Gelificação termicamente e com resposta ao pH de

nanoemulsões estabilizadas por surfactantes de ácidos fracos

As nanoemulsões são amplamente utilizadas em aplicações como em produtos

alimentícios, ingredientes farmacêuticos e cosméticos. Além disso, as
nanoemulsões têm sido um sistema coloidal modelo devido à sua facilidade de
síntese e à flexibilidade nas formulações que permitem projetar os potenciais
entre gotas e, assim, ajustar racionalmente as microestruturas e propriedades
reológicas do material. Neste artigo, estudamos um sistema de nanoemulsão
no qual as interações entre gotículas são moduladas por temperatura e pH.

Desenvolvemos uma suspensão de nanoemulsão na qual as gotículas são

estabilizadas por surfactantes de ácidos fracos cujo estado de carga pode ser
controlado de forma independente por temperatura e pH, levando a uma
repulsão eletrostática responsiva. Além disso, o segmento adicional de poli
(etilenoglicol) (PEG) no surfactante dá origem a uma atração responsiva à
temperatura entre as gotículas via associação PEG-PEG e interação iondipolo.
A interação dessas três interações dá origem a tendências não monotônicas
nas propriedades e estruturas dos materiais em função da temperatura. O
mecanismo subjacente que resulta nessas tendências é obtido caracterizando
cuidadosamente as gotículas de nanoemulsão e estudando as interações
moleculares. Essa compreensão mecanística também fornece orientação para
modular o potencial entre gotículas usando pH e força iônica. Além disso, a
compreensão molecular do surfactante de ácido fraco também lança luz sobre
a desestabilização das gotículas de nanoemulsão desencadeada por uma
mudança no pH. O controle da competição de interações atraentes e repulsivas
usando estímulos externos abre a possibilidade de projetar materiais macios
complexos baseados em nanoemulsão com estruturas controláveis e
propriedades reológicas.

1. Introdução

As nanoemulsões são suspensões líquido-líquido cineticamente estáveis, em

que um líquido imiscível se dispersa em outro com gotas de tamanho da ordem
de 10–100 nm. O tamanho da gota em nanoescala leva a uma estabilidade
robusta, grande área interfacial e transparência óptica, o que tornou as
nanoemulsões um tópico popular no campo da ciência coloidal e de interface
nas últimas duas décadas [1]. Além disso, os pequenos domínios lipofílicos
podem ser utilizados em aplicações como nano-reatores para polimerizações
[2,3] ou nano-cargas em produtos alimentícios [4-6]. A outra característica
importante das nanoemulsões é a facilidade de síntese em que novas
formulações podem ser facilmente sintetizadas. Tal flexibilidade permite aos
pesquisadores modular as interações entre as gotas e, consequentemente, as
propriedades do material, tornando a nanoemulsão um material versátil em
diversos campos, como sensores [7,8], cosméticos [9] e design de materiais
complexos [10]; e um sistema modelo atraente para estudar o comportamento
coloidal, como reologia de suspensão [11], automontagem [12] e gelificação
[13].

As nanoemulsões que sofrem gelificação têm atraído muita atenção tanto em

estudos fundamentais [13-15] quanto em aplicações práticas [16,17]. A
gelificação de nanoemulsões, ou para suspensões coloidais gerais, é
controlada pela modulação das interações entre as gotículas, e a gelificação
pode ser induzida pela manipulação de interações atrativas ou repulsivas. Para
sistemas de gelificação impulsionados por atração, uma maneira comum de
induzir a gelificação é por meio de uma interação de depleção. Ao adicionar
depletantes à fase contínua, essas espécies não adsorventes são excluídas da
vizinhança das gotículas, levando a um desequilíbrio na pressão osmótica.
Essa pressão osmótica atua como uma força atrativa líquida entre as gotas, em
última análise, dando origem à gelificação [18,19]. Diferentes depletantes,
incluindo micelas de surfactante [20,21] e polímeros não adsorventes [17], têm
sido usados para obter nanoemulsões gelificantes.

Por outro lado, a gelificação das nanoemulsões também pode ser induzida pela
modulação das repulsões. Talvez a abordagem mais amplamente vista seja a
triagem da repulsão eletrostática pela adição de eletrólitos em suspensões de
nanoemulsão com carga estabilizada. A adição de eletrólitos reduz a escala de
comprimento efetiva da repulsão eletrostática, levando ao surgimento de um
mínimo secundário no potencial interativo e eventualmente induzindo a
gelificação [22,23]. Outro exemplo que utiliza a repulsão eletrostática, a
chamada gelificação repulsiva [21], para obter géis de nanoemulsão é através
do aumento da fração efetiva do volume de óleo em sistemas de emulsão
estabilizados eletrostaticamente [12,24]. A fração de volume de óleo efetiva (/
e) é calculada considerando a fração de volume de óleo real (/ a) e o volume
excluído resultante da nuvem de carga repulsiva que se estende da interface
óleo / água (ou seja, comprimento de Debye, j 1), e / e = / a (1 + j 1 / a) 3 onde
a é o raio da gota. À medida que o tamanho da gota diminui, / e aumenta.
Quando / e é maior do que o limite máximo de interferência aleatória, um gel de
nanoemulsão viscoelástica é obtido.

Nosso grupo tem projetado e estudado sistemas de nanoemulsão em que a

gelificação é desencadeada por um estímulo externo - um aumento na
temperatura [25-27]. Ao compreender as interações entre gotículas em nível
molecular, projetamos várias nanoemulsões de gelificação térmica nas quais o
sistema experimenta uma transição sol-gel em temperaturas elevadas. Por
exemplo, ao adicionar oligômeros telecélicos onde ambas as extremidades da
estrutura hidrofílica são funcionalizadas com frações hidrofóbicas para a fase
contínua, os oligômeros agem para formar uma ponte sobre as gotículas ao
aumentar a temperatura e, por fim, levam à gelificação [25,28]. Por outro lado,
também projetamos outro mecanismo de gelificação térmica incluindo
oligômeros anfifílicos não iônicos em nanoemulsões de óleo em água com
carga estabilizada [26]. Em temperaturas elevadas, os oligômeros não iônicos
substituem os surfactantes iônicos nas gotículas. Esse deslocamento leva a
uma diminuição dramática na repulsão eletrostática e dá origem à gelificação.
Finalmente, também desenvolvemos uma nanoemulsão gelificante adicionando
uma pequena quantidade de copolímeros Pluronic à fase contínua. Nossa
hipótese é que a gelificação em temperaturas elevadas é induzida através da
formação de micelas de copolímero e o aumento de / e pela adsorção de
copolímeros nas gotas [27].

No geral, esses sistemas responsivos a estímulos externos aumentam a

capacidade de processamento e manipulação de materiais, o que beneficia não
apenas a pesquisa fundamental, como estudar o efeito da história de
processamento nos comportamentos materiais [29], mas também a prática
aplicações como o design de hidrogéis estruturados hierárquicos [16]. No
entanto, tanto para estudos fundamentais quanto para aplicações, seria
desejável desenvolver sistemas que respondessem a outro estímulo além da
temperatura. Por exemplo, sistemas que respondem à mudança de pH podem
ser utilizados para produtos para a pele [30,31] ou recuperação aprimorada de
óleo [32].

Aqui, relatamos um sistema de nanoemulsão gelificante no qual as

propriedades do material respondem à temperatura e ao pH. A nanoemulsão é
sintetizada por meio de uma rota de baixa energia e as gotículas são
estabilizadas com um surfactante de ácido fraco contendo um segmento de
PEG e um grupo carboxila. A desprotonação do grupo carboxila influencia
muito o comportamento da nanoemulsão. O comportamento do material é
caracterizado por reometria e microscopia confocal [33-38]. Este novo sistema
de nanoemulsão mostra um comportamento não intuitivo que é muito diferente
de todos os sistemas anteriores de gelificação térmica que nosso grupo
estudou. Em temperaturas elevadas, os módulos viscoelásticos primeiro
aumentam, depois diminuem e, finalmente, aumentam novamente, e as
microestruturas da nanoemulsão montada também mostram a mesma
tendência não monotônica. Essa tendência não intuitiva é explicada pelo
aumento não monotônico na atração líquida devido à competição entre
interações repulsivas e atrativas, que são investigadas medindo o potencial
zeta das gotículas de nanoemulsão e comparando nosso sistema com os
estudos da literatura. Nossa hipótese é que a associação entre PEG
segmentos e grupos carboxilato carregados são responsáveis pelo mudanças
nas interações entre gotas. Armados com essa compreensão mecanicista,
mostramos ainda que as propriedades reológicas termicamente responsivas da
nanoemulsão podem ser moduladas através da mudança de pH e força iônica.
Além disso, com o conhecimento da geometria molecular dos surfactantes,
também demonstramos que as gotículas de nanoemulsão podem ser
desestabilizadas pela alteração do pH do sistema. Este trabalho abre a
oportunidade de projetar sistemas de nanoemulsão responsivos a múltiplos
estímulos controlando as porções químicas dos surfactantes adsorvidos nas
gotículas.

2.2. Síntese de nanoemulsão

A nanoemulsão de óleo em água continha gotículas IM (fração em peso / =

12,5% em peso) estabilizadas por uma mistura de surfactantes à base de ácido
carboxílico composto de ácido carboxílico laureth-11 (12,5% em peso) e ácido
láurico (3,13% em peso), e um co-surfactante PEG400 (9,38% em peso) [27]
suspenso na água desionizada. O equilíbrio hidrofílico-lipofílico (HLB) do
surfactante misto é de 13.

Também demonstramos que é importante usar o co-surfactante para estabilizar

a nanoemulsão medindo o tamanho das gotículas ao longo do tempo em várias
concentrações de PEG400 (Fig. S1)]

Usamos o método de Composição de Inversão de Fase (PIC) para sintetizar as

nanoemulsões que fornecem uma rota de baixa energia para a obtenção de
gotas nanométricas [1]. Para a síntese, uma mistura homogênea de óleo
contendo IM, surfactantes e co-surfactantes foi preparada primeiro. Em
seguida, a água desionizada foi adicionada gota a gota na mistura de óleo sob
uma agitação constante usando uma barra de agitação magnética. A
velocidade de agitação foi mantida a 1100 rpm ao longo da síntese. Essa
abordagem é chamada de método PIC, pois a fase contínua é adicionada à
fase dispersa. Durante a adição, em algum ponto crítico conhecido como ponto
de inversão de fase, a interface óleo-água experimenta uma tensão interfacial
ultrabaixa que facilita a formação de gotículas nanométricas [39,40]. Medimos o
tamanho da gota e a polidispersidade usando dispersão de luz dinâmica
(90Plus PALS, Brookhaven Instruments) após diluir a nanoemulsão para / =
0,5% em peso usando água desionizada.

Em nosso sistema, o diâmetro da gota resultante é de 20 nm com

polidispersidade de 0,08.

2.3. Medição de pH
O pH das nanoemulsões foi medido usando um medidor de pH (Orion StarTM
A215, ThermoFisher Scientific) equipado com um eletrodo OrionTM ROSS
UltraTM Refillable pH / ATC TriodeTM. Todas as medições foram realizadas a
20 C. Para os diferentes valores de pH estudados neste trabalho, o pH foi
ajustado com NaOH. Os valores de pH relatados foram obtidos medindo o pH
de toda a suspensão de nanoemulsão (tanto a fase contínua quanto a gotas).

2.4. Caracterização reológica

As propriedades reológicas da nanoemulsão foram medidas usando um

reômetro controlado por estresse (DHR-3, instrumento TA) equipado com um
cone superior de 2 40 mm e uma placa inferior Peltier controlada por
temperatura. Para evitar a evaporação da amostra, uma armadilha de solvente
foi usada e algumas gotas de água foram adicionadas no topo do cone. Antes
de cada medição, um procedimento de condicionamento foi aplicado à
amostra: uma etapa de pré-cisalhamento foi aplicada realizando uma rotação
constante a uma velocidade de 10 rad / s por 30 s, seguida por um período de
60 segundos em que a amostra permaneceu quiescente em o reômetro. Toda
a etapa de condicionamento foi mantida a 20,0 C para eliminar qualquer
possível efeito da história térmica [29]. Na etapa de pré-cisalhamento,
nenhuma gelificação ou automontagem da suspensão de nanoemulsão é
obtida (como mostrado nas Figs. 1 e 2, onde a reologia é relatada, e na Fig. 3,
onde as imagens confocais são relatadas). Portanto, esta etapa de pré-
cisalhamento não tem influência nas estruturas do gel e nas propriedades
reológicas associadas quando a temperatura é aumentada.

As medições de varredura de frequência e rampa de temperatura foram

realizadas usando cisalhamento oscilatório de pequena amplitude (SAOS) em
uma tensão de cisalhamento c = 0,05%. Para medições de varredura de
frequência, o módulo de armazenamento, G0, e o módulo de perda, G00, em
várias temperaturas, T, com frequência angular x = 1–100 rad / s foram
medidos.

Antes de cada medição, a temperatura foi mantida na meta T por 30 min. Para
medições de temperatura-rampa, G0 e G00 foram medidos em função da
temperatura em uma frequência angular fixa x = 25 rad / s. As gotículas de
nanoemulsão permanecem estáveis ao longo da janela de temperatura
experimental, monitorando o tamanho das gotículas em função da temperatura
(Fig. S2). Para cada medição, a nanoemulsão fresca foi carregada no
reômetro.
2,5. Potencial zeta

Potenciais zeta das gotículas de nanoemulsão com diferentes temperaturas e

pH foram medidos por um zetasizer Brookhaven Instruments 90Plus PALS.
Antes de cada medição, a nanoemulsão mãe (/ = 12,5% em peso) foi
recentemente diluída para / = 0,5% em peso. Para cada medição, a
nanoemulsão fresca foi carregada.

2.6. Microscopia confocal

As microestruturas da nanoemulsão montada em várias temperaturas foram

capturadas usando um microscópio confocal de varredura a laser (LSM 700,
Zeiss) equipado com uma objetiva de imersão em óleo 63. A temperatura foi
controlada usando um aquecedor objetivo (OW-1, Warner Instruments) e um
estágio de aquecimento de microscópio (Heating Insert P S1, Zeiss) equipado
com um controlador de temperatura (TempModule S1, Zeiss). A temperatura foi
calibrada independentemente por um termômetro digital adicional.

Para visualização, IM foi marcado com fluorescência dissolvendo vermelho do

Nilo em IM a uma concentração de 0,1 mg / g antes da síntese da
nanoemulsão. A resolução espacial do microscópio confocal é de 200 nm.
Portanto, as gotículas de nanoemulsão individuais (faixa de tamanho de 20 a
110 nm) não podem ser detectadas. Para visualizar as microestruturas, a
nanoemulsão foi carregada em uma câmara de vidro em forma de cilindro feita
em casa usando espaçadores Secure-SealTM. A câmara resultante tem uma
altura de 500 lm e um diâmetro de 9 mm. Um pequeno diâmetro garante a
homogeneidade térmica em toda a amostra [41]. Antes de as imagens serem
tiradas, a câmara cheia de nanoemulsão foi montada na placa de aquecimento
no alvo T por 30 min. Amostras frescas foram usadas para cada caracterização
reológica e imagem confocal (ou seja, as amostras após as medições
reológicas foram descartadas e não reutilizadas para imagem confocal).

3 Resultados e discussão
3.1. Nanoemulsões termicamente responsivas

Nossa nanoemulsão é um líquido em temperatura ambiente, mas muda para

um gel viscoelástico após o aquecimento. No entanto, quando a temperatura
(T) aumenta ainda mais, a resistência mecânica diminui e aumenta novamente.
Nós estudamos quantitativamente este interessante comportamento de fase
usando a reometria de cisalhamento oscilatório de pequena amplitude. A Fig. 1
mostra o esquema da suspensão de nanoemulsão e os módulos viscoelásticos
dinâmicos (módulo de armazenamento G0 e módulo de perda G00) em função
da frequência angular (x) em temperaturas elevadas. Em T = 20 e 25 C, a
nanoemulsão mostra um comportamento líquido onde G00 (x) ~ x1 [42].
Quando T é aumentado, G0 (x) e G00 (x) aumentam e o sistema sofre um

transição sol-gel. Eventualmente, G0 (x) é maior do que G00 (x), sugerindo que
a nanoemulsão fez a transição de um líquido na sala

temperatura para um gel viscoelástico em T = 35 C.

Surpreendentemente, G0 e G00 diminuem à medida que T aumenta ainda

mais, conforme mostrado na Fig. 1C. A tendência dos módulos viscoelásticos
em função da temperatura pode ser vista mais claramente na Fig. 2. A
diminuição em G0 e G00 permanece até T atingir 45 C. No entanto, quando T é
aumentado ainda mais, G0 e G00 aumentam novamente, e tal aumento
permanece dentro de nossa janela de temperatura experimental, como
mostrado na Fig. 1D e Fig. 2. Observamos também que a força do gel desta
nanoemulsão (o maior G0 é ~ 100 a 101 Pa) é significativamente menor do que
as nanoemulsões de gelificação térmica anteriores que nosso grupo
desenvolveu (G0 ~ 104 a 105 Pa) [25-27]. Os dados relatados na Fig. 2, bem
como na Fig. 1, estão todos acima do limite de torque do reômetro.

Os dados que não podem ser medidos não são apresentados (por exemplo, o
módulo de armazenamento G0 em T = 20 e 25 C). Também mostramos que a
tendência na Fig. 2 é estatisticamente significativa, pois a mudança nos
módulos viscoelásticos está bem acima dos erros padrão (Fig. S3).

3.2. Visualização direta de microestruturas

As propriedades reológicas dos materiais são ditadas por suas microestruturas.
Aqui, a microestrutura da nanoemulsão em função da temperatura foi
capturada por microscopia confocal.

Imagens confocais representativas de nanoemulsões auto-montadas são

mostradas na Fig. 3. As gotículas de óleo são marcadas com fluorescência
usando vermelho do Nilo. Em temperatura ambiente, a imagem mostra um
borrão vermelho, sugerindo que as gotículas de nanoemulsão estão
homogeneamente dispersas na fase contínua. Isso ocorre porque o limite de
resolução de nossa configuração de microscopia confocal é de 200 nm, no qual
gotículas únicas (diâmetro = 20 nm) não podem ser visualizadas. Quando T é
aumentado para 30 C, uma rede conectada começa a se formar,
correspondendo à transição sol-gel reológica observada na Fig. 1B.

Embora seja difícil obter imagens reconstruídas em 3D das microestruturas

montadas por microscopia confocal devido à turbidez, as imagens 2D sugerem
que a rede é muito esparsa. Esta observação é semelhante ao nosso trabalho
anterior em uma nanoemulsão hermallygelling diferente, que também mostra
uma rede de gel muito esparsa em imagens confocais 2D perto do ponto de gel
[41]. Em T = 35 C, uma rede de gel bem conectada é observada, que é
novamente consistente com o gel viscoelástico da Fig. 1B.

Quando T é continuamente aumentado para 40 e 45 C, a rede de gel parece se

dividir em domínios separados. A rede quebrada é exibida como estruturas
semelhantes a nuvens na Fig. 3 em T = 40 e 45 C. Esta quebra visual da rede
é consistente com a resposta reológica mostrada na Fig. 2, onde os módulos
viscoelásticos diminuem quando T é aumentado de 35 para 45 C. Finalmente,
quando T é aumentado para 50 C, notavelmente, a nanoemulsão novamente
monta em uma rede de gel bem conectada, correspondendo à recuperação dos
módulos viscoelásticos na Fig. 2 quando T é aumentado para 50 C e acima.

3.2. Visualização direta de microestruturas

As propriedades reológicas dos materiais são ditadas por suas microestruturas.

Aqui, a microestrutura da nanoemulsão em função da temperatura foi
capturada por microscopia confocal.

Imagens confocais representativas de nanoemulsões auto-montadas são

mostradas na Fig. 3. As gotículas de óleo são marcadas com fluorescência
usando vermelho do Nilo. Em temperatura ambiente, a imagem mostra um
borrão vermelho, sugerindo que as gotículas de nanoemulsão estão
homogeneamente dispersas na fase contínua. Isso ocorre porque o limite de
resolução de nossa configuração de microscopia confocal é de 200 nm, no qual
gotículas únicas (diâmetro = 20 nm) não podem ser visualizadas. Quando T é
aumentado para 30 C, uma rede conectada começa a se formar,
correspondendo à transição sol-gel reológica observada na Fig. 1B.

Embora seja difícil obter imagens reconstruídas em 3D das microestruturas

montadas por microscopia confocal devido à turbidez, as imagens 2D sugerem
que a rede é muito esparsa. Esta observação é semelhante ao nosso trabalho
anterior em uma nanoemulsão hermallygelling diferente, que também mostra
uma rede de gel muito esparsa em imagens confocais 2D perto do ponto de gel
[41]. Em T = 35 C, uma rede de gel bem conectada é observada, que é
novamente consistente com o gel viscoelástico da Fig. 1B.

Quando T é continuamente aumentado para 40 e 45 C, a rede de gel parece se

dividir em domínios separados. A rede quebrada é exibida como estruturas
semelhantes a nuvens na Fig. 3 em T = 40 e 45 C. Esta quebra visual da rede
é consistente com a resposta reológica mostrada na Fig. 2, onde os módulos
viscoelásticos diminuem quando T é aumentado de 35 para 45 C. Finalmente,
quando T é aumentado para 50 C, notavelmente, a nanoemulsão novamente
monta em uma rede de gel bem conectada, correspondendo à recuperação dos
módulos viscoelásticos na Fig. 2 quando T é aumentado para 50 C e acima.

3.3. Mecanismo proposto de gelificação por nanoemulsão

A gelificação coloidal é o resultado da competição entre interações atrativas e

repulsivas. As suspensões coloidais, assim como as nanoemulsões, gelificam
quando a interação atrativa supera a interação repulsiva. Portanto, a tendência
não intuitiva nos módulos viscoelásticos de nossa nanoemulsão (Figs. 1 e 2)
sugere um aumento não monotônico na atração líquida devido à competição
entre as interações atrativas e repulsivas entre as gotículas de nanoemulsão
em função da temperatura. No texto a seguir, discutiremos as fontes de ambas
as interações.

3.3.1. Interação repulsiva

Em nosso sistema, as gotículas de nanoemulsão são estabilizadas por

surfactantes de ácido carboxílico (12,5% em peso de ácido láurico-11 e 3,13%
em peso de ácido láurico). À temperatura ambiente, os surfactantes de ácidos
fracos são descarregados e os segmentos de PEG nas gotículas fornecem a
repulsão estérica que dá origem à estabilidade coloidal da nanoemulsão. No
entanto, essa repulsão estérica provavelmente não é responsável pelo
aumento da interação repulsiva em função da temperatura, já que a densidade
do surfactante não é modulada. Portanto, hipotetizamos que a dissociação dos
ácidos carboxílicos leva a uma repulsão eletrostática dependente da
temperatura entre as gotas, como ilustrado na Fig. 4A. Para validar essa
hipótese, medimos o potencial zeta (f) das gotículas de nanoemulsão em
função da temperatura, e o resultado é mostrado na Fig. 5A. Em temperatura
ambiente, as gotículas estão quase sem carga, sugerindo que a dissociação do
grupo carboxila é insignificante. No entanto, à medida que a temperatura
aumenta para 35 C, uma diminuição em f é observada. Tal diminuição indica
que a dissociação do grupo carboxila é promovida quando a temperatura é
aumentada, e o valor negativo de f fortemente suporta que é o grupo
carboxilato residual na gota que dá origem ao carga superficial e, portanto, o
aumento na magnitude de f, do gotículas de nanoemulsão. Consistente com
nossos resultados, foi relatado na literatura que a dissociação de ácidos
carboxílicos [43-46], bem como outros ácidos fracos [47], é intensificado em
níveis elevados temperaturas.

A tendência de diminuição de f em função da temperatura é consistente com a

tendência dos módulos viscoelásticos. Na Fig. 5A, f permanece quase zero de
T = 20 a 30 C, começa a diminuir de T = 30 a 35 C, experimenta uma grande
diminuição de T = 35 a 45 C e finalmente atinge um platô quando T 45 C. Esta
tendência em f é consistente com os módulos viscoelásticos na Fig. 2.
Começando com a temperatura ambiente, primeiro, G0 e G00 experimentam
um aumento inicial. Durante este período inicial, a repulsão eletrostática deve
ser desprezível, uma vez que f é quase zero, e o aumento nos módulos
viscoelásticos e a formação da rede de gel montada (Fig. 3) são provavelmente
devidos a

o aumento da interação atrativa entre as gotas. Os detalhes

da atração será discutido mais tarde. Em seguida, f sofre uma diminuição

dramática, daí o aumento da repulsão eletrostática,

quando T é aumentado para 45 C, e os módulos viscoelásticos diminuem

dentro da mesma faixa de temperatura na Fig. 2. Essa diminuição em G0 e
G00 sugere que a repulsão supera a atração. Finalmente, conforme a
temperatura aumenta ainda mais, f atinge um platô, levando a uma repulsão
eletrostática quase constante. Neste regime, G0 e G00 encontram seu segundo
aumento e a rede de gel é novamente exibida (Fig. 3), indicando que a
interação atrativa supera a repulsão eletrostática no regime de alta
temperatura, como no período inicial (T = 20 a 30 C).

Até agora, demonstramos que nosso sistema de nanoemulsão tem uma

repulsão eletrostática que é modulada pela temperatura.

Ao comparar as tendências no potencial zeta com as tendências observadas

na medição reológica, propomos que deve haver interações atraentes
concorrentes. Na próxima seção, discutiremos a origem das interações
atrativas em nosso sistema.
3.3.2. Interação atraente

Ao considerar os constituintes de nossa nanoemulsão, acreditamos que

existem duas fontes que são responsáveis pela interação atrativa entre as
gotículas: (1) a interação íon-dipolo entre o grupo carboxilato carregado e o
segmento de poli (etilenoglicol) (PEG) em ácido carboxílico laureth-11 e (2) a
associação entre PEGs nos ácidos carboxílicos laureth-11 entre gotículas. Um
diagrama esquemático de ambos os mecanismos é mostrado na Fig. 4B. Para
esclarecimento, PEG livre na fase contínua (Mw = 400 g / mol) é denotado
como PEG400, e o PEG no surfactante de ácido fraco (Mw 400-440 g / mol) é
denotado como PEGw.

A interação íon-dipolo (interação dipolo induzida por íon) resulta da interação

entre o grupo carboxilato iônico e PEGw nos ácidos carboxílicos laureth-11 não
carregados. Conforme mostrado na Fig. 5A, o aumento da temperatura leva à
dissociação do grupo carboxila do surfactante adsorvido na gota.

No entanto, como discutiremos o efeito do pH no sistema posteriormente,

apenas uma fração dos grupos carboxila nas gotículas de nanoemulsão é
desprotonada, mesmo em altas temperaturas. Portanto, o PEGw nos ácidos
carboxílicos laureth-11 indissociados em uma gota pode interagir com os
grupos carboxilato iônico na outra gota (Fig. 4B), dando origem a uma atração
líquida entre as gotas. Na verdade, a interação íon-dipolo entre os grupos
principais carregados dos surfactantes e as porções hidrofílicas não carregadas
dos polímeros tem sido extensivamente estudada na literatura [48]. Técnicas
experimentais, incluindo reometria [49], espalhamento de nêutrons [50],
calorimetria de titulação isotérmica [51,52], RMN [52] e titulação
potenciométrica [53], bem como modelos termodinâmicos [54] e simulações
[55], têm fortemente apoiou o conceito de associação íon-dipolo.

Até onde sabemos, a interação íon-dipolo entre grupos carboxilato carregados

e PEGs não foi sistematicamente estudada na literatura. No entanto, foi
demonstrado que a interação íon-dipolo não ocorre apenas no conhecido
sistema SDS / PEG [50-53,55], mas também em outros sistemas onde
polímeros sem carga, como PEG ou poli (Nvinilpirrolidona) , são misturados
com espécies carregadas, como íons livres e brometo de cetiltrimetilamônio
(CTAB) [48,49,56,57].

Esses trabalhos anteriores demonstram que a interação íon-dipolo é genérica e

também deve ocorrer em nosso caso, onde os grupos carboxilato carregados
coexistem com PEGs não carregados.
A outra interação atrativa proposta entre gotículas de nanoemulsão é da
associação PEGw-PEGw. Tem sido amplamente observado na literatura que o
PEG se torna mais hidrofóbico em soluções aquosas quando a temperatura é
aumentada [58-61]. Para tais soluções aquosas de PEG, quando a temperatura
é elevada, a afinidade entre os PEGs é aumentada e a separação de fases
pode ser induzida (isto é, uma temperatura de solução crítica mais baixa,
LCST, pode ser definida) [62,63]. Esta afinidade pode dar origem a uma
interação atrativa líquida entre as gotículas de nanoemulsão através do PEGw
em ácido carboxílico laureth-11 (Fig. 4B). Tal atração usando o comportamento
LCST de polímeros tem sido utilizada para induzir a gelificação de coloides de
copolímeros em bloco [64]. Por outro lado, o comportamento UCST também foi
utilizado para induzir gelificação coloidal em suspensões de nanopartículas
enxertadas com polímero [65,66]

Para PEGs lineares (como em nosso sistema), verificou-se que a temperatura

para induzir um ponto de nuvem é maior para moléculas de PEG mais curtas
[59,61,62], pois a afinidade entre os PEGs é reforçada quando o peso
molecular é aumentado . Portanto, considerando o backbone PEGw curto,
nosso sistema nunca alcançará o LCST em nossas condições experimentais.
No entanto, isso não significa que a associação PEG-PEG não ocorre quando
a temperatura está abaixo da LCST. Foi proposto que o aumento da afinidade
PEG-PEG no aumento da temperatura na água é devido ao equilíbrio
conformacional nos segmentos [63]. Os segmentos preferem as conformações
polares (isto é, a água é um bom solvente) a temperaturas mais baixas e
preferem as conformações não polares a temperaturas mais altas (isto é, a
água está se tornando um solvente pobre).

É importante ressaltar que foi demonstrado que tal mudança conformacional

nos segmentos é gradual em temperaturas elevadas. Bjoerling et al. estudaram
a adaptação conformacional das cadeias de PEG usando 13C NMR [59]. Eles
descobriram que mesmo para o PEG curto (Mw = 600 g / mol), o segmento
sofre uma mudança conformacional gradual em T = 25 a 75 C, o que é
consistente com nossa janela de temperatura experimental (T = 25 a 55 C ) e
apóia nosso mecanismo proposto de que a associação PEG-PEG pode dar
origem a uma interação atrativa em nosso sistema.

A interação de ponte mediada por PEG400 livre no contínuo também pode

ocorrer. Especulamos que o PEG400 não reproduz um

papel principal nas interações entre gotículas. Em nosso mecanismo proposto,

a atração é proveniente da interação íon-dipolo e da associação PEGw-PEGw
entre surfactantes em diferentes gotas.

No entanto, com base neste mecanismo proposto, não queremos descartar a

possibilidade de que o PEG400 possa fazer a ponte entre as gotículas de
nanoemulsão por meio dessas interações atraentes, encadeando as moléculas
como PEGw-PEG400-PEGw ou COO-PEG400-COO.

No geral, em nosso sistema, acreditamos que a competição da atração e

repulsão dependente da temperatura entre as gotículas de nanoemulsão é
responsável pela tendência não monotônica

nos módulos de viscoelasticidade (os módulos primeiro aumentam, depois

diminuem e, finalmente, aumentam novamente com o aumento da
temperatura).

Quando a repulsão domina o sistema, a gelificação é diminuída e, portanto, a

diminuição dos módulos viscoelásticos. Por outro lado, quando a atração
domina, o viscoelástico

aumento dos módulos. Ao considerar cuidadosamente os constituintes do

sistema, propomos que a atração venha do PEGw-PEGw

associação e a interação íon-dipolo (COO-PEGw). Portanto,

comparando com os dados reológicos da Fig. 2, concluímos que a diminuição

dos módulos em T = 35 a 45 C é devido ao aumento significativo no potencial
zeta (e, portanto, a repulsão eletrostática). Com base nos dados do potencial
zeta, pode-se então concluir que o segundo aumento nos módulos
viscoelásticos

(T 45 C) é principalmente devido ao aumento da associação PEGw-PEGw.

Uma vez que o potencial zeta (e, portanto, a densidade de carga das gotículas)
permanece inalterado dentro desta janela de temperatura,

não esperamos um aumento na interação íon-dipolo em T 45 C, pois nenhuma

evidência significativa na literatura sugere que essa interação seja afetada pela
temperatura. Finalmente, no primeiro regime de gelificação (T = 20 a 35 C), a
gelificação é devido à interação íon-dipolo (uma vez que a magnitude do
potencial zeta aumenta) e associação PEGw-PEGw.

Conforme representado na Fig. 4, as interações íon-dipolo e PEGw-PEGw

dependem de diferentes regiões das moléculas de surfactante. Portanto, as
interações são altamente acopladas e é muito difícil isolar a dominância entre a
associação PEGw-PEGw e a interação íon-dipolo (COO - PEGw). Embora as
duas interações sejam difíceis de desacoplar e imediatamente obscuras devido
à falta de um modelo bem desenvolvido, podemos obter algum entendimento
de sua força combinada estimando a repulsão eletrostática que devem superar
para gelificar a suspensão. Usando os dados de potencial zeta na Fig. 5,
podemos estimar a força da repulsão eletrostática, eelec, como onde eo é a
permeabilidade elétrica do espaço livre, er é a constante dielétrica da fase
contínua (aqui er da água é usado para estimativa), k é a constante de
Boltzmann, T é a temperatura absoluta, e é a carga elementar, z é o número da
carga en é o potencial zeta. Os resultados são mostrados na Fig. 6, e revelam
que a repulsão eletrostática em nosso sistema é bastante fraca. Mesmo para a
repulsão eletrostática mais forte, eelec é de apenas 0,6 kT (T 45 C).

Além disso, como mostrado nas Figs. 1 e 2, a resistência mecânica deste gel
de nanoemulsão é muito fraca (G0 é ~ 100 a 101 Pa), em comparação com
outros géis de nanoemulsão que nosso grupo desenvolveu (G0 ~ 104 a 105
Pa), onde interações atrativas mais fortes foram introduzidas no suspensões de
nanoemulsão [25-27], sugerindo que as interações atraentes concorrentes
(associação PEGw-PEGw e interação íon-dipolo) também são muito fracas.
3.4. Efeito do pH nas propriedades reológicas

Mostramos que a temperatura pode ser usada para controlar a protonação do

grupo carboxila do surfactante na gota (Fig. 5A), e a mudança resultante na
repulsão eletrostática afeta significativamente a resposta reológica do gel de
nanoemulsão (Figs. 1 e 2 ) No entanto, para controlar a protonação de ácidos
fracos, uma maneira mais direta é ajustar o pH do sistema.

Nesta seção, investigamos o efeito do pH na suspensão de nanoemulsão

estudando o potencial zeta das gotículas, a resposta reológica e a estabilidade
das gotículas em função do pH.

O potencial zeta (f) das gotículas de nanoemulsão como uma função de pH é

mostrado na Fig. 5B. Como esperado, f diminui (| f | aumenta) com o aumento
do pH, uma vez que a desprotonação do grupo carboxila é facilitada na
condição básica. Começando com a nanoemulsão pura (pH = 3,1), f
permanece quase zero até que o pH seja elevado para 3,8, e então
experimenta uma diminuição significativa quando pH> 4. Esta mudança em f é
consistente com o pKa relatado do ácido laureth-11 carboxílico na literatura
onde o pKa aparente é determinado como sendo 4 usando titulação
potenciométrica [67], e o ácido laureth-11 carboxílico é o principal surfactante
em nosso sistema. À medida que o pH é aumentado (pH> 6), f atinge um
patamar, sugerindo que a desprotonação do ácido carboxílico está completa. A
magnitude do f final da Fig. 5B (f 23 mV, o efeito do pH) também sugere que
apenas a desprotonação parcial do ácido carboxílico é alcançada por energia
térmica (f 8 mV), como mostrado na Fig. 5A .

Em seguida, investigamos o efeito do pH na reologia da nanoemulsão. Os

módulos viscoelásticos durante uma rampa de temperatura são mostrados na
Fig. 7. Deve-se notar que para a nanoemulsão pura na Fig. 7, o pH é 2,5, que é
inferior ao pH da nanoemulsão 'pura' para a medição do potencial zeta em Fig.
5B onde o pH é 3,1. Essa diferença se deve à diluição necessária para a
medição do potencial zeta, em que a nanoemulsão é diluída de 12,5% em peso
(Fig. 7) para 0,5% em peso (Fig. 5B). Na Fig. 7, quando o pH é aumentado, o
aumento de G0 e G00 ocorre em temperaturas mais altas, indicando que uma
temperatura de gelificação mais alta é necessária quando o pH é mais alto.
Além disso, quando o pH é 5, nenhuma gelificação pode ser induzida dentro da
janela de temperatura experimental.

O aumento do pH enfraquece o comportamento de gelificação térmica do

sistema de nanoemulsão, e isso é esperado uma vez que a repulsão
eletrostática da dissociação dos ácidos carboxílicos desempenha um papel
importante na resposta reológica, conforme discutido anteriormente.
Em comparação com a temperatura, o pH é uma estratégia mais eficaz para
promover a desprotonação do ácido carboxílico, pois f mais negativo pode ser
obtido (Fig. 5B). Portanto, não é surpreendente que o pH suprima
significativamente o comportamento de gelificação.

Temos que enfatizar que a reologia da rampa de temperatura mostrada na Fig.

7 é diferente dos dados mostrados na Fig. 2, onde G0 e G00 são relatados em
uma frequência angular fixa usando medições de varredura de frequência em
várias temperaturas (salto de temperatura) . Nosso grupo estudou
anteriormente o efeito da história térmica nas propriedades reológicas das
nanoemulsões termogelizantes em grande detalhe, em que a rota da
temperatura ambiente pode efetivamente aumentar a resistência do gel [29].

Portanto, esperávamos que houvesse uma diferença nos módulos

viscoelásticos entre as Figs. 2 e 7 da nanoemulsão pura (pH = 2,5). Aqui, a
caracterização reológica usando uma rampa de temperatura é usada como
uma estratégia para obter convenientemente uma compreensão quantitativa do
efeito do pH na reologia da nanoemulsão em uma ampla faixa de temperaturas.

Finalmente, estudamos o efeito do pH na estabilidade da nanoemulsão,

monitorando o tamanho das gotas ao longo do tempo. Neste trabalho,
utilizamos o método de composição de inversão de fase (PIC) para sintetizar a
nanoemulsão. Para o método PIC, ou para qualquer método de baixa energia
para obtenção de nanoemulsões, a geometria molecular do surfactante
desempenha um papel crucial na formação da gota e na estabilidade da
interface óleo / água [6]. Essa geometria molecular é quantificada por uma
quantidade chamada parâmetro de empacotamento p = aT / aH, onde aT e aH
são as áreas da seção transversal do grupo cauda e grupo da cabeça,
respectivamente. Diferentes valores de p levam a diferentes tipos de
empacotamento de surfactante na interface óleo / água e, portanto, favorecem
diferentes curvaturas da interface.

A estabilidade da nanoemulsão em diferentes pH é mostrada na Fig. 8. O pH

foi ajustado após a síntese da nanoemulsão. Como mostrado, o aumento do
pH facilita a instabilidade das suspensões de nanoemulsão, enquanto a
nanoemulsão pura permanece estável ao longo da janela de tempo
experimental. Conforme mostrado na Fig. 5B, o aumento do pH leva à
desprotonação do grupo carboxila do surfactante nas gotículas. Tal
desprotonação transforma o surfactante de não iônico (f 0 em pH baixo) em
aniônico (f <0 em pH mais alto) e, portanto, altera p. Essa mudança de p rompe
o empacotamento original dos tensoativos na interface óleo / água, levando a
uma instabilidade da interface e, portanto, ao aumento do tamanho da gota. Tal
instabilidade destaca a importância da geometria molecular do surfactante na
estabilização da interface óleo / água, e também sugere que em nosso sistema
o aumento do pH pode ser utilizado como estratégia para demulsificar as
gotículas de nanoemulsão, que pode ser aplicada em aplicações práticas como
em cosméticos [68,69], indústria de alimentos [5,70], recuperação aprimorada
de óleo [71-73] e tratamento de água [74].

A partir da Fig. 8, reconhecemos que durante a caracterização reológica o

tamanho das gotículas de nanoemulsão aumenta para valores de pH maiores
que 2,5. Assim, as tendências na reologia responsiva ao pH na Fig. 7 são
possivelmente complicadas com mudanças no tamanho das gotículas. A fim de
desacoplar o máximo possível as mudanças de pH nas interações dos efeitos
do tamanho das gotas, aplicamos uma caracterização rápida de temperatura
(tempo total de medição 20 min na Fig. 6).

Dado este curto período de tempo, a mudança de tamanho é limitada (quase

insignificante para pH até 4,3) e o comportamento de gelificação térmica ainda
pode ocorrer, uma vez que o tamanho da gota ainda está em regime de
nanoemulsão. Em trabalhos anteriores, estudamos extensivamente o efeito do
tamanho das gotas em um sistema de nanoemulsão de gelificação térmica
diferente [25,26].

3,5. Efeito da força iônica nas propriedades reológicas

A natureza carregada das gotículas de nanoemulsão sugere a possibilidade de

ajustar as propriedades do gel usando a força iônica. Ao rastrear a repulsão
eletrostática usando eletrólitos, esperamos que a gelificação da nanoemulsão
possa ser induzida mais facilmente em temperaturas elevadas. Usamos
novamente a reologia da rampa de temperatura para estudar o efeito da força
iônica usando cloreto de sódio (NaCl), e o resultado é mostrado na Fig. 9.
Como esperado, a adição de NaCl facilita a gelificação térmica da
nanoemulsão onde ocorre o aumento em G0 e G00 ocorre em temperaturas
mais baixas. Além disso, a magnitude da diminuição dos módulos
viscoelásticos na temperatura intermediária é significativamente reduzida à
medida que mais NaCl é adicionado (por exemplo, o valor G0 a 30 C para
[NaCl] = 1,0 M em comparação com 44 C para [NaCl ] = 0 M). Tal redução no
declínio dos módulos apóia nosso mecanismo proposto no qual o grupo
carboxilato carregado na gota leva a um aumento na repulsão eletrostática que
rompe a rede de gel. À medida que mais NaCl é adicionado, a repulsão
eletrostática é mais fortemente filtrada, levando a uma temperatura de
gelificação mais baixa e menos redução nos módulos viscoelásticos em
temperaturas intermediárias.

Porém, mesmo para a maior força iônica ([NaCl] = 1,0 M), a diminuição dos
módulos viscoelásticos ainda existe. Além disso, a magnitude do pico nos
módulos é quase a mesma na janela [NaCl], sugerindo que a interação
repulsiva ainda é crítica. Conforme discutido anteriormente, o surgimento da
repulsão eletrostática devido à dissociação termicamente desencadeada do
grupo carboxila é responsável pela quebra da rede de gel (Figs. 1-3). Portanto,
hipotetizamos que a adição de NaCl também facilita a desprotonação dos
ácidos carboxílicos. De fato, o efeito da força iônica na dissociação de ácidos
fracos já foi estudado na literatura. Foi descoberto que a adição de eletrólitos
promove a desprotonação de vários ácidos fracos, uma vez que os coeficientes
de atividade das espécies iônicas são altamente sensíveis à força iônica [75-
78]. Esta dissociação promovida devido ao NaCl é validada na Fig. 10, onde o
potencial zeta dependente da temperatura das gotículas de nanoemulsão, f, em
[NaCl] elevado é medido. À medida que o [NaCl] aumenta, a dissociação dos
ácidos carboxílicos ocorre em temperaturas mais baixas e | f | em temperaturas
mais altas também aumenta, o que é consistente com estudos anteriores em
que os eletrólitos facilitam a dissociação do ácido fraco [75-78]. Além disso, em
[NaCl] mais alta, f atinge um platô em temperaturas mais baixas. Isso é
consistente com os dados reológicos na Fig. 9, onde o mínimo em módulos
ocorre em temperaturas mais baixas para maiores [NaCl], o que também apóia
o mecanismo proposto onde o aumento na repulsão eletrostática devido à
dissociação de ácido fraco é responsável pela diminuição nos módulos
viscoelásticos.

Notamos também que, como mostrado na Fig. 9, em alta força iônica (NaCl =
1,0 M), a nanoemulsão pode gelificar perto da temperatura ambiente.

Esta gelificação precoce não é intuitiva, uma vez que parece discordar da
discussão sobre a dissociação de ácido carboxílico promovida.

Portanto, a adição de eletrólito também deve modificar a interação atrativa para

induzir um início precoce de gelificação. Na verdade, estudos anteriores
mostraram que a adição de sais facilita a associação entre as moléculas de
PEG [79-82]. A separação de fases, ou o ponto de nuvem, ocorre em uma
temperatura mais baixa quando mais sais são adicionados [79,81,82]. Portanto,
em nosso sistema, a adição de NaCl aumenta a interação atrativa resultante da
associação PEG-PEG entre as gotículas, o que também apóia nosso
mecanismo proposto onde a associação PEGw-PEGw dá a atração inter-
gotículas em nossa suspensão de nanoemulsão.

Reconhecemos que o efeito da força iônica na atração e repulsão está

interligado. Trabalhos futuros se concentrarão na dissociação do efeito da
adição de eletrólitos na gelificação da nanoemulsão e na contribuição para a
interação atrativa e repulsiva de uma forma mais quantitativa.

4. Conclusão
Construindo uma compreensão em escala molecular de nossos sistemas
anteriores de nanoemulsão de gelificação térmica [25-27], neste trabalho
desenvolvemos um novo sistema de nanoemulsão no qual as propriedades
podem ser moduladas através da temperatura e do pH. A nanoemulsão é
sintetizada usando um método de baixa energia, e as gotículas são
estabilizadas com surfactantes de ácido fraco contendo segmentos de poli
(etilenoglicol) (PEG) e grupos carboxila. A associação entre os PEGs e a
desprotonação dos ácidos carboxílicos controla as interações atrativas e
repulsivas inter-gotículas. À medida que a temperatura aumenta, os módulos
viscoelásticos do sistema de nanoemulsão primeiro aumentam, depois
diminuem e, finalmente, aumentam novamente. Paralelamente às tendências
dos módulos, a rede de gel também experimenta uma formação inicial,
destruição e reforma à medida que a temperatura aumenta. Essas tendências
não intuitivas são devidas a interações atrativas e repulsivas que mudam em
função da temperatura, conforme validado por medições de potencial zeta e
comparações com pesquisas anteriores [43-46]. A dissociação dos grupos
carboxila no surfactante foi ainda mais alavancada como uma estratégia para
ajustar as propriedades reológicas do gel de nanoemulsão, alterando o pH do
sistema. Além disso, com uma compreensão do empacotamento do surfactante
na interface, podemos desestabilizar ainda mais as gotículas de nanoemulsão
alterando o parâmetro de empacotamento do surfactante via pH [6].
Finalmente, mostramos que a força iônica do sistema pode ser usada como
outra alça de engenharia para ajustar as propriedades do gel.

O trabalho apresentado mostra que a competição sutil entre interações

atrativas e repulsivas determina as propriedades do sistema, permitindo aos
pesquisadores projetar materiais de matéria macia baseados em nanoemulsão
mais complexos. Além disso, a compreensão mecanicista dos potenciais
interativos no nível molecular fornece várias estratégias de engenharia para
manipular as propriedades do material. Por exemplo, as nanoemulsões
gelificantes apresentadas podem ser usadas em produtos cosméticos, como
um creme para a pele - na garrafa, o sistema de nanoemulsão é um líquido à
temperatura ambiente com boa fluidez, e a nanoemulsão pode gelar em
contato com a pele devido a um aumento na temperatura. Posteriormente, uma
mudança de pH devido ao contato prolongado com a pele pode romper a rede
de gel de nanoemulsão e as gotículas de tamanho nanométrico podem então
ser facilmente absorvidas pela pele [1,9]. Além disso, as gotículas de óleo são
veículos eficazes para encapsular ingredientes ativos hidrofóbicos [4,17]. Além
disso, um sistema de nanoemulsão que responde a mudanças no pH e na
temperatura pode ser usado em aplicações de recuperação aprimorada de óleo
onde a temperatura e gradientes de pH podem ser encontrados. O trabalho
futuro se concentrará no desenvolvimento de produtos para a pele usando o
sistema de nanoemulsão apresentado e no desenvolvimento de uma
compreensão quantitativa mais profunda das interações de pares entre as
gotículas de nanoemulsão.