IMUNOENSAIOS

Trabalho prático de pesquisa

Tendo em conta os imunoensaios indicados abaixo, pesquise informação sobre o
fundamento teórico de um deles e a sua aplicação (cada grupo deverá focar-se apenas
num teste e todos os testes deverão ser apresentados pelos grupos). Prepare 4 ou 5
slides em ppt para transmitir a informação encontrada aos colegas dos outros grupos.

- Teste marijuana

- Teste de Gravidez

- Teste deteção SARS-CoV2 (agente etiológico COVID-19)

- Teste serológico de deteção de anticorpos para SARS-CoV2 (agente etiológico

COVID-19)

Exercícios

1. Após sofrer um acidente, um doente precisa de uma transfusão de emergência. Sabe-

se que ele pertence ao grupo sanguíneo A Rh+ e que, no hospital, há dois indivíduos
que se ofereceram para doar sangue. Foi realizada a determinação de grupos
sanguíneos do Joaquim e do Manuel utilizando-se sangue de cada um deles que se
colocou em lâminas e misturou-se com os soros anti-A, anti-B e anti-Rh. Os resultados
são apresentados abaixo.

1.1. Quem poderá ser dador de sangue? Justifique a resposta.

AB Rh (-) > Ags B nas suas hemácias
O Rh (+)

1.2. Imagine que o pai do doente que precisa do transplante faz um teste indireto, isto
é, é recolhido o seu soro que não reage com eritrócitos contendo antigénio A, nem com
eritrócitos contendo antigénio B e nem com eritrócitos contendo antigénio Rh. Poderá
ser dador? Justifique a resposta.

Joaquim

AB (+)

Rh + ou - > Tanto pode ser positivo como negativo

Manuel

Não, pois apresenta anticorpo para

2. Pretendeu-se quantificar a pre-albumina no soro de um indivíduo refugiado recém-
chegado de África em conjunto com outras análises de forma a avaliar o seu estado
nutricional. Para isso, recorreu-se à técnica representada na Figura 1. Construiu-se
então o Gráfico 1 com o diâmetro dos círculos de precipitado em função da
concentração de soluções padrão de pre-albumina.

2.1. Em que consiste o círculo de precipitado branco? Imunodifusão radial simples

Formação de complexo anticorpo/antigénio

2.2. Tendo em conta os resultados, indique a concentração aproximada de pre-albumina

no soro do indivíduo, sabendo que o diâmetro do círculo de precipitado correspondente
é de 4 mm.

Figura 1

Gráfico 1
3. De forma a comparar uma proteína/antigénio do coronavírus SARS-CoV2 com um
outro coronavírus que causa uma constipação ligeira, realizou-se o ensaio ilustrado na
figura abaixo (Figura 2).
3.1. Como se designa a técnica e em que consiste?

3.2. Os anticorpos reconhecem especificamente (seleccione a alínea correta):

a. o antigénio 1 mas não o 2;
b. o antigénio 2 mas não o 1;
c. o antigénio 1 e o antigénio 2;
d. nenhum dos dois antigénios;
e. não tem informação para responder à questão.

3.3. Compare os antigénios contidos nos poços 1 e 2 (iguais, parcialmente iguais ou

diferentes) e justifique a resposta.

Ag1 Ag2

Ac
Figura 2

4. A imunodifusão dupla também pode ser usada para análise semi-quantitativa de

antigénios ou anticorpos. Observe a Figura 3, identifique os poços que contêm antigénio
e indique a quantidade relativa de antigénio nos poços, por ordem crescente.

1 2

6 Ac 3

5 4

Figura 3
Poços – soro humano Calhas - anticorpos
Controlo
5. Tendo em conta os resultados abaixo (Figura 4):
5.1. Identifique a técnica utilizada e indique em que consiste;
Doente

Controlo
5.2. Indique se foi encontrada alguma alteração no soro do doente. Justifique a resposta.
Doente

Controlo

DoenteDoente
Anti-Imunoglobulinas
Controlo
Controlo
Figura 4

6. Imagine que faz um dot blot para deteção da proteína spyke no novo coronavírus
(resultado na Figura 5).
6.1- Dos anticorpos primários e secundários indicados abaixo, qual o par que escolheria
para usar no teste? Justifique a resposta, indicando qual utilizará na 1ª incubação com
anticorpos e qual utilizará na 2ª incubação com anticorpos e porquê.
- IgG de burro anti-spyke
- IgG de cabra anti-spyke
- IgG de burro anti-IgG de coelho-HRP
- IgG de burro anti-IgG de coelho
- IgG de coelho anti IgG de burro-HRP
- IgG de coelho anti IgG de burro

6.2. O que representa o C+?

Proteína spyke

6.3 – Tendo em conta o resultado, indique se o teste é fidedigno e se algum dos

indivíduos estaria infetado com o novo coronavírus.

É valido pois no controlo positivo há a proteína

spyke

Figura 5