OBTENÇÃO DE PECTINA DE SUBPRODUTO

AGROINDUSTRIAL

RESUMO - Extração enzimática de pectina de bagaço de laranja residual da indústria de

suco utilizando poligalacturonase de Kluyveromyces marxianus foi estudada com base na
Metodologia de Superfície de Resposta (MSR) e delineamento fatorial completo 3 2,
variando a concentração de bagaço de laranja (6-10%) e a proporção enzima/substrato
(10-50 µL.g-1). Quando utilizados 6% de bagaço de laranja e 30 µL.g-1 de
enzima/substrato, obteve-se 16,72% como o maior rendimento de extração de pectina
com as características: 72,45% de ácido galacturônico e 20,9 Cp de viscosidade do gel.

ABSTRACT - Enzymatic extraction of pectin from orange bagasse residual from juice
industry using polygalacturonase of Kluyveromyces marxianus was studied based on
Response Surface Methodology (RSM) and 3 2 full factorial design, varying the
concentration of orange bagasse (6-10%) and the ratio enzyme/substrate (10-50 µL.g-1).
When using 6% orange bagasse and 30 µL.g-1 enzyme/substrate, it was obtained 16.72%
as the highest extraction yield of pectin with the following characteristics: 72.45%
galacturonic acid and 20.9 Cp gel viscosity.

PALAVRAS-CHAVE: Bagaço de laranja. Poligalacturonase. Ácido galacturônico. Gel.

KEYWORDS: Orange bagasse. Polygalacturonase. Galacturonic acid. Gel.

1. INTRODUÇÃO

Das 19,4 milhões de toneladas de laranja que o Brasil produz (MAPA, 2011) 70% são
destinadas a extração de suco (Neves et al., 2012), o que gera quantidade expressiva de resíduo sólido,
já que 50% da fruta que entra na planta processadora sai como bagaço (Oreopoulou e Russ, 2007),
formado por casca (flavedo), albedo, membranas e sementes. No albedo, porção branca e fibrosa
aderida internamente à casca da laranja, está a maior concentração de pectina, uma fibra alimentar
amplamente utilizada como agente estabilizante e espessante na indústria de alimentos, farmacêutica e
de cosméticos (Min et al., 2011). Industrialmente a pectina é extraída por processos com ácidos fortes
como clorídrico e sulfúrico, entre outros (Yapo et al. 2009), os quais geram resíduos que necessitam de
tratamento complexo (Min et al., 2011). De modo alternativo, é possível obter pectina por extração
com enzimas como a poligalacturonase (Alimardani-Theuil et al., 2011; Contreras-Esquivel et al.,
2006). O objetivo do presente estudo foi avaliar a extração enzimática de pectina de bagaço de laranja
gerado durante a produção industrial de suco utilizando poligalacturonase de K. marxianus e
caracterizar a pectina obtida.
2. MATERIAL E MÉTODOS

2.1 Bagaço de laranja

Para a extração da pectina foi utilizado bagaço de laranja, variedades Valência, Pêra e Folha
Murcha fornecido pela Indústria de suco concentrado Paraná Citrus (Paranavaí – PR - Brasil). Após
lavagem com água fria, o bagaço foi prensado, triturado em multiprocessador, lavado com água a
100°C, prensado novamente, desidratado a 50ºC por 40 h em estufa e triturado em moinho de bancada.
O pó resultante foi armazenado a 4ºC até o uso. A umidade do bagaço foi determinada por
desidratação em estufa a 105ºC por 2 horas (AOAC, 1995). Para a determinação de pectina, a extração
foi realizada conforme McCready e McComb (1952) e a quantificação de ácido galacturônico (padrão:
10-70 µg) de acordo com Kintner e Van Buren (1982).

2.2 Produção de poligalacturonase por Kluyveromyces marxianus

A cepa de K. marxianus (fragilis) (CCT 3172), pertencente a coleção de microrganismos do

Laboratório de Ciência de Alimentos da Universidade Estadual de Londrina, Paraná, foi utilizada para
a produção da enzima poligalacturonase. O caldo composto de melaço (12ºBRIX), sulfato de amônio
(5 g.L-1) e pectina (7 g.L-1), com inóculo de 2% (v/v) foi incubado a 28 ºC durante 24 h a 150 rpm
(Bravo et al., 2000).

2.3 Extração de pectina

No processo de extração estudado foram avaliadas 2 variáveis independentes em três níveis de

variação conforme delineamento fatorial completo 3 2, totalizando 9 ensaios. Os níveis de variação da
concentração de bagaço de laranja foram 6% (-1), 8% (0) e 10% (+1) e as proporções enzima/substrato
foram 10 µL.g-1 (-1), 30 µL.g-1 (0) e 50 µL.g-1 (+1), definidos com base em experimentos prévios.
Como variável dependente considerou-se o rendimento de extração (%), dado pela razão entre o teor
de pectina obtida em cada ensaio e o total de pectina no bagaço de laranja utilizado
experimentalmente. A extração foi realizada a 50ºC e pH 5,0 (Alimardani-Theuil et al., 2011) em
incubadora com agitação a 100 rpm durante 60 minutos e a reação interrompida em banho-de-gelo.
Após a extração, a pectina foi recuperada segundo descrito por Donaghy e Mckay (1994): o sistema de
extração foi centrifugado, filtrado a vácuo e ao filtrado foram adicionados 2 volumes de etanol 95%
gelado para a precipitação da pectina, que foi separada por centrifugação a 2250g durante 15 min
seguida de filtração à vácuo, utilizando pano de viscose (Perfex) como filtro (Calliari et al., 2011).
Após sucessivas lavagens com etanol, a pectina obtida foi desidratada a 40ºC overnight e triturada até
60 mesh. O etanol utilizado foi recuperado em evaporador rotativo a 50°C.
2.4 Caracterização da pectina

A concentração de ácido galacturônico da pectina foi determinada utilizando método descrito

por Kintner e Van Buren (1982). Para avaliar a capacidade geleificante da pectina obtida na extração
enzimática, uma solução aquosa contendo 1% de pectina (p/v) e 67,5% sacarose (p/v), foi mantida a
100°C sob agitação, durante cinco minutos. Após cinco minutos a temperatura ambiente, o pH da
solução foi ajustado a 3,5 com ácido cítrico 0,5% e esta foi envasada a 85ºC e mantida em repouso a
25ºC por 24 h. A viscosidade do gel foi medida em viscosímetro Brookfield com spindle n° 18, a 20
rpm e 25ºC. Para fins de comparação, um gel de pectina cítrica Sigma  foi preparado nas mesmas
condições.

2.5 Análises estatísticas

O delineamento experimental e a análise dos resultados foram obtidos pelo software Statistica
7.1, com significância a p ≤ 0,05. Os resultados são expressos como médias +/- o desvio padrão de
triplicatas.

3. RESULTADOS E DISCUSSÃO

O bagaço de laranja em pó utilizado nos experimentos apresentou 5,07±0,11% de umidade e

29,30±1,70% (b.s.) de pectina total, resultado similar ao reportado por El Nawawi e Shehata (1987).
Quando utilizado 6% (nível -1) deste material como substrato para a extração enzimática da pectina
com 30 µL (nível 0) de poligalacturonase por grama de bagaço, obteve-se 16,72% como o maior
rendimento experimental. Entre as variáveis testadas, somente a concentração de bagaço de laranja
teve efeito significativo sobre a resposta, sendo linear e negativo. O processo enzimático utilizado
neste trabalho é um potencial modo de produção sustentável de pectina como alternativa aos processos
químicos industrialmente praticados, considerando que o resíduo sólido da extração enzimática pode
ser utilizado como fertilizante e ingrediente para a alimentação animal e o resíduo líquido (etanol)
recuperado e reutilizado. Observou-se que o processo é brando para a pectina extraída, que apresentou
concentração de ácido galacturônico de 72,45±3,87%, o que indica pureza superior a requerida para as
pectinas cítricas comerciais (FAO, 2009). A viscosidade do gel preparado utilizando a pectina obtida
no processo enzimático foi de 20,9±0,8 Cp, resultado semelhante ao obtido para o gel de pectina
cítrica Sigma (20,9±0,6 Cp) preparado nas mesmas condições.
4. CONCLUSÃO

As características de concentração de ácido galacturônico e viscosidade do gel apresentadas

pela pectina extraída por poligalacturonase de Kluyveromyces marxianus, indicam que o ingrediente
obtido apresenta pureza superior ao padrão comercial, portanto o processo estudado não implicou em
despolimerização do produto, sendo sugerido como alternativa aos processos químicos industriais.

5. AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico

(CNPq) pelo apoio financeiro.

6. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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