Origens e síntese do acetil-CoA,

catabolismo dos aminoácidos

cetogénicos e relação com o ciclo de
Krebs
Origens e síntese do Acetil-CoA

Glicogénio Triacilgliceróis Proteína

Glicogenólise Lipólise Proteólise

Glicose Ácidos gordos

livres
Glicólise Aminoácidos

β-oxidação
Piruvato
Desaminação
oxidativa

Descarboxilação
Oxidativa Acetil CoA
Glicogénio Triacilgliceró Proteína
is
Glicogenólise Lipólise Proteólise

Glicose Ácidos gordos

Glicólise livres Aminoácidos

β-oxidação
Piruvato
Desaminação
oxidativa
Descarboxilaç
ão Acetil CoA
Oxidativa
 Síntese de Acetil-CoA:
1-Descarboxilação oxidativa do piruvato

A acetil-CoA é formada a partir da descarboxilação oxidativa do

piruvato, realizada sequencialmente pela piruvato desidrogenase –PDH
(complexo multienzimático de 3 enzimas), na matriz mitocondrial:
Desidrogenase pirúvica (grupo prostético TPP)
Dihidrolipoiltranscetilase (grupo prostético Lipoamida)
Dihidrolipoildesidrogenase (grupo prostético FAD)
– …e 5 coenzimas:
Tiamina pirofosfato (TPP) – reage com o piruvato
Lipoamida – aceita grupo acetil e transfere-o para o CoA
CoA – aceita grupo acetil
FAD – aceita equivalentes redutores
NAD+ – aceita equivalentes redutores
 Reacção global:

Reacção altamente exergónica

É irreversível

Ácidos gordos não podem

gerar directamente glícidos
2 - β-oxidação
3 – Desaminação oxidativa

Aminoácidos Cetogénicos

no decurso do seu catabolismo desdobram-se,

levando à formação de Acetil-CoA e
Acetoacetil-CoA
 .

. .

.
. .
 Acetoacetil-CoA (1)

transaminação
 Tirosina (Glutamato)
Para-hidroxifenilpiruvato

hidrolisado
(Fumarato) Fumaril-acetoacetato
Acetoacetato

Acetoacetil-CoA
 Acetoacetil-CoA (2)

 Lisina
 Leucina
 Fenilalanina (que se converte em tirosina):
fenilalanina + tetrahidrobiopterina + O2 → TIROSINA +
dihidrobiopterina + H2O ( por acção da hidroxílase da fenilalanina)

 Triptofano

Triptofano Glutatil-CoA Acetoacetil-CoA

Conversão de Acetoacetil-CoA em Acetil-CoA

Acetoacetil-CoA Acetil-CoA
 Acetil-CoA (1)

 Isoleucina
Perda dos grupos α-amina em reacções de transaminação,
formando α-cetoácidos ramificados .
α-cetoácidos ramificado + CoA + NAD+ → acetil-CoA
ramificado + CO2 + NADH + Propionil-CoA ( cisão tiolítica);

 Leucina
Perda dos grupos α-amina em reacções de transaminação,
formando α-cetoácidos ramificados
α-cetoácidos ramificado + CoA + NAD+ → acil-CoA
ramificado + CO2 + NADH
Acil-CoA Acetoacetato + Acetil-CoA ( por cisão)
 Acetil-CoA (2)

Treonina desidrogenase
 Treonina 2-amino-3-cetobutirato

ligase

Acetil-CoA
 Acetil-CoA (3)

 Triptofano
(gera-se através da hidrólise de um intermediário do catabolismo da 3-
hidrocinurenina)

Libertação de alanina e 3-hidroxiantranilato

Acetil-CoA
Ciclo de Krebs

Etapas e intervenientes
 Ciclo de Krebs (ciclo dos ácidos tricarboxílicos,
ciclo do ácido cítrico)

Hans Krebs (1900-1981)

Realiza-se na matriz mitocondrial, porque Ciclo anfibólico

as principais fontes de acetil-CoA estão
na mitocôndria

• Oxidação completa da acetil-CoA em CO2;

Objectivo
• Formação de equivalentes redutores.

Gerar ATP na cadeia de transporte de electrões e fosforilação oxidativa.

Substracto: acetil-CoA

Produtos: 2 CO2 , 1 GTP (ATP) , 3 NADH , 1 FADH2

 1ª reacção: formação de citrato

Citrato sintase: cadeia polipéptidica com 2 domínios diferentes, com o

centro activo entre estes.

Reacção de condensação altamente exergónica. Formas de

regulação da enzima dependente da quantidade dos substractos.

Formação de um composto intermédio bastante energético ( citroil-

CoA), que rapidamente se transforma em citrato, libertando CoA.
 2ª reacção: formação de isocitrato

Reacção catalisada pela enzima aconitase ( ou aconitase hidratase).

Composto por 2 reacções envolvendo a perca e recuperação de H2O.

Formação de cis-aconitato é endergónica. Logo cis-aconitato citrato

exergónica, com tendência para se dar.

No entanto o isocitrato está em baixa concentração na célula e consome-

se rapidamente na próxima reacção, conseguindo a aconitase captar H2O,sendo
necessário Fe2+ como co-factor.
 3ª reacção: formação de α-cetoglutarato

Este conjunto de 3 reacções (descarboxilação oxidativa) é primeiramente

catalizado pela enzima isocitrato desidrogenase ( requer a presença de NAD+).

Essencial a ligação de Mn2+ ou Mg2+ ao grupo carbonilo do composto

intermédio oxalosuccinato para que se forme o produto final.

Nesta reacção é produzido NADH e CO2.

 4ª reacção: formação de succinil-CoA

Descarboxilação oxidativa catalizada pelo complexo

multienzimático α-cetoglutarato desidrogenase (α-cetoglutarato,
dihidrolipoil transsuccinilase e dihidrolipoil desidrogenase), na
presença de coenzimas e grupos proestéticos (tiamina pirofosfato,
ácido lipoico, CoA, FAD e NAD+), activada pelo Ca2+.

Forma-se, igualmente NADH e CO2. A ligação S-CoA conserva a

energia.
Na presença de glutamato desidrogenase, um intermediário de α-
cetoglutarato pode ser redutoramente aminado e deixar o ciclo ( na presença
de NADH e amónia) dando origem ao glutamato.
5ª reacção: formação de succinato

A succinil-CoA sintetase (constituida por 2

subunidades) convertendo o substracto em succinato,
quebrando uma ligação bastante energética.

Permitindo a fosforilação a nível do substracto de GDP a GTP.

Conservando o carácter de alta energia da ligação tiol-éster.

Na presença do nucleósido difosfato

cinase.

Equação reversível com ATP e GTP são energeticamente

equivalentes
 6ª reacção: formação de fumarato

Succinato oxidado a fumarato pela succinato desidrogenase.

FAD ligado covalentemente Intimamente ligada na membrana

mitocondrial interna.

Complexo II da cadeia respiratória ( passagem de electrões)

Malonato ( semelhante ao
succinato) é um inibidor desta reacção Bloquear o Ciclo de Krebs
podendo ligar-se ao succinato
desidrogenase.
 7ª reacção: formação de malato

O fumarato é hidratado a malato ( mais

concretamente L-malato) pela enzima fumarase.

Só no fumarato ( devido a ligação dupla) é que esta

reacção ocorre.
 8ª reacção: formação de oxaloacetato

Catalizada pela enzima malato desidrogenase na presença de

NAD+, havendo formação de NADH.

Reacção endergónica no Baixa concentração de oxaloacetato na célula

sentido directo (novo ciclo) e a oxidação de NADH a NAD+
pela respiração mitocondrial obrigam a
reacção a progredir neste sentido.

Aspartato ( transminação)
Oxaloacetato
Piruvato ( descarboxilação)
Relembrar…

A completa oxidação da acetil-CoA em CO2 e H2O

conserva energia

O ciclo serve como via oxidativa terminal para a maioria dos

combustíveis metabólicos
Ciclo de Krebs

Características
anfibólicas, energéticas
e regulação
Características Energéticas
Equação geral do ciclo
Características Energéticas
 Rendimento energético:
3 NADH

1 FADH2

1 GTP/ATP
Características Energéticas

Moléculas de NADH e FADH2, reduzidas nas etapas

oxidativas

Transporte de electrões para a cadeia respiratória

Gerando mais ATP durante a fosforilação oxidativa

Características anfibólicas

O ciclo de Krebs é um ciclo anfibólico

Participa em reacções de catabolismo e

anabolismo
Características anfibólicas
Catabolismo

O ciclo de Krebs participa do catabolismo oxidativo de:

Ácidos gordos
Oses
Aminoácidos
que servem como substrato em diferentes etapas do ciclo.
Características anfibólicas

Anabolismo

Vários intermediários do ciclo servem como precursores

em reacções de biossíntese.
Características anfibólicas
Características anfibólicas
Anabolismo
As concentrações dos intermediários têm de se manter
constantes, caso contrário o ciclo não decorre normalmente. Como
tal, os intermediários têm de ser repostos por outros compostos,
através de reacções anapleróticas.
Regulação

A regulação faz-se a dois níveis:

antes do início do ciclo, na conversão

do piruvato em Acetil-CoA;

durante o ciclo, nas 3 etapas

exergónicas.
Regulação

 Regulação da conversão de piruvato em Acetil-CoA

Pode ser:
Positiva - presença de AMP, CoA, Ca2+,
Alostérica NAD+

Negativa – presença de ATP, ácidos

gordos, NADH e Acetil-CoA

Covalente Acção na presença de ATP sobre uma

das subunidades da enzima E1 do
complexo PDH
Regulação

 Regulação do ciclo
Ocorre principalmente em 3 etapas consideradas limitantes:

1- Síntese do citrato;
2- Conversão do isocitrato em α-cetoglutarato;
3- Conversão do α-cetoglutarato em succinil-CoA.

Pode também ocorrer nas outras etapas, devido à concentração

de substratos e de produtos finais.