TÉCNICAS DE INOCULAÇÃO

DE MICRO-ORGANISMOS

Em microbiologia, há várias técnicas de

inoculação de micro-organismos; algumas
são utilizadas para exames qualitativos e
outras para estudos quantitativos
(contagem de bactérias), as quais serão
descritas adiante. O inóculo é definido
como o material utilizado para iniciar uma
cultura microbiana.
 Normas utilizadas
- O fio e a alça de platina devem ser sempre flambados antes
e depois de qualquer inoculação, ou seja, devem ser
aquecidos ao rubro no cone interno do bico de Bunsen.
Para a coleta do material, devem ser esfriados na parte
interna do recipiente com meio de cultura;

- Os recipientes (tubos de ensaio, placas de Petri etc) com

meio de cultura devem sempre ser abertos próximo ao bico
de Bunsen;

- A boca dos tubos de ensaio deve ser aquecida após a

retirada e antes da colocação da tampa (boneca). A tampa
nunca deve ser colocada sobre a bancada, sendo retirada e
mantida segura pelo dedo mínimo da mão direita durante a
inoculação.

Técnica de semeadura em meio líquido

A cultura de micro-organismo é inoculada

em um tubo de ensaio contendo meio
líquido estéril utilizando-se uma alça de
platina ou níquel cromo.
Figura 1. Transferência asséptica. (a) A alça é aquecida até a incandescência, sendo rapidamente
resfriada no ar. (b) O tubo é destampado. (c) A ponta do tubo é passada pela chama. (d) A amostra é
coletada com a alça estéril. (e) Após a remoção da amostra, o tubo é novamente passado na chama, e a
amostra, transferida para um meio estéril. (f) O tubo é fechado e a alça é novamente aquecida, antes de
ser dispensada.

Técnica de semeadura em meio sólido

inclinado

A cultura de micro-organismo é inoculada

em um tubo de ensaio contendo meio
sólido inclinado estéril por meio de estrias
na superfície do Agar, utilizando a alça de
platina.
 Figura 2. Técnica de semeadura em meio sólido inclinado

Técnica de semeadura em meio

sólido por picagem profunda
A cultura de micro-organismo é inoculada
em um tubo de ensaio contendo meio
sólido estéril utilizando a agulha de
platina: a inoculação deverá ter a
profundidade de 2/3 do meio e não deverá
ser mais do que uma única picada.
Figura 3. Técnica de semeadura em meio sólido por picagem profunda

Diluição da amostra para

inoculação
 Procedimento de contagem
de viáveis por meio de
diluições em série da
amostra e o método de
semeadura em
profundidade. O fator de
diluição corresponde à
recíproca de diluição.

Técnicas de semeadura em
meio sólido em placa
 Técnica de semeadura por
esgotamento
A técnica do esgotamento em placa
consiste em depositar sobre um ponto da
superfície do meio uma alíquota do
material e depois espalhá-lo em dois ou
três setores, por meio de alça de platina,
sem recarregá-la, de maneira a obter
quantidades progressivamente menores
do material

a)

Técnica de semeadura por esgotamento, para obtenção de culturas puras. A alça é utilizada para
coletar uma alíquota de inóculo a partir do meio de cultura. (b) A semeadura é realizada sobre um
meio sólido estéril, em placa, pelo espalhamento dos micro-organismos. Após a semeadura no
setor inicial, semeaduras subseqüentes são realizadas, formando ângulos em relação à primeira. (c)
Aspecto de uma placa semeada após a incubação. Colônias da bactéria Micrococcus luteus
desenvolvendo-se em placas de ágar sangue. A partir das colônias isoladas, culturas puras podem
ser obtidas.