Avanos da

Nanotecnologia
Farmacutica-1
Prof. Dr. Nelson Durn
MSc. Priscyla D. Marcato
MSc. Zaine Teixeira
IQ-UNICAMP
aula-2 (12/03/08)
qf-933
1 nm = 10
-9
m
NANO (ano)
ALGUMAS DICAS
Rede de Nanobiotecnologia:
(www.nanobiotec.iqm.unicamp.br)
Google: MIT OpenCourseWare
(vrios cursos completos)
MIT OpenCourseWare BE.4625
(curso: Molecular Principles of Biomaterials)
Conferencia(http://www.ranf.com/pdf/discursos/numero/vila.p
df)
Rawat et al. Nanocarriers... Biol. Pharm. Bull. 29, 1790 (2006).
Kayser et al. The Impact of nanobiotechnology... Current
Pharm. Biotechnol. 6, 3 (2005).
3,5 bilhes de anos atrs - Clulas possuem
biomquinas nanomtricas que tm funes
como manipulao de material gentico e
suprimento de energia.
Os qumicos: Sintetizam polmeros (grandes
cadeias de molculas feitas de minsculas
unidades nanoescalares- monmeros) h muitas
dcadas
NANO X MACRO
Abaixo de 100 nm as propriedades fsicas e
qumicas mudam


Aumento da rea superficial = maior
reatividade, maior penetrao em clulas


Novas propriedades ticas, eltricas e
magnticas
NANO X MACRO
NANO X MACRO
NANOBIOTECNOLOGIA MULTIDISCIPLINAR
Nanotecnologia
Nanobiotecnologia
Medicina
Engenharias
Informtica
Cincias
dos
Materiais
Biologia
Qumica
Fsica
Oral
Rotas de administrao de ativos
Oftlmica
Drmica
Parenteral (intravenosa,
intramuscular, subcutnea)
Nasal
QUAL A FUNO DOS
ATIVO (FRMACO OU
COSMTICO) NA
REA ESPECIFICA DE
ATUAO?
O FRMACO DEVE ATINGIR
UM ALVO DEFINIDO COM
EXATIDO
CLULAS OU TECIDOS
CONTROLAR O MECANISMO
DE PENETRAO DO FARMACO
MAGIC BULLET
(Paul Ehrlich)
O ATIVO LOCALIZADO DE
FORMA PRECISA NO ALVO E NO
EXATO LOCAL DA AO
OS ATIVOS ESTO LONGE
DESTE DESENHO
NANOTECNOLOGIA
NanoBioTecnologia


Encapsulamento de ativos (drug delivery)

Biosensores

Mquinas e dispositivos Moleculares

Implantes mdicos

Engenharia de tecidos

Descoberta de novos medicamentos



O princpio ativo encapsulado em espcies
coloidais como lipossomas, nano e
micropartculas polimricas ou lipdicas slidas

O princpio ativo pode estar associado a
nanopatrculas metlicas e nanotubos de
carbono


SISTEMA DE LIBERAO
SUSTENTADA
Nanopartculas: dimetro < 1m
Micropartculas: dimetro > 1 m
Vantagens
Melhora a estabilidade fsica e qumica de ativos

Melhorar a biodisponibilidade

Mantm o efeito do frmaco no tecido alvo

Solubilizar ativos lipoflicos

Minimiza os efeitos colaterais

Reduz a toxicidade

Diminui o nmero de doses/aplicaes
LIBERAO SUSTENTADA
Efeitos adversos

Nveis txicos

Faixa teraputica
Concentrao
Min. efetiva
Sem efeito


Convencional
Liberao ordem
zero



Tempo/dosagem administrada
N

v
e
i
s

P
l
a
s
m

t
i
c
o
s

Dendrmeros
Nanoemulses
Ciclodextrina
Lipossoma Nanopartculas
Polimricas
Nanopartculas
Metlicas
Nanopartculas
Lipdicas Slidas
Fulerenos
Nanotubo de Carbono
Preparao e Caracterizao de
Nanopartculas no Encapsulamento de
Ativos/Frmacos
Top-Down X Bottom-Up
http://www.barrettresearch.ca/teaching/nanotechnology/nano06.htm
Encapsulamento e liberao de
ativos: Mtodo Botton-Up atravs
de molculas auto-organizao
de molculas em soluo aquosa
Molculas anfiflicas

Renem dois grupos com polaridades
ou solubilidades opostas
lipdeos, surfactantes, protenas



Sal de amina graxa
(surfactante catinico)

Alquilssulfato
(surfactante aninico)
Betana (surfactante anfotrico)
(Surfactantes no-inicos)
Polimeros em bloco
Estruturas de algumas molculas anfiflicas tpicas

fosfatidilcolina
(fosfolipdios)
EMULSES

Aula 2




uma disperso, na qual as fases so lquidos imiscveis ou
parcialmente miscveis. Neste sistema tem-se uma fase finamente
dividida (dispersa ou interna) em uma outra fase (contnua ou
externa), na presena de surfatante (agente emulsificante).

Classificao (tamanho das partculas da fase dispersa):

MACROEMULSES - >400 nm;
MINIEMULSES 100 a 400 nm;
MICROEMULSES - transparentes, < 100 nm;
MLTIPLAS a partcula dispersa j uma emulso

Emulso
De Azevedo, 2004
Exemplos de tipos de emulses
A/O
De Azevedo, 2004
A

O
O


A
A

A/O
Emulso
mltipla A/O/A
Emulso
A/C
H
2
O / leo de parafina /
emulsificador (copoliol
cetildimeticona, lipoflico),
A/O
H
2
O /emulsificador (SDS,
hidroflico), espessante (poli
cido acrlico),A
H
2
O / CO
2
(l ou supercrtico)
/ emulsificante
Neste caso no qualquer
emulsificante, tem que ter boa
solubilidade em CO
2
com fracas
foras de dispersodas cadeias
(perfluoropoliter)

CF
3
(O-CF
2
- CF (CF
3
)
n
- (O-CF
2
)-
COO
-
NH
4
+

Gota a gota, rpm
De Azevedo, 2004

Conceito de tenso interfacial:

Foras de disperso (as chamadas foras de London):flutuaes

Presena de momentos de dipolo instantneos inerentes s
molculas, que se reorientam o tempo todo

Os momentos de dipolo de molculas vizinhas so
correlacionados e em decorrncia,molculas vizinhas sempre se
atraem

Existe uma energia superficial decorrente da existncia destas
foras intermoleculares, particularmente de disperso


De Azevedo, 2004

Conceito de tenso interfacial:

Em conseqncia das foras intermoleculares, molculas
sempre se atraem e a tendncia a minimizao da rea
superficial espontaneamente (variao da energia livre
superficial ou interfacial com a variao de rea)
A a rea de contato entre as fases
(Processo de aumento da superfcie de um lquido)
A = G
T,P ,n

De Azevedo, 2004

INSTABILIDADE:
2 lquidos imiscveis puros no podem formar uma emulso:


A tenso interfacial de valor alto representa uma energia livre
interfacial alta, decorrente do aumento na rea de contato entre
as fases

O sistema instvel termodinamicamente, se comparado rea
mnima que se conseguiria entre as duas fases quando
separadas.


De Azevedo, 2004.

Esta metaestabilidade est intimamente relacionada presena de
molculas anfiflicas (surfatantes) na interface.
+Adsorve na interface L-L como
um filme interfacial orientado

+Provoca abaixamento da tenso
interfacial, o que leva
diminuio na energia livre
interfacial

+Isto permite uma maior rea de
contato entre as fases


A maior parte dos sistemas que interessam so metaestveis ( A energia livre do
sistema tende a diminuir, mas este sistema mantido no mesmo estado por uma
barreira de ativao)
+leo
+leo
(O/A,
interface)
+gua
leo +interface
De Azevedo, 2004
Instabilidade fsica das emulses
Mecanismos
+Floculao , sedimentao
(creaming)
+Coalescncia
+Envelhecimento de
Ostwald,
separao de fases
reversvel
irreversvel
Irreversvel
quebra
Mecanismos
De Azevedo, 2004
Instabilidade Fsica das emulses
Disperso:
Movimento Browniano,
Difuso
Coliso efetiva
Foras atrativas entre as gotas,
formam-se agregados (floculao)
Rompimento do filme interfacial e coalescncia
+Paralelamente a estes fenmenos, as gotas podem flotar
+ ou sedimentar (tamanho)
Ostwald Ripening
De Azevedo, 2004
+Abaixamento da tenso interfacial: A formao da emulso
mais fcil, mas existem outros fatores de estabilidade
Mecanismos de estabilizao
das gotas
+Estrica: fora repulsiva
entre as cadeias (tamanho e
solvente);La Mer: floculao x
coagulao
+Eletrosttica: carga do
surfactante, adsoro de
contra-ons.Repulso
governada pelo overlap
entre as camadas difusas
(potencial de Stern).
+Drenagem gera
gradientes de
[surfatante] mas h cura
do filme
+Outros: natureza do
filme interfacial,
viscosidade da fase
contnua
De Azevedo, 2004
Estabilidade pela presena de partculas
slidas
+Partculas de ltex de
poliestireno estabilizando uma
gota de gua
na interface gua/octano
A partcula ir
permanecer no lquido
que molha melhor
(ngulo de contato)
Para deslocar a
partcula da interface
necessrio realizar
trabalho
De Azevedo, 2004
Ordenamento das partculas de ltex de
poliestireno ( 2,6 m )
na interface gua/octano
Organizadas em
monocamada
com empacotamento
hexagonal
A mesma
monocamada, aps
compresso: dobras e
filme pregueado.

Foras repulsivas laterais (originadas da carga superficial das partculas)
d origem monocamada altamente organizada.
De Azevedo, 2004
Seleo do surfatante como
agente emulsificante
Mtodo do HLB (balano
hidroflico-lipoflico, Griffin, 1949).
hidrofilicidade
O tamanho relativo dos
grupos determina a
curvatura preferida da
interface, o que
determina a fase dispersa
Selecionar o surfatante
ou uma combinao de
surfatantes
De Azevedo, 2004
O/A x A/O

Jacob Israelachvili (University of
California) First World Congress
in Emulsions, Paris, 1993
Hierarquia de foras e o tipo de estrutura auto-
organizada que estabiliza: emulses e
micremulses ocupam um lugar especial,
energia da ordem de kT.

Parmetro de agregao crtica, CPP = V
ap
/ L A
O PROBLEMA:
No acompanha
mudanas nas
condies
(temperatura, co-
surfatantes)
HLB indicativo apenas do tipo de emulso que pode ser esperada
,mas no indicativo de sua eficincia (concentrao requerida) ou de
sua contribuio estabilidade da emulso;

Muitas maneiras de se calcular, ex: HLB= 20 * M
hidroflico
/ M
hidroflico
+

M
lipoflico
(no-inicos)
O SONHO:
Relacionar estrutura
molecular do
surfatante com HLB
Exemplo:
Etoxilados, HLB=13
mas acima de 80
0
C
forma emulso A/O
De Azevedo, 2004
Mtodo de PIT

Shinoda e Saito (1969) definiram PIT como a temperatura na qual uma
emulso O/A torna-se A/O;
Nesta temperatura as tendncias hidroflica e lipoflica do surfatante
so perfeitamente balanceveis.

De Azevedo, 2004
Diagramas de fase para o sistema
surfatante/leo/gua
+3 diferentes tipos de diagramas de fase, dependendo dos valores relativos
de energia de interao do surfatante com leo ou gua; tie line seria
horizontal para afinidades totalmente balanceadas
+Winsor tipo I +Winsor tipo II +Winsor tipo III
Regio bifsica: tensoativo-gua
predomina
tensoativo-leo
predomina
microemulso
2 2
2
3
1
2
2
1
1
De Azevedo, 2004
Preparao de emulses
A formao e estabilidade de uma emulso afetada pela seqncia e
metodologia de mistura ( ex: emulsificador adicionado em separado,
mistura de todos os componetes);
a energia introduzida influi no dimetro das gotas;
forte tenso de cisalhamento pode levar a coalescncia e
polidispersidade (margarina O/W : componente de aroma na fase
dispersa)

Mtodos

oMtodos de micronizao energia mecnica ao sistema, promovendo
agitao dos 2 fluidos e do emulsificador (agitador)
ultra-som: produo repentina e subseqente colapso das cavidades em
um lquido; crescimento da presso local, subdiviso da gota (problemas
de reprodutibilidade, controle dos ncleos de cavitao



Mtodos




Preparao de emulses
Inverso de fase: O/A
preparada de uma
emulso A/O (menor
gasto energtico)

PIT: pequenas gotas
podem ser obtidas em T
um pouco abaixo do PIT;
consegue-se uma menor
tenso interfacial




Aplicao : preparao de microesferas
SEM, eltrons
secundrios
(topografia)
A=5000x
(clorofrmio)
De Azevedo, 2004
Emulso mltipla na
obteno de
microesferas para
vacinas de DNA
De Azevedo, 2004
Bibliografia-M.M.M.DE ACEVEDO(2004)
[1] Rosen, M. J. Surfactants and Interfacial Phenomena, John Wiley & Sons: New Yok,
1989, 304-336.
[2] Rosano, H. L., Gandolfo, F. G. e Hidrot, J-D. (1998). Stability of W
1
/O/ W
2
multiple
emulsions, influence of ripening andinterfacial interactions Colloids Surf. A. 71, 109-121.
[3] Lee, C. D., Psathas, P. A. e Johnston, K. P. (1999). Water-in-Carbon Doxide
Emulsions: Formation and Stability., Langmuir 15, 6781-6791.
[4] Hunter, R. J. Foundations of Colloid Science, Clarendo,Oxford,, 1991, 177.
[5] Wnali, K., Yi, Liu et. al. ( 2000). Interactions between alkali/surfactant/polymer and
their effects on emulsion stability
/
. Colloids Surf. A. 175, 243-247.
[6] Taylor, P. (1995). Ostwald ripening in emulsions
/
. Colloids Surf. A. 99, 175-185.
[7] Sjblom, J., Emulsions and Emulsion Stability-Surfactant science Series (61), Marcel
Dekker: New Yok, 1996, 1-41.
[8] Adamson, A. W. e Gast, A. P. Physical Chemistry of Surfaces, John Wiley & Sons,
1997.
[9] Israelachvilli, J. (1997). The science and applications of emulsions-an overview
Colloids Surf. A. 91, 1-8.
[10] Davis, H. T. (1994). Factors determining emulsion type: hidrophile-lipophile balance
and beyond Colloids Surf. A. 91, 9-24.
[11] Stein, H. N. The -Surfactant science Series (61), Marcel Dekker: New Yok, 1996, 1-
41.
[12] Becher., P.Encyclopedia of Emulsion Technology-vol.3, NY, M. Dekker Inc.,1988.
[13] Lim, F. Bomedical Application of Microencapsulation, CRC Press, Inc. : Boca Raton,
USA, 1985.

FORMAO DE AGREGADOS POR
MOLCULAS ANFIFLICAS
Surfactantes
Tensoativos ou
agentes de superfcie
head hidroflica
tail hidrofbica
Surfactantes em soluo
cmc concentrao
micelar crtica faixa
estreita de
concentrao
Aparecimento de
agregados (micelas)
Myers, 1999; Fendler, 1982
Tipos de Micelas
Jnsson e col., 1998

Nmero de monmeros de surfactantes em
cada micela no sistema aquoso
constante em uma ampla faixa (~100 vezes cmc)
Nmero de Agregao
| da concentrao
Formao de diferentes tipos de agregados
organizados: mesofases liotrpicas
Cristais Lquidos Liotrpicos
Efeito da temperatura
sobre os tipos de
agregados formados
por surfactantes no-
inicos
(mesofases
termotrpicas)
Cristais Lquidos Termotrpicos
Vesculas ou lipossomas
multivesculas
Fendler e col. 1982
Parmetro de crtico de empacotamento, p
Dependente da natureza do grupo polar e cadeia
hidrofbica, concencentrao, temperatura, pH etc.

Rodrguez-Hernndez e col., 2005
MICELAS
Preparao de Micelas
Equilbrio
simples
Dilise
casting
liofilizao
Emulso
o/a
Gaucher e col., 2005
Modelos de Solubilizao
Rangel-Yagui e col., 2005
A introduo de molculas ativas
no muda significativamente o
tamanho micelar.
O mtodo de preparao exerce
influncia sobre a quantidade
encapsulada.
Lukyanov e Torchilin, 2004
Eficincias de Encapsulamento
Mtodos convencionais como
HPCL, absorbncia no UV/VIS,
fluorescncia.
Comumente variam de 1,5-
50%.
Lukyanov e Torchilin, 2004
Tcnicas de Caracterizao
Espalhamento de luz dinmico (DLS).
Espalhamento de luz esttico (SLS).
Espalhamento de nutrons a baixos
ngulos (SANS).
Espalhamento de raios X a baixos
ngulos (SAXS).
Microscopia eletrnica de
transmisso (TEM).
Espalhamento de luz dinmico (DLS)
Intensidade de luz espalhada por
partculas em suspenso em movimento
Browniano.

D
T
=kT/3tqd

clculo do raio de hidratao, d (raio de
Stokes)
Edwards e Baeumner, 2006
Espalhamento de luz esttico (SLS)
Tempo mdio de espalhamento
em funo do ngulo.

Informaes sobre raio mdio,
massa molar e raio giratrio.

Edwards e Baeumner, 2006
Espalhamento de Raios X a Baixo ngulo
(SAXS) e Espalhamento de Nutrons a
Baixo ngulo (SANS)
Mede-se a intensidade de luz espalhada em
funo do ngulo de espalhamento.
Interferncias geradas por estruturas
organizadas (seguem a lei de Bragg:
d=n/2t(1/senO=n)
Informaes sobre tamanhos, formas e
organizaes de partculas. Linder e Zamb, 1991
Small Angle X-ray Scattering
(SAXS)
http://srs.dl.ac.uk/arch/DALAI/SAXS.html
Microscopia Eletrnica de Transmisso (TEM)
Feixe de eltrons incidentes que interagem com a
amostra de diferentes formas
Informaes sobre tamanhos, formas e organizaes
de partculas.
Aplicaes de sistemas micelares
no carreamento de bioativos
PEG-b-PDLLA no encapsulamento do anticancergeno
Paclitaxel (formulao padro com Cremofor EL, Taxol)

Aumento da eficcia, diminuio de efeitos colaterais
Kim e col., 2004
Micelas baseadas em PEG-PE foram modificadas com o
mAb 2C5, sendo reconhecidas por diversos tipos de
tumores, conforme estudos realizados no encapsulamento
de paclitaxel.
Lukyanov e Torchilin, 2004; Gao e col., 2003
Micelas de PEG-b-Phis foram relatados na forma micelar
quando em pH fisiolgico. A acidificao do meio aquoso
provoca a ionizao progressiva dos segmentos de
Polihistidina (Phis), expondo as molculas encapsuladas.
Gaucher e col., 2005; Lee e col., 2005
NANOPARTICULAS MICELARES
COMERCIALIZADAS E EM
DESENVOLVIMENTO
Marcato and Durn, J. Nanosci. Nanotechnol. 2007
FSD=female sexual dysfunction; PMH= post-menopausal hormone
CRISTAIS LQUIDOS
Tcnicas de preparao similares aos de preparaes
de micelas.
Sagalowicz e col. 2006
Modelos de Solubilizao
Tcnicas de Caracterizao
Medidas de viscosidade
Microscopia ptica com luz polarizada.
Espalhamento de luz dinmico (DLS).
Espalhamento de luz esttico (SLS).
Espalhamento de nutrons a baixos ngulos
(SANS).
Espalhamento de raios X a baixos ngulos
(SAXS).
Microscopia eletrnica de transmisso (TEM).
Microscopia ptica
Identificao das fases
lquido cristalinos devido a
observao de diferentes
texturas.
Ex. fase hexagonal
apresenta textura do tipo
leque.
fase cbica (isotrpica).
Microscopia ptica: exemplos de texturas
fase lquido cristalina hexagonal
fase lquido cristalina lamelar
Micrografias por cryo-TEM
de uma fase hexagonal
reversa (b); fase cbica
hexagonal reversa de uma
disperso de Dimodan U (c),
vescula a partir de uma
fase lamelar a partir
de uma mistura de
Dimodan U e lactato de
sdio esterico (d);
disperso de micela de
soluo de polissorbato
80 (e).
Sagalowicz e col. 2006
Aplicaes
Ciclosporina A, um peptdeo altamente lipoflico
empregado no tratamento de inflamaes drmicas, foi
encapsulado em fases cbicas e hexagonais de
monolena, sendo que foi observado um aumento da
permeao cutnea, alm da diminuio da irritao.

Lopes e col., 2006
Aplicaes

Furosemida como frmaco modelo em
sistema lquido cristalino para aplicao
oral. Foi obtida uma fase cbica de
monolena que aumentou a
biodisponibilidade do medicamento, alm
de promover uma liberao sustentada.

Sallam e col., 2002
LIPOSSOMAS
Preparao de lipossomas
Lipossomas: MLV, SUV, LUV
Preparao de lipossomas
Lipossomas: MUV, SUV, LUV
(http://www.avantipolarlipids.com/PreperationofLiposomes.html) jun/2006.
Modelos de Solubilizao
Fendler, 1982
Caracterizao de lipossomas
Nmero de lamelas
Distribuio de tamanhos
Composio e concentrao de
lipdios, alm da eficincia de
encapsulamento
Nmero de lamelas
31
P NMR (adio de Mn
2+
que suprime o sinal P)
NMR dos fosfolipdeos da face externa dos
lipossomas.
SAXS
Cyo-TEM
Distribuio de Tamanhos
DLS
SLS
HPLC-GEC-high-performance gel exclusion
chromatography
Contedo de fosfolipdios
Mtodos colorimtricos
NMR
HPLC
Outras caracterizaes
DSC na interao ativo/membrana
NMR na organizao das vesculas
Possibilidades de interaes
Chorilli e col., 2004
Limitaes da Primeira Gerao
de Lipossomas
Segunda Gerao de Lipossomas:
Stealth
Janof, 1999; Villanova e Consiglieri, 2000
Exemplo
injeo em tumores slidos, de maneira a reduzir efeitos
colaterais e aumentar a citotoxicidade local. Aps a
injeo tumoral aproximadamente 90% dos lipossomas
catinicos permaneceram nos tumores.
Hashida e col., 2005
Gerao Atual de Lipossomas
Exemplos
Os Lipossomas funcionalizados com transferina
aumentaram a eficincia de transporte para as clulas
endoteliais capilares cerebrais de uma droga modelo,
atravs de receptores de transferina, em comparao
com as formulaes sem transferina.
Visser e col., 2006
Exemplos
Lipdios galactosilados em lipossomas no
encapsulamento da doxorubina promoveram
direcionamento da droga para hepatcitos.
Wang e col. 2006
EXEMPLOS DE LIPOSSOMAS APROVADO PELA FDA
Marcato and Durn, J. Nanosci. Nanotechnol. 2007
PRODUTOS LIPOSSOMAIS EM FASE CLINICA I/II APROVADA PELA FDA
Marcato and Durn, J. Nanosci. Nanotechnol. 2007
PRODUTOS LIPOSSOMAIS EM FASE CLINICA III E IV
APROVADA PELA FDA.
Marcato and Durn, J. Nanosci. Nanotechnol. 2007
ALGUMAS VACINAS LIPOSSOMAIS EM DIFERENTES
FASES CLNICAS
Marcato and Durn, J. Nanosci. Nanotechnol. 2007
OUTROS TIPOS DE AGREGADOS
ORGANIZADOS DE MOLCULAS
ANFIFLICAS
Complexos de polions (PIC) no
carreamento de bioativos.
Yamamoto e col., 2001
Nanotubos de peptdeos
Hidrlise parcial de o-lactalbumina na presena de Ca
2+

Condies mais severas de hidrlise do que na pasteurizao
Graveland-Bikker and Kruif, 2006
THE EMERGING FIELD OF NANOTUBE BIOTECHNOLOGY
C. R. Martin and P. Kohli (NATURE REVIEWS | DRUG DISCOVERY, 2,
29 (2003).


Yu et al. Bioconjugate Chem.
16, 1484-1487 (2005)
Nanofibras de Oligopeptdeo
Globular e Filamentos Fibras
|Concentrao
Fung e col., 2003
Bibliografia
Chorilli, M.; Leonardi, G. R.; Oliveira, A. G.; Scarpa, M. V. Lipossomas em
formulaes dermocosmticas. Infarma, 16 (2004), 75.
Edwards, K. A.; Baeumner, A. J. Analysis of liposomes. Talanta, 68 (2006), 1432.
Fendler, J. H. Membrana Mimetic Chemestry, John Eiley & Sons, New York, 1982.
Fung, S.Y.; Keyesm, C.; Duhamel, J;Chen, P. Biophys. J., 85 (2003), 537.
Gao, Z.; Lukyanov, A. N.; Chakilan, A. R.; Torchilin, V. P. J. Drug Target, 11 (2003),
297.
Gaucher, G.; Durfresne, M. H.; Sant, V. P.; Kang, N., Maysinger, D.; Leroux, J. C. J.
Contr. Rel., 109 (2005), 169.
Graveland-Bikker, J. F.; Kruif, C. G. Trends Food Sci Technol., 17 (2006), 196.
Hashida, M.; Kawakami, S.; Yamashita, F. Chem. Pharm. Bull., 53 (2005), 871.
Janof, A. S. Liposomes Rational Design, Marcel Dekker, Inc, New York, 1999.
Jnsson, B.; Lindman, B.; Holmberg, K.; Kronberg, B. Surfactants and Polymers in
Aqueous Solution, John Wiley & Sons, Chichester, 1998.
Kim, T. Y.; Kim, D. W.; Chang, J. Y.; Shim, S. G..; Kim S. C.; Heo, D. S.; Kim, N. K.;
Bang, J. Y. Clin. Cancer Res., 10, (2004), 3708.
Lee, E. S.; Na, K.; Bae, Y. H. Nano Lett., 5 (2005), 325.


Linder, P.; Zemb, Th. (editors). Neutron, X-Ray and Light Sacttering: Introduction to an
investigative Tool for Colloidal and Polymeric Systems. North-Holand, Amsterdan, 1991.
Lopes, L. B., Lopes, J. L. C.; Oliveira, D. C. R.; Thomazinim J. A.; Garcia, M. T.; fantinim
M. C. A., Colleti, J. H.; Bentley, M. V. Eur. J. Pharm. Biopharm., 63 (2006), 146.
Lukyanov, A. N.; Torchilin, V. P. Adv. Drug Del. Rev., 56 (2004), 1273.
Myers, D. Surfaces, Interfaces, and Colloids, Wiley-VCH, 2nd edition, New York, 1999.
Rodrguez-Hernndez, J.; Chcot, F.; Gnanou, Y.; Lecommandoux, S. Prog. Polym. Sci.,
30 (2005), 691.
Sagalowicz, L.; Leser, M. E.; Watzke, H. J.; Michel, M. Trends in Food Sci. Technol., 17
(2005), 204.
Sallam, A.-S.; Khalil, E.; Ibrahim, H.; Freij, I. Eur. J. Pharm. Biopharm., 53 (2002), 343.
Villanova, J. C. O.; Consigliere, V. O. Braz. J. Pharm. Sci., 36 (2000), 179.
Visser, C. C.; Stevanovic, S.; Voorwindrn, L. H.; van Bloois, L.; Gaillard, P. J.; Danhol,
M.; Crommelin, D. J. A.; Boer, A. G. Eur. J. Pharm. Sci., 25 (2005), 299.
Wang, S.-n.; Deng, Y.-h.; Xu, H.; Wu, H.-b.; Qiu, Y.-k; Chen, D.-w. Eur. J. Pharm. Bioph.,
62 (2006), 32.
Yamamoto, H. H.; Senoo, Y.; Nishida, A.; Ohkawa, K. J. Appl. Polym. Sci., 79 (2001),
437




REDE NANOTUB0S
DE CARBONO
CNPq/MCT
AGRADECIMENTOS
CNPq/MCT