Ciclo celular

Bases Moleculares
 Fases do Ciclo Celular
 MITOSE
 Divisão celular (30 minutos)
 Cromossomos condensados,
individualizados e duplicados
 INTÉRFASE
 Maior parte do ciclo (24 horas)
 DNA difuso no núcleo.
 Processos contínuos: síntese de membranas,
ribossomos, mitocôndrias, lisossomos, ER, Golgi e
macromoléculas.
 Processos intermitentes (1 só vez no ciclo): síntese de
DNA (fase S), duplicação dos centríolos.
 Fases: G1, S e G2.
 Fases do Ciclo Celular

CÉLULAS ADULTAS

CÉLULAS EMBRIONÁRIAS

2000, Geoffrey M Cooper

 Go INTÉRFASE
 Fasequiescente
 Metabolicamente ativa
 Tempo indeterminado (até estímulo)
Fase não obrigatória
 G1
 Crescimento celular
 Duplicação de organelas
 S
 Replicação do DNA
 G2
 Crescimento celular
 Preparação para mitose
 MITOSE
Cromossomos duplicados se Microtúbulos do fuso
condensam, e os centrossomos se se ligam ao
movem para lados opostos. cinetecoro.

Cromossomos
alinhados no equador
da célula.

Cromátides irmãs separam-se e se

movem para pólos opostos do fuso.

Regeneração do envelope nuclear e

descondensação dos cromossomos.
 Divisão Celular
As células podem ser divididas em:
 Células que se dividem continuamente
Ex.: céls. embrionárias, céls. de renovação rápida como epitélio do
intestino delgado, folículos capilares, sistema linfático, medula óssea,
epiderme
 Células que não se dividem, mas podem entrar em divisão
em resposta a estímulos
Ex.: hepatócitos , fibroblastos da pele, células renais, céls. do
músculo liso, pâncreas, ovário, pulmão, céls. ósseas
 Células diferenciadas que não se dividem
Ex.: neurônios, céls. da musculatura esquelética e cardíaca
Cada célula responde a um
conjunto de sinais
Como estudar as fases do ciclo celular?
 Num mesmo tecido, a duração do ciclo varia, de modo
que os ciclos não são sincronizados.

 Há métodos que permitem induzir a sincronização:

 indução de sincronização – carência de fatores de
crescimento

 Células no início do desenvolvimento embrionário são

sincronizadas. Estas células se dividem rapidamente,
sem crescer.
Estímulos para divisão celular
 Nutrientes
 Fatores de crescimento

G0  estímulo  G1
 Em um ponto anterior à passagem para a fase S;

anterior ao ponto de restrição (R)  ponto crítico a ser

ultrapassado para que a célula entre em divisão

 Estímulos para divisão celular
 Ciclo celular - influenciado por fatores de crescimento e outros
sinais extracelulares
 NGF - fator de crescimento neural
 EGF - fator de crescimento epidermal
 FGF - fator de crescimento de fibroblastos
 PDGF - fator de crescimento derivado de plaquetas
 IGF - fator de crescimento semelhante à insulina

2000, Geoffrey M Cooper

 Controle do Ciclo Celular
 Cdks (cinases dependentes de
ciclinas)
 Atividade surge e desaparece com o
avanço do ciclo;
 Oscilações diretamente ligadas com a
regulação do ciclo;
 Níveis de Cdks constantes.

 CICLINAS
 Responsáveis pela regulação das
Cdks
 Cdks + ciclinas = ATIVIDADE
 Sofrem ciclo de síntese e degradação
a cada ciclo celular.
 Ativação do complexo

Inativação do complexo Inativação do complexo

Proteina CKI

Degradação da ciclina por ubiquitinação

Complexo Cliclina Cdk
Ciclina-Cdk
G1-Cdk Ciclina D Cdk4 ou 6

G1/S-Cdk Cliclina E Cdk2

S-Cdk Ciclina A Cdk2

M-Cdk Ciclina B Cdk1

 Estímulos para divisão celular

2000, Geoffrey M Cooper

Fase G1 – Rb

Ex: Ciclina E
Fase G1 – Rb: Células em repouso
Fase G1 – Rb: Células em Proliferação
 Principais Ciclinas e Cdks
COMPLEXOS VERTEBRADOS BUDDING YEAST

Ciclina-Cdk Ciclinas Cdk associada CYCLIN CDK PARTNER

G1 - Cdk ciclina D Cdk4, Cdk6 Cln3 Cdk1**

G1/S-Cdk ciclina E Cdk2 Cln1, 2 Cdk1

S-Cdk ciclina A Cdk2 Clb5, 6 Cdk1

M-Cdk ciclina B Cdk1 Clb1, 2, 3, 4 Cdk1

OBS: Cdc2=Cdk1

2000, Geoffrey M Cooper

2006, Bruce Alberts
 Pontos de checagem (Checkpoints)
 Controlam as transições entre os estágios
do ciclo celular

 Danos no DNA  G1, S, G2

 Metáfase  Cromossomos alinhados

ANAFASE
CHECKPOINT
Fase G1 – p53
 p53 ativa p21

GENE SUPRESSOR DE TUMOR

p53 ativa p21
Fase G2
 Pontos de checagem (síntese do DNA)
 Síntese de RNA e proteínas
 Síntese do complexo proteico denominado:

Fator promotor de maturação (MPF):

 Regulador da transição G2  M, responsável por:
 condensação cromossômica
 ruptura da carioteca
 montagem do fuso
 degradação da ciclina
Fase G2: Controle do MPF
Separação das
cromátides irmãs

Aumento da síntese da
proteína Cdc20
Ativação da enzima APC
(complexo promotor de
anáfase)
Enzima separase degrada
coesinas que fixam as
cromátides irmãs

 Fim da fase M
desfosforilação das proteínas que levaram a mitose
Ubiquitinação da M-Ciclina desencadeadas pelo complexo Cdc20-
APC
Pontos de checagem
Ponto de checagem do DNA danificado
 Inibição das G1-Cdk e G1/S-Cdk
 Aumenta atividade da proteina p53
Pontos de checagem
Ponto de checagem da replicação
do DNA
 Detectam o DNA não replicado
ou uma forquilha de replicação
(mecanismos moleculares
desconhecidos)
 Geram sinais negativos para o
sistema de controle do ciclo
 Inibi a atividade da fosfatase
Cdc25 para não haver a ativação
da M-Cdk
Pontos de checagem
Ponto de checagem na fixação do
fuso
 Cinetocoro que não esta fixado
adequadamente gera um sinal
negatico para o controle do ciclo
 Inibi a ativação da Cdc 20/APC
conseqüentemente não
separação das cromátides irmãs
Controle do crescimento em células normais

 Condições normais  órgãos crescem até atingir um

tamanho fixo, raramente ultrapassado

CONTROLE RÍGIDO DE CRESCIMENTO

 Fatores estimulatórios e inibitórios (hormônios e

fatores de crescimento) em equilíbrio até que ocorra
um estímulo especial
 Fatores antiproliferativos
 Sinais antiproliferativos
 incluem agentes que danificam o DNA, fatores ambientais

adversos, proteínas importantes para contato celular

 agem através dos inibidores de cdk, inativação de MPF,

bloqueio do ciclo (genes supressores de tumor)

 p53 - potente indutor de apoptose

Gene supressor
de tumor
genes que agem inibindo a
proliferação celular e o
desenvolvimento do tumor.
 Fatores Proliferativos
 Sinais Proliferativos
 incluem os diferentes tipos de fatores de crescimento

 se ligam a receptores, sinalizam componentes da maquinaria

celular, que “ativa” o ciclo (proto-oncogenes)

 Ras/Raf/ERK (cascata de sinalização celular)

Proto-oncogenes
Genes normais que podem se
transformar em oncogenes. Eles
codificam proteínas relacionadas à
proliferação celular.
Mutações são modificações que
ocorrem no material genético.

Mutante é o organismo que apresenta

forma ou função alterada, como resultado
da ocorrência de uma mutação.
 Número de
Tipo de Mutação
Lotes
Monoploidia n

Euploidia Triploidia 3n

Tetraploidia 4n

Nulissomia 2n - 2

Monossomia 2n - 1
Aneuploidia
Trissomia 2n + 1

Tetrassomia 2n + 2
Constituições cromossômicas em um organismo normalmente diplóide (2n).
Substituição de Bases – Transições e Transversões

Transições

Bases Púricas

Transversões

Bases Pirimídicas
Substituição de Bases – Transições e Transversões
Mutação Silenciosa

ATG GAA GCA CGT

Met Glu Ala Gly

ATG GAG GCA CGT

Met Glu Ala Gly

Substituição de Bases – Transições e Transversões
Mutação de Sentido Trocado

TAC AAC GTC ACC

Met Phe Gln Trp

TAC GAC GTC ACC

Met Leu Gln Trp

 Mutação puntual em ras
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Met Thr Glu Tyr Lys Leu Val Val Val Gly Ala Gly Gly

ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG CGC GCC GGC GGT ...

ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG CGC GCC GTC GGT ...
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Met Thr Glu Tyr Lys Leu Val Val Val Gly Ala Val Gly

Carcinoma de bexiga
IV Programa de Atualização para Professores do Ensino Médio – O Fluxo da Informação Gênica
Tumor: proliferação anormal de
células
 Benigno  Maligno
 Confinado à  Invade tecidos
localização original vizinhos
 Não invade o tecido  Dá metástases
adjacente e nem através dos sistemas
outros tecidos circulatório e linfático
distantes  Só os tumores
malignos são
chamados de “câncer”
Tipos de tumores malignos
 Carcinomas
 90% dos tumores humanos
 Derivam-se de células epiteliais
 Sarcomas
 Raros no homem
 São tumores sólidos do tecido conjuntivo
(músculo, osso, cartilagem, tecido fibroso)
 Leucemias e linfomas
 8% dos tumores malignos humanos
 Células que dão origem às células sangüíneas
e do sistema imune, respectivamente
 CÂNCER
 Resultante do acúmulo de lesões no
material genético das células, que
induz o processo de crescimento,
reprodução e dispersão anormal das
células (metástase).
A incidência de vários tipos de
câncer aumenta com a idade
Causas do câncer
 Fatores genéticos
 Agentes iniciadores – causam mutações
 Químicos
 Benzo(a)pireno (tabaco), aflatoxina (fungo), etc.
 Físicos
 Radiações ionizantes e ultravioleta
 Agentes promotores de tumor – estimulam a
proliferação celular
 Ésteres de forbol e hormônios
 Vírus
 De DNA e de RNA
Doenças Multifatoriais
100% AMBIENTAL

MONOGÊNICA POLIGÊNICA
 GENES

• Proto- Oncogenes
• Genes supressores de tumor
 Porque?
Normal
Proto-oncogenes + Crescimento e
Proliferação celular
Genes supressores de tumor
-
Câncer
Mutação ou “ativação”
dos ++
Oncogenes Transformação maligna

Mutação ou “inativação”
Dos
Genes supressores de tumor
 Oncogenes
 Oncogenes são a forma mutada dos proto-oncogenes
celulares.

 Mutação dominante

 Proto-oncogenes codificam proteínas celulares que

regulam o crescimento e diferenciação celular.
Função dos Proto-oncogenes celulares

1. Secreted Growth Factors

2. Growth Factor Receptors

4. Nuclear
Proteins:
Transcription
3. Cytoplasmic Factors
Signal Transduction
Proteins
5. Cell Growth
Genes
Sinaliazação
Celular

59
PROTO-ONCOGENE: Ras
Sinalização Celular- Via Ras Raf MAP quinase

GTP
Raf Proto-oncogene
Ras
Tyr
Tyr P GDP
Grb2 ATP
SOS
ADP

proto-oncogene = ras
MAPKK
Oncogene = mutated ras
Thr P
Sempre ativado 2ATP
MAPK
Sempre estimulando 2ADP
Tyr P
proliferação

Proliferação celular
 Mecanismo de ativação dos Proto-
oncogenes

proto-oncogene --> oncogene

Translocação Cromossômica Amplificação Gênica Mutação na sequencia

codificadora

Superprodução da proteína Superprodução da proteína Proteína hiperativa produzida

normal normal em quantidades normais
 Genes Supressores de Tumor

 Função: Inibir a proliferação celular;

 Ausência ou Inibição deste fator -->

câncer
Ciclo Celular
Controle
Origem clonal do tumor

Desenvolvimento
do tumor
Estágios do desenvolvimento do tumor:
Iniciação

Mutação
 Estágios do desenvolvimento do tumor:
Progressão
Proliferação

População inicial
Segunda mutação

Célula com maior

potencial de Seleção para
crescimento crescimento rápido

Célula com potencial

ainda maior de
crescimento
Estágios do desenvolvimento do tumor:
Progressão

Terceira mutação

Seleção

Predomínio de células que

acumulam várias mutações e
apresentam alta velocidade
de proliferação
 A capacidade de dar metástases requer
outras modificações genéticas
Melanoma Clonagem

Injeção dos clones em animais sadios e análise dos pulmões após 18 dias

Muitas metástases pulmonares Poucas metástases pulmonares

Carcinoma
de cólon
 Características da célula
transformada
 Menor inibição por densidade celular em cultura
 Menor interação célula-célula e
 Maior adesão célula-matriz
 Menor inibição de migração por contato
 Menor dependência a fatores de crescimento
 Produção de fatores de crescimento
 Divisão celular aumentada
 Secreção de proteases
 Angiogênese aumentada
 Diferenciação celular diminuída
 Apoptose diminuída