CT 3009 Preparao de amostras Profa. Dra.

Ivanise Gaubeur

Decomposio de amostras por fundentes

Luciana Sarmento Fernandes

Santo Andr, 16/04/2012

Objetivos
Introduo do mtodo de decomposio por fundentes;
Apresentao dos objetivos e procedimento analtico do artigo de referncia; Discusso dos resultados; Abordagem sobre Validao de mtodos analticos.

Introduo
Fuso Alcalina Decomposio de amostras por fundentes

Decomposio e Dissoluo da amostra

Com cidos inorgnicos em frascos abertos

Por meio de microondas

Ignio sob altas temperaturas na presena de ar ou oxignio

Por fuso em meios salinos fundidos

*Os mtodos diferem na temperatura na qual so utilizados e na fora dos reagentes empregados.

Introduo
Quando empregado... Para o caso de amostras que no se dissolvem prontamente para formar solues aquosas de cidos e bases comuns, para que ocorra a liberao dos ons para anlise.

Caso do Enxofre ou halognios determinados em compostos orgnicos e tambm silicatos minerais Altas temperaturas e o emprego de reagentes potentes para romper as fortes ligaes existentes entre esses elementos e o carbono.

Fuso: ltimo recurso a ser considerado. O fundente pode introduzir impurezas na amostra.

Introduo
Como realizado...
A amostra misturada com o sal de metal alcalino fundente , normalmente na proporo de pelo menos 10 vezes a massa da amostra. a mistura levada fuso para que seja formado um produto solvel fundido

Desvantagens: Problemas com segurana Elevadas temperaturas so requeridas; Perdas por volatilizao;

Possvel contaminao da amostra por impurezas presentes no fundente e tambm pelo ataque quase inevitvel do fundente ao frasco onde realizada a fuso;
A soluo aquosa resultante ao final do processo possui elevada concentrao de sais, que pode ocasionar dificuldades nas etapas posteriores de anlise;

Introduo

Artigo

Objetivo do trabalho: - Desenvolver um mtodo simples, rpido e confivel para determinao de fluoreto em amostras biolgicas. Foram estudadas as influncias sobre os resultados analticos a respeito da: - Concentrao e volume de NAOH como auxiliar da calcinao; - Peso da amostra; - Tempo de vida do eletrodo; - Tempo de estocagem das solues de amostras. Teores de fluoreto foram determinados em amostras biolgicas marinhas e materiais de referncia certificado.

Artigo
Mtodos mais comuns para decomposio de material biolgico: Calcinao (open ashing); Fuso; Combusto por oxignio; Digesto cida. Concentrao de fluoreto normalmente determinada por: eletrodo seletivo ao on; cromatografia gasosa.

Calcinao auxiliada com compostos alcalinos como mtodo adequado para anlise de plantas e itens alimentcios.

Metodologia:

Artigo
Amostras: 3 Materiais de referncia certificado; 2 materiais de referncia interno; vegetao contendo fluoreto, tecido de ostra, farinha de bacalhau, ch, alimentao de peixes, escamudo, camares, krill.

Materiais:
cadinhos de nquel; eletrodo seletivo a on fluoreto; pHmetro agitador magntico; balana analtica; titulador; chapa aquecedora; tubos plsticos. Reagentes: NaOH (aq); HCl concentrado e dilido; soluo estoque padro contendo 100mg F-/L estabilizado em NaF; soluo tampo para ajuste de pH.

Artigo
Procedimento analtico: 1. Pesagem da amostra diretamente no cadinho, 2. Adio de NaOH (aq) 8mol/L, 3. Aquecimento do cadinho em chapa aquecedora para evaporao at secura do contedo,

4. Forno mufla para combusto: 200C por 16 horas e depois 525C por 3 horas,
5. Resfriamento do cadinho e adio de 10 a 15 mL de gua destilada aquecimento em chapa para solubilizao do bolo fundido, 6. Depois de 2 horas, transferncia para tubos plsticos de 50 mL, 7. Neutralizao com HCl concentrado, adicionado gota a gota at pH 8,0-8,5. Depois, ajuste de pH com o titulador at pH 7,2-7,5 com HCl diludo, 8. Transferncia da amostra para frascos de 50 mL e diluio com gua destilada para o

volume total e armazenagem at o momento da anlise.

Artigo
A anlise:

Alquotas de 5 mL so utilizadas com a adio de TISAB III para ajuste de pH entre 5,2 e 5,4 faixa ideal para anlise de fluoretos
Branco analtico: foram sempre preparados juntamente com o preparo das amostras e consideradas durante todo o processo. Foram utilizados para o ensaio em branco e para preparar as solues padro com as concentraes de fluoreto de 0,100 , 1,00 e 10,00 mg F-/L

Solues padro e solues de amostras foram analisadas utilizando-se eletrodo seletivo ao on fluoreto.

Resultados
I. Massa das amostras: A quantidade de amostra necessria para a determinao da concentrao de fluoreto depende: da homogeneidade da amostra e, da concentrao de fluoreto presente. Quando se utiliza um mtodo de rotina em um laboratrio de controle, CRMs devem ser substitudos por padres internos de materiais de origem vegetal ou animal garantir a preciso do mtodo analtico. A maioria dos itens alimentcios de origem vegetal possuem teor de fluoreto relativamente baixo massas de 1 a 2 gramas so vantajosas para garantir a qualidade da anlise.

Resultados
I. Massa das amostras: Pouca diferena na [F-] comparando-se a massa das amostras, * Massas de 1g e 2g so difceis de manusear excessivo volume para de amostra final mais amostra, mais cinzas, mais gua para dissoluo... Transbordamento durante neutralizao.

*Resultados no obtidos com massa de 2g.

Resultados
II. Volume e concentrao de NaOH NaOH adicionado antes da fuso para evitar a perda de fluoreto durante o processo de calcinao. A soluo 8 mol/L dissolve mais facilmente o material fundido, Peso ideal de amostra: 0,2g Volume de NaOH: 2 mL Valores recomendados: 2,5 mL NaOH 8mol/L para 0,25g amostra, 5 mL NaOH 8mol/L para 0,5g amostra

Resultados
III. Tempo de calcinao
* A preparao de amostras por fuso leva aprox. 1 dia til. aconselhvel deixar a amostra no forno durante a noite.

A temperatura de 300C foi testada, mas ocasionou perdas por transbordamento e aderncia das cinzas nas paredes do cadinho.
Quanto a temperatura de 525C, pouca diferena foi encontrada na determinao de fluoreto com a durao de 1, 2 ou 3 horas, porm, com 3 horas as cinzas resultantes so mais finas e mais fceis de trabalhar.

Resultados
IV. Processo de neutralizao Etapa crtica da preparao das solues de amostra e que mais consome tempo. TISAB III no forte o suficiente para o ajuste de pH adiciona-se cido.

Na escolha da concentrao do cido para ajuste de pH: Se for muito forte, fluoreto pode ser perdido como HF gasoso. Concentrao ideal: 7,76x10-4 mol/L resulta em excessivo volume final de amostra soluo: utilizao de cido concentrado para ajuste inicial e subsequente ajuste pelo titulador para o valor correto. As cinzas devem ser misturadas na soluo com auxlio do agitador magntico antes do processo de neutralizao, caso contrrio, o pH pode variar e cair abaixo de 7,0.

Resultados
V. Efeito do tempo de estocagem das solues de amostra As amostras foram analisadas 1 vez por semana por 8 semanas. Apesar da variao, no houve tendncias de aumento ou decrscimo da concentrao com o passar do tempo.

Validao
Validao de mtodos de ensaios qumicos:
Comprovao, atravs do fornecimento de evidncia objetiva, de que os requisitos para uma aplicao ou uso especficos pretendidos foram atendidos. (ABNT NBR ISSO/IEC 9000)

O processo de validao:
Deve estar descrito em um procedimento;
Os estudos para determinar os parmetros de desempenho devem ser realizados com equipamentos e instrumentos dentro das especificaes, funcionando corretamente, adequadamente calibrados e validados; O operador que realiza os estudos deve ser competente na rea de estudo e ter conhecimento suficiente sobre o trabalho.

Validao
Parmetros de Validao de mtodos de ensaios qumicos:

Devem incluir os seguintes itens, quando aplicvel:

Especificidade e Seletividade Linearidade Sensibilidade Limite de deteco Limite de quantificao

Exatido
Preciso Robustez

Incerteza de medio

Resultados
Linearidade: Habilidade do mtodo analtico em produzir resultados que sejam diretamente proporcionais concentrao do analito em amostras, em uma dada faixa de concentrao.
* Curva de calibrao: demonstra a relao linear entre a [F-] nos padres e leituras realizadas. Coeficiente de correlao linear (R) : indica o quanto pode ser considerada adequada a reta como modelo matemtico R deve ser maior que 0,999.

R= 0,999 em 1997, R= 0,997 em 1998, Diminuio conforme a utilizao e tempo de vida Cuidado ao se utilizar eletrodos velhos na determinao de fluoreto...

Resultados
Exatido: Concordncia entre o resultado do ensaio e o valor de referncia aceito como verdadeiro. avaliado por uso de materiais de referncia e realizao de ensaios de recuperao. Recuperao: Estimada pela anlise de amostras adicionadas com quantidades conhecidas do analito de interesse.

* Quando a gua destilada usada como diluente ao invs da soluo do branco, a recuperao cai para 725% para as amostras de ch e 767% para as amostras de bacalhau as solues padro devem ter a composio mais prxima possvel das solues de amostras.

Testes de recuperao oferecem controle limitado de erro sistemtico e no so suficientes para dizer se o fluoreto total foi determinado, mas sim que o fluoreto adicionado no foi perdido durante o processo analtico.

Resultados
Preciso: Avalia a disperso de resultados entre ensaios independentes, repetidos de uma mesma amostra, amostras semelhantes ou padres, em condies definidas. demonstrada por meio da repetitividade e reprodutibilidade, expressas pelo desvio padro. Repetitividade: Grau de concordncia entre os resultados das medies sucessivas, efetuadas sob as mesmas condies de medio, tais como: mesmo laboratrio, mesmo equipamento e procedimento, mesmo operador e repetidas em um curto espao de tempo.

Resultados
Limite de Deteco (LOD) e Limite de Quantificao (LOQ) LOD: Menor concentrao que pode ser detectada com certa confiana estatstica indicando que o analito est presente na amostra, mas no necessariamente permitindo quantificao. LOQ: Menor concentrao do analito na amostra que pode ser quantitativamente determinada com confiana declarada. Dois eletrodos (A e B) foram testados utilizando-se a mesma soluo branco, com 15 meses de diferena. O eletrodo A foi utilizado frequentemente, enquanto o eletrodo B foi armazenado.

*A correta estocagem dos eletrodos pode no ser eficiente para manter a eficcia importante test-los regularmente e aconselhvel manter um carto de controle.

Resultados
Concentrao de fluoreto das amostras estudadas * A maioria dos materiais so frutos do mar, que contm alto teor de fluoreto.

Concluses
Existe uma grande necessidade de que procedimentos analticos confiveis sejam documentados para determinao de fluoreto em alimentos;

Anlises de fluoreto total devem ser priorizadas, considerando que diferentes cidos e
misturas de cidos podem dissolver o fluoreto em matria orgnica em graus variados; Apesar do mtodo por fuso alcalina se mostrar adequado para determinao de fluoreto, a otimizao de procedimentos que possam agilizar o processo de neutralizao devem ser encorajados, j que uma etapa

Referncias Bibliogrficas
HARRIS, D.C. Anlise Qumica Quantitativa. 6.ed. Rio de Janeiro: LTC Editora,2003. INMETRO. Orientaes sobre validao de mtodos de ensaios qumicos, DOQ-CGCRE-008, 2007. M.Kjellevold et al. Food Chemistry 73 (2001) 373-379. SKOOG, D. A.; HOLLER, F. J.; WEST, D.M.; CROUCH, S.R. Fundamentos de Qumica Analtica. 8.ed. So Paulo: Cengage Learning, 2006.

Obrigada!