Universidade Federal de Minas Gerais

Instituto de Cincias Biolgicas

Departamento de Microbiologia

Agresso por bactrias

anaerbias da microbiota
exgena
Discentes: Flvia Fonseca
Jefferson Silva
Joo Prado
Lethcia Henriques
Junho/2016

Outline
Introduo
Clostridium difficile
Clostridium perfringens
Ttano
Botulismo

Introduo
Infeces anaerbicas
Envolvem anaerbios formadores de esporos e que
produzem toxinas.
Infeces mistas de anaerbios obrigatrios e
facultativos.
maioria das infeces
Infeces causam formao de pus, gs, odor, abcesso e
necrose.
A minoria das infeces anaerbias so causadas por
espcies exgenas.
Infeces de origem exgena so transmitidas atravs do
meio ambiente (solo, ferramentas contaminadas, fezes).
Agresso pode ocorrer sem ou com colonizao

Introduo
Estabelecimento de
infeces

Perda de suprimento sanguneo em tecidos

Rompimento da barreira anatmica (trauma)
Ferimento com corpos estranhos
Queimaduras
Ingesto/Inalao
Baixa imunidade
Consrcio com bactrias anaerbicas
facultativas

Introduo
Fatores de virulncia

Fmbrias e adesinas
Capsula (polissacadeos)
Enzimas histolticas
Exotoxinas

http://estruturabacteriana.blogspot.com.br/
2011/03/fimbrias.html

http://202.116.160.98:8000/course/weis
hengwx/huanongen/shiyanjishu/jiamoran

https://www.bnl.gov/newsroom/ne
ws.php?a=1176

Introduo

Introduo
Diagnstico

Introduo
Agente etiolgico

Clostridium spp
Gram-positivas de baixo contedo GC
Anaerbios
Filo: Firmicutes
Formadores de endsporos
Mais de 203 espcies identificadas (rDNA 16S)
Mais de 50 patognicas (humanos e animais)

http://www.medscape.com/viewarticle/841721

Introduo
Agente etiolgico
Clostridium spp
Forma de bacilo (0,3 2,0 m dimetro, 1,5 20 m
comprimento
Podem formar arranjos curtos
Podem apresentar flagelos peritrqueos
Podem apresentar capsula
Produtores de toxinas

http://www.medscape.com/viewarticle/841721

Introduo
Ecologia
Pode ser encontrado nos diversos ambientes
Esporos podem estar dispersos no solo, gua,
pastagem
Alimentos de origem animal e vegetal
Espcies no patognicas no trato intestinal de
animais e do homem

http://www.tecnologiaetreinamento.com.b
r/pecuaria/alimentacao-pecuaria/cursorecuperar-pastagens/

http://informativoregional.com.br/de
staque/botulismo-campo-ou-emcasa/

www.insumos.com.br

Introduo
Patologia
Patgenos no invasivos : pouca capacidade de
colonizar nos tecidos, produo de potentes toxinas
Ex: C. botulinum e C. tetani
Patgenos invasivos : multiplicam-se nos tecidos e
produzem toxinas
Ex: C. perfringens

http://en.citizendium.org/wiki/Cl
ostridium_tetani

https://wellcomeimages.org/indexplus/gallery/Pathogens
%20and%20disease.html?f=14&vf=1

Introduo
Agentes etiolgicos

Introduo
rvore filogentica

http://bioweb.uwlax.edu/bio203/s2009/kumm_jakl/classification.ht

Clostridium difficile
Identificado em 1930 no trato intestinal de recm
nascidos.
Nome dado devido a dificuldade de se cultivar in
vitro.
encontrado na microbiota humana, 3% adultos e
70% bebs
Contaminao atravs da ingesto de esporos,
pelo contato com fezes ou em ambientes
hospitalares.
Infeco nosocomial devido ao uso de antibiticos
morte da microbiota indgena (defesa)
A colonizao do C. difficile
pode ocasionar colite
http://bioweb.uwlax.edu/bio203/s2009/kumm_jakl/Pathol

Clostridium difficile

Clostridium difficile
FATORES DE
VIRULNCIA

Colonizao do trato intestinal

Toxina A : enterotoxina presente em 70% das
cepas.
induz expresso de protaglandinas

Toxina B : citotoxina presente em todas as cepas.

interagem com mastcitos, liberando
grnulos inflamatrios

Inativam Rho GTPases, rompendo as junes das

clulas epiteliais
Aumento da permeabilidade paracelular

Clostridium difficile
Epidemiologia

(Ananthakrishnan, 2011)

Clostridium difficile

Diagnstico e
Tratamento

Diagnstico:
Coleta e cultivo difcil
Ensaio de citotoxicidade
Imunocromatografia
ELISA

Tratamento: Parar com o antibitico causador,

e utilizar antibiticos especficos, como
metronidazol e vancomicina
Preveno: Higiene (lavar as mos)

Clostridium perfringens
Fisiologia

Bastonete reto e grosso

Esporos ovais e pequenos (no so formados em meio

cido)

Esporulao nos tecidos incomum

Apresentao individual ou aos pares

Pleomrfico em cultivos velhos

Gram-positivo

(varivel com subcultivos)

Clostridium perfringens
Fisiologia

Colnias
circundadas

do
por

gar
dois

sangue
tipos

de

hemlise

Liquefaz a gelatina rapidamente

Fragmentos de carne ou fgado
tornam-se rseos, no digerveis
e com um odor desagradvel
(stormy fermentation)

Quando

cultivado

em

meio

contendo substrato fermentvel

produz grande quantidade de gs

Clostridium perfringens
Histrico

George Nuttall

- Isolado, pela primeira

vez, por Welch e Nuttall,
em 1892, de um cadver
(homem) em adiantado
estado de decomposio.
- Em 1900, Migula props
a
denominao
de
Bacillus
welchii
em
homenagem
ao
pesquisador americano.
William Welch

Clostridium perfringens
Etiopatogenia e epidemiologia

Amplamente distribudo nos solos e trato alimentar de

quase todos os animais de sangue quente

Encontrado como invasor do trato alimentar aps a morte,

na gangrena gasosa do homem, dos animais ou associado a
anaerbios

Associado s leses semelhantes ao endema maligno

especialmente nos ovinos
Ingesto de alimentos contaminados
Inoculao de esporos em feridas

Clostridium perfringens
Principais grupos e
toxicidade
Variao toxignica responsvel por toxemias fatais em
ovinos, bezerros, leites e no homem (A, B, C, D, E)

Produo de 4 principais toxinas letais: alfa, beta, psilon e

iota

Protenas com atividade enzimtica

Lbeis ao calor e antignicas

Podem ser utilizadas como toxides (toxina inativa) pela

ao de qumicos que a inativam sua toxigenicidade sem
perder sua antigenicidade.

Clostridium perfringens
Toxicidade e
virulncia

(Gomes,

Clostridium perfringens
Principais grupos e
distribuio

(Gomes,

Clostridium perfringens
Resistncia
C. perfringens resistente aos aminoglicosdeos.
Sensibilidade
Penicilina G, tetraciclinas, cloranfenicol, furazolidona,
bacitracina, eritromicina, lincomicina.
Toxides podem ser inativados pela ao de qumicos

Clostridium perfringens
Tipo de infeco
Invasiva (histotxica): infeco progressiva e destruio
do tecido
Com colonizao
Manifestaes clnicas e doenas em
humanos
Gangrena Gasosa
Celulite anaerbia
Miosiste supurativa
Endometrite
Enterite necrosante

Celulite anaerbia
Clostridium
perfringens

Agente etiolgico
- Na maioria dos casos provocada
porStaphylococcusouStreptococcus
- C. perfringens, C. septicum, C.ramosum
Inflamao da derme e tecido celular subcutneo, sem
desenvolvimento de abscesso. Fatores de risco

Contuso na pele anterior

Linfedema
de
membro
inferior
Mastectomia (retirada da
glndula mamria)
Diabetes
Queimaduras
Uso de drogas na veia

Gangrena Gasosa
Agente etiolgico

Clostridium
perfringens

- C. perfringens produz grandes quantidades de hidrognio e

dixido de carbono (responsvel por 80% dos casos)
- C. septicum, C. novyitipo B, C. sordelli, C. histolyticum, C.
fallax, C. bifermentans.
Sintomas e caractersticas
- Dor, inchao e gs na regio
afetada
- Destruio nos tecidos
- Febre, sudorese, ansiedade,
baixa da presso sangunea
- Mau cheiro (putrefao)

Gangrena Gasosa
Clostridium
perfringens

Diagnstico
Visualizao
de
edema,
vesculas
hemorrgicas,
evidncia de gs no tecido ou anlise microbiolgica por
microscopia com a retirada de substncia do processo
inflamatrio.
Tratamento
Retirada do tecido
necrosado,
terapia
hiperbrica (inalao
de oxignio puro
com aumento da
presso ambiente),
administrao
de
antibiticos

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo A
- Principal causa de miosite necrosante em equinos
como sequela de ferimentos ou injees
- A toxina alfa causa leso vascular e hemlise intravascular
- Animais portadores de yellow lamb disease morrem
de 6 a 12 horas aps os primeiros sinais clnicos (Califrnia)
- Nos leites se apresenta como uma diarreia aquosa e
amarelada em animais abaixo de cinco dias e alta
morbidade e baixa mortalidade
Morbidade x
x Mortalidade
Mortalidade
Morbidade
Morbidade: taxa
taxa de
de portadores
portadores de
de determinada
determinada doena
doena em
em
Morbidade:
relao populao
populao estudada
estudada em
em determinado
determinado momento
momento ee local
local
relao
Mortalidade: nmero
nmero de
de bitos
bitos em
em relao
relao ao
ao nmero
nmero de
de
Mortalidade:
habitantes
habitantes

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo B
Disenteria dos cordeiros
- O cordeiro infecta-se durante os primeiros dias de vida
com a me ou o ambiente
- A toxina beta causa leses hemorrgicas e necrose da
mucosa intestinal
- Os animais morrem em poucas horas aps os primeiros
sinais de dor abdominal, desinteresse pelo mamar e
sangramento contnuo
Enterite hemorrgica
terneiros e potros

de

cordeiros,

cabritinhos,

Incidncia: Inglaterra, Esccia, Pas de Gales, frica do Sul e

Oriente Mdio

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo C
Enterotoxemia e enterite necrtica e hemorrgica em
terneiros e cordeiros
- A doena em bezerros geralmente observada em
animais com menos de uma semana de vida
- Leites com uma semana de idade podem exibir enterite
hemorrgica com grande mortalidade
- A doena frequente no Reino Unido, Estados Unidos e
Dinamarca
- Torna-se enzotica (constantemente presente naquele
local) uma vez estabelecida na propriedade
A beta toxina muito lbil e facilmente desnaturada por
ao enzimtica (ausncia tem pouco valor como prova
diagnstica)

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo D
Doena da supralimentao ou doena do rim pulposo
- Associada sbita mudana de uma dieta pobre para
uma dieta rica ou excessiva ingesto de alimentos
palatveis
- Desequilbrio da flora ruminal tornando o alimento
indigervel
- A presena do amido no digerido favorece o crescimento
de C. perfringens e produo de toxinas
- O efeito no crebro manifestado por alteraes dos
capilares cerebrais tornando-os permeveis s protenas
plasmticas
e
gua,
resultando
num
rpido
extravasamento de fluidos no crebro e aumento da
presso intracerebral
- Incoordenao e convulses

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo D
Doena da supralimentao ou doena do rim
pulposo
- Ocorrem edemas e efuses em diversos graus no
pulmo, pericrdio e outras cavidades serosas
- Incidncia mundial
O sistema intensivo de criao, confinamentos ou a
preparao para exposies so fatores estressantes e
predisponentes da doena.

Importncia veterinria
Clostridium perfringens
tipo E
Enterite hemorrgica e necrtica em terneiros
- Incidncia: Austrlia
- Patogenicidade em ovinos e bovinos no bem
esclarecida
O agente e a toxina esto presentes ao mesmo tempo no
intestino de ovinos e bovinos durante o exame postmortem, mesmo sem sinais de enterotoxemia por
clostrdios.

Anaerbios
Clostridium tetani

Distribuio
Atualmente, o ttano ocorre em cerca de um milho de pessoas
por ano em todo o mundo, e a maioria dos pacientes so recmnascidos nos pases em desenvolvimento localizados em reas
tropicais.
Organizao Mundial de Sade (OMS) estimou que havia
715.000 mortes por ttano em recm-nascidos, em 1990.
frequente tambm no incio do vero para o outono,
coincidindo com o aumento do exterior atividades em homens
idosos.
NAJAPPA et al., 2015

Agente causador
Clostridium tetani

Esquerda: pus manchadas de uma infeco anaerbia mista. Pelo

menos trs Clostridium diferente so evidentes.
Direita: micrografia eletrnica de clulas Clostridium tetani
vegetativos.

NAJAPPA et al., 2015

Bacilo
Gram positivo
Esporula.
Aspecto de baqueta/Raquete
Mvel
Tamanho 0.5 x 2-18 m.
Eles esto agrupados em pares ou em cadeias curtas. Eles
podem ser encontrados sozinhos.
(EBISAWA, 2001)

(EBISAWA, 2001)

Metabolismo:
Anaerbios obrigatrios e catalase
negativo

Parasitismo: Saprfitos

(NNAJAPPA et al., 2015)

Morfologia e
fisiologia

Bastonetes Gram positivos mveis;

Formador de esporos;
Anaerbicos obrigatrios;
Beta-hemlise exibido por colnias isoladas;

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

 A toxina tetnica altamente potente; uma dose

letal estimada para ser de 2,5 ng / kg de peso do
corpo (1 g de toxina corresponde a dose letal para
6.000.000 adultos com peso entre 60 kg).

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Mtodos de contaminao

A presena de tecidos necrticos, abscesso ou corpos estranhos, leso

aberta, extrao dentria, cirurgia gastrointestinal , aborto artificial, uso de
drogas, leses gangrenosa ( diabetes mellitus) , abcesso dentrio.

Fornece um ambiente anaerbico adequado para germinao.

proliferam cerca de 6 h aps a contaminao.

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Virulncia e
patogenicidade

No patognico para seres

humanos e animais por
infeco invasiva, mas a
produo de uma protena
favorece a produo toxina
tetnica ou tetanospasmina.

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Virulncia e
patogenicidade

Tetanospasmina
neurotoxina

Tetanolisina
A hemolisina causa necrose tissular local e favorece a multiplicao do C.
tetani.
A ao da toxina no espasmognica pouco definida.

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Mecanismo de ao

Estimulao
contnua

Transmisso
excitatria
Tetanospasmi
na

Inibio da
transmisso
Inibio da
transmisso
(NAJAPPA et al., 2015)

Tipos de ttano:
local, ceflico, generalizado,
neonatal

Ttano localizado e
ceflico

Espasmos na local acometido.

Fraqueza muscular
Paralisia de nervos cranianos do
motor, msculos extra-oculares
podem tambm ser envolvidos

Fonte :http://www.cristofoli.com/biossegurana/ttano

Ttano generalizado
O perodo de incubao geralmente de 7-10 dias .
Trismo ou '' ttano '' reflete hipertonia e espasmos dos msculos masseter,
sendo encontrado como o sintoma inicial em 75% dos pacientes.
Irritabilidade, dificuldade de deglutir, rigidez e dor muscular em pescoo,
ombos e costas.
Desenvolvimento de espasmos tnicos
Disfuno respiratria
infeces secundrias
crise hipertensiva
taquicardia

Fonte :http://www.cristofoli.com/biossegurana/ ttano

Ttano neonatal
Processos impuros para tratamento
do coto umbilical em recm-nascidos.
De um modo geral, o incio da doena
de 3-10 dias
'' A doena do stimo dia. ''
Debilidade geral
Dificuldade de suco e irritabilidade
Espasmos tnico.
(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Diagnstico

Fonte :http://www.cristofoli.com/biossegurana/ttano

Tratamento

(Guiderlines for anaerobic infections , 2011)

Fonte :http://www.cristofoli.com/biossegurana/ttano

Botulismo
Histrico

1793 (Alemanha): surto envolvendo

30 pessoas, com 6 bitos, pela
ingesto de um tipo de salsicha
fervida e defumada (produo
caseira).
botulus (do latim: salsicha )

1897 (Blgica): Emile Van Ermengem

isolou o C. botulinum e detectou a
toxina em um surto envolvendo 23
pessoas, com trs bitos, pela
ingesto de presunto.

Botulismo

gente Etiolgico: Clostridium botulinum (principal)

Grupo formado por : C. botulinum, C. argentinense, C. baratii

e
C.
butyricum
(produzem toxinas proteicas que causam
botulismo em humanos e animais).

Botulismo

Botulismo

Botulismo

Botulismo

Principais grupos

NATURE REVIEWS

MICROBIOLOGY VOLUME 12

AUGUST 2014

Clostridium botulinum
Fisiologia
Bastonetes grandes (0,5-0,8 m de dimetro e 3-6 m de
comprimento)
Cadeias curtas ou em unidades individuais
Mveis quando jovens com flagelos peritrquios
Esporos: ovais e subterminais

Esporos

Clostridium botulinum
Fisiologia
Colnias: grandes,
semitransparentes com bordos
irregulares, cobertas por uma
penugem
Cresce melhor em torno dos
30C

Clostridium botulinum
Resistncia
Esporos:
Muito resistentes, podendo resistir fervura por 30
minutos por vrias horas.
Resistem a autoclavao a 120 C por 20 minutos.
Toxinas:
Calor: 30 min a 80 C, por qualquer tempo a 100 C
Qumica: hipoclorito de sdio (NaOCl a 0,1 %, durante 30
min).
Raios solares: 1 a 3 horas.
Aerobiose e na escurido: aps 12 horas
A clorao clssica utilizada para o tratamento das guas

Botulismo
Tipos

Botulismo
Botulismo
Botulismo
Botulismo

alimentar
infantil
por ferimentos
por inalao

Toxinas

Esporos

Clostridium botulinum
Distribuio

O C. botulinum e o seus esporos so amplamente distribudos

mundialmente.
(Frequentes nos solos e sedimentos marinhos).

Esporo - frequentemente detectado na superfcie de frutas,

vegetais e frutos do mar.

Botulismo
Virulncia

Botulismo
Virulncia
As neurotoxinas botulnicas so as toxinas mais potentes
conhecidas.
Sem tratamento 60% dos casos evoluem para a morte.
Dose letal (homem): 0,1-1 g.

1 g da toxina poderia matar mais

de um milho de pessoas.

Botulismo

Prescott et al. (2008)

Os efeitos fisiolgicos da toxina botulnica. (A) A relao entre

o neurnio motor e o msculo na juno neuromuscular. (B) No
estado normal, a acetilcolina liberada na sinapse passa para o
msculo e gera um impulso que estimula a contrao muscular.
(C) No botulismo, a toxina impede a exocitose da acetilcolina. Com

Botulismo
Sinais
e sintomas

Alimentar:
Oculares (viso embaada, pupilas
dilatadas, reflexos por luz atrasados)
Paralticos ( fala comprometida,
perda de audio, dificuldade de
engolir, perda de expresso facial)
Secreo comprometida (boca seca).

Botulismo
Sinais e sintomas
Infantil: constipao, perda de apetite, sonolncia, apatia,
paralisia, reflexos comprometidos, dificuldade respiratria.

Botulismo
Sinais e sintomas

Botulismo por ferimentos em um usurio de herona

Botulismo
Sinais e sintomas

Botulismo em animais

Botulismo
Tratamento
Eliminao da toxina do trato gastrintestinal e respiratrio

-Enemas (encurtam o tempo de reteno intestinal)

- Intubao endotraqueal (necessria em metade dos casos
infantis)
- Antitoxina equina (em casos graves, exceto em casos
infantis)
-Penicilina G ou Metronidazol. (Antibiticos no so usados

Botulismo
Controle

Botulismo
Controle

Referncias
Lindstro, M. (2006). Laboratory Diagnostics of Botulism, 19(2), 298314.
http://doi.org/10.1128/CMR.19.2.298
Services, M. (2016). UK Standards for Microbiology Investigations
Identification of
Clostridium species, 127.
Rossetto, O., Pirazzini, M., & Montecucco, C. (2014). Botulinum
neurotoxins: genetic,
structural and mechanistic insights. Nature
Publishing Group, 12(8), 535549. http://doi.org/10.1038/nrmicro3295
Fonte :http://www.cristofoli.com/biossegurana/ttano
Guiderlines for anaerobic infections (individual fields): tetanus . J Infect
Chemother 17
(Suppl 1):125132, 2011.
NANJAPPA, S.; SHAH, S.; PABBATHI, S. Clostridium septicum Gas Gangrene
in Colon Cancer:
Importance of Early Diagnosis. Case Rep Infect
Dis,2015.
Ebisawa I. Ecology of Clostridium tetani. Mod Media. 47:19599 (Japanese),
2001;

Obrigado (a)!