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OBJETIVOS:
Observar o consumo de glicose por crescimento de células de levedura
em meio sintético (YED 2%), observar a produção de ácido em crescimento de bactérias
láticas em leite pasteurizado. Além de fazer a quantificação por espectrofotometria e
titulação.
REFERENCIAS:
Materiais
Pipeta graduada 5mL e 10mL
Proveta 100mL
Becher 50mL
8 tubos com tampa de rosca
1 Erlenmeyer 250mL
Bastão de vidro
Equipamentos
Espectrofotômetro UV-Vis
Balança
Reagentes
Fermento biológico
Extrato de lêvedo
Glicose
KH2PO4
(NH4)2SO4
Leite integral pasteurizado
Solução dornic de NaOH (N/9)
Métodos
Em um erlenmeyer de 200 mL foi preparada a solução de YED:
adicionando 1g de extrato de lêvedo, 2g de glicose, 0,2g de KH2PO4, 0,2g de (NH4)SO4
e 100 mL de água destilada, esperou-se até a solubilização total dos reagentes.
Em seguida foram adicionados 2g de fermento biológico a solução de
YED 2%. A solução foi agitada de 5 em 5 minutos, após a inoculação das células, foram
retiradas alíquotas de 10mL em um intervalo de 1 hora entre elas.
Cada alíquota coletada foi centrifugada para o recolhimento do
sobrenadante, para determinação do teor de glicose pelo método DNS.
Método DNS:
Adicionou-se em um tubo 2,5mL do sobrenadante e 1mL de DNS,
levando a fervura por 5 minutos. Após o resfriamento do tubo foi adicionado 6,5mL de
água destilada. Em seguida foi feita a leitura no espectrofotômetro a 570nm.