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MOLECULAR AULA 01
1 nm -> 10 A
As preparações coradas são examinadas por
iluminação que atravessa a amostra.
O microscópio é composto por partes mecânicas e
ópticas.
A parte óptica consiste em três sistemas de lentes.
Condensador
Concentra a luz de uma lâmpada e projeta um
feixe luminoso na amostra.
A luz é projetada por uma lâmpada, refletida pelo
espelho e concentrada para ser direcionada a amostra.
A objetiva é responsável por receber a luz que transpassou a
amostra projetando para a ocular uma imagem aumentada a
qual é novamente ampliada pela objetiva em questão.
Para se calcular as imagens projetadas na retina deve-se
multiplicar o aumento da objetiva pelo aumento da ocular.
Ex :
É a menor distância entre duas partículas ou entre duas
linhas a qual permite que elas sejam vistas como dois
objetos separados.
O poder de resolução máximo de um microscópio óptico é
de 0,2 micrômetros, ou seja imagens aumentadas em até
1000 a 1500 vezes.
A grande responsável pelo poder de resolução é a
objetiva
Microscopia de contraste de fase-> é usada pra
verificar imagens de amostras não coradas utilizando-se
da difração da luz realçando os contrastes.
ESPERMATOZOIDES NÃO VIÁVEIS
Como funciona?
Os raios de luz passam por um filtro polarizador e com
isso estes raios luminosos saem vibrando em uma só
direção. Outro filtro é colocado para barrar o feixe
luminoso.
Caso o material a ser analisado possua naturalmente
uma estrutura organizacional definida ( colágeno,
micro túbulos, celulose), isso fará com que o feixe de luz
se reorganize em seu plano de vibração fazendo com
que a imagem obtida possua estruturas luminosas em
um plano de fundo escuro.
Microscopia de Polarização
Este tipo de microscopia foi desenvolvido para resolver
um problema comum em observações microscópicas, o
fato de não se obter amostras delgadas o suficiente,
acarretando assim, imagens sobrepostas.
Esta técnica consiste em:
Iluminação por um feixe estreito de luz.
A imagem coletada deve passar por um orifício muito
pequeno.
Consequentemente só a imagem originada do plano
focalizado alcançará o detector enquanto que as outras
imagens serão bloqueadas.
Funcionamento de um microscópio confocal.
Quando algumas substâncias são irradiadas por luz de
um certo comprimento de onda, elas emitem luz com
comprimento de onda mais longo. ( fenômeno conhecido
como fluorescência)
Geralmente neste método utiliza-se a luz ultravioleta
emitindo luz na porção visível do espectro fazendo com
que as substâncias fluorescentes apareçam brilhantes.
Este tipo de microscopia se divide em duas categorias:
De Transmissão
De Varredura
De Transmissão Permite altíssima resolução
( 0,1 nm) ampliação de 400.000 vezes.
Este tipo de ampliação é usada para analisar partículas
ou moléculas isoladas pois cortes delgados de células e
tecidos podem ser observados com detalhes em
aumentos de 120.000 vezes.
Assim como a refração da luz, os elétrons
também podem ser desviados por campos
eletromagnéticos.
1. Elétrons liberado pelo aquecimento do
Catodo ( filamento delicado de
tungstênio) em ambiente de vácuo.
2. Elétrons submetidos a uma diferença de
voltagem 60-120 kV
3. Os elétrons são atraídos pelo anodo
passando por um orifício sendo acelerado a
altas velocidades.
4. O feixe de elétrons passa por bobinas
elétricas ( lentes eletromagnéticas)
5. O feixe passa pela amostra e vai sendo
ampliado pelas demais lentes.
6. Nossas retinas não são capazes de detectar
elétrons e por isso é necessário um detector
o qual pode ser uma placa fluorescente,
um filme fotográfico ou uma câmera CDC.
A configuração tanto do
microscópio óptico
quanto do eletrônico são
muito parecidas, embora
no eletrônico o trajeto
dos elétrons se dá de
cima para baixo.
A imagem de uma amostra feita por microscópio
eletrônico sempre em preto- e-branco.
Autótrofos
Heterótrofos