GENTICA BIOQUMICA: Distrbios do Metabolismo

Cada processo metablico consiste em uma sequncia de etapas catalticas mediadas por enzimas codificadas por nossos genes. Geralmente esses genes replicam-se em alta segurana, de modo que os sistemas enzimticos continuam a funcionar efetivamente. Ocasionalmente, as mutaes reduzem a eficincia das enzimas codificadas a um nvel no qual o metabolismo normal no pode ocorrer: So os distrbios de "erros inatos do metabolismo". Ex: Alcaptonria (AKU) produzida por uma falha em se produzir a homogentisato 1,2 dioxigenase (HGO). Uma das duas mutaes sem sentido identificadas em HGO codifica uma protena que no apresenta atividade de HGO quando expressa in vitro (conclui-se que a alcaptonria causada por uma mutao de perda de funo.

VARIANTES DO METABOLISMO Prevalncia de Doenas Metablicas Distrbios metablicos contribuem com uma porcentagem substancial de morbidade e mortalidade diretamente atribudas a doenas genticas. Compreende-se, hoje, que alelos diferentes podem alterar o risco de muitas doenas comuns. No entanto, o diagnstico de um distrbio metablico pode ser um desafio. Ex: O reconhecimento da Sndrome de Reye como uma fenocpia de um defeito no ciclo da uria importante, porque, alm dos cuidados de apoio, os defeitos do ciclo da uria so diretamente tratveis.

Herana dos Defeitos Metablicos A maioria dos distrbios metablicos herdada de moto autossmico recessivo. S as pessoas com dois alelos mutantes so afetadas. Embora um alelo mutante produza ou no atividade enzimtica reduzida, ele geralmente no altera a sade do heterozigoto portador. Hoje, o teste dos portadores e o diagnstico pr-natal de muitos distrbios metablicos esto disponveis. Entretanto, infelizmente, a maioria das mortes causadas por erros inatos do metabolismo devida a variantes enzimticas no includas nos programas de triagem neonatal.

Tipos de Processos Metablicos Os distrbios metablicos podem ser classificados por 1) Os efeitos patolgicos da via bloqueada; 2) Classes funcionais diferentes de protenas; 3) Co-fatores associados; 4) Vias afetadas. Nenhum destes engloba todos os distrbios metablicos.

DEFEITOS DOS PROCESSOS METABLICOS Metabolismo de Aminocidos Por serem as unidades estruturais fundamentais das protenas, alguns dos aminocidos podem ser sintetizados endogenamente (no essenciais), ao passo que outros devem ser obtidos do ambiente (essenciais). Ex: Hiperfenilalanemias - Causadas por defeitos no metabolismo de fenilalanina (um aminocido essencial). Resumem-se a distrbios causados por mutaes dos loci codificantes de componentes da via de hidroxilao da fenilalanina. Os nveis elevados de fenilalanina plasmtica perturbam processos celulares essenciais no crebro (como a mielinizao e sntese de protenas) e, por isso, produzem grave retardo mental. A maioria dos casos de hiperfenilalanina causada por mutaes da fenilalanina hidroxilase (PAH) e produzem a fenilcetonria clssica (PKU). Mais de 100 mutaes foram identificadas na PAH, incluindo substituies, inseres e delees. O tratamento da maioria das hiperfenilalanemias visa a restaurar os nveis normais de fenilalanina sangunea, restringindo a ingesto diettica de alimentos contendo fenilalanina. Porm, sendo uma falta completa de fenilalanina fatal, deve ser mantido um balano cuidadoso para fornecer ao afetado fenilalanina e protenas suficientes para o crescimento normal. Triagem Neonatal para Fenilcetonria: A restrio diettica de fenilalanina, quando iniciada antes de quatro semanas de idade, altamente efetiva em alterar o curso da doena. Virtualmente, todas as pessoas com PKU clssica tero inteligncia normal quando tratadas. No perodo neonatal deve ser feito o teste de Guthrie, no qual o sangue coletado por uma puno no calcanhar, incubado com uma linhagem de bactrias que requer fenilalanina para crescimento e, com isso, feita a quantificao da fenilalanina na amostra sangunea. A taxa de deteco desse teste de 98% aps dois dias de idade e

alimentao regular com protenas.

Diagnstico Pr-Natal de Doenas Genticas e Defeitos Congnitos

O diagnstico pr-natal o principal foco do diagnstico gentico, servindo para fornecer a famlias em risco informaes de forma que elas possam fazer escolhas durante a gravidez. Os potenciais benefcios dos diagnsticos pr-natais incluem: 1) Fornecer apoio a famlias em risco quando o resultado anormal; 2) Fornecer informao de risco a casais que, na ausncia desta informao, no escolheriam iniciar uma gravidez; 3) Permitir ao casal preparar-se psicologicamente para o nascimento de um beb afetado; 4) Ajudar o profissional de sade a planejar o parto, o procedimento e o cuidado da criana quando o feto diagnosticado com a doena; 5) Fornecer informao de risco a casais para os quais a interrupo da gravidez uma opo. O diagnstico pr-natal inclui ambos os testes de triagem e diagnstico: Amniocentese: Retirada de lquido amnitico durante a gravidez, realizada em torno de 16 semanas depois do ltimo perodo menstrual da mulher (LMP) e utilizada para diagnosticar vrias doenas genticas. A taxa de perda fetal atribuda a esse procedimento de aproximadamente 1/200 acima do risco normal. A amniocentese tambm pode ser realizada precocemente na gravidez; alguns indica elevada taxa de perda fetal aps a amniocentese precoce. indicado em caso de: Idade materna acima de 35 anos/ Crianas anteriores com anomalias cromossmicas/ Histria de anomalia estrutural cromossmica em um genitor/ Histrico familiar de defeitos genticos diagnosticveis por anlises bioqumicas ou de DNA/ Risco de defeitos do tubo neural. CVS (Amostragem das Vilosidades Corinicas): A CVS realizada antes da amniocentese (entre 10 - 11 semanas ps LMP), utilizando uma abordagem transcervical ou transabdominal. O risco de perda fetal atribudo CVS de aproximadamente 1%-1,5%. O mosaicismo confinado placenta pode confundir o diagnstico. Existe alguma evidncia de que a CVS pode aumentar o risco de deficincias dos membros: este risco maior quando o procedimento realizado antes das 10 semanas ps-LMP. Amostragem de Sangue Umbilical Pericutnea/ Cordocentese: um mtodo para a amostragem direta de sangue fetal e utilizado para obter uma amostra de sangue

para anlise citogentica rpida ou anlise hematolgica ou para a confirmao de mosaicismo. Ultrassonografia: Transdutor posicionado no abdome da me envia pulsos de ondas sonoras atravs do feto. Com a reflexo das ondas em um monitor, algumas das vrias malformaes fetais so detectveis. Dosagem da -Fetoprotena no Lquido Amnitico e no Soro Materno: O nvel de alfafetoprotena elevado quando o feto tem um defeito do tubo neural e fornece um teste pr-natal confivel para esta condio. Nveis de -fetoprotena srica materna (MSAFP) so, por alguma razo, diminudas quando o feto portador da Sndrome de Down e substancialmente elevada quando o feto portador de espinha bfida. Alm da Sndrome de Down e de Defeitos do Tubo Neural (NTD), a MSAFP tambm fornece deteco da Trissomia do 18. O procedimento no-invasivo no envolve virtualmente nenhum risco, mas sua sensibilidade e especificidade para a deteco de NTD so menores que aquelas para o diagnstico da AFP Amnitica. O uso de marcadores adicionais (ex, a triagem tripla) no segundo trimestre de gravidez aumenta a sensibilidade para a deteco de Sndrome de Down. A triagem do soro materno para Sndrome de Down, Trissomia do 13 e Trissomia do 18 tambm possvel no primeiro trimestre. Diagnstico Pr-Implantao: Pode ser realizado em clulas de glbulos polares, de blastmeros ou de blastocistos, nas quais a anlise por PCR e/ou de FISH realizada. O diagnstico de condies genticas permite a implantao somente de embries noafetados e evita a questo da interrupo da gravidez. Diagnstico Fetal Utilizando Clulas Isoladas de Sangue Materno: Clulas fetais que entram na circulao materna podem ser isoladas e avaliadas por mutaes utilizando PCR ou FISH. Este procedimento experimental no impe risco algum de perda fetal.

Limitaes dos Testes Genticos: 1) Nenhum teste gentico 100% preciso; 2) Os testes genticos revelam a presena de mutaes, no a presena de doenas. Isto reflete o fato de que vrias mutaes causadoras de doenas tm penetrncia incompleta; 3) O teste gentico pode no detectar todas as mutaes que podem causar doena; 4) O teste gentico pode levar a complexas consideraes ticas e sociais. Os resultados de um teste gentico podem levar estigmatizao ou discriminao por parte dos empregadores ou das companhias de seguro.

GENTICA DO CNCER
As causas do cncer so uma mistura de alteraes ambientais e genticas que ocorrem em nossos tecidos. A predisposio herdada exerce um papel importante em algumas famlias. "Cncer" um conjunto de distrbios que compartilham a caracterstica comum de crescimento celular descontrolado. Isso leva a uma massa de clulas denominada neoplasia (ou tumor). Vrios eventos importantes devem ocorrer se as clulas escapam dos limites habituais que impedem a proliferao desenfreada. Clulas com caractersticas anormais de crescimento deveriam desencadear um processo de morte celular programada - apoptose, mas, ao invs disso, parecem de algum modo incapacitar esse processo. Os sinais inibitrios adicionais devem ser vencidos para que o tumor alcance um estado maligno, em que as neoplasias invadem tecidos prximos e promovem a metstase para locais mais distantes do corpo. A capacidade de invadir e de produzir metstase distingue neoplasias benignas de malignas. Na normalidade da atividade metablica, um conjunto de sinais bioqumicos determina o desenvolvimento, o crescimento, diferenciao e morte (apoptose) de clulas do corpo. O cncer resulta do surgimento de um clone de clulas livres dessas limitaes de programao e de desenvolvimento e capazes de uma proliferao inadequada.

CAUSAS DO CNCER Consideraes Genticas "A CAUSA BSICA DO CNCER O DANO DE GENES ESPECFICOS. GERALMENTE, AS MUTAES NESSES GENES SE ACUMULAM EM CLULAS SOMTICAS AO LONGO DOS ANOS, AT QUE UMA CLULA ACUMULA UM NMERO SUFICIENTE DE ERROS PARA DAR INCIO A UM TUMOR. SE O DANO OCORRE EM CLULAS DA LINHAGEM GERMINATIVA, ENTRETANTO, UMA FORMA ALTERADA DE UM DESSES GENES PODE SER TRANSMITIDA AOS DESCENDENTES E PREDISPOR ESSES INDIVDUOS AO CNCER. O AUMENTO DO RISO DE DESENVOLVER CNCER EM TAIS PESSOAS DEVIDO AO FATO DE QUE CADA UMA DE SUAS CLULAS CARREGA O PRIMEIRO PASSO DAS MUITAS ETAPAS DO DESENVOLVIMENTO DO CNCER." As alteraes genticas dos sistemas de regulao celular so a base principal da carcinognese. A maioria dos eventos genticos que causa o cncer ocorre em clulas somticas. A frequncia desses eventos pode ser alterada pela exposio a agentes mutagnicos (estabelecendo, assim, uma ligao a carcingenos ambientais).

No entanto, esses eventos genticos no so transmitidos s geraes futuras, porque ocorrem em clulas somticas e no em germinativas. Tambm possvel que mutaes que predisponham ao cncer ocorram em clulas germinativas. Isso resulta na transmisso de genes alterados que so importantes na gnese do cncer de uma gerao para a outra. Quase todos os indivduos que herdam o alelo mutante desenvolvero um tumor, porque cada uma de suas clulas agora carrega o gene alterado e isto j o primeiro passo na via de desenvolvimento do cncer. Se predisposies hereditrias so determinantes significativas de risco de uma pessoa desenvolver um tipo especfico de cncer, deve ser possvel identificar aqueles com risco elevado. Uma triagem mais intensa de grupos definidos como de alto risco poderia resultar na deteco precoce e na interveno, levando a um melhor prognstico para os pacientes e diminuindo a morbidade e a mortalidade.

Consideraes Ambientais "OS FATORES AMBIENTAIS SO CONHECIDOS POR DESEMPENHAR UM PAPEL IMPORTANTE NA CARCINOGNESE. NO ENTANTO, O RISCO DE UMA PESSOA EM TODA PARTE DESENVOLVER UM TIPO DE CNCER DEPENDE DE UMA COMBINAO DE FATORES HERDADOS E COMPONENTES AMBIENTAIS." sugerido um papel importante do ambiente ou estilo de vida na etiologia do cncer de clon. Acredita-se que uma dieta com alto teor de gordura e pobre em fibras nos Estados Unidos possa aumentar o risco de cncer de clon, enquanto no Japo, as tcnicas utilizadas para preservar e temperar os peixes mais consumidos podem aumentar o risco de desenvolver cncer de estmago neste pas. provvel, ento, que o risco de cncer seja uma composio de ambos os fatores - genticos e ambientais - com a interao entre os dois componentes.

FATORES ENVOLVIDOS NA GNESE DO CNCER Controle Gentico do Crescimento e da Diferenciao Celular O cncer se forma quando um clone de clulas normais perde o controle sobre o crescimento e diferenciao. Mais de 100 genes envolvidos na gnese do cncer que codificam protenas que participam dessa regulao j foram identificados.

A regulao do crescimento celular realizada por substncias que incluem: 1) FATORES DE CRESCIMENTO, que transmitem sinais de uma clula para outra; 2) RECEPTORES ESPECFICOS para os fatores de crescimento; 3) MOLCULAS DE TRANSDUO DO SINAL que ativam uma cascata de reaes de fosforilao na clula; 4) FATORES DE TRANSCRIO NUCLEARES. A clula integra e interpreta a srie de sinais que recebe de seu ambiente. Decises de crescer e diferenciar-se resultam do processamento desses sinais. "As mutaes podem ocorrer em qualquer uma das etapas envolvidas na regulao do crescimento e da diferenciao celular. O acmulo dessas mutaes em uma linhagem de clulas pode resultar em uma desregulao progressiva do crescimento, finalmente produzindo uma clula tumoral."

O Gene do Cncer Hereditrio versus O Gene Alterado Somaticamente Retinoblastoma: Alfred Knudson determinou a Teoria da Carcinognese em Dois Eventos, que passou ento a descrever como a herana de um gene alterado predispe o portador do gene a desenvolver o cncer. Segundo esta, uma clula pode iniciar um tumor quando ele contm dois alelos mutantes: Por isso, uma pessoa que herda uma cpia de um gene retinoblastoma mutante deve experimentar uma segunda mutao somtica em um ou mais retinoblastomas. Duas mutaes somticas tambm podem ocorrer em um nico retinoblasto de um feto no predisposto, produzindo um retinoblastoma espordico. Ambos os eventos evidenciam perda de funo (deleo/mutao pontual/hipermetilao na regio promotora do RB1 na primeira mutao + Remoo do alelo normal restante de um gene fetal durante o perodo de diviso e proliferao dos retinoblastos na segunda mutao) A compreenso dos genes mutados que so herdadas nas famlias pode nos ajudar a compreender melhor a via somtica de tumores malignos comuns.

PRINCIPAIS CLASSES DE GENES IMPORTANTES NO DESENVOLVIMENTO DO CNCER 1) Genes Supressores de Tumor A descoberta de que o retinoblastoma resulta da inativao de ambos os alelos no mesmo lcus do cromossomo 13, no mesmo retinoblasto, levou ao conceito de genes supressores de tumor. Os produtos desses genes suprimem a formao do tumor por controlar o crescimento celular, mesmo quando uma clula contm apenas uma cpia normal do gene. As mutaes que levam perda de funo, que inativam as duas

cpias de uma clula do gene supressor de tumor podem provocar a proliferao celular desenfreada. 2) Oncogenes: Os proto-oncogenes codificam produtos que controlam o crescimento e a diferenciao celulas. Quando mutados ou amplificados, podem tornar-se oncogenes, que podem causar cncer. A maioria dos oncogenes age como mutaes dominantes com ganho de funo que levam desregulao do controle do ciclo celular. Em contraste com os genes supressores de tumor, a maioria dos oncogenes no apresenta mutaes germinativas que causam sndromes de cncer hereditrio. Em vez disso, so observadas mutaes somticas que levam ao cncer espordico. 3) Genes envolvidos no Reparo do DNA, Integridade Cromossmica e Tumorignese: A instabilidade genmica, que pode resultar de defeitos no reparo do DNA, muitas vezes observada em clulas tumorais e caracterizada por mutaes generalizadas, quebras cromossmicas e aneuploidias. Essas alteraes podem causar cncer quando elas afetam as vidas que regulam a proliferao celular. 4) Alteraes Genticas e Imortalidade da Clula Tumoral: Normalmente, o encurtamento progressivo dos telmeros limita o nmero de divises de uma clula para cerca de 50-70. As clulas tumorais superam essa limitao pela ativao da telomerase, que substitui os segmentos do telmero que so perdidos em cada diviso celular. Isso parece ajudar as clulas tumorais a escapar da restrio da senescncia celular.

CNCER DE MAMA HEREDITRIO Mutaes nos genes BRCA1 e BRCA2 so responsveis por uma parcela significativa dos casos de cncer de mama hereditrio, especialmente os de incio precoce. Essas mutaes normalmente resultam em um produto proteico truncado e perda de funo. Os produtos proteicos destes genes desempenham um papel importante no reparo do DNA.