Cultivo, Crescimento

e Reprodução
Microbiana

Prof Alexandre C. de Moura

 Cultivo Microbiano

• MEIOS DE CULTURA:
(mistura de nutrientes necessários ao m.o.) Fonte:www.cenapro.com.br/

• Devem levar em consideração: fonte de C, fonte

de energia e substrato doador de elétrons

* Quanto a Consistência:
• Líquidos: sem ágar.
• Semi-sólido: concentração de ágar entre 0,3 e
0,5%
• Sólido: concentração de ágar entre 1,5 a 2,0%
Fonte:biomedicinabrasil.com.br/
 * Quanto a Procedência

• Naturais: aqueles que não sofrem

alteração na sua composição
original

• Artificiais: São preparados pela

mistura de diversas substâncias
 Em relação Componente da fórmula

• Sintético: composição quimicamente definida.

• Complexo ou Não sintético: composição qualitativa ou quantitativa desconhecida.

 Em relação Componente da fórmula

Simples: base para outros meios de cultura. Ex: Água peptonada

Enriquecimento: privilegiar o crescimento de determinado grupo de bactérias.

Ex. Agar sangue ( cresce a maioria das bactérias e fungos)

Transporte: São meios que não contém fontes de Carbono e de Nitrogênio. Isto
faz com que as bactérias permaneçam viáveis, mas não podem multiplicar-se.
Ex: Salina glicerinada ( fezes)

Seletivo: inibem crescimento certos grupos bacterianos. Ex: MacConkey

crescem BGN

Diferencial: evidenciam atividades metabólicas de det. Gên. e espécies

bacterianas. Ex: Chapman ( identifica os estafilococos)
 Em relação Componente da fórmula

Seletivo

Verde Brilhante Bile

Lactosado

Agar MacConkey

Diferencial

Provas bioquimicas
 FATORES AMBIENTAIS

1- Temperatura

2- pH

3- Oxigênio

4- Salinidade
 FATORES AMBIENTAIS

1- Temperatura

• Psicotrofica: 0 a 7º C (Ótima acima 20º C)

ex: Acinetobacter, Citrobacter, Clostridium, Escherichia, etc...
• Psicrófilas: 12 a 17ºC (rio, lagos, oceanos e pólos)
ex: Flavobacterium
• Mesófilas: 28 a 37ºC (interesse médico)
ex: Escherichia coli, Streptococcus, Staphylococcus, Pseudomonas
• Termófilas: 57 a 63ºC (águas termais)
ex: Bacillus stearothermophillus
• Termófilas extremas ou hipertermófilas: > 83ºC (fundo dos oceanos→ vulcões
ex: Thermococcus celer, Pyrodictium brockii
• Temperatura ó ma→ melhor crescimento
FATORES AMBIENTAIS
Temperatura
 FATORES AMBIENTAIS
pH

Acidófilas: pH : 1 a 5
Neutrófilas: pH : 6 a 8
Alcalófilas: pH: ~ 9
pH maioria bactéria: pH 6,8 a 7,2
Fonte: courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/the-effects-of-ph-on-microbial-growth/
 FATORES AMBIENTAIS
Oxigênio
Aeróbias estritas: exigem oxigênio. Ex: Acinetobacter,
Pseudomonas aeruginosa
Microaerófilas: necessitam de pouco oxigênio.
Ex: Campylobacter jejuni, Azospirillum
Facultativas: crescem presença ou ausência
de oxigênio. Ex: Escherichia coli
Aerotolerantes: não utilizam o oxigênio.
Ex: Lactobacillus, Streptococcus faecalis
Anaeróbias estritas: oxigenio é letal. Ausência de
catalase e superóxido dismutase
Ex: Clostridium tetani e C. botulinum
Fonte: slideplayer.com.br/slide/7918752/
 FATORES AMBIENTAIS
Salinidade
• Não halófilas: [sal]< 0,05% Ex: Escherichia coli

• Halófilas: [sal] > 0,5% Ex: Vibrio

• Halotolerantes: [sal] > 6% Ex: Staphylococcus aureus

• Halófilas extremas: [sal] > 30% Ex: Halobacterium

salanarium
 Curva de crescimento: bactéria é semeada em
CRESCIMENTO BACTERIANO meio líquido de composição apropriada e
incubada em T adequada.
• Divisão binária→ aumento de todos
os componentes celulares
Nº total de
Tempo
células
0 1
• Tempo de geração: intervalo de 1 2

tempo requerido para que cada m.o 1,5

2
4
8
se divida 2,5 32
3 32
• Ex: E. coli – 20 minutos e 20 minutos3,5 64
Mycobacterium – 13 a 15 horas 4 128
4,5 256
20 minutos 5 512
5,5 1024
6 2048
6,5 4096
20 minutos
7 8192
... ...
10 1048576
 Curva de crescimento:

bactéria é semeada em meio líquido de

composição apropriada e incubada em T
adequada.

20 minutos

20 minutos

20 minutos

Fonte: pt.slideshare.net/gildocrispim/crescimento-bacteriano
 Fase Lag ou Latente

• Pode ou não existir

• Tende a ser longa: Inoculo pequeno;

Cultura pura; Meio e Temperatura são
desfavoráveis

• Período adaptação e intensa atividade

metabólica

• Ausência de divisão celular ( nº células

constantes), mas ↑ massa celular

• Período de síntese de enzimas para

adaptação a um novo meio
 Fase Logarítmica ou Exponencial

Multiplicação máxima e
constante

• Crescimento seda progressão

geométrica razão 2

• Dobra a cada geração: nº

indivíduos e a massa celular

• Final fase: escassez de

nutrientes; acúmulo de
metabólicos tóxicos e
ausência O2
 Fase Estacionária ou Plato

• Nº de células novas = nº de
células mortas
• Degradação de nutrientes de
reserva
• Final fase: pode ocorrer
formação de esporos

4- Fase Declínio ou Morte

• Nº de células mortas excedem o
nº de células novas
 Fase Declínio ou Morte

• Nº de células mortas excedem o

nº de células novas

• Muitos Metabolitos Tóxicos

• Poucos Nutrientes
• Pouco oxigênio
REPRODUÇÃO
REPRODUÇÃO ASSEXUADA
Bipartição ou Cissiparidade:

• Um indivíduo divide-se dando

origem a outros dois
geneticamente idênticos:

• duplicação do cromossomo:
• cada novo cromossomo fica
associado a um mesossomo
e entre eles verifica-se o
crescimento da célula;
• citocinese.

Fonte:www.todamateria.com.br/reproducao-assexuada/
Bipartição ou Cissiparidade
Parede celular
Duplicação do DNA
Membrana
plasmática

Molécula de DNA

Separação das células

Alexandre C de Moura
 REPRODUÇÃO SEXUADA
(Passagem ou troca de mateiral genético)
• Conjugação:
• passagem de material genético de uma bactéria
doadora para uma receptora através de fímbrias
sexuais (pilus F):
• reconhecimento e contato entre as células,
• transferência de DNA plasmidial.

• associada à presença de plasmídeos F:

• célula portadora de plasmídeo F  F+,
doadora;
• célula desprovida de plasmídeo F  F,
receptora.
• plasmídeos F integrados no cromossomo 
processo mediado por IS (Insertion Sequences):
• podem mobilizar a transferência de genes
cromossômicos;
• células portadoras de plasmídeos F integrados
 Hfr (High Frequency of Recombination);
 Conjugação

• Pode ser de dois tipos:

• entre células F+ e F  duas células
F+;
• entre células Hfr e F  uma célula
Hfr e outra F.
• Mecanismo provável de transferência
do DNA  círculo rolante:
• apenas uma das fitas é transferida
 fita complementar sintetizada
pela célula receptora.

Alexandre C de Moura
 Conjugação
F+ F- F+ F-

Mecanismo provável
de transferência do
DNA  círculo rolante:

apenas uma das fitas é

transferida  fita
complementar sintetizada
pela célula receptora.
 REPRODUÇÃO SEXUADA Transdução:

• mediada por vírus (bacteriófagos ou fagos)

Transdução Generalizada

• pode ser :

Generalizada (qualquer fragmento de

DNA)

Especializada (determinados genes,

passados por fagos temperados).
 Transformação
REPRODUÇÃO SEXUADA incorporação de DNA na forma livre

• ocorre quando uma

bactéria incorpora
moléculas de DNA
existentes em seu
meio e esta passa a
ter novas
características.
Fonte: Sadava et al (2009)
 Transformação - etapas
• Ligação do DNA: inicialmente reversível 
• Captação do DNA: DNA exógeno células competentes ligam o DNA com muito
mais eficiência que células não competentes
(1) liga-se a proteínas na superfície celular (1000 vezes mais).
(2), sendo em seguida absorvido ou tendo
uma de suas fitas degradadas por nucleases • Integração do DNA:
antes da absorção: • associação do DNA exógeno com proteínas
• Gram +  DNA captado como dupla de ligação e proteína RecA:
hélice e absorvido como fita simples • proteção contra degradação;
 uma das fitas é degradada. • recombinação.
• Gram   DNA absorvido como fita • degradação do que resta da fita simples e
dupla  apenas uma das fitas formação de um DNA híbrido.
participa do processo de
recombinação.

DNA exógeno (1) ao encontrar o receptor (2) interage com este, promovendo a ativação de vários genes (3, 4 e 5) dentre eles autolisinas,
nucleases e proteína de ligação ao DNA. Uma das fitas do DNA passa a ser captada pela célula, enquanto a outra é degradada (6). Ao
penetrar na célula a fita simples é protegida por proteínas. Caso este DNA encontre uma região complementar, a proteína RecA auxiliará
sua recombinação com o DNA endógeno (7).
Transformação Molécula de DNA circular
Fragmentos de
DNA doador Célula bacteriana

Lise celular Quebra

do DNA
Célula bacteriana Fragmentos de DNA
ligam-se à superfície
da célula receptora.

O fragmento de DNA é
incorporado à célula receptora.

O fragmento de DNA é integrado

ao cromossomo da célula receptora.

Célula transformada