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Métodos Analíticos para o Controle da Produção de Açúcar e Álcool – 5ª Edição - 2014

Método Fermentec – FTCQ – 10 / 005

Determinação de Sulfito (SO2) em Açúcar Cristal Branco e
Açúcar VVHP

1. Princípio do Método

O método baseia-se na determinação da concentração de sulfito utilizando a reação com

o Cloridrato de rosanilina, seguida da leitura de absorbância para monitoramento da
formação do composto colorido.

2. Material

2.1. Equipamentos

- Microdestilador Kjeldahl
- Espectrofotômetro
- Balança analítica com 4 casas decimais
- Balança de precisão com 2 casas decimais
- Agitador magnético
- Agitador de tubos
- Estufa elétrica
- Homogeneizador de açúcar tipo “Y” ou similar

2.2. Vidrarias e Outros

- Tubos de ensaio de 150 ou 180 mm de comprimento por 15 mm de diâmetro

- Balões volumétricos de 100, 200, 250, 1000 mL
- Pipetas volumétricas de 2, 5, 10 e 20 mL
- Beckers de 150, 250 e 1000 mL
- Bureta de 100 mL
- Proveta de 50 mL
- Barras magnéticas de agitação
- Bastão de plástico
- Pipetas graduadas de 5 mL
- Micropipetas de volume variável (Contemplando o volume de 0,5 mL)
- Pisseta

3. Reagentes

- Cloreto de mercúrio p.a. - HgCl2

- Cloreto de sódio p.a. - NaCl
- Bissulfito de sódio p.a. - NaHSO3 ou
Metabissulfito de sódio p.a – Na2S2O5 ou
Mistura de metabisulfito de sódio com bissulfito de sódio.

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- Cloridrato de rosanilina (fucsina básica) p.a. - C20H20CIN3

Fucsina Básica é uma mistura de rosanilina, pararosanilina e Magenta II,

- Sorbitol p.a. - C6H14O6

- Formaldeído 37,4% p.a. - H2CO
- Ácido Clorídrico concentrado p.a. - HCl
- Água destilada ou deionizada
- Amido Solúvel p.a. – (C6H10O5)n
- Tiossulfato de Sódio p.a. - Na2S2O3.5H2O
- Dicromato de potássio p.a. - K2Cr2O7
- Iodo Puro p.a.

4. Preparo de Soluções

- Solução de tetracloromercurato 0,2 M

Pesar 54,40 g (± 0,03 g) de HgCl2 em becker de 1000 mL. Adicionar aproximadamente
700 mL de água e dissolver com auxilio de agitador magnético. Pesar 23,40 g (± 0,03 g)
de NaCl e transferir para o becker que contém o HgCl2 dissolvido em água. Continuar a
dissolução e transferir quantitativamente para balão volumétrico de 1000 mL completando
seu volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 30 dias. Conservação: Temperatura ambiente do laboratório.

- Solução de tetracloromercurato 0,1 M

Pesar 27,20 g (± 0,03 g) de HgCl2 em becker de 1000 mL. Adicionar aproximadamente
700 mL de água e dissolver com auxilio de agitador magnético. Pesar 11,70 g (± 0,03 g)
de NaCl e transferir para o becker que contém o HgCl2 dissolvido em água. Continuar a
dissolução e transferir quantitativamente para balão volumétrico de 1000 mL completando
seu volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 30 dias. Conservação: Temperatura ambiente do laboratório..

- Solução Padrão de Sulfito (base): 100 mg SO2/L

Calcular a massa de bissulfito de sódio p.a. (NaHSO3) ou do metabissulfito de sódio ou da
mistura de metabissulfito de sódio e bissulfito de sódio contemplando o teor de sulfito SO2
do reagente (considerar a pureza do certificado de análise ou analisar no próprio
laboratório conforme descrito adiante nos itens 4.1 e 4.2) conforme o cálculo abaixo.

Massa corrigida pelo Teor de SO2 = 10 / %SO2

Pesar a massa obtida no cálculo acima (± 0,0003 g) de bissulfito de sódio p.a., em becker
de 150 mL. Adicionar aproximadamente 100 mL de água e dissolver com auxilio de
agitador magnético. Transferir para balão volumétrico de 1000 mL completando seu
volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: Preparo, uso imediato no preparo da solução padrão estoque e
descarte da solução.

- Solução Padrão Estoque de Sulfito: 10 mg SO2/L

Transferir 20 mL da Solução Padrão de Sulfito (base) 100 mg SO2/L, com pipeta
volumétrica, para um balão volumétrico de 200 mL e ainda não completar o volume. Pesar

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10,0 g (± 0,03 g) de sorbitol em Becker de 150 mL e adicionar aproximadamente 50 mL

de tetracloromercurato 0,2 M para dissolução do sorbitol, com auxilio de agitador
magnético. Transferir a solução do becker quantitativamente para o balão volumétrico de
200 mL que já contém 20 mL da Solução Padrão de Sulfito (base) 100 mg SO2/L, com
auxilio do tetracloromercurato 0,2 M completando o volume do balão com o mesmo.
Homogeneizar.
Prazo de validade: 30 dias. Conservação: Geladeira (entre +2 e + 8 ºC).

- Solução Padrão de Trabalho de Sulfito a 1 mg SO2/L

Transferir 10 mL do padrão estoque de Sulfito (10 mg/L), já ambientado a temperatura do
laboratório, com auxilio de pipeta volumétrica, para balão volumétrico de 100 mL e
completar o volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: preparo, uso na análise e descarte da solução.

- Solução de NaOH 0,1 N

Pesar 4,00 g (± 0,03 g) de NaOH p.a. em um becker de 250 mL, adicionar cerca de 100
mL de água e dissolver o material com auxilio de agitador magnético. Transferir
quantitativamente o material contido no becker para um balão volumétrico de 1000 mL e
completar o volume do balão com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 30 dias; Conservação: temperatura ambiente do laboratório (frasco
plástico).

- Solução de HCl 1:1

Adicionar cerca de 40 mL de água em um balão volumétrico de 100 mL, utilizando
preferencialmente proveta de 50 mL. Adicionar lentamente no balão volumétrico de 100
mL, sobre a água, 50 mL de HCl p.a. utilizando bureta e completar o volume com água.
Homogeneizar.
Prazo de validade: 120 dias; Conservação: temperatura ambiente do laboratório.

- Solução Reagente de Cloridrato de Rosanilina

Pesar 0,1000 g (± 0,0003 g) de cloridrato de rosanilina (fuccina básica) p.a., em becker de
250 mL, adicionar aproximadamente 150 mL de água e dissolver com auxilio de agitador
magnético. Transferir quantitativamente o conteúdo do becker para balão volumétrico de
250 mL e adicionar 40 mL da solução de HCl 1:1, com auxílio de pipeta volumétrica de 20
mL, completando na seqüência seu volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 180 dias. Conservação: Frasco âmbar em Geladeira (entre +2 e + 8
ºC).

- Solução Reagente de Formaldeído 0,2 % ( v/v)

Transferir 5 mL de formaldeído 37% p.a., com pipeta volumétrica, para um balão
volumétrico de 1000 mL e completar o volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 30 dias. Conservação: Frasco âmbar em Geladeira (entre +2 e + 8 ºC).

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4.1. Preparo de soluções para determinação da concentração de sulfito no sal

bissulfito de sódio ou metabissulfito de sódio ou mistura de metabissulfito de sódio
e bissulfito de sódio.

- Solução de Iodo a 0,1 N.

Pesar 36,00 g (±0,03 g) de iodeto de potássio p.a. em becker de 250 mL. Adicionar cerca
de 100 ml de água e dissolver o material com auxílio de agitador magnético. Transferir
quantitativamente para um balão volumétrico de 1000 ml mas ainda não completar o
volume.
Pesar 12,75 g (±0,03 g) de iodo puro em um vidro de relógio.
Observação: Não utilizar balança analítica por causa dos vapores de iodo e realizar este
procedimento de pesagem em câmara de exaustão, uma vez que estes vapores são
venenosos.
- Transferir, por meio de um funil seco, o iodo pesado acima para o balão volumétrico de
1000 mL que contém a solução concentrada de iodeto de potássio.
- Tampar com rolha de vidro e agitar o frasco a frio, até que todo o iodo esteja dissolvido.
- Deixe a solução voltar a temperatura ambiente e complete o volume até a marca
(menisco).
Prazo de validade: 180 dias. Conservação: Frasco âmbar em Geladeira (entre +2 e + 8
ºC).

- Solução de Tiossulfato de Sódio a 0,1 N

Pesar 6,2250 g (±0,0003 g) de Na2S2O3.5H2O p.a. em becker de 500 mL. Pesar
transferir 0,0500 g (±0,0003 g) de carbonato de sódio anidro (Na2CO3) e transferir para o
becker de 500 mL adicionando na seqüência 250 ml de água previamente fervida e já
resfriada com auxílio de proveta. Deixe decantar por 24 horas.
Prazo de validade: 180 dias. Conservação: Frasco âmbar em Geladeira (entre +2 e + 8
ºC).

4.1.1. Padronização da solução de Tiossulfato de Sódio a 0,1 N

- Pesar 3,0000 g (±0,0003 g) de KI p.a. isento de iodato (IO3) e dissolver em ácido
clorídrico diluído (6 ml HCl concentrado em 100 ml de água). Adicionar essa solução em
25 ml (exatamente) de dicromato de potássio 0,1N. Adicionar cerca de 300 ml de água
destilada. Titular com a solução de tiossulfato de sódio 0,1N, até coloração verde
amarelado. Adicionar 1 ml de solução de amido e continuar a titulação até a solução ficar
fracamente verde.
Realizar três repetições desta operação de titulação.

Estabelecer o Fator de Padronização da Solução de Tiossulfato de Sódio a 0,1 N

através do seguinte cálculo:

F = 25 / Vg

Onde:
F = Fator de Padronização da Solução de Na2S2O3 0,1N
Vg = Média das 3 repetições dos volumes gastos da Solução de NaOH 0,1 N nas
titulações.

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- Solução indicadora de amido.

Fazer uma pasta com cerca de 1 g de amido em pequena quantidade de água.
Despeja-se em 105 ml de água em fervura e deixa-se ferver por 5 minutos. Após o
resfriamento filtra-se usando algodão.
Prazo de validade: preparo, uso na análise e descarte da solução.

- Solução de dicromato de potássio 0,1 N.

Secar aproximadamente 6 g de dicromato de potássio p.a. em estufa à aproximadamente
150ºC por uma hora. Pesar 4,9035 g (±0,0003 g) de dicromato de potássio em becker de
250 mL, adicionar cerca de 50 mL de água e dissolver. Tranferir o conteúdo do becker
para um balão de 1000 ml e completar o volume com água.Homogeneizar.
Prazo de validade: 180 dias. Conservação: Frasco âmbar em Geladeira (entre +2 e + 8
ºC).

- Solução de HCl 2M.

Adicionar cerca de 50 mL de água em um becker de 250 mL, utilizando a própria
marcação do becker, adicionar lentamente sobre a água 16,6 mL de HCl p.a. utilizando
bureta. Transferir quantitativamente para balão volumétrico de 100 mL e completar o
volume com água. Homogeneizar.
Prazo de validade: 120 dias; Conservação: temperatura ambiente do laboratório.

4.2. Determinação de Sulfito no sal bissulfito de sódio ou metabissulfito de sódio ou

mistura de metabissulfito de sódio e bissulfito de sódio.
Transferir 0,0250 g (±0,0003 g) do sal para erlenmeyer de 250 ml contendo 25 ml de
solução de iodo a 0,1N, 5 ml de ácido clorídrico 2 M e 150 ml de água. Agitar o líquido
até que todo o sólido tenha reagido. Adicionar 5 ml da suspensão de amido e titular o
excesso de iodo com tiossulfato de sódio 0,1N padronizado até a solução de iodo clarear
ou seja, a viragem será de azul para incolor.
Realizar três repetições desta operação de titulação.

Estabelecer a pureza em SO2 do sal bissulfito de sódio ou metabissulfito de sódio ou

mistura de metabissulfito de sódio e bissulfito de sódio através do seguinte cálculo:

% SO2 = 12,8 (Vbr - Vam) x f

Onde:
Vam = Volume de solução de Na2S2O3 a 0,1 N gasto na titulação da solução com o sal.
Vbr = Volume de solução de Na2S2O3 a 0,1 N gasto na titulação da solução sem o sal.
f = fator de padronização da solução de Na2S2O3 a 0,1 N.
Obs: Considerar esta pureza no cálculo da quantidade de sulfito de sódio a ser pesada
para o preparo do padrão de sulfito.

5. Determinação
- Pesar 40,00 g (± 0,03 g) da amostra de açúcar previamente homogeneizada em um
becker de 250 mL, adicionar aproximadamente 70 mL de água destilada e dissolver com
auxílio de agitador magnético.

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- Transferir quantitativamente o conteúdo do becker para um balão volumétrico de 100

mL, adicionar 4 mL de NaOH 0,1N, com pipetas volumétricas e completar o volume com
água. Homogeneizar.
- Filtrar o conteúdo do balão volumétrico de 100 mL em papel de filtro qualitativo
desprezando aproximadamente 20 mL do filtrado obtido no início da filtração.

- Utilizando pipetas volumétricas, transferir 10 mL de:

- Extrato filtrado para 3 tubos de ensaio;

- Solução Padrão de Trabalho de Sulfito a 1 mg SO2/L para 3 tubos de ensaio;
- água deionizada/destilada (prova em branco) para 3 tubos de ensaio.

- Adicionar 2 mL da Solução Reagente de Cloridrato de Rosanilina, com pipeta

volumétrica ou micropipeta, em cada um dos tubos. Homogeneizar com auxilio de
agitador de tubos.
- Adicionar 2 mL da Solução de Formaldeído 0,2%, com pipeta volumétrica ou
micropipeta, em cada um dos tubos. Homogeneizar com auxilio de agitador de tubos.
- Deixar em repouso por 30 minutos (± 30 segundos).
- Realizar as leituras em absorbância no espectrofotômetro, com cubeta de 10 mm, à 560
nm.
Observação: No caso de Açúcar liquido: Pesar uma quantidade de amostra que contenha
40,00g de açúcar, calculada pela equação: Peso de amostra = (40,00 x 100) / brix da
amostra.

6. Cálculos
O teor de sulfito em açúcar é expresso em mg de SO2/Kg de amostra.

Sulfito = 2,5 * ((La – Lb) / (Lp – Lb))

Onde:
La = médias das 3 leituras do extrato da amostra
Lp = média das 3 leituras da Solução padrão de Trabalho de Sulfito a 1 mg SO2/L
Lb = média das 3 leituras da prova em branco

7. Referências
a. ICUMSA-GS2/1/7-33(2000)
b. NAUMAN, R.V.; WEST, P.W.; TRON, F. (1960) A spectrophotometric study of the
schiff reaction as applied to the quantitative determination of sulfur dioxide.
Analytical Chemistiy, vol. 32, 10, 1307-1311.
c. MÉTODOS ANALITICOS PARA O CONTROLE DA PRODUÇÃO DE AÇÚCAR E
ÁLCOOL, 3a edição, FERMENTEC, Piracicaba, 2003.

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