APO

STIL
A DE
HEM
ATO
LOGI
Beatriz
Demarchi
P1 A 1
Sumário
O SANGUE:...............................................................................................................................3
Hemácias:..............................................................................................................................3
Leucócitos:...........................................................................................................................3
Plaquetas:.............................................................................................................................4
PLASMA:...................................................................................................................................4
COLETA DE AMOSTRA BIOLÓGICA..................................................................................6
Material Biológico (Amostras):........................................................................................6
Instruções Gerais................................................................................................................6
Formas De Coleta:...............................................................................................................6
O Problema Da Hemólise:.................................................................................................7
OBTENÇÃO DE SANGUE:.....................................................................................................8
Punção Venosa....................................................................................................................9
Procedimento...................................................................................................................9
Punção Arterial..................................................................................................................12
Punção Capilar...................................................................................................................12
VEIN WIEVER.........................................................................................................................13
ANTICOAGULANTES............................................................................................................14
Tubos Com Vácuo:...........................................................................................................14
Vermelho.........................................................................................................................14
Roxo..................................................................................................................................14
Verde................................................................................................................................15
Azul...................................................................................................................................15
Preto/Marron...................................................................................................................15
Amarelo............................................................................................................................16
Cinza.................................................................................................................................16
Azul Royal.......................................................................................................................16
DESCARTE DE MATERIAL BIOLÓGIOCO.......................................................................17
HEMATOPOIESE E ERITROPOESE:.................................................................................18
Hematopoese:....................................................................................................................18
Órgãos hematopoiéticos:............................................................................................18
Eritropoiese:.......................................................................................................................20
O reticulócito:.................................................................................................................21
Eritropoetina:..................................................................................................................21
MORFOLOGIA E FUNÇÃO DAS CÉLS. SANGUÍNEAS.................................................24
Metabolismo Eritróide......................................................................................................24

2
 Membrana Celular.............................................................................................................25
Proteínas Integrais............................................................................................................25
Hemoglobina......................................................................................................................25
Síntese De Hb.....................................................................................................................26
Morfologia Eritrocitária:...................................................................................................27
ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS:.....................................................................................30
Anisocitose:........................................................................................................................30
Microcitose:........................................................................................................................30
Macrocitose:.......................................................................................................................30
ALTERAÇÕES NA COR DOS ERITRÓCITOS (ANISOCROMIA ERITROCÍTICA):....31
Anisocromia:......................................................................................................................31
Hipocromia:........................................................................................................................31
Hipercromia:.......................................................................................................................31
Policromatofilia:................................................................................................................32
ALTERAÇÕES NA FORMA DOS ERITRÓCITOS:...........................................................33
Poiquilocitose:...................................................................................................................33
Drepanócitos:.................................................................................................................33
Esferócitos:.....................................................................................................................33
Eliptócitos:......................................................................................................................34
Hemácias em alvo/ Codócitos:...................................................................................35
Dacriócitos:.....................................................................................................................35
Acantócitos:....................................................................................................................36
Esquizócitos:..................................................................................................................36
...........................................................................................................................................36
Estomatócitos:...............................................................................................................37
HEMOGRAMA COMPLETO:................................................................................................38
Automação:.........................................................................................................................39
Vantagens:......................................................................................................................39
Eritrograma:........................................................................................................................41
Impedância:....................................................................................................................42
Dosagem de Hemoglobina:.........................................................................................43
VALORES HEMATIMÉTRICOS:..........................................................................................44
Hematócrito:.......................................................................................................................44
Volume Globular Médio (VGM ou VCM):......................................................................45
Hemoglobina Globular Média (HGM ou HCM):...........................................................46
Concentração da Hemoglobina Globular Média (CHGM ou CHCM):....................46

3
 Rdw – Índice De Anisocitose:........................................................................................47
LEUCOGRAMA:.....................................................................................................................50
Contagem de leucócitos:.................................................................................................50
Laser: Gráfico de dispersão dos leucócitos...............................................................51
PLAQUETOGRAMA:.............................................................................................................53
Contagem de plaquetas:..................................................................................................53
O QUE AS MÁQUINAS NÃO OBSERVAM:.......................................................................55
Observações Microscópicas:.........................................................................................58
Observações Microscópicas:.........................................................................................59
Pseudoplaquetopenia induzida pelo EDTA:...................................................................60
Critérios de triagem de hemogramas para a microscopia:.........................................60
Causas de erros na realização do hemograma:............................................................61

4
 O SANGUE:

O sangue é um tecido conjuntivo líquido que circula pelo sistema

vascular sanguíneo dos animais vertebrados. É produzido na medula óssea
vermelha, e tem como função a manutenção da vida do organismo por meio do
transporte de nutrientes, toxinas (metabólitos), oxigênio e gás carbônico. É
constituído por diversos tipos de células, que formam a sua parte “sólida”.
Estas células estão imersas em uma parte líquida chamada plasma. As células
são classificadas em leucócitos (ou glóbulos brancos), que são células de
defesa; eritrócitos (glóbulos vermelhos ou hemácias), responsáveis pelo
transporte de oxigênio; e plaquetas responsáveis pela coagulação do sangue.
Como dito, o sangue é constituído por uma porção celular (hemácias,
leucócitos e plaquetas) e outra fluida, denominada plasma ou soro. Numa
pessoa sadia, encontram-se em torno de 40 a 45% de elementos figurados
(células) e 60 a 65% de plasma. Um adulto possui em média 4 a 6 litros de
sangue. Veja abaixo um esquema detalhado das 3 linhagens de células
sanguíneas:

Hemácias:

São unidades morfológicas da série vermelha do sangue, também

designadas por eritrócitos ou glóbulos vermelhos, que estão presentes no
sangue em número de cerca de 4,5 a 6,5 x 106 /mm³, em condições normais e
sua função é transportar o oxigênio (principalmente) e o gás carbônico (em
menor quantidade) aos tecidos. As hemácias vivem por aproximadamente 120
dias. Embora sejam células anucleadas, constituídas apenas por membrana
plasmática e citoplasma, são bastante complexas. Originam-se na medula
óssea pela proliferação e maturação dos eritroblastos, fenômeno chamado de
eritropoiese (assunto que será mais detelhado no capítulo específico).

Leucócitos:

Também conhecidos por glóbulos brancos, são

células produzidas na medula óssea e presentes no
sangue, linfa, órgãos linfóides e vários tecidos
conjuntivos. Um adulto normal possui entre 4.000 e
11.000 mil leucócitos por microlitro (milímetro cúbico) de
sangue. Os leucócitos (ou glóbulos brancos) têm a
função de combater microorganismos causadores de
doenças por meio de sua captura ou da produção de anticorpos. Uma
quantidade muito pequena ou muito grande de leucócitos indica um distúrbio. A
leucopenia, uma diminuição na quantidade de leucócitos para menos de 4.000

5
células por mililitro, torna uma pessoa mais suscetível à infecções. A
leucocitose, um aumento na quantidade de leucócitos, pode ser uma resposta
à infecções ou substâncias estranhas, ou ser resultante de um câncer, de um
traumatismo, do estresse ou de determinadas drogas. A maioria dos distúrbios
dos leucócitos envolve os neutrófilos, os linfócitos, os monócitos, os eosinófilos
e os basófilos. Os monócitos, macrófagos e neutrófilos tem como função ingerir
bactérias, células mortas, anormais ou infectadas. Os neutrófilos são os
primeiros a atacar o agente invasor (principalmente em infecções bacterianas).
Caso ele falhe, o monócito (que engloba os invasores) é acionado. A função do
linfócito está relacionada com as reações imunitárias: a imunidade humoral
ligada à produção de anticorpos (linfócitos B); e a imunidade celular ligada à
proliferação de células efetoras. Os linfócitos são mais atuantes em infecções
virais. Os basófilos e os eosinófilos combatem processos alérgicos. Os
eosinófilos também estão envolvidos em infecções parasitárias.

Plaquetas:

Também chamadas de trombócitos, são fragmentos de células

presentes no sangue, formados na medula óssea. A sua principal função é a
formação de coágulos, participando, portanto, do processo de coagulação
sanguínea. Uma pessoa normal possui entre 150.000 e 450.000 plaquetas por
mm³ de sangue. Sua diminuição ou disfunção pode levar a sangramentos,
assim como seu aumento pode aumentar o risco de trombose.
Trombocitopenia (ou plaquetopenia) é a diminuição do número de plaquetas no
sangue, e a trombocitose (ou plaquetose) é o aumento do número de plaquetas
no sangue.

PLASMA:

É o componente líquido do sangue, no qual as células sanguíneas estão

suspensas. O plasma é um líquido de cor amarelada e é o maior componente
do sangue, compondo cerca de 55% do volume total de sangue. O plasma
contém água (92%), proteínas, sódio, fibrinogênio, globulinas, albumina e
outras substâncias dissolvidas, como gases, nutrientes, excretas, hormônios e
enzimas. Entre as proteínas presentes no sangue, a mais abundante é a
albumina. Tem como função transportar os elementos figurados e substâncias
dissolvidas, como nutrientes, medicamentos, produtos tóxicos (como exemplo o
dióxido de carbono que as células eliminam, entre outros). É também o plasma
que transporta para todo o corpo os medicamentos que ingerimos. Um modo
simples de separar as células presentes no sangue do plasma é através de
centrifugação. A parte líquida do sangue também pode ser chamada de SORO,
mas cuidado: em laboratório, denomina-se soro a porção líquida do sangue
separada da parte sólida por centrifugação, após coleta sem anticoagulante. Já

6
plasma, é a porção líquida de sangue separada da parte sólida por
centrifugação, colhido com anticoagulante (EDTA, heparina, citrato de sódio ou
demais anticoagulantes). Neste caso, não ocorreu coagulação do sangue.

7
COLETA DE AMOSTRA BIOLÓGICA

Material Biológico (Amostras):

- Líquidos;
- Secreções;
- Excreções;
- Fragmentos de tecido;
Mais utilizados: sangue e urina.

Instruções Gerais
- O jejum recomendado é de 10 a 14 horas. É livre a ingestão de água.
- As amostras para análise devem ser coletadas na primeira parte da
manhã.
- Convém que o paciente ao chegar ao laboratório seja acalmado e que
descanse por alguns minutos.
- Exercícios físicos devem ser evitados antes da coleta.
- Antes de iniciar a coleta conferir o nome e n°. do paciente e a relação
de exames com os frascos de coleta.
- Verificar com o paciente o tempo de jejum, a relação de
medicamentos, a data da última menstruação (quando for o caso) e
tomar nota.

Formas De Coleta:
- Sistema Agulha/Seringa estéreis e descartáveis.
- Lanceta estéril e descartável.
- Coleta a vácuo, agulhas estéreis e descartáveis.
- Em geral, agulhas 25x0.8 ou 25x0.9 para adultos
e 25x0.6 ou 25x0.7 para crianças.

8
O Problema Da Hemólise:
- A ruptura de hemácias libera hemoglobina e seus metabólitos, e isto
altera os resultados de alguns exames.
- A ruptura de uma pequena quantidade de hemácias é praticamente
inevitável e não causa hemólise visível.
- Amostras de plasma ou de soro hemolisadas apresentam-se mais
coradas.
- Alguns cuidados durante a coleta :
- Após a anti-sepsia do local de coleta, deixar evaporar totalmente o
anti-séptico.
- Usar o garrote o menor tempo possível.
- Não mover a agulha durante a coleta.

9
OBTENÇÃO DE SANGUE:
- Punção Venosa;
- Punção Arterial.

10
Punção Venosa
- Sangue venoso que circula da periferia
para o centro do sistema circulatório, o
coração, é o mais usado em exames
laboratoriais.
- A coleta é feita com agulhas e seringas
estéreis e descartáveis ou por meio de
tubos com vácuo adaptados a agulhas
estéreis, com ou sem anticoagulantes.
- Preferência pelas veias intermediárias
basílica e cefálica em adultos e crianças
maiores.
- Outras opções: veias jugulares, veia
femoral, seio sagital superior,etc.

Procedimento
Veias da Dobra do Cotovelo
1. Retirar a agulha da embalagem estéril e acoplar à seringa estéril, deixando
na própria embalagem estéril pronta para ser usada.
2. Colocar um garrote ao redor do braço do paciente, cerca de 5 cm acima da
dobra do cotovelo.
3. Pela inspeção e palpação determinar a veia a ser puncionada, que deve ser
calibrosa e firme.
4. Desinfetar a pele sobre a veia selecionada, com álcool a 70% e deixar secar.
5. Não tocar o local a ser puncionado, nem deixar que o paciente dobre o
braço.
6. O paciente, agora, deve permanecer com a mão fechada.
7. Introduzir a agulha na pele sob a veia a ser puncionada, e lentamente,
penetrar na luz do vaso.
8. O sangue deverá fluir espontaneamente para dentro da agulha ou, então,
deve-se puxar lentamente o êmbolo, para verificar se a agulha está na veia e,
em seguida, retirar o sangue necessário.
9. Soltar o garrote, colocar um pedaço de algodão seco no local, e retirar a
agulha.
10. Retirar a agulha da seringa com auxílio de uma pinça e transferir o sangue
coletada para os tubos com ou sem anticoagulantes, de acordo com o exame
solicitado, escorrendo lentamente o sangue, sem formar espuma.
11. Tubos com anticoagulantes devem ser invertidos, várias vezes, lentamente.

11
OBS: Cuidado para não transfixar a veia, pois se isto ocorrer, ou se a agulha
for puxada fora dela, não se consegue o volume de sangue necessário, há
extravasamento de sangue para os tecidos e formação de hematoma, sendo
que o sangue de hematoma não pode ser utilizado, pois irá apresentar-se
hemolisado.

Veias do Dorso da Mão

- Em pacientes edemaciados, o acesso as veias do braço pode ser mais difícil,
e por vezes as veias das mãos são mais calibrosas.
- São extremamente móveis
(veias bailarinas).
- A perfuração é mais dolorosa
e a hemostasia mais
demorada, geralmente
formando hematomas.

Veia Jugular Externa/Interna

- Difícil Localização
- Imobilização do paciente (principalmente crianças), em posição inclinada, com
a cabeça em nível inferior ao tronco.
- Roda-se a cabeça para o lado oposto ao da punção, o que permite visualizar
a veia.
- Provoca-se o choro em crianças, para que aumente a estase venosa. Se
adulto, deve ficar assoprando com a boca e nariz fechados.
- A agulha deve penetrar
diretamente sobre a veia que
nessa região é bem superficial.
- Após a punção, manter o
paciente sentado e com
algodão ou gaze fazer
compressão demorada.

12
Veia Femoral
- Difícil localização.
- Palpa-se o pulso femoral, ao nível da prega inguinal e punciona-se logo
abaixo do ligamento inguinal, para dentro da
artéria pulsátil.
- Sangue venoso mais escuro, sangue
arterial mais “vermelho”.
- A agulha deve penetrar em posição
vertical (± 90°), lentamente, até se
conseguir obter o fluxo de sangue.
- Após a coleta comprimir o local durante 15
minutos.

Cordão Umbilical
- Imediatamente após o nascimento do bebê, o cordão umbilical é pinçado e
cortado.
- Para recolher o sangue do cordão, outra pinça é colocada a 20 ou 25
centímetros da primeira, a seção isolada é cortada e a amostra do sangue
coletada dentro de um tubo de amostra.
- O exame é realizado para avaliar:
- Gases sanguíneos
- pH do tecido fetal
- Nível respiratório
- Hemograma completo
- Bilirrubina
- Glicose
- Hemocultura (se houver suspeita de infecção)
- Armazenamento de células-tronco.

13
Punção Arterial
- Sangue arterial é o sangue oxigenado
pelos pulmões e bombeado do coração para
todos os tecidos. É essencialmente uniforme
em sua composição
- São utilizadas a artéria femoral, a artéria
radial ou a artéria braquial.
- Estudo da gasometria sanguínea.
- Através da amostra de sangue arterial, o
laboratório pode determinar as
concentrações de oxigênio e de dióxido de
carbono, assim como a acidez do sangue,
que não pode ser mensurada em uma
amostra de sangue venoso.
- O exame é utilizado para avaliação de
doenças respiratórias e de outras condições
que afetem os pulmões. O exame é usado também para determinar a eficiência
da terapia com oxigênio. O componente ácido-base do exame também fornece
informações a respeito do funcionamento dos rins.

Obter seringa para gasometria, heparinizada.

- O paciente deve repousar por 30 minutos.
- Realizar anti-sepsia com álcool iodado e álcool a 70%. Deixar secar.
- Palpar a artéria com luvas e puncionála em ângulo de 30º a 90º.
- Coletar cerca de 2 ml de sangue.
- Aplicar pressão ao local puncionado com algodão por 5-15minutos.
- Retirar o ar da seringa e vedá-la com borracha. Agitar a amostra.
- Imediatamente colocar a amostra imersa em gelo.

Punção Capilar
- Utilizado na hematologia, em pesquisa de hemoparasitas, na coleta de
amostras para execução de microtécnicas e em provas de coagulação.
- É uma mistura de sangue venoso e arterial, mas o sangramento é
principalmente arterial.
- O sangue capilar é obtido através da pele.
- Especialmente em pacientes pediátricos.

14
Punção da pele:
- Superfície póstero-lateral do calcanhar, em crianças até 1 ano de idade.
- Na polpa do 3º ou 4º dedo da mão.
- Lóbulo da orelha.
PUNÇÃO CAPILAR
Nunca:
- Em local edematoso.
- Massagear antes.
- Espremer.
Pode:
- Aquecer previamente com compressas quentes.
Sempre:
- Limpar com álcool a 70%.
- Desprezar a primeira gota.

VEIN WIEVER
Avaliação de vasos por densidade.
Utilizado para:
- coletas difíceis,
- aplicação de medicamentos,
- operação de varizes.

15
ANTICOAGULANTES
Quando necessita-se de sangue total ou plasma
para algumas análises usam-se
anticoagulantes.
Em geral, interferem no mecanismo de
coagulação in vitro, inibindo a formação da
protrombina ou da trombina.
Os mais usados são:
- EDTA (ácido etileno-diamino-tetra-acético) –
determinações bioquímicas e hematológicas
- Fluoreto de sódio– provas bioquímicas
- Citrato – provas de coagulação

Tubos Com Vácuo:

Vermelho
Sem anticoagulante (tubo seco).
- Obtenção de soro para bioquímica e sorologia.
Exemplo de testes:
- Ácido Úrico
- Creatinina
- Uréia
- Colesterol
- Pesquisa e identificação de anticorpos e ou antígenos no soro.

Roxo
Manter as características das células.
- EDTA liga-se aos íons cálcio, bloqueando assim a
cascata de coagulação
- Obtém-se assim o sangue total para hematologia
Testes:
- Eritrograma
- Leucograma
- Plaquetas

16
Verde
- Paredes internas revestidas com heparina.
- Produção de uma amostra de sangue total.
- Estabilização por até 48 horas.
- Testes bioquímicos.

Azul
Contém citrato de sódio
- Anticoagulante utilizado para a obtenção de plasma
para provas de coagulação:
- Tempo de Coagulação
- Retração de Coágulo
- Tempo Parcial de Tromboplastina
- Tempo de Protrombina

Preto/Marron
Os tubos para VHS
- Contêm solução tamponada de citrato trissódico
- Utilizados para coleta e transporte de sangue venoso
para o teste de sedimentação.

17
Amarelo
- Tubos para tipagem sangüínea
- Com solução de ACD (ácido citrato dextrose)
- Utilizados para teste de tipagem sangüínea ou preservação celular

Cinza
- Tubos para glicemia
- Contêm um anticoagulante e um estabilizador, em
diferentes versões:
- EDTA e fluoreto de sódio
- oxalato de potássio e fluoreto de sódio
- heparina sódica e fluoreto de sódio
- heparina lítica e iodoacetato
- Ocorre inibição da glicólise para determinação da taxa
de glicose sanguínea.

Azul Royal
- Três versões:
- Sem aditivo
- Com heparina sódica
- Com ativador de coágulo
- Utilizados para testar traços de elementos metálicos, como: Cu, Zn, Pb,
etc.

18
DESCARTE DE MATERIAL BIOLÓGIOCO
- Sangue total/coágulos;
- Soro/Plasma;
- Fezes/Urina;
- Meios de Cultura;
- Outros materiais: Luvas, Swabs, Cotonetes, etc.

19
HEMATOPOIESE E ERITROPOESE:

Eritrócitos ou glóbulos vermelhos são as células envolvidas na síntese,

proteção e transporte da molécula de hemoglobina no organismo. Estas células
são originadas na medula óssea através da diferenciação de um precursor
eritróide (proeritroblastos), que após o processo de amadurecimento perde
totalmente suas organelas. Portanto, os eritrócitos não podem dividir ou
crescer, sendo as células-tronco a única forma possível de se obter mais
eritrócitos.
Este elemento vivo é, aparentemente, diferenciado exclusivamente para
o transporte de oxigênio aos tecidos (através da molécula de hemoglobina). No
homem tem o diâmetro médio de 7,5 μ, espessura na borda de 2 μ e 1,2 μ no
centro, sendo desprovido de núcleo em todos os mamíferos. Tem vida média
de 120 dias na circulação, sendo as células senis (velhas) fagocitadas e
digeridas pelo sistema monocítico fagocitário do fígado e baço.
Esta célula é um exemplo do perfeccionismo da evolução, levando em
conta que eritrócitos de animais inferiores na escala zoológica são nucleados.
Em mamíferos, com a perda do núcleo, aumentou o espaço para troca de
gases, e diminuiu o consumo interno de energia. As enzimas que estão
contidas em seu interior apresentam a função de produção de energia
necessária para a manutenção da integridade da membrana eritrocitária e
manter o ferro da hemoglobina no estado reduzido, estado no qual este íon é
fisiologicamente ativo para o transporte de oxigênio.

Hematopoese:

É o processo de formação, desenvolvimento e maturação dos elementos

do sangue (eritrócitos, leucócitos e plaquetas) à partir de um precursor celular
comum e indiferenciado conhecido como célula hematopoiética pluripotente, ou
célula-tronco, hemocitoblasto ou stem-cell. As células-tronco, que no adulto
encontram-se na medula óssea, são as responsáveis por formar todas as
células e derivados celulares que circulam no sangue.

Órgãos hematopoiéticos:

São os órgãos que produzem no processo da Hematopoiese os

elementos do sangue: leucócitos, hemácias e plaquetas. Esses órgãos são:
medula óssea, linfonodos (gânglios linfáticos), baço e fígado.
Nas primeiras semanas de gestação (aproximadamente 19° dia), o saco
vitelino é o principal local de hematopoiese. De seis semanas até seis a sete
meses de vida fetal, o fígado e o baço são os principais órgãos envolvidos e

20
continuam a produzir células sanguíneas até cerca de duas semanas após o
nascimento.
A medula óssea dos ossos chatos (esponjosos), é o local mais
importante a partir de seis a sete meses de vida fetal. As células em
desenvolvimento estão situadas fora dos seios da medula óssea, enquanto as
maduras são liberadas nos espaços sinusais e na microcirculação medular e, a
partir daí, na circulação geral.
A medula óssea é o órgão mais importante da gênese das mais diversas
células sanguíneas pois lá estão as células-tronco que dão origem às células
progenitoras de linhagens mielocíticas, linfocíticas, megacariócitos e
eritroblastos.

21
Eritropoiese:

É denominado eritropoiese o processo de produção de eritrócitos,

também denominados hemácias ou glóbulos vermelhos do sangue. Em
humanos adultos, a eritropoiese ocorre na medula óssea, mas em fetos e em
situações especiais, como anemias severas, pode ocorrer em outros órgãos,
principalmente, no fígado e no baço.
Ocorre à partir dos proeritroblastos, que são grandes células com
nucléolos e citoplasma discretamente disformes. À partir desta célula originam-
se, por reprodução celular, o eritroblasto basófilo, que após 24/48 horas se
transforma, por maturação, em eritroblasto policromático, à partir desta classe
de eritroblasto inicia-se o processo de formação da hemoglobina, daí o nome
de policromático. O eritroblasto policromático, em 24 horas, se diferencia em
eritroblasto ortocromático que, 12 horas depois, perde o seu núcleo e dá
origem ao reticulócito. O reticulócito é um eritrócito grande e imaturo, com RNA
ribossômico em variáveis quantidades em seu citoplasma. O reticulócito tem
um período de vida médio de 3 dias, após o qual se transforma em eritrócito e
é liberado da medula óssea para o sangue circulante.

Em condições normais um adulto produz cerca de 200 bilhões de

hemácias por dia, substituindo número equivalente de células destruídas
diariamente, para manter estável a massa total de hemácias do organismo. Os
precursores da linhagem eritróide constituem cerca de 1/3 das células da
medula óssea. O proeritroblasto é o tipo celular mais imaturo que pode ser
identificado como pertencente a essa linhagem.
Os precursores eritróides têm capacidade proliferática intensa, assim,
cada proeritroblasto origina 8-32 eritroblastos ortocromáticos; estas células, por
sua vez, não têm mais capacidade de dividir-se e, perdendo o núcleo, dão
origem às hemácias maduras.
Além da capacidade multiplicativa, os precursores eritróides
caracterizam-se pela intensa síntese de porteínas. A principal proteína
sintetizada e acumulada pelos eritroblastos é a hemoglobina.

22
 A morfologia dos precursores eritróides reflete estas duas características
fundamentais: a capacidade proliferativa e a intensa síntese de hemoglobina.
Assim, a célula mais primitiva tem núcleo mais imaturo, volumoso e cromatina
fina. À medida que amadurece, o núcleo vai diminuindo de volume e a
cromatina fica mais condensada até o núcleo se tornar picnótico,
correspondendo à célula que perdeu a capacidade de se dividir.
Do ponto de vista funcional, os precursores eritróides caracterizam-se
pela presença de dois tipos de receptores essenciais para sua diferenciação: o
receptor de eritropoietina e o receptor de transferrina.

O reticulócito:

O eritroblasto ortocromático perde o núcleo num processo

aparentemente ativo de extrusão. O núcleo perdido é rapidamente fagocitado
por macrófagos da medula óssea. Com a perda do núcleo, o eritroblasto
ortocromático se transforma em reticulócito, uma célula anucleada, que ainda
conserva no citoplasma alguns resquícios de organelas: retículo
endoplasmático, ribossomos (com RNA mensageiro) e mitocôndrias.
Os reticulócitos são ligeiramente maiores que as hemácias maduras, e
ainda retêm no citoplasma traços de basofilia, dando uma coloração com
policromatofilia. O uso de corantes específicos, como o azul de cresil brilhante,
revela estes restos de organelas no interior dos reticulócitos. O reticulócito
recém-formado permanece de um a três dias na medula óssea, sendo em
seguida liberado para a circulação. Um ou dois dias depois de entrarem na
circulação, os reticulócitos perdem todas as organelas, têm o volume
ligeiramente reduzido e adquirem a coloração citoplasmática própria das
hemácias maduras.

Eritropoetina:
A eritropoietina é o principal fator de crescimento que atua sobre a
linhagem eritróide e regula a produção de hemácias. A principal fonte de
eritropoietina no organismo é o tecido renal (em torno de 90%), sendo os 10%
restantes produzidos pelo fígado.
A baixa da pressão parcial em oxigênio (pessoas que vivem em grandes
altitudes), a diminuição do número de glóbulos vermelhos (ou hemácias)
causada por uma hemorragia ou por uma destruição excessiva, o aumento da
necessidade de oxigênio pelos tecidos, levam a uma secreção de
eritropoietina. Ao contrário, o excesso de oxigênio nos tecidos diminui a sua
secreção. Atua sobre as células eritroblásticas da medula óssea, isto é, as
células precursoras dos glóbulos vermelhos por intermediação de receptores
específicos.

23
 Na medicina ela é utilizada nos seguintes casos: insuficiência renal
crônica, doenças hematológicas, tumores sólidos, linfomas, mieloma múltiplo,
programas de transfusão autóloga (transfusão efetuada com sangue do próprio
indivíduo, coletado e conservado em data anterior). A aplicação varia de acordo
com a necessidade e estado clínico do paciente.
A eritropoietina pode ser utilizada para o aumento do desempenho dos
atletas, sobretudo nas modalidades como o ciclismo, o atletismo ou esqui, uma
vez que aumenta o nível de glóbulos vermelhos no sangue, melhorando assim
a troca de oxigênio e elevando a resistência ao exercício físico. Entretanto, o
uso de eritropoietina para esse fim é proibido, caracterizando dopping.
Como os rins são os principais produtores de eritropoietina, uma
insuficiência renal crônica leva geralmente a uma deficiência de eritropoietina,
e por consequência, à uma anemia hipoplásica.
Abaixo, temos uma sinopse de cada tipo de célula jovem da medula
óssea atuantes na eritropoiese.
 HEMOCITOBLASTO: (ou célula-tronco da medula óssea ou stem-cell):
é a denominação utilizada para designar a célula-tronco pluripotente da
medula óssea. Capaz de se diferenciar em quaisquer células
sanguíneas.
 PROERITROBLASTO: célula oval ou arredondada com 20 a 25μ de
diâmetro, citoplasma reduzido. O núcleo ocupa cerca de 80% da célula,
apresenta cromatina delicada e com a 1 a 2 nucléolos.
 ERITROBLASTO BASÓFILO: célula geralmente com cerca de 16 a 18μ
de diâmetro, citoplasma intensamente basófilo. O núcleo já não
apresenta nucléolos visíveis, a cromatina se dispõe em conglomerados
de formas diversas, freqüentemente pentagonais ou hexagonais, que se
distribuem no núcleo em forma semelhante aos raios de uma “roda de
carroça”, mais ou menos regulares, dando aspecto característico.
 ERITROBLASTO POLICROMÁTICO: neste estágio de maturação a
hemoglobina está presente em grande quantidade, mas os ribossomas
ainda persistem e conseqüentemente a coloração do citoplasma varia de
azul a cinza. A célula mede cerca de 9 a 12μ de diâmetro, o núcleo
ocupa cerca de 25% da célula, cora-se mais intensamente, conservando
sempre o aspecto característico das condensações cromatínicas
dispostas como “ roda de carroça “.
 ERITROBLASTO ORTOCROMÁTICO: nesta fase há uma grande
diminuição do diâmetro: a célula mede cerca de 8 a 9μ, atinge o fim de
sua capacidade de síntese de DNA e é incapaz de atividade mitótica
(divisão celular); o citoplasma é saturado de hemoglobina com
conseqüente acidofilia, apresentando coloração mais parecida de uma
hemácia madura. O núcleo é constituído por massa homogênea de
cromatina, sem estrutura definida, de localização excêntrica, estágio que
normalmente precede sua expulsão.

24
  RETICULÓCITO: é a primeira etapa de maturação onde a célula é
anucleada. Não é reconhecível em coloração por Giemsa e similares,
embora apareça como eritrócito maior e com policromatofilia. Com a
coloração vital, (ex.: Novo Azul de Metileno ou o Azul de Cresil Brilhante)
apresenta um retículo basófilo (RNAm) neste citoplasma.
 ERITRÓCITO: é um disco bicôncavo, anucleado, com cerca de 7μ de
diâmetro, de coloração róseo-clara e com halo central mais claro.

MORFOLOGIA E FUNÇÃO DAS CÉLS. SANGUÍNEAS

Os eritrócitos no sangue periférico são bicôncavos, circulares e uniformes em

tamanho, com um diâmetro celular médio de 8 µm, podendo ser observadas
algumas alterações no seu tamanho e morfologia.

Metabolismo Eritróide

 Como a hemácia não possui núcleo,

portanto, não sintetiza proteínas, ela
necessita de um aporte grande de
enzimas para produção de energia
(glicólise) e para manter a Hb em boas
condições de funcionamento.
- Como a hemácia não possui núcleo, portanto, não sintetiza proteínas, ela
necessita de um aporte grande de enzimas para produção de energia (glicólise)
e para manter a Hb em boas condições de funcionamento.
- A produção de energia pelo eritrócito é obtida a partir da metabolização da
glicose. A glicose entra na hemácia, através de transportador específico,
presente na membrana, independe de insulina ou qualquer outro hormônio.

 - Como a hemácia não acumula

glicogênio, a oferta e a entrada de
glicose devem ser constantes.

25
- Como a hemácia não acumula glicogênio, a oferta e a entrada de glicose
devem ser constantes.
A quebra da glicose vai gerar energia por meio de dois mecanismos:
- Glicólise anaeróbia, responsável por 90% da utilização da glicose em
condições normais.
- Ciclo das pentoses, ou ciclo da pentose-fosfato, mecanismo aeróbio, que
corresponde por 10% da utilização da glicose em condições normais.
É importante saber que podem ocorrer deficiências enzimáticas, como
deficiências congênitas de enzimas da via glicolítica, que vão decorrer com
diminuição da vida média eritrocitária, com hemólise e anemia.

 Glicólise anaeróbia, responsável por

90% da utilização
da glicose em
condições normai

Membrana Celular
- A membrana vai conferir proteção ao
eritrócito circulante auxiliando na
deformabilidade e elasticidade necessária
para a passagem na microcirculação.
- É um constituinte muito importante do
glóbulo vermelho, tendo como funções a
contenção da Hb dentro da célula, e a manutenção de importantes
características físicas da hemácia (deformabilidade e trocas entre o meio
externo e interno da célula).
- A membrana é constituída por duas unidades estruturais importantes: os
Lípides e proteínas integrais e um esqueleto protéico periférico que reveste a
face interna da membrana.

Proteínas Integrais
- Proteínas integrais, possuem um segmento central hidrofóbico que interage
com os lípides da dupla camada lipídica.

26
- Proteínas periféricas, estão localizadas
na face interna da membrana, formando
uma rede subjacente à membrana
constituindo o citoesqueleto da
membrana eritrocitária.
- As principais proteínas integrais são a
proteína 3 (banda 3) e as glicoforinas, e
dentre as periféricas, são a espectrina
(proteínas 1 e 2), a anquirina (proteína
2.1), a actina (proteína 5) e a proteína
4.1.

Hemoglobina
- Ocupa 90% do citoplasma do Eritrócito.
- É um tetrâmero, formado por dois pares de cadeias polipeptídicas, chamadas
de globinas. Cada cadeia está ligada a um grupo prostético colorido (heme),
com complexo de ferro e protoporfirina.
- O heme é essencial para o transporte de oxigênio enquanto a globina protege
o heme da oxidação, torna a molécula solúvel e permite variações na afinidade
pelo oxigênio.
Outra função da Hb é transportar dióxido de carbono (CO2) dos tecidos para os
pulmões (10%), mas a maioria do CO2 (90%) entra livremente no eritrócito e é
eliminado no ar expirado.

Tipos:
- A síntese das cadeias globínicas ocorre inicialmente no saco vitelino. A partir
da oitava semana de gestação existe síntese de Hb no fígado fetal e no baço e,
mais tarde, ainda na vida intra-uterina, a medula
óssea torna-se o principal local da síntese de
hemoglobina.

Síntese De Hb
A estrutura de todas a Hemoglobinas é semelhante
(dois pares de cadeias globínicas idênticas). Exceto
as hemoglobinas embrionárias, todas as
hemoglobinas normais são constituídas por um par
de cadeias alfa, combinadas com um par de cadeias
não-alfa, sintetizadas na proporção de
aproximadamente 1:1.
- As hemoglobinas embrionárias, sintetizadas no saco vitelínico são: 

27
- Gower 1 (ζ2ε2) [zeta2Epsilon2] – 20 a 60%
- Gower 2 (α2ε2) [alfa2Epsilon2] – 10 a 20%
- Portland (ζ2γ2) [zeta2gama2] – 5 a 20%.
- Após o nascimento, 75% de Hb aproximadamente é HbF, mas cai para cerca
de 5% aos seis meses de idade. No adulto existe ainda uma quantidade
diminuída (0-1%).
HbF (α2 γ 2) [ alfa2gama2] – 90 a 100%
HbA (α2 β2) [ alfa2beta2] – 5 a 10%
HbA2 (α2 δ 2) [ alfa2delta2] – Traços
- E após 6 meses de idade, ou considerando a fase adulta:
HbA (α2 β2) [ alfa2beta2] – 96 a 98%
HbA2 (α2 δ 2) [ alfa2delta2] – 2 a 4%
HbF (α2 γ 2) [ alfa2gama2] – 0-1%

Morfologia Eritrocitária:
A avaliação morfológica dos eritrócitos baseia-se nos seguintes critérios:
- Tamanho;
- Formato;

28
 - Cor;
- Distribuição no esfregaço (número
de células);
- Inclusões (citoplasmáticas).

Eritrócitos normais, normocíticos e

normocrômicos.

Eritrócitos hipocrômicos, escassez de Hb,

formam um halo central mais pálido.

Anisocitose

29
Microcitose, hemácias com tamanho diminuído, e normalmente repletos de Hb.

Macrocitose, hemácias muito grandes, em sua maioria ovais, e repletos de Hb.

>8µm.

Células em forma de foice, Drepanócitos, anemia falciforme.

Esquizócito, fragmento celular,

ocorre principalmente por
hemólise mecânica.

30
 Hemácias em alvo, comuns em
anormalidades de Hb, anemias
hemolíticas e pós esplenectomia.

31
ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS:

Anisocitose:

É um aumento da variabilidade do tamanho dos eritrócitos que excede a

observada nos indivíduos normais e sadios. Ocorre pela presença de eritrócitos
menores ou maiores do que os normais.

Microcitose:

É a diminuição do tamanho dos eritrócitos.

Eritrócitos microcíticos são notados na distensão
sanguínea quando o diâmetro é inferior a 7 μ. O
núcleo do linfócito pequeno, com diâmetro de
8,5μm, é um guia útil na avaliação do tamanho
dos eritrócitos. A microcitose poderá ser geral ou
poderá existir uma parte da população composta
de eritrócitos pequenos. Se todos (ou quase
todos) os eritrócitos forem pequenos, haverá uma
redução significativa do VGM, mas uma pequena
população microcítica pode estar presente sem
que o VGM se encontre abaixo dos limites de referência. Os eritrócitos das
crianças são menores do que dos adultos, ao passo que os do recém-nascido
são muito maiores, Dessa forma nota-se que o VGM deve ser interpretado de
acordo com a idade do indivíduo. Microcitose é incomum no recém-nascido,
mas pode ocorrer em distúrbios α-talassêmicos e na deficiência de ferro
resultante de perda sanguínea intra-uterina.

Macrocitose:

É o aumento do tamanho dos eritrócitos. Os

eritrócitos do recém-nascido mostram uma
acentuada macrocitose quando comparados com
os do adulto. Uma discreta macrocitose é uma das
características fisiológicas da gravidez, também
encontrada em idosos. A macrocitose é notada na
distensão sanguínea pelo aumento do diâmetro
celular. Ela poderá ser geral, e nesse caso o VGM
estará elevado, ou poderá afetar apenas uma
parte da população de eritrócitos. Os macrócitos podem ter contorno oval ou
arredondado, com significado diagnóstico diferente nas duas situações.

32
ALTERAÇÕES NA COR DOS ERITRÓCITOS (ANISOCROMIA
ERITROCÍTICA):
São detectados pelo CHGM (ou CHCM) e hematoscopia.

Anisocromia:
Nos diferentes tipos de anemias, os eritrócitos podem sofrer variações
em seu conteúdo de hemoglobina e, consequentemente, na intensidade da
coloração. Este estado patológico constitui a anisocromia eritrocítica, que
indica insuficiência da medula óssea. Ocorre pela presença de eritrócitos
pobres ou ricos em hemoglobina (hipocrômicos ou hipercrômicos).

Hipocromia:
É a redução da coloração do
eritrócito. Os eritrócitos hipocrômicos
possuem tamanho normal ou reduzido;
apresentam-se pálidos ou descorados,
sobretudo na zona central, que passa a
ocupar área superior a um terço do
diâmetro do eritrócito. A hipocromia
pode ser geral ou pode existir uma
população de células hipocrômicas. Os eritrócitos das crianças sadias são
frequentemente hipocrômicos, quando comparados com os dos adultos. A
hipocromia ocorre, em geral, nas anemias por deficiência, falta de absorção ou
de armazenamento de ferro.

Hipercromia:
É o aumento da coloração do
eritrócito. Os eritrócitos hipercrômicos
são células de grande tamanho, que
aparecem intensamente coradas e, em
muitos casos, sem a zona central clara,
observada normalmente, em
conseqüência de seu conteúdo
hemoglobínico anormalmente intenso.
O termo hipercromia é raramente
usado na descrição de distensões sanguíneas, uma vez que a mesma pode ser
só aparente, por aumento do tamanho da célula. Alterações na forma, como
esferócitos, causam colorações mais intensas do que nos eritrócitos normais. O
CHGM pode estar aumentado, indicando que a hipercromia relaciona-se não
apenas com a alteração na forma da célula, mas também com um verdadeiro
aumento da concentração de hemoglobina. Alguns macrócitos são mais

33
espessos do que os eritrócitos normais e, por isso, hipercrômicos, sem que
exista um aumento na concentração de hemoglobina.

Policromatofilia:
Eritrócitos policromatófilos são
eritrócitos imaturos, geralmente
maiores que os normais, cujo
citoplasma tem afinidade pelos
corantes ácidos e básicos. Coram-se,
pelos corantes de Romanowsky, de
róseo-azulado, devido à sua afinidade
simultânea por eosina (pela
hemoglobina) e corantes básicos (por
RNA ribossômico).
Normalmente o número de eritrócitos policromatófilos é muito reduzido,
cerca de 0,5% a 1,5%. O aumento desses elementos acima de 2% constitui a
policromatofilia ou policromasia, que é sinal de regeneração eritrocítica,
aparecendo, principalmente, na intoxicação pelo chumbo, na malária, nas
anemias e leucemias.

34
ALTERAÇÕES NA FORMA DOS ERITRÓCITOS:

Poiquilocitose:
Normalmente os eritrócitos apresentam-se em forma de discos
bicôncavos, circulares. Em condições patológicas, assumem formas
irregulares: ovais, de foice, de alvo, esferas. Tais eritrócitos deformados são
chamados poiquilócitos (ou pecilócitos), denominando poiquilocitose
eritrocitária a presença destes elementos. É uma anormalidade comum,
frequentemente inespecífica, encontrada em vários distúrbios hematológicos;
pode resultar da produção de eritrócitos anormais pela medula óssea, ou de
dano às células após liberação na corrente sanguínea.
A morfologia das hemácias (ou estudo da forma das hemácias) é feita ao
microscópio, analisando o esfregaço de sangue. Diversas alterações podem
ser observadas:

Drepanócitos:
Aparecem nas doenças falciformes (SS, SC, S-talassemia e outras
combinações de hemoglobinas anormais com a hemoglobina S). A desoxi-
hemoglobina S tende a formar polímeros que se alinham em fibras paralelas,
que tracionam a membrana do eritrócito que adquire a forma de foice ou
crescente, característica dessas doenças.

Esferócitos:
Esferócitos são eritrócitos de forma esférica porque perderam porções
de membrana. Como conservam o mesmo conteúdo com continente menor,
como resultado, perdem a característica palidez central, e no esfregaço
parecem ser células de menor diâmetro e mais intensamente coradas. Isso
ocorre na esferocitose hereditária, onde existe um defeito no citoesqueleto da
membrana eritrocitária, mas pode ocorrer também em condições adquiridas

35
como nas anemias imuno-hemolíticas, nas quais porções de membrana com
anticorpos ou complemento ligados a elas são removidas pelos macrófagos ou
devido à ação de toxinas bacterianas. A fragmentação de eritrócitos presente
nas anemias hemolíticas microangiopáticas pode originar microesferócitos, que
são esferócitos que apresentam não apenas redução do diâmetro, mas
também do volume eritrocitário. Esferoequinócitos (esferócitos “crenados”)
podem estar presentes em esfregaço de sangue de pacientes que receberam

transfusão de sangue armazenado.

Eliptócitos:
Embora muitas vezes eliptócitos e ovalócitos sejam usados como
sinônimos, o termo eliptócito refere-se às células cujo maior eixo é pelo menos
duas vezes o menor. Os ovalócitos são as células cujo maior eixo é inferior ao
dobro do eixo menor. Os eliptócitos ou ovalócitos podem aparecer em várias
condições hereditárias e adquiridas. Quando muito numerosos, geralmente são
decorrentes de eliptocitose hereditária, uma doença causada por uma alteração

hereditária da membrana do glóbulo vermelho.

36
Hemácias em alvo/ Codócitos:
Distribuição anormal de hemoglobina pode resultar na formação de uma
célula com uma mancha central de hemoglobina rodeada por uma área de
palidez, chamada célula em alvo. São formadas devido a um excesso de
membrana em relação ao volume do citoplasma. Isso pode ocorrer quando
existe excesso de lipídios na membrana, como na icterícia obstrutiva e nas
hepatopatias graves, ou quando existe redução do conteúdo citoplasmático
sem redução da membrana como ocorre nas talassemias, na deficiência de
ferro, e em algumas hemoglobinopatias.

Dacriócitos:
As hemácias em forma de lágrima ou dacriócitos aparecem quando
existe fibrose da medula óssea ou diseritropoese grave. Podem ocorrer,
também, em algumas anemias hemolíticas e nas anemias megaloblásticas. É
característica da mielofibrose tanto idiopática quanto secundária às infi ltrações
da medula óssea.

37
Acantócitos:
São hemácias com a membrana irregular, apresentando espículas
irregularmente distribuídas. In vitro pode ser artefato. In vivo decorre de

hepatopatias, diminuição da
função do baço e esplenectomia.

Esquizócitos:
São eritrócitos fragmentados, irregularmente contraídos e mordidos.
São causados por traumas mecânicos, válvulas cardíacas artificiais, agressão
térmica nas queimaduras e agressão química pelo uso de fármacos oxidantes.
Se a fragmentação for significativa, o paciente irá apresentar manifestações
clínicas de anemia hemolítica.

Aparecem também em condições clínicas como coagulação

intravascular disseminada (CIVD),

púrpura trombocitopênica trombótica (PTT) e Síndrome Hemolítico-Urêmica

(SHU).

38
Estomatócitos:
São eritrócitos com o halo central semelhante a uma boca de peixe. O
termo stoma significa boca.
Pode ser um artefato da distensão sanguínea. Pode estar presente em
hepatopatias, sangue de recém-nascidos e na estomatocitose hereditária, uma
anemia hemolítica congênita muito rara.

39
 HEMOGRAMA COMPLETO:
Avaliação quantitativa e morfológica dos elementos celulares do sangue.
Hemograma é o exame laboratorial que tem por objetivo a avaliação
qualitativa e quantitativa das hemácias e leucócitos do sangue periférico. É
considerado como primeiro passo na avaliação da função hematológica do
organismo, mostrando alterações de valor diagnóstico em doenças de
quaisquer patogêneses. Além disso, é útil para o acompanhamento da
evolução dos processos patológicos e da eficácia terapêutica administrada.
O hemograma completo inclui:
 A contagem dos eritrócitos (Hematimetria), a determinação da
hemoglobina e do hematócrito e o cálculo dos índices hematimétricos
(VGM, HGM, CHGM).
 A contagem dos leucócitos (Leucometria global) e de cada tipo de
leucócito encontrado (Leucometria específica).
 A hematoscopia, que se define como a observação das eventuais
alterações morfológicas das hemácias e dos leucócitos.
OBS.: Embora não seja consenso, alguns laboratórios também acrescentam a
estimativa do número de plaquetas.

40
Automação:

1953 - Wallace Coulter introduziu o conceito de contagem de células por

impedância
1970 - Uso de radio frequência para análise de características internas das
células
1980 – Citoquímica/Laser
1997 - Laser combinado a imunofluorescência
1998 - Automação Completa.

Vantagens:

- Aumento da reprodutibilidade, precisão e exatidão;

- Melhoria na qualidade do Hemograma.
- Dosagem de hemoglobina c/ menor interferência.
- Contagem diferencial – 10.000 células.
- Diluição automática altamente reprodutiva.
- Maior segurança para o operador.
- Maior rapidez para resultados.
- Maior lucratividade para o laboratório.

41
42
Eritrograma:
Constitui o estudo da séria vermelha, revelando alguns tipos essenciais
de alterações patológicas do sistema eritropoético como eritrocitoses e
anemias.
Os métodos para contagem global das células sanguíneas consistem
geralmente em diluir o sangue, em proporção conhecida, com um líquido
diluidor chamado Hayem, permitindo a conservação das células em estudo.
1. Pipetar 4 ml do líquido diluidor em um tubo de ensaio.
2. Com a pipeta transferir 0,02 ml de sangue. Limpar a parede externa
da ponteira com auxílio de papel absorvente.
3. Transferir os 0,02 ml de sangue para o tubo com o líquido diluidor,
lavando com ele o interior da ponteira por aspiração e expulsão do líquido. A
diluição é de 1:200.
4. Agitar suavemente por inversão para uma correta homogeneização.
5. Com uma pipeta preencher os retículos da câmara de contagem,
evitando excesso de líquido e bolhas de ar sob a lamínula aderida firmemente
à câmara.
6. Deixar repousar por dois minutos para sedimentação dos glóbulos.
7. Focalizar a preparação com pequeno aumento no microscópio para
localizar o retículo e observar a distribuição uniforme das hemácias. Observar
então, com aumento de 100X ou 400X, conforme necessidade.
8. Fazer a contagem de todas as hemácias encontradas nos quadros
marcados “H” na figura relativa ao retículo de Neubauer, ou seja, 1/5 de mm2 .
Sistematizar a contagem segundo a figura abaixo. Contar os elementos em
negro.

43
Impedância:
- Método baseado na determinação de mudanças na resistência elétrica que
produzem pulsos elétricos mensuráveis.
- O número de pulsos gerado é indicativo do número de partículas.
- A amplitude de cada pulso é eletricamente proporcional ao volume da
partícula.

44
Dosagem de Hemoglobina:
É o método de referência para a dosagem de hemoglobina. Dosam
todas as suas formas exceto a sulfemoglobina. A desvantagem reside na
extrema toxidade do cianeto usado no preparo do reagente (solução de
Drabkin), mas pode ser resolvida pela aquisição já preparada, de concentração
mínima.
Temos usado, com bons resultados, os reagentes Labtest; a solução de
Drabkin modificada e o padrão de hemoglobina de concentração conhecida.
Calcula-se um fator determinado a absorbância de 0,02 ml do padrão em 5ml
da solução de cianeto, através da fórmula:

45
VALORES HEMATIMÉTRICOS:
Hematócrito:
Fornece o volume ocupado pelas hemácias em 100 mL de sangue após
a centrifugação. É realizado enchendo o tubo de Wintrobe (macrométodo) ou o
tubo capilar (micrométodo), centrifugando e fazendo a leitura do volume
ocupado pelas hemácias, cujo resultado é dado em porcentagem.
Valores normais: Homens adultos: 46 +- 7% Mulheres adultas: 42 +- 6%

46
Volume Globular Médio (VGM ou VCM):
O VGM fornece o volume médio (tamanho) das hemácias. Como a
avaliação do tamanho das hemácias é uma chave para o diagnóstico de uma
anemia, o VGM é o mais importante parâmetro dos índices hematimétricos.
Mesmo quando o número de hemácias é normal, deve-se notar o valor do VGM
no resultado do hemograma, porque uma anormalidade do tamanho das
hemácias precede o aparecimento de anemia franca.

47
Hemoglobina Globular Média (HGM ou HCM):
É a medida do conteúdo hemoglobínico por hemácia, ou seja, é o peso
de hemoglobina na hemácia.
Nas anemias, em que a síntese de hemoglobina é prejudicada, a massa
de hemoglobina por hmácia diminui, levando ao decréscimo de HGM. A HGM
poderá estar falsamente elevada pela hiperlipidemia ou pela leucocitose, pois o
aumento da turbidez plasmática poderá elevar a medida da hemoglobina. Para
isto, a centrifugação da amostra para eliminar a turbidez seguida da
determinação da hemoglobina pelo método manual poderá permitir a correção
do valor da HGM.

Concentração da Hemoglobina Globular Média (CHGM ou CHCM):

Fornece a medida da concentração média de Hb das hemácias, ou seja,
a proporção de massa de hemoglobina em relação ao volume em que ela está
contida.

48
Rdw – Índice De Anisocitose:
Amplitude de Distribuição do Tamanho das Hemácias
 RDW – CV (VR: 9,5 –14,8 %)
 RDW – SD (VR: 38,6 –49,1 fL)

49
50
51
LEUCOGRAMA:
O leucograma corresponde a contagem global e específica dos
leucócitos, representados pela leucometria e pelo estudo quantitativo e
qualitativo dos glóbulos brancos. O quadro leucocitário que se apresentará
após ser concluído o exame hematológico, permitirá ao médico tirar conclusões
diagnósticas e prognósticas importantes.

 Leucometria Global: É a contagem total dos glóbulos brancos

( leucócitos) do sangue. Neste caso não é feita a distinção entre os tipos
de células presentes (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e
monócitos). Intervalo de referência para adultos: 4.000 a 11.000
leucócitos/ mm3
 Leucometria específica: É a contagem específica dos leucócitos
realizado em extensões sanguíneas coradas pelos corantes
hematológicos. Após a lâmina secar, baseado nos caracteres
morfológicos, contamos, no mínimo, 100 leucócitos, classificando-os.

Contagem de leucócitos:
1. Pipetar 0,4 ml do líquido de Turk no tubo
2. Com pipeta automática, pipetar 0.02 ml de sangue.Limpar a ponteira com
papel de filtro.
3. Transferir os 0,02 ml de sangue para o tubo com o líquido diluidor, lavando
com ele o interior da pipeta por aspiração e expulsão do líquido. A diluição é de
1:20.
4. Agitar suavemente por dois minutos.
5. Encher os dois retículos da câmara de contagem, evitando excesso de
líquido e bolhas de ar sob a lamínula, aderida firmemente à câmara por
compressão daquela sobre esta, cobrindo ambos os retículos.
6. Deixar repousar de um a dois minutos para sedimentação dos glóbulos.
7. Focalizar a preparação com pequeno aumento no microscópio para localizar
o retículo e observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Em seguida,
observar com aumento de 100 x ou 400 x, a desejar.
8. Fazer a contagem de todos os leucócitos encontrados nos quadros
marcados “L” na figura relativa de Neubauer,ou seja, 4mm2 .

52
Laser: Gráfico de dispersão dos leucócitos
- A dispersão de luz é apresentada na forma de gráficos de dispersão.
- Cada célula analisada é representada por um ponto no gráfico de dispersão.

- Os pontos são representados num local determinado pela interseção das

informações do canal, designadas nos eixos X e Y.

53
54
PLAQUETOGRAMA:
- Nº de plaquetas
- Íncides plaquetários
 VPM: fL
 Plaquetócrito: %
 PDW: %
- Análise morfológica

Contagem de plaquetas:

55
- Depende muito da coleta, do intervalo entre a coleta e a realização do exame,
da homogeneização e do transporte.
- A Tendência atual é a contagem automatizada através de, pelo menos, 2
Tecnologias
- A Precisão dos Analisadores Hematológicos é Satisfatória:

 CV < 10,0% ➔ 40.000 –1.000.000 /mm3

 CV ≅ 50% ➔ 10.000 –30.000/mm3
 CV ≅100% ➔ < 10.000 /mm3
- A variação entre equipamentos é significativa, principalmente nos valores
baixos e altos
- Mesmo paciente: Variação entre 10 a 15%, em dias sucessivos.

56
O QUE AS MÁQUINAS NÃO OBSERVAM:
- Principalmente alterações morfológicas
 Esfregaço Sanguíneo
- Observações Morfológicas:
 Morfologia celular, principalmente poiquilocitose e inclusões;
 Número reduzido de eritroblastos;
 Se a amostra está hemolisada ou com outras alterações que interferem
nas análises;
 Microcoágulos; Crioaglutininas; Icterícia; Lipemia.

57
58
59
Observações Microscópicas:
 Grânulações Tóxicas,
 Vacúolos citoplasmáticos,
 Corpúsculos de Dohle,
 Anomalia de Pelger-Huët, Alder-Reilly, May-Hegglin, Chediak-Higashi,
Hairy Cells,
 Neutrófilos Hipersegmentados,
 Plasmócitos,
 Linfócitos clivados,
 Células de Sézary,
 Linfócitos com granulações ou vacuolização,
 Blastos pequenos e homogêneos (L1),
 DE*

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Observações Microscópicas:
 Satelitismo Plaquetário (Plaquetopenia/Leucopenia)
 Agregação Plaquetária

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Pseudoplaquetopenia induzida pelo EDTA:
- Plaquetograma:
 Número de Plaquetas bastante diminuído
 Alarme: plaquetas agregadas
- Microscopia:
 plaquetas agregadas impossibilitando a contagem
Possíveis técnicas para solucionar o problema:
- Contagem, com EDTA, imediatamente após a coleta (37oC )
- Coleta com Citrato de Sódio, Fluoreto de Sódio ou Heparina → Banho Maria
37oC, 15 minutos – Contagem
- Coleta com Citrato → desagregação total das plaquetas
 Obs: Citrato de Sódio com Paraformalaldeído a 1%→previne a
agregação plaquetária (Van der Meer, W; et al. Eur.J.Haematol 69:243-
7, 2002)

Critérios de triagem de hemogramas para a microscopia:

- Clínicas específicas:
 Onco-Pediatria, Hematologia Clinica, Transplante de Medula Óssea etc
- Dados Clínicos relevantes:
 Leucemia, Linfoma, Micose Fungóide, Mielodisplasia etc.
- Valores Hematológicos > ou < Limites:
 determinados pelo Serviço
- Alertas relevantes:
 RBC, WBC e PLT.

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Causas de erros na realização do hemograma:
 Sangue coagulado
 Perda de plasma por derramamento
 Sangue hemolisado
 EDTA em excesso
 Sangue velho
 Sangue mal conservado
 Transporte irregular
 Falta de homogeneização adequada
 Crioaglutinação
 Coleta do cateter

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