Universidade Federal do Triângulo Mineiro

Instituto de Ciências Tecnológicas e Exatas

Heloísa Hakime Costa Dutra

Isabela Cardoso
Isabela Schettini
Janaina Placedes
João Victor Jacob
Karina Casadei Sanches
Letícia Francini Gomes

Lectinas e Saponinas
Toxicologia de Alimentos
Docente: Guilherme Vannucchi Portari

Uberaba
2017
1. LECTINAS
Lectinas são proteínas que se ligam seletivamente aos carboidratos e,
principalmente, as porções de hidratos de carbono das glicoproteínas que
decoram a superfície da maioria das células animais. Sua ingestão, presentes
em alguns vegetais cozidos indevidamente, pode causar irritações
gastrointestinais. Outros sintomas agudos após a ingestão são náuseas, vômitos
e diarréia. Em estudos com ingestão a longo prazo em modelos de roedores
notou-se aumento de células, hiperplasia intestinal e perda de peso.
O mecanismo de toxicidade é desconhecido mas sabe-se que as lectinas
inibem a exocitose. As células epiteliais intestinais estão constantemente
expostas a tensões mecânicas e outras e rupturas da membrana plasmática.
Reparação destas rupturas da superfície celular permite que a célula ferida
sobreviva: a falha resulta na morte celular necrótica. O reparo da membrana
plasmática é mediado, em parte, por um evento exocitótico. Inibindo o reparo da
membrana plasmática as torna tóxicas para células feridas, logo isso representa
uma nova forma de toxicidade.
O reparo das rupturas da membrana plasmática e exocitose do muco foi
avaliado após o tratamento de células cultivadas modelos e segmentos
excisados do trato gastrointestinal com lectinas. As rupturas da membrana
plasmática foram produzidas por irradiação focal de células individuais, usando
um laser à base de microscópio, ou por abrasão mecânica de células múltiplas,
usando uma agulha de seringa. O reparo foi depois avaliado pela monitoração
da penetração citosólica de corantes incapazes de atravessar a membrana
plasmática intacta. Percebeu-se que as lectinas ligadas à superfície celular
inibem potentemente o reparo da membrana plasmática e a exocitose do muco
que normalmente acompanha a resposta de reparo.
Áreas de necrose celular epitelial e até zonas de desnudação completa
de células epiteliais são observadas em biópsias do estômago e intestino de
mamíferos e insetos alimentados com lectinas de plantas. As microvílias das
células epiteliais particularmente são afetadas pela exposição à lectina, o que
desencadeia a interrupção e a perda dessas projeções de superfície ricas em
membrana. Quando as células são tratadas com lectinas in vitro, mesmo em
doses muito altas, a necrose não é observadas porém são observadas
mitogênese, formação de vacúolos e inibição da exocitose.
 Um tratamento avaliando a célula após a criação da ruptura da
membrana plasmática com um laser. Monitorou-se a coloração intracelular com
um corante fluorescente, em função do tempo após a lesão. A presença de Ca2+
fez-se necessária para o reparo, e nenhuma absorção adicional foi medida 10-
20s após a lesão laser, apenas um pequeno ponto é observado. A omissão de
Ca2+, fez com que ocorra a absorção do corante e toda membrana interna seja
manchada. O ressarcimento falhou, como esperado, na ausência de Ca2 +
extracelular.
Outro estudo de curto prazo de células com estas lectinas nas
condições utilizadas para ferimento a laser, mas em a ausência de indução de
rupturas da membrana plasmática não afetou negativamente a saúde das
células, tanto durante o tratamento quanto após o tratamento. Assim, aquelas
lectinas observadas para se ligar fortemente à célula BS-C-1 podem inibir o
reparo. As lectinas foram, portanto, tóxicas quando uma célula exposta a elas
experimentou a ruptura da membrana plasmática.
O mecanismo de inibição da lectina ao reparo da membrana ainda não
está claro. A exocitose, que é necessária para o reparo da membrana,
provavelmente é alvo desta classe de toxina. Estudos anteriores mostraram que
as lectinas podem inibir a exocitose. A ligação das glicoproteínas da superfície
celular pelas lectinas interfere nos eventos exocitóticos associados ao reparo da
membrana (secreção de muco) e que as lectinas bloqueiam o reparo.
Propôs-se então uma segunda categoria de doença que pode ser
explicada como uma falha no mecanismo de reparo da membrana plasmática.
Lectinas são tóxicas quando presentes no trato gastrointestinal com base em
dois efeitos inter-relacionados. Primeiro, a falha de ressecamento ocorre dentro
da população geral de células do trato GI normalmente expostas a níveis de
ruptura da membrana de estresse mecânico, levando à sua necrose. O segundo
efeito induzido por lectina é a insuficiência exocitótica dentro da subpopulação
das células do trato GI que normalmente secretam muco, levando a uma
diminuição na secreção de muco lubrificante protetora e um consequente
aumento na incidência de eventos de interrupção da membrana induzida
mecanicamente. Como as lectinas, com base nos danos que causam ao
revestimento do trato GI, e seu efeito hipertrófico, foram implicadas,
respectivamente, na doença celíaca e câncer, o conhecimento desse
mecanismo pode ter implicações além de uma melhor compreensão da
intoxicação alimentar.
Sabe-se que as lectinas são proteínas não pertencentes ao sistema
imunológico, porém capazes de reconhecer sítios específicos em moléculas e
ligar-se reversivelmente a carboidratos, sem alterar a estrutura covalente das
ligações glicosídicas dos sítios. São encontradas em uma ampla variedade de
espécies de plantas e animais, entretanto, estas substâncias estão presentes em
maior quantidade em grãos de leguminosas e gramíneas.
O fato de terem larga distribuição em plantas sugere alguma importância
fisiológica para estas substâncias. Suas funções podem ser variadas e parecem
ter relação com os estádios de maturação e germinação das sementes, assim
como parecem ter relação com os mecanismos de defesa da planta contra o
ataque de fungos.
Os efeitos tóxicos das lectinas de leguminosas podem geralmente ser
eliminados por tratamento térmico apropriado. A alta sensibilidade térmica das
lectinas em solução pode explicar a facilidade de inativação de lectinas em grãos
de feijões, quando previamente embebidos em água. Obtiveram inativação total
de lectina em uma solução purificada contendo 475 µg de proteína/ml, submetida
a temperatura de 90°C durante 5 minutos.
Analise do teor de lectina de soja in natura e processada: Os níveis de
lectina mais altos foram encontrados em soja crua (3 600 µg/g) e os mais baixos
(3,75 a 12,92 µg/g) em produtos de proteína de soja texturizada. Como era
esperado, os níveis de atividade de lectina de soja dependeram do
processamento térmico.
As leguminosas são fontes importantes de energia e proteína para a dieta
em algumas regiões do mundo, portanto a toxicidade de compostos como os
inibidores de proteases e lectinas são de considerável interesse, principalmente
onde as leguminosas fazem parte do hábito alimentar, uma vez que o valor
nutritivo destes alimentos pode ser limitado pela presença de fatores
antinutricionais.
2. SAPONINAS
As saponinas são um vasto grupo de glicosídeos. Suas propriedades de
superfície-ativa são o que distingue esses compostos de outros glicosídeos. Eles
se dissolvem em água para formar soluções coloidais que espuma ao agitar. As
plantas contendo saponina são procuradas para uso em detergentes
domésticos.
As saponinas também foram buscadas na indústria farmacêutica porque
alguns constituem o ponto de partida para a semi-síntese de drogas esteroidais.
Muitos têm propriedades farmacológicas e são utilizados na fitoterapia e na
indústria cosmética. A raiz de ginseng é um dos medicamentos orientais
tradicionais mais importantes e agora é usada em todo o mundo. As saponinas
são consideradas como constituintes principais ativos do ginseng.
A maioria das saponinas tem propriedades hemolíticas e são tóxicas para
a maioria dos animais de sangue frio. Podem ser classificadas em dois grupos
com base na natureza do esqueleto aglicônico. O primeiro grupo consiste nas
saponinas esteróides, que estão quase exclusivamente presentes nas
angiospermas monocotiledônicas. O segundo grupo consiste nas saponinas
triterpenoides, que são as mais comuns e ocorrem principalmente nas
angiospermas dicotiledôneas.

2.1 Propriedades hemolíticas

As saponinas têm a capacidade de romper eritrócitos. Isso levou ao
desenvolvimento de ensaios hemolíticos para detectar a presença de saponinas
em drogas ou extratos vegetais.
As propriedades hemolíticas são geralmente atribuídas à interação entre as
saponinas e os esteróis da membrana dos eritrócitos. Como resultado, a
membrana explode, causando aumento da permeabilidade e perda de
hemoglobina.
Investigaram o efeito das saponinas na estrutura da membrana através
da hemólise de eritrócitos humanos. Os resultados mostraram que os eritrócitos
com lisia não são resealados e, portanto, indica que o dano de saponina na
bicamada lipídica é irreversível.
2.2 Atividade anti-inflamatória
Há uma série de relatos de saponinas com propriedades antiinflamatórias.
Muitas saponinas isoladas a partir de fontes de plantas produzem uma inibição
da inflação no ensaio de edema induzido por carragenina de murganho. a
atividade antiinflamatória das saponinas isoladas de Bupleurum fruticescens
está relacionada à estrutura química das saponinas.
Das sete saponinas testadas, cinco foram bastante ativas na redução do
edema da orelha induzido por TPA. As saponinas produziram uma redução de
edema dependente da dose. Apenas duas saponinas foram ativas na redução
da inflamação crônica da pele e também causaram uma diminuição paralela na
filtração neutrofílica.

2.3 Atividade antifúngica

Saponinas esteroidais de Yucca schidigera Roezl. ex Ortgies (Agavaceae)
mostraram exibir atividades efetivas de inibição de crescimento contra leveduras
que deterioram os alimentos. Uma fração de saponina, contendo principalmente
saponinas monodesmosidicas, foi testada para a atividade anti-siest e
antifúngica, mostrando atividade inibitória do crescimento contra muito das
leveduras, bem como alguns fungos dermatófitos.
Oito saponinas monodesmosidicas previamente caracterizadas isolados
de Hedera colchica K.Koch (Araliaceae) foram testado para atividade antifúngica
e antiprotozoária. Embora os compostos exibissem atividade antifungica, a
atividade foi menor do que as referências agentes antifúngicos. No entanto,
mesmo que a atividade fosse baixa, havia uma clara indicação de que a atividade
antifúngica foi relacionada à estrutura. Saponinas com hederágena como a
aglicona era mais ativa do que aqueles sem. O número, o tipo e a sequência dos
resíduos de açúcar também tiveram uma significância efeito sobre a atividade
antifúngica observada.

2.4 Atividade antibacteriana e antimicrobiana

As saponinas também foram relatadas com atividades antimicrobianas,
alguns resultados mostraram que saponinas do tetraglicosideo possuem maior
atividade do que saponinas do triglicosideo.
2.5 Atividade antiparasitária
Duas novas saponinas triterpenoides, glinosídeos A e B, Isolado das
partes aéreas de Glinus oppositifolius L. (Molluginaceae) demonstraram ter
atividade antiprotozoária contra Plasmodium falciparum. Três saponinas
isoladas de Hedera helix L. (Araliaceae), mostraram ter atividade antileishmanial.
Os resultados mostraram que essas saponinas apresentaram uma ação
antiproliferativa forte em todos os estágios de desenvolvimento do parasita
Leishmania infantum. A acção das saponinas foi devido a mudanças na
integridade da membrana e potencial.
2.6 Atividade citotóxica e antitumoral
Numerosos relatórios destacam as propriedades altamente citotóxicas de
muitas saponinas. No entanto, saponinas com alta citotoxicidade nem sempre
possuem propriedades antitumorais como citotóxicas. Os compostos podem ser
potencialmente utilizados como agentes antitumorais.
Em um estudo isolou-se um novo metabolito de saponina (IH-901) de
Panax ginseng C.A.Meyer (Araliaceae), que mostrou atividade antitumoral in
vitro. Este composto foi testado contra quatro linhas celulares de câncer humano
e uma sublina resistente à cisplatina (CDDP). Dos resultados, foi sugerido que
esta saponina não era resistente a CDDP na linha celular testada e poderia ser
um candidato para o tratamento de câncer pulmonar resistente a CDDP.

2.7 Atividade antiviral

A saponina do tipo oleanane inibiu a síntese de DNA do vírus de herpes
simples tipo 1. O tipo ursane inibiu a síntese do capsídeo proteico do vírus de
herpes simples tipo 1. Foi relatado que as saponinas triterpenoid da família
Fabaceae apresentam atividade anti-vírus da hepes. A atividade anti o vírus da
herpes foi relacionadoa à estrutura. Saponinas com uma unidade de glucosil na
porção de açúcar central pareceu apresentarem melhor atividade.
Uma espécie de saponina (arganina C) mostrou grande potencial antiviral,
inibindo a entrada do HIV dentro das células e não apresentando uma
citotoxicidade significativa. Outros tipos de saponinas foram capazes de inativar
vírus de influenza dos tipos A e B em humanos. Porém essas mostraram-se
tóxicas às células hospedeiras e é necessária a condução de estudos mais
profundos para avaliação. As misturas de algumas saponinas resultaram em
uma atividade inibitória de 89% contra a protease HIV-1.

2.8 Outras atividades biológicas

Estimula o processo de cura de feridas através de mudanças do
metabolismo extracelular. Papel de proteção contra lesões nos tecidos
provocadas por radicais livres. Saponinas provenientes de leguminosas
melhoraram significativamente a habilidade de memória de ratos normais e com
amnésia, comparado com os respectivos animais controle.
Em ratos, inibiu a hiperatividade causada por morfina e mostrou uma ação
antidopaminérgica das saponinas no receptor pós-sináptico de dopamina.
Estudos sugeriram que as saponinas podem ser úteis para a prevenção e terapia
de alguns efeitos adversos da nicotina. Exerceram um potencial efeito contra
lesões gástricas induzidas pelo etanol. Em um estudo com ratos e galinhas, as
saponinas aumentaram níveis de anticorpos específicos, mostrando melhora na
resposta imunológica a determinados fatores.

2.9 Distribuição das saponinas

. Saponinas são encontradas em uma grande variedade de alimentos,
incluindo aspargos, feijões, blackberries, peras, batatas, beterraba e chá. Elas
ocorrem em diferentes famílias de plantas (em torno de 200 espécies de plantas)
e a descoberta de propriedades em uma espécie foi levando à investigação de
espécies semelhantes.

Acredita-se que o papel natural desses componentes nas plantas é

protegê-las contra o ataque de patógenos. Embora as saponinas sejam
extremamente tóxicas para animais de sangue frio, a toxicidade delas nos
mamíferos é baixa.
Devido à sua toxicidade a vários organismos, elas podem ser usadas por
suas propriedades inseticidas, antibióticas, fungicidas e farmacológicas. A vasta
diversidade química de alguns tipos de saponinas tem levado a estudos que
indicam agentes quimioterápicos potenciais.
Os estudos evidenciam a importância das pesquisas nessa área e as
oportunidades que existem para estudos futuros desse grupo de componentes,
com chances promissoras de se descobrirem novos constituintes biologicamente
ativos.
3. REFERÊNCIAS
MIYAKE, Katsuya; TANAKA, Toru; MCNEIL, Paul L.. Lectin-based food
poisoning: a new mechanism of protein toxicity. Plos one.
SPARG, S.g.; LIGHT, M.e.; STADEN, J. Van. Biological activities and distribution
of plant saponins. Journal of ethnopharmacology, mai./mai. 2004
SILVA, Mara Reis; SILVA, Maria Aparecida Azevedo Pereira Da. Fatores
antinutricionais: inibidores de proteases e lectinas. Rev.
nutr., Campinas, jan./abr. 2000.