QUESTIONÁRIO 2 - AVA

Pergunta 1 - A clonagem de um gene é um conjunto de técnicas que permite isolar uma

sequência de DNA e amplificá-la para uma aplicação desejada. As técnicas do DNA
recombinante são bastante usadas para esse fim, isso até o desenvolvimento das técnicas
atuais de amplificação. Sobre as técnicas atuais para amplificar sequencias de DNA, podemos
afirmar:

(A) As técnicas de DNA recombinante ainda são as mais utilizadas para amplificar
fragmentos de DNA, visto nenhuma outra técnica melhor foi desenvolvida.
(B) A técnica denominada reação em cadeia da polimerase – PCR vem substituindo os
métodos de DNA recombinante por serem mais rápidos, sensíveis e baratos.
(C) A amplificação do DNA é um procedimento ainda em experimentação, por isso
somente utilizado nos institutos de pesquisa científica.
(D) Na atualidade, a reação em cadeia da polimerase – PCR é uma alternativa ainda pouco
usada para amplificar DNA, devido a sua alta complexidade.
(E) Os processos para amplificar fragmentos de DNA ainda são pouco usados devido a sua
complexidade e alto custo.

Pergunta 2 - O avanço das tecnologias e métodos para aprimoramento das técnicas de PCR
permitiu o desenvolvimento de diversos tipos diferentes de PCR. Um dos tipos mais
proeminentes e mais utilizados é a PCR em tempo real. Essa técnica se caracteriza pelo fato de:

(A) A técnica em tempo real é pouco viável na prática, sendo por esse motivo pouco
aplicável em nenhuma área de atuação, se restringindo a pesquisa cientifica em
institutos apenas. A reação de amplificação do DNA é acompanhada de outro
fragmento de DNA com concentração conhecida, possibilitando a quantificação do
alvo em tempo real, por isso a sigla qPCR.
(B) Essa técnica se diferencia por não precisar de um DNA molde para amplificação, basta
apenas adicionar um DNA de concentração conhecida para ele possa ser quantificado
durante a reação.
(C) A PCR em tempo real segue o mesmo padrão da técnica normal, possibilitando apenas
à amplificação em tempo real, sem permitir a quantificação da molécula alvo.
(D) A qPCR recebe essa denominação, representada por essa sigla, pelo fato da polimerase
nessa reação ser especializada permitindo a quantificação do fragmento de
polimerase.
(E) A tecnologia de PCR em Tempo Real (qPCR) é uma evolução do método de PCR
(Polymerase Chain Reaction ou Reação em Cadeia da Polimerase). Seu princípio se
baseia na duplicação de cadeias de DNA “in vitro” que pode ser repetida diversas
vezes, gerando quantidade de DNA suficiente para realizar diversas análises. Com
apenas um único fragmento de DNA é possível reproduzir milhões de cópias.

Pergunta 3 - Até a década de 70 era ainda muito difícil de estudar a molécula de DNA,
sequenciá-la para analisar os genes de forma mais aprofundada. Essa questão só ficou melhor
após o desenvolvimento de técnicas modernas de sequenciamento, os dois métodos que
revolucionaram esse campo foram:

(A) O método de DNA recombinante foi revolucionário permitindo sequenciar um genoma

completa de forma rápida, eficaz e com baixo custo.
(B) O desenvolvimento das polimerases estáveis permitiu um sequenciamento mais
seguro e rápido, diferenciando-os das demais técnicas.
 (C) As técnicas de reação em cadeia da polimerase foi a única técnica capaz de
revolucionar os métodos de sequenciamento de DNA.
(D) A metodologias de sequenciamento de Gilbert e Sanger revolucionou a forma de se
fazer o sequenciamento de DNA.
(E) A técnica de sequenciamento de DNA sofreu pouco avanço nos últimos anos, muito
devido ao alto custo de sua aplicação.

Pergunta 4 - A reação de cadeia da polimerase – PCR, além de tecnologias para seu

funcionamento precisou do estudo e identificação de uma série de variáveis que impactam
diretamente na eficácia dessa técnica. Sobre as etapas fundamentais para realização da PCR é
correto afirmar:

(A) A PCR consiste em três etapas que são a desnaturação da proteína para abertura da
fita de DNA, ligação dos iniciadores sintéticos e ampliação através de enzima Taq
DNA polimerase.
(B) Para a realização da PCR não é necessário quebrar, ou seja, desnaturar a dupla fita de
DNA, sendo totalmente possível amplificar os fragmentos de DNA mesmo mantendo
sua estrutura de dupla hélice.
(C) Enzimas conhecidas como polimerases são as principais responsáveis pela amplificação
do DNA por adicionarem os pares complementares, por isso são os únicos fatores
indispensáveis para a PCR.
(D) Pelo fato de a PCR estar ainda em fase experimental ainda não há um protocolo
totalmente estabelecido para realização dessa técnica, sendo possível adaptar a
diversos outros protocolos.
(E) As etapas para realização da PCR não estão relacionadas com a obtenção das cópias de
DNA sendo essas dispensáveis para realização de todo o processo de amplificação.

Pergunta 5 - A partir da virada do século novas abordagens para o sequenciamento de DNA,

que romperam totalmente com os métodos de Sanger, foram desenvolvidas. Denominados de
sequenciamento de nova geração eles apresentam uma superioridade sobre as técnicas
anteriores, principalmente evidenciados por mudanças como:

(A) O que diferencia os sequenciamentos de nova geração dos anteriores é a quantidade

de bases que cada um pode obter, sendo as outras características preservadas iguais
as técnicas anteriores.
(B) As mudanças que as técnicas na nova geração apresentam é somente o baixo custo, já
que o método de sequenciamento é apenas uma adaptação da metodologia de
Sanger.
(C) A velocidade e quantidade de etapas, a baixa concentração das amostras de DNA e o
custo extremamente baixo são as mudanças mais significativas das tecnologias de
nova geração.
(D) A única mudança realmente significativa das técnicas de nova geração foram as baixas
concentrações nas quais as técnicas podem ser realizadas, tendo a possibilidade de
usar pequenas quantidades de DNA.
(E) As técnicas de nova geração só receberam esse nome pois utilizam sequenciamento
automatizado com base em marcadores fluoresecentes de baixo custo e alta
especificidade.
Pergunta 6 - Os métodos automatizados aprimoraram a técnica de Sanger trazendo um
desenvolvimento ainda maior dos processos de sequenciamento do DNA. Entre os fatores que
tornam o método automatizado melhor do que o tradicional podemos citar:

(A) O uso de marcadores fluorescente permitiu um sequenciamento mais seguro que o

radioativo e mais rápido por ser feito através de leitura automatizada.
(B) A única característica que a diferencia do método de Sanger é a utilização de
marcadores fluorescentes.
(C) O alto custo da automatização é um fato que impossibilitou o uso desse tipo de técnica
em larga escala.
(D) O sequenciamento automatizado rompeu totalmente com o método de Sanger
aplicando procedimentos totalmente novos.
(E) O uso de marcadores radioativos é característico das técnicas automatizadas,
permitindo uma leitura mais eficaz.

Pergunta 7 - O conhecimento do código genético, caracterizado pelas sequências especificas

de nucleotídeos, foi fundamental para o desenvolvimento das tecnologias do DNA. Encontrar
ferramentas que fragmentassem esse DNA nessas sequências especificas para permitir a
manipulação desse código foi imprescindível na época. Sobre as ferramentas que
possibilitaram isso é correto:

(A) As enzimas de restrição se mostraram ferramentas importantíssimas para utilização

como tesouras moleculares, porém sua obtenção a partir de bactérias torna essas
enzimas não aplicáveis em seres humanos.
(B) A descoberta de tesouras moleculares não é uma prioridade, na atualidade, para o
desenvolvimento da tecnologia do DNA, visto que o grande enfoque no momento e
sequenciar e conhecer os genes humanos.
(C) A descoberta de uma classe de enzimas bacterianas denominadas enzimas de
restrição, capazes de cortar o DNA em sequencias altamente específicas, foi um
marco no desenvolvimento das tecnologias do DNA.
(D) O homem ainda busca o desenvolvimento de ferramentas que consigam clivar o DNA
em regiões especificas e que não atuem de forma aleatória como a maioria das
enzimas atuais.
(E) Um grande salto para as tecnologias do DNA foi a descoberta das enzimas bacterianas
conhecidas como enzimas de restrição, porém essa técnica é pouco aplicável por
cortar apenas sequencias curtas.

Pergunta 8 - O método de PCR já é bem estabelecido com uma técnica de vanguarda na

biologia molecular e que apresenta muitas vantagens em relação ao processo anterior de
amplificação do DNA, por isso sendo aplicado em vários campos do conhecimento. Sobre o
diferencial que essa técnica apresenta podemos citar:

(A) A rapidez com que é feita a replicação do DNA através da PCR é seu grande diferencial,
contudo a seletividade dessa técnica ainda é muito baixa.
(B) O processo para amplificar DNA com base na PCR é diferente do anterior pois é feito
uma parte in vitro e outra com a utilização de células.
(C) A PCR é capaz de replicar sequencias do DNA in vitro sem a necessidade do uso de
células e com grande rapidez e seletividade.
(D) A grande diferença da técnica de PCR é que ela capaz de replicar grandes pedaços de
DNA com o auxílio de células especificas.
 (E) O grande diferencial é apenas poder realizar a replicação in vito, sendo um processo
tão demorado e custoso como os anteriores.

Pergunta 9 - A manipulação do DNA envolve um conjunto de técnicas que estão inseridos na

disciplinada denominada biologia molecular, e se empenham em estudar e desenvolver formas
de isolar, clonar, manipular e estudar o DNA dos organismos vivos. Em relação ao histórico
desse procedimento realizado pelo homem podemos afirmar:

(A) Através da manipulação do DNA a ciência deu um grande salto do entendimento do

código genético, contudo o custo e complexidade das técnicas fizeram com que elas
não fossem levadas adiante.
(B) As técnicas de manipulação são extremamente recentes só sendo capazes de serem
desenvolvidas após o conhecimento detalhado da estrutura e composição do DNA e
dos genes como um todo.
(C) O homem, apesar do desenvolvimento tecnológico na área de manipulação genética,
só consegue atualmente isolar um gene para estudá-lo, não tendo esse procedimento
uma aplicação muito prática na sociedade.
(D) A manipulação do DNA pelo homem não é um processo recente sendo realizado há
muitos séculos, através de cruzamentos seletivos para obtenção de características o
homem “domesticou” várias espécies.
(E) A tecnologia do DNA é a composição de técnicas que permitem o homem apenas
estudar o DNA e os genes nos ambientes acadêmicos, dentro dos institutos de
pesquisa.

Pergunta 10 - O sequenciamento do genoma de organismos vivos dependeu de uma série de

fatores que vão desde o desenvolvimento de tecnologias até a evolução do conhecimento
sobre biologia molecular e das características intrínsecas da molécula de DNA. O estudo do
genoma contribui:

(A) Na identificação de genes capazes de causar doenças genéticas, no entendimento

dos processos evolutivos e na medicina através da prevenção, diagnóstico e formas
de tratamento para diversas doenças.
(B) O sequenciamento de DNA genômico por completo, por ser extremamente complexo,
ainda não foi totalmente possível, sendo necessário maior investimento e
desenvolvimento nessa área.
(C) Apenas na identificação de genes mutantes capazes de causar doenças genéticas em
humanos, sendo outras aplicações que não sejam essas impossíveis de serem
desenvolvidas.
(D) A genômica é uma área da ciência focada no estudo da natureza química dos genes
dos diversos organismos vivos, sem se preocupar com a ordem das sequencias nas
quais eles estão dispostos.
(E) No diagnóstico de microrganismos patogênicos que impactam a saúde, sendo o estudo
do genoma focado somente nesta área da medicina, visto seu potencial de aplicação.