Relatório

Coloração de gram

As bactérias elas podem ser divididas em dois grandes grupos com base na sua capacidade das
paredes celulares fixarem o corante cristal violeta, e desta forma serem classificados em Gram-
positivas as que coram em roxo e Gram- negativas as que coram em vermelho, a parede de
bactérias Gram-postiva e composta por peptideoglicanos que constitui uma camada espessa ao
redor da célula e as bactérias Gram negativas, o peptideoglicanoconstitui uma camada delgada .

A coloração de Gram consiste em tratar as bactérias com os corantes cristal violeta, lugol,
fucsina e descorante álcool, sendo que o cristal violeta e o lugol penetram tanto nas bactérias
gram positivas assim como nas gram-negativas formando uma cor roxa e o álcool e a etapa
diferencial nas gram positivas, o álcool não retira o cristal violeta- lugol porque sua acção
desidratante faz com que a camada espessa de peptideoglicanos se torne menos permeável
retendo o corante, o mesmo não acontece com as bactérias gram negativas que são descoradas e
toma a cor vermelha.

Procedimentos

Para a realizarmos essa técnica foi suspenso um pequeno inóculo de uma colónia isolada no
centro da lâmina estéril com ajuda de uma anca espalhamos a fim de obter um esfregaço oval e
fino, depois essa foi flambada para promover a fixação das bactérias.

Depois do nossa lâmina secar cobrimos primeiro com o corante cristal violeta durante 1 minuto,
depois lavamos em água corrente e em seguida adicionamos o segundo corante o lugol também
durante 1minuto, após 1 minuto lavamos novamente em água corrente e emseguida com álcool
que e o nosso diferenciador e por fim cobrimos o esfregaço com a fucsina de ziehl que funciona
como contra-corante por 30 minutos e retiramos em seguida com água.

Depois de termos feito a coloração deixamos lâmina secar a temperatura ambiente, assim que
secasse fizemos a leitura no microscópio utilizando a objectiva de imersão com uma gota de óleo
de imersão no centro do esfregaço.

Resultados

Conseguimos observar a morfologia e a coloração das colónias de acordo com a forma podemos
visualizar os cocos que a apresentam forma esférica e apresentavam uma cor vermelha e
concluímos que se tratava de bactérias gram negativas. E com os resultados que obtivemos, foi
necessários realizarmos varias provas para obtermos o género e a espécie pertencente das
bactérias em questão.
Provas bioquímica

Prova de catálase

A prova de catálase é uma enzima que degrada o peróxido de hidrogeno(H2O2) a em uma

molécula de água. Esta enzima é produzida por muitos microrganismos e utilizada para
diferenciar os géneros STAPHYLOCOCUS SPP (com catálase positiva) e streptococusspp (com
catálase negativa).

Procedimentos

Para a realização dessa prova, colocamos uma gota de peróxidos de hidrogénio a 3% na lâmina e
depois adicionamos uma pequena quantidade de uma colónia isolada.

Resultado

O resultado que obtivemos foi positivo porque havia o borbulhamento devido a liberação do
oxigénio, isso significa que a bactéria possuía a enzima catálase então o seu género e
staphylococus.

Prova de oxidase

Procedimentos

A prova de oxidase apresenta uma enzima citocromooxidade que faz parte do transporte e
metabolismos de nitrato em algumas bactérias.

Esta prova baseiou se no esfregaço da massa bacteriana utilizando se um palito estéril em uma
fita teste e aguardar alguns segundos. O resultado só era considerado positivo houvesse uma
coloração púrpura ate em 1 minuto. E na reacção negativa não se manifestava essa coloração.

Resultados

Não ocorreu nenhuma reacção isso significa que não apresentou coloração púrpura e
consideramos a reacção como negativa.

Prova de coagulase

O objectivo dessa prova foi de testar a capacidade da bactéria em formar coágulos no meio
contendo plasma devido a presença da enzima coagulase. E são usados principalmente para
diferenciar staphylococusareus (coagulase positiva)
Procedimentos

Para a realização desta prova inoculamos uma bactéria com ajuda da alça bacteriológica em um
tubo contendo plasma.

Resultado

Para verificarmos o resultado agitávamos o tubo e se o conteúdo permanecesse imóvel indicava

que houve coagulação e era positivo, se o conteúdo permanecesse inalterado indicava que não
houve coagulação e era negativo.

Sendo assim o nosso resultado durante a aula pratica permaneceu inalterado e significa que
tivemos um resultado negativo e umas das causa disso acreditamos nos que foi a demora para
introduzir na estufa.

Prova de optoquina

Procedimentos

Coloca se um disco de optoquina na superfície do agar sangue e pode se incluir no antibiograma.

Havendo impedimento do crescimento das colónias ao redor do disco de optoquina trata-se de

um teste positivo caso não haja crescimento considera se teste negativo.

Resultados

Na aula pratica conseguimos observar um crescimento das colónias ao redor do disco de

optoquina e assim sento obtivemos um teste positivo.

Prova de bacitracina

O teste de bacitracina e um teste de sensibilidade que tem por finalidade diferenciar

strephococuspyogenes de outras cepas do grupo.

Procedimentos

Utilizamos um disco impregnado com bacitracina, colocamos na superfície do meio de cultura

semeodo com microrganismos em estudo. Incubar a 37 graus celciospo 24 horas em
microeorofilia.

Resultados