por dois dias. Depois, a pele foi
e tinta da China 30% (Volpon & Santos Neto, 1983) com removida, a articulação coxofemoral desarticulada e
seringa de vidro conectada ao mesmo cateter iniciado o processo de diafanização. A peça foi colocada
(aproximadamente 15 ml). em solução de álcool 70% por 48 horas e, depois, mantida
4 l, 1999 O Ultra-som na Neovascularização Pós-Iesão Muscular 21

Figura 1. Principais etapas cirúrgicas de produção da lesão muscular. A — visualização da massa muscular do quadríceps. B — divulsão do músculo
reto femoral. C — posicionamento da pinça até a marca padronizada para produzir a lesão. D — esmagamento muscular. E — músculo
esmagado com demarcação dos dentes da pinça. F — pele em álcool absoluto por nove dias, com troca da solução a
suturada. cada três dias. Foi removido o músculo quadríceps femoral
em bloco, descolando-o da inserção femoral, com secção
do tendão patelar e iniciado o processo
A pressão de injeção foi manual e controlada de clarificação de acordo com a técnica de Spalteholz (Volpon &
empiricamente, de modo a permitir livre fluxo da solução, Santos Neto, 1983). Para tanto, o músculo foi mantido em
evitar excesso de pressão c ruptura dos vasos. Cerca de benzeno puro por cinco dias e, depois, os componentes do
uma hora após a injeção do corante estava completada sua quadríceps foram dissecados e separados, ficando presos apenas
pelo conjunto tendão quadriciptal e patela. Os músculos foram Outros ramos vasculares independentes penetravam
amarrados em quadros de aço de 6 x 12 cm para impedir retração na periferia do músculo e subdividiam-se e realizavam
e preservar o comprimento nas etapas seguintes. Todo o conjunto conexões anastomóticas com os ramos provenientes do
foi mantido em benzeno. Após relativa transparência (em torno de vaso central (Figura 2b).
uma semana) o músculo reto femoral foi separado e regularizado Na região da lesão foi observada a presença de
em fatias longitudinais de 2 a 3 mm de espessura, com auxílio de
derrame difuso de contraste (Figura 3a e 3b). Houve maior
lâminas de barbear. Estas fatias foram colocadas entre duas
quantidade de vasos de pequeno calibre em direções
lâminas de vidro, presas por clipes metálicos e mantidas em
variadas, situados por toda a área da lesão, diferentemente
benzeno por mais 15 dias para completar a diafanização.
22 Dionísio, V. C. e Volpon, J. B. Rev. Bras. Fisiot.
A análise do material foi feita em microscópio cirúrgico das regiões proximal e distal, característica do aumento de
com aumento de 6 e 10 vezes. As peças foram observadas por vascularização local.
transiluminação com luz proveniente de um negatoscópio Na comparação entre os lados houve semelhança
odontológico. qualitativa em toda a rede vascular, inclusive na região da
lesão. Portanto, entre os lados tratado e não-tratado, não
RESULTADOS foram observadas diferenças significativas na morfologia
da rede vascular, do ponto de vista qualitativo.
Os animais toleraram o procedimento cirúrgico e
foram capazes de apoiar e realizar movimentação ativa com
os membros posteriores durante o período experimental.
Os espécimes apresentaram rica trama vascular que
era originada a partir de um vaso principal na porção central
do músculo, distribuído da direção proximal para a distal.
Deste vaso principal havia divisão de vasos de menor
calibre direcionados para a periferia do músculo, dispostos
mais ou menos com a mesma orientação (Figura 2a). Estes
mesmos vasos emitiam outros vasos de menor calibre e
assim sucessivamente, formando a árvore vascular, com
amplas conexões anastomóticas entre os vasos de diferentes
cali bres. Na região próxima do tendão quadriciptal havia
diminuição da vascularização.

Figura 2. A — músculo reto femoral submetido à injeção de vasos. Há um vaso central que penetra na região proximal do músculo e divide-se
sucessivamente. Outros ramos penetram pelas bordas do músculo e, por subdivisão, realizam ampla anastomose (l ,5x). B — detalhe
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da vascularização (5x).
DISCUSSÃO
O ultra-som é um recurso terapêutico muito utilizado
no tratamento das lesões musculares, geralmente associado
a outras terapias como mobilizações ativas e passivas,
massagens e resfriamento com bolsas de gelo. A incidência
destas lesões é maior no âmbito esportivo, onde é comum
aos atletas serem submetidos ao tratamento com ultra-som,
que tem, aparentemente, sido eficiente.
4 l, 1999 O Ultra-som na Neovascularização Pós-Iesão Muscular
Figura 3. Vascularização da região lesada do músculo reto femoral tratado (A) e controle (B). Em ambos músculos há espalhamento do contraste
e proliferação vascular com padrão semelhante (5x).
Desta forma, foi investigado se a aplicação do
ultrasom terapêutico poderia provocar mudanças do
padrão de neoformação de vasos nas lesões musculares, o
que poderia refletir-se no processo de reparação, tanto em
qualidade como em velocidade.
A contusão muscular ou esmagamento do músculo
foi escolhido como modelo por ser o tipo mais comum de
lesão, sendo também um modelo experimental bastante
descrito na literatura, junto com as lesões por esforço
(Crisco et al., 1994). O modelo de agressão muscular
provocada por esforço não foi selecionado, pois as lesões
podem ocorrer na região proximal, média, distal ou em
todas estas regiões (Pachioni, 1996), sendo mais difícil
padronizá-las e localizá-las para aplicação do ultra-som.
Foi adotado o modelo descrito por Allbrook (1962), com
modificações, pois pretendíamos obter uma lesão
padronizada, que abrangesse massa muscular e
vascularização suficientes para a análise proposta. O
tempo de compressão foi menor do que aquele descrito,
para evitar uma lesão grave que poderia até levar à rotura
do corpo muscular. Procuramos simular o máximo
possível as condições clínicas nas quais as lesões
musculares mais freqüentes são leves ou moderadas.
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Outra modificação foi quanto à escolha do músculo.
Pareceu-nos mais interessante utilizar o músculo reto
femoral devido a sua localização superficial e formato
achatado. Isto favoreceu a dissecação deste músculo em
relação aos outros componentes do quadríceps, bem como
tornou as etapas cirúrgicas e o processamento da peça
mais seguros. Aliado a estas vantagens o reto femoral
também foi escolhido por ser o quadríceps femoral um
dos elementos que comumente é sede de lesão no homem
(Lopes et ai., 1994).
Na aplicação do ultra-som 24 horas após a lesão, na
fase aguda de reparação (Oakley, 1978), foi utilizado o
modo pulsado, evitando-se a maior produção de calor
(Dyson et al., 1970; Teer Haar, 1987) e que o processo
inflamatório agudo causado pelo traumatismo fosse
exacerbado (Patrick, 1978).
Foi utilizada a freqüência de I MHz para atingir tecidos mais
profundos do músculo (Draper et al., 1995). A intensidade de 0,5
W/cm2 foi selecionada por ser a mais indicada nesta fase da
reparação (Dyson et al., 1970; Dyson, 1987; Young & Dyson,
1990a) e por não provocar a estase de células sangüíneas (Dyson
& Pond, 1973). O tratamento foi realizado durante cinco minutos
por ser o mais recomendado na literatura (Dyson et al., 1970;
Clarke & Stenner, 1976; Pospisilová, 1976; Hogan et ai., 1982;
Young & Dyson, 1990a; Young & Dyson, 1990b). O período de
dez dias consecutivos de tratamento foi realizado para simular
condições clínicas, além de aproveitar os primeiros dias pós-Iesão
quando ocorre a neoformação de vasos (Dyson, 1987; Young &
Dyson, 1990b).