2) Síntese de uma nova fita complementar (fita vermelha) para cada uma das fitas. Desta forma a fita pré-existente funciona como um molde para formação da nova fita (replicação semiconservativa) As duplas fitas do DNA sempre são antiparalelas. Forma A Forma B Forma Z
O DNA pode ocorrer em formas tridimensionais diferentes apresentando
funções específicas no metabolismo do DNA: Forma B: é a mais comum Forma A: soluções relativamente desprovidas de água (redução da umidade relativa em 75%, predominante em híbridos RNA-DNA ou RNA-RNA )
Forma Z: Desempenha um papel (ainda não identificado) na regulação da
expressão de alguns genes ou na recombinação gênica; PALÍNDROMO - Sequência de pares de bases do DNA que têm a
Mesma leitura nos
filamentos complementares. Exemplo: GAATTC CTTAAG. Estrutura de DNA-H: seqüência de resíduos T e C alternantes, forma uma fita tríplice: duas fitas são pirimidinas e uma purina; Estrutura do RNA - Fita única de conformação helicoidal de mão direita, dominada por interações de empilhamento de bases. - O pareamento de bases segue o modelo do DNA; - Na estrutura tridimensional do RNA pareamento comum entre G e U; - quando ocorrem fitas pareadas no RNA, estas são antiparalelas; - possuem forma de grampo e saliências internas; - sequências de UUCG são frequentemente encontradas nas extremidades dos grampos de RNA; -Podem apresentar uma estrutura secundária e terciária que envolve o pareamento de bases intramoleculares, empilhamento de bases e pontes de hidrogênio entre diferentes parte da molécula Estrutura tridimensional do RNA Química dos ácidos nucleicos:
Desnaturação do DNA: Quebra das pontes de H que liga a dupla
fita do DNA ou DNA com RNA. Não há ruptura das pontes fosfodiéster. Agentes: extremos de pH ou temperatura acima de 80ºC;
Renaturação: quando em pH fisiológico e temperatura ambiente,
as pontes de H são restabelecidas as fitas complementares; processo rápido quando um segmento da dupla hélice tinha se mantido unido.
Quando as duas fitas estão totalmente separadas, o processo de
renaturação ocorre em duas fases: o primeiro de “se encontrar”, mais lento (colisão ao acaso). Segundo passo, mais rápido, os demais pares de bases se fecham como um “zíper”. Fitas únicas de DNAs desnaturados de duas espécies podem formar dúplex híbridos e o grau de hibridização depende da extensão da semelhança da sequência; Se o DNA apresenta um número A hibridização é a base para maior de pares G-C do que A-T, técnicas importantes usadas para maior é a estabilidade da molécula, estudar e isolar genes e RNAs maior deverá ser o aumento da específicos. Técnica utilizada para temperatura para haver a identificação de indivíduos; desnaturação(Temperatura de “melting”); Os ácidos nucleicos sofrem Mutações: alterações transformações não permanentes na estrutura do enzimáticas, como as DNA, que na maioria das vezes mutações, pela radiação UV, são deletérias, mas que podem hidrólise da ligação ajudar na adaptação das entre a BN e a pentose, nas espécies ao longo dos anos. extremidades das fitas. Multiplicação do DNA pela técnica da reação em cadeia de polimerase (PCR)
No microtubo colocar: DNA molde, Enzima Taq polimerase,
nucleotídeos livres, tampão de reação, primers (iniciadores da polimerização), solução com os reagentes adequados.
Termociclador, Aparelho utilizado
para realizar uma PCR, Reação em cadeia da polimerase