Centro de Bioterismo

Faculdade de Medicina/ USP

Categorias sanitárias
e
Técnicas cirúrgicas para limpeza de linhagens:
- Histerectomia
- Criopreservação
Prof. Selmo
 CATEGORIAS SANITÁRIAS

• Animais convencionais
• Animais SPF
• Animais gnotobióticos
• Animais GermFree
 Animais Convencionais

São animais que possuem

microbiota indefinida por serem
mantidos em ambientes
desprovidos de barreiras sanitárias
rigorosas.

Animal Quality and Model in Biomedical Research

 Animais SPF

Possuem microorganismos e
parasitas específicos e são
mantidos em ambiente com
barreiras sanitárias rigorosas

Animal Quality and Model in Biomedical Research

 Animais Gnotobióticos

Possuem flora microbiológica

conhecida e devem ser criados
em ambientes de barreiras
sanitárias absolutas

Animal Quality and Model in Biomedical Research

 GermFree

Esses animais são livres de qualquer

forma de vida associada, portanto,
requerem cuidados especiais

Animal Quality and Model in Biomedical Research

 Fluxograma
Os animais provenientes de outras instituições devem passar por
processo de prevenção de modo a evitar possíveis contaminações.
O gráfico a seguir demonstra a seqüência pela qual os animais passam
para finalmente chegar as mãos do pesquisador

S Reprodução
Animais de Colônia de P Produção
Quarentena
outras
Fundação F Estoque Comunidade
instituições
 Equipamentos utilizados na Quarentena

Capela de Fluxo

Estante ventilada
ESTANTE VENTILADA
QUARENTENA
MICROISOLADOR
COLÔNIA DE FUNDAÇÃO
ÁREA DE CRIAÇÃO CONVENCIONAL
TÉCNICAS CIRURGICAS PARA LIMPEZA DE LINHAGENS

HISTERECTOMIA E CRIOPRESERVAÇÃO
 CHEGADA PROGRAMADA DOS ANIMAIS

QUARENTENA

GNOTO HISTERECTOMIA CRIOPREVERÇÃO

SPF QUARENTENA QUARENTENA

FOENECIMENTO GNOTO GNOTO

SPF SPF

FORNECIMENTO FORNECIMENTO
 PROGRAMAÇÃO DE HISTERECTOMIA

• Animais Isogênicos – Tempo de gestação 21 dias

• Animais Heterogenéticos – Tempo de gestação 18 dias
 Acasalamento programado
1) Os acasalamentos devem ser programados de
modo que a cirurgia seja efetuada em dias
úteis.
2) Fêmeas receptoras são acasaladas com dois
dias de antecedência das fêmeas doadoras
Ex.: Animais doadores:
- Acasalamento animais isogênicos dia 1 , data
da cirurgia: dia 19
- Acasalamento animais Heterogenéticos dia 1,
data da cirurgia: dia 16
Plug
 FLUXO LAMINAR

Utilizado nas salas de Quarentena

I e II.
Todos os manejos são efetuados
dentro de fluxo a saber:
Troca semanal, desmame,
verificações gerais, troca quando
quando da chegada de animais
vindos de outras instituições ou
importados.
ISOLADORES PARA HISTERECTOMIA
 ESTANTES VENTILADAS

Utilizadas para a manutenção dos

animais das Quarentenas I e II. O ar e
a temperatura são controlados e
monitorados diariamente.
- Troca de ar de 18 a 20 vezes/ hora.
- Temperatura de 20ºC a 22ºC.
MATERIAIS UTILIZADOS PARA RETIRADA DO ÚTERO DA
MÃE DOADORA
MÃE DOADORA
DESLOCAMENTO CERVICAL
ASSEPSIA PRÉ-RETIRADA DO ÚTERO
CORTE LOGITUDINAL DO ABDOME
EXPOSIÇÃO DO ÚTERO
Doadora
ÚTERO PRONTO PARA SER RETIRADO
SEPARAÇÃO DO ÚTERO
ISOLAMENTO DO ÚTERO
RETIRADA DO ÚTERO
FLUXO PARA BANHO GERMICIDA E
REANIMAÇÃO DOS NEONATOS
BANHO GERMICIDA DO ÚTERO
LIMPEZA DOS FILHOTES
REANIMAÇÃO DOS FILHOTES
Limpeza das vias respiratórias
Etapa final de limpeza
FILHOTES PRONTOS PARA ADOÇÃO
FILHOTES ADOTADOS PELA MÃE RECEPTORA
 CRIOBIOLOGIA

CIÊNCIA ESTUDADA DESDE 1951 POR BEAUTHY

 FINALIDADES
• Conservar padrão genético original;
• Limpeza de linhagens;
• Diminuição de custos;
• Estoque potencial muito alto;
• Transporte facilitado;
 UTILIZAÇÃO DA TÉCNICA

• Testes de toxicidade de meios;

• Utilização em medicina humana e veterinária;
• Micromanipulação – Modelos trangênicos;
 DESCRIÇÃO DA TÉCNICA
Técnicas preparatórias:
1) Vasectomia;
2) Superovulação de fêmeas doadoras;
3) Resgate de embriões;
4) Protocolos de acompanhamento;
5) Processo de congelamento
6) Implantes
 Animais utilizados
• Fêmea doadora e Macho doador
• Fêmea receptora e Macho Vasectomizado
Vasectomia
 SUPEROVULAÇÃO

PMSG (5ui) HCG (5ui) PLUG 2 cél. 4-8 cél. Mórula Blastocistos
|--------------------|-------------|--------|--------|-------- ---|-------------|
16h (48h) 16h 8h
(dia -2) (dia 0) (dia 1) (dia 2) (dia 3) (dia 4)-----(dia 5)

Oviduto Útero
Resgate de embriões
Desenvolvimento embrionário
Desenvolvimento embrionário após a implantação:
 CONTATO:

Centro de Bioterismo - Faculdade de Medicina/USP

Fone: (11) 3061.8510
e-mail: selmo@biot.fm.usp.br