1- O fato de as duas fitas da molécula de DNA serem antiparalelas tem
extrema importância no processo de replicação pelo fato de estas
apresentarem complementaridade entre as bases nitrogenadas de seus nucleotídeos. É essa complementaridade que possibilita a manutenção da informação genética durante o processo de síntese de uma nova molécula de DNA. 2- O experimento clássico de Meselson e Stah demonstrou que a replicação do DNA é semiconservativa. Nesse experimento as células inicialmente foram colocadas em um meio contendo 15N, a seguir foram incubadas em um meio contendo 14N e foi observado que o DNA fita dupla após uma geração continha uma fita com isótopo pesado (15N) e a outra fita com isótopo leve 14N. Na segunda geração a progênie era constituída de DNA híbrido (14N/15N) ou de moléculas com as duas fitas contendo 14N. Dá-se o nome de forquilha de replicação ao local onde a dupla fita se encontra separada e dar-se-á o processo de replicação. A origem de replicação é uma seqüência específica para a ligação de proteínas ligadoras (promovem a abertura da dupla hélice), as origens de replicação geralmente apresentam seqüências ricas em AT. NO sentido 5’→3’. São primers (iniciadores) de RNA necessários durante a replicação na fita lerda. A fita líder ou contínua é aquela que utiliza apenas um primer inicial para sua polimerização. A fita lerda ou descontínua é aquela que há a utilização de vários primers (fragmentos de Okasaki) para sua polimerização. 3- Uma endonuclease é uma proteína que possui atividade de clivar extremidades de moléculas de DNA. As exonucleases possuem atividade de clivar ligações internas entre os nucleotídeos (rompimento de ligações fosfodiéster) atuam rompendo pareamentos errôneos na extremidade 3’OH retirando o último nucleotídeo pareado. As polimerases são enzimas que possuem a propriedade de adicionar nucleotídeos na extremidade 3’OH de uma região pareada do DNA possibilitando o crescimento da cadeia no sentido 5’→3’. 4- A DNA polimerase I possui a característica de catalisar adição de nucleotídeos no sentido 5’→3’, atividade de exonuclease 3’→5’ que consiste na remoção de bases mal-pareadas na extremidade 3’OH da nova fita e atividade exonuclease 5’→3’ que consiste na degradação e remoção de pequenos blocos de nucleotídeos. 5- A alta processividade das DNA polimerase se dá devido as subunidades auxiliares γ e τ. O alto grau de fidelidade é alcançado devido aos seguintes mecanismos de reparo: A DNA polimerase tem um sítio ativo que só se fixa quando as bases estão pareadas corretamente; A DNA polimerase tem capacidade de verificar a fidelidade da replicação na cadeia nascente (proofreading) e corrigir os erros (atividades exonucleásicas); Depois da replicação, existe um sistema de reparo que corrige qualquer erro de pareamento de bases. A presença na região carboxiterminal da atividade exonuclease 3’→5’. Atividade exonuclease 5’→3’ seu papel para a fidelidade no processo de replicação se dá pela correção de erros pela excisão de blocos de nucleotídeos. 6- A DNA polimerase II possui as atividades: polimerase 5’→3’ exonuclease 3’→5’ e de reparo do DNA. A DNA polimerase III possui atividade polimerase 5’→3’ e atividade exonuclease 3’→5’. As atividades dessas polimerases são semelhantes às da DNA polimerase I. 7-