TRANSCRIÇÃO DO DNA:

Síntese do mRNA

•Gene (Unidades transcricionais)

•Tipos de RNA

•Tipos de RNA polimerase

•Tipos de RNA polimerase DNA‐dependente

•Transcrição em Procariotos

•Transcrição em Eucariotos

•Mecanismos de controle da Exp. Gênica

1959/60‐ Jacob,
Jacob Monod e Gross

Isolaram o ácido ribonucleico responsável pelo direcionamento da

síntese de proteínas nos ribossomos e propuseram o nome RNA
mensageiro (mRNA) para esta molécula.

O mRNA representa apenas cerca de 2% do RNA total em relação aos

outros tipos de RNA (rRNA e tRNA).

1
 DEFINIÇÕES DE GENE

Genética – Mendeliana
Porção do cromossoma que determina ou afeta um único caráter (fenótipo), como por 
exemplo a cor dos olhos.

Molec lar Beadle e Tatum, 1940

Molecular – Beadle e Tat m 1940
Segmento de material genético que determina ou codifica uma enzima (conceito obtido 
a partir de seus estudos sobre o metabolismo de fungo N.crassa)

E1 E2 E3 E4
A B C D E
x
Segundo a proposta de Beadle e Tatum, 1gene codifica uma enzima (proteína).
Segundo a proposta de Beadle e Tatum, 1gene codifica uma enzima (proteína).

Este conceito vem sendo atualizado e a definição atual é a seguinte:
‐ Um gene codifica pelo menos uma cadeia polipeptídica (“Splicing alternativo”), um 
tRNA, ou um rRNA, como produto final em Eucariotos.
‐No entanto, uma cadeia polipeptídica pode ser codificada por dois genes separados, 
gerada a partir de “Protein splicing” ou “mRNA trans‐splicing”

ESTRUTURA GERAL DE UM GENE

PROMOTOR CODIFICA RNA
5´... ...3´

3´... ...5´
Downstream        Upstream
‐10 +1 10

2
 UNIDADES TRANSCRICIONAIS DE:
PROCARIOTO (policistrônica) 
EUCARIOTO (monocistrônica)

Figure 9‐1

PROCARIOTOS x EUCARIOTOS:
ORGANIZAÇÃO GÊNICA, TRANSCRIÇAO E TRADUÇAO

3
 Estrutura do Ácido Ribonucleico ‐ RNA

Ligação 
fosfodiester entre 
os nucleotídeos.
5’

Ligação entre P ligado ao 
C 5 do nucleotídeo que 
chega com a OH ligada ao 
g g
C 3 do nucleotídeo da 
cadeia.
5’ 3 ‘

3’

4
 Small nuclear RNA (snRNA) Núcleo Processamento de mRNA 

TIPOS DE RNA POLIMERASES

RNA polimerase DNA dependente:
• Envolvida na transcrição do DNA.
• Utiliza nucleotídeos tri‐fosfatados (NTP) como substrato e depende de uma fita 
molde antiparalela. Catalisa o ataque nucleofílico
p q da hidroxila do carbono 3 da ribose 
sobre o fosfato alfa do nucleotídeo a ser incorporado na cadeia de polinucleotídeo.

RNA polimerase RNA dependente:
• Envolvida na replicação do genoma de alguns vírus RNA. 
• Catalisa o ataque nucleofílico da hidroxila do carbono 3 da ribose sobre o fosfato 
alfa do nucleotídeo a ser incorporado na cadeia de polinucleotídeo.
• Utiliza NTP como substrato e depende de uma fita molde antiparalela.

Polinucleotídeo fosforilase (a primeira nucleotídeo polimerase isolada e caracterizada ‐

descrita por Manago e Ochoa)
• Catalisa a seguinte reação reversível:
• (NMP)n + NDP  (NMP)n+1  +  Pi
• Não depende de molde e a composição do polinucleotídeo depende da 
composição de NDP do meio.

5
 Tipos de RNAs polimerases – DNA dependente

Compostas de subunidades (multiméricas)

PROCARIOTOS EUCARIOTOS

RNA Polimerase (sintetiza todos os RNAs)
( ) RNA Polimerase I (Nucléolo) : Pré rRNAs ‐
rRNAs 18S, 5,8S e 28S

RNA Polimerase II (Nucloplasma): hnRNAs ‐
mRNA

RNA Polimerase III (Nucleoplasma): tRNA e 
snRNAs

Experimento de Volkin e Astrachan, 1957

Experimento de “Pulse‐chase” para marcação das moléculas de RNA: células 
incubadas com uracila radioativa, seguida de incubação com uracila não‐radioativa
Molécula de RNA se move do núcleo para o citoplasma.

6
TRANSCRIÇÃO EM PROCARIOTOS

INÍCIO, ALONGAMENTO E
TÉRMINO DA TRANSCRIÇÃO
- RESUMO -

7
ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA
EM PROCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾ TÉRMINO

TRANSCRIÇAO EM PROCARIOTOS

PROMOTORESPRO
CARIOTOS

8
 Procariotos ‐ Iniciação

5’
5 3’ (DNA +)
3 (DNA +)

5’ 3’
3’ 5’

9
ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA
EM PROCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾ TÉRMINO

RNA POLIMERASE ENZIMA RESPONSÁVEL PELA SÍNTESE DE RNA

Direção 
polimerização 5’ 
→ 3’
Substratos:  DNA 
molde 
antiparalela e 
NTP

Holoenzima
Composta de subunidades

10
 Procariotos – Alongamento (Parte 1)

Procariotos – Alongamento (Parte 2)

DNA Toposimerase II

DNA Toposimerase I

11
ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA
EM PROCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾ TÉRMINO

Términação dependente de 
proteína rô (helicase)
t í ô (h li )

Proteína rô reconhece sítio rut 
no RNA e promove o 
desligamento da RNA Pol
desligamento da RNA Pol

12
 Procariotos – Terminação 
independente da proteína Rô

Procarioto: ausência de MN 
(acoplamento Transcrição/Tradução)

13
TRANSCRIÇÃO EM EUCARIOTOS

Eucariotos ‐Transcrição

Genes interrompidos 
(introns e exons)
Presença de MN 
(proteção de mRNA)

14
TRANSCRIÇÃO DO DNA 
PELA  RNA‐Pol II
‐ RESUMO ‐

ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA

EM EUOCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾PROCESSAMENTO DO RNA

15
 Eucariotos ‐ Iniciação

Promotores 
E
Eucarióticos
ió i

Necessidade de Fatores 
Necessidade de Fatores
gerais de início  da 
trasncrição
TFI
TFII
TFIII

TATA Binding Protein

Atividade Helicase 
Montagem do complexo 
g p e Proteína Quinase

de início da transcrição 
com a RNA‐Pol II

16
Modelo de cooperatividade para o complexo de início da transcrição no promotor 
TTR em hepatócitos

ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA

EM EUCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾ PROCESSAMENTO DO RNA

17
 Eucariotos – Alongamento (Parte 1)

Eucariotos – Alongamento (Parte 2)

DNA Toposimerases I e II

DNA Toposimerase I e II

18
 INIBIDORES DA TRANSCRIÇÃO EM PROCARIOTOS E EUCARIOTOS
Agentes intercalantes

INIBIDORES DA TRANSCRIÇÃO

Amanita phalloides

Rifampicina
Inibidor seletivo da RNA Pol
procariótica.
Composto semi-sintético derivado da Alfa-Amanitina
Amycolatopsis rifamycinica (também
conhecida como Amycolatopsis mediterranei Inibidor seletivo da RNA pol II
and Streptomyces mediterranei).[ eucariótica

19
ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO DO DNA
EM EUCARIOTOS:

¾ INÍCIO

¾ ALONGAMENTO

¾ PROCESSAMENTO DO RNA

Processamento do hnRNA ‐ Resumo

20
ETAPAS DO PROCESSAMENTO DO
RNA

¾CAPEAMENTO DO TERMINAL 5`

¾“SPLICING”
¾( remoção de íntrons e ligação covalente de éxons)

¾POLI-ADENILAÇÃO DO TERMINAL 3`
¾

Eucariotos – Processamento da extremidade 5’ do hnRNA
“Heterogenous Nuclear RNA”: Capeamento

21
ETAPAS DO PROCESSAMENTO DO
RNA

¾CAPEAMENTO DO TERMINAL 5`

¾“SPLICING”
¾( remoção de íntrons e ligação covalente de éxons)

¾POLI-ADENILAÇÃO DO TERMINAL 3`
¾

Eucariotos – “Splicing” do hnRNA
Remoção dos Íntrons e ligação 
covalente dos Éxons
Spliceossomo (U1,U2,U3,U4,U5)

22
ETAPAS DO PROCESSAMENTO DO
RNA

¾CAPEAMENTO DO TERMINAL 5`

¾“SPLICING”
¾( remoção de íntrons e ligação covalente de éxons)

¾POLI-ADENILAÇÃO DO TERMINAL 3`

23
 Eucariotos – Processamento da extremidade 3’ do hnRNA
“Heterogenous Nuclear RNA”: Poliadenilação

COMPARAÇÃO ENTRE mRNAs PROCARIÓTICOS E EUCARIÓTICOS

24