UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR CENTRO DE TECNOLOGIA DEPTO.

DE ENGENHARIA HIDRULICA E AMBIENTAL DISCIPLINA: QUMICA APLICADA AO SANEAMENTO PROFESSOR: RONALDO NASCIMENTO

Biotratamento de cromo (VI) de guas contaminadas utilizando bactrias redutoras de sulfato alimentadas com etanol
Equipe: Ana Ktia Flvia Telis Karina Zuiga Keyve Mayane Socorro Hortegal

INFORMAES

Biotratamento de guas Contaminadas VI por BRS alimentadas com Etanol

1. INTRODUO
Tratamento de Esgotos

Tratamento Biolgico: Aerbio e Anaerbio Tratamento Fsico-Qumico Tratamento Anaerbio: Ausncia de Oxignio

Digesto Anaerbia

INTRODUO

INTRODUO
Bactrias Redutoras de Sulfato - BRS

So anaerbias de vida livre SO4-2 aceptor de eltrons

Resultados- meio alcalinos e precipitao de metais

Sulfeto metlico

INTRODUO
sulfitos

Aceptores de eletrons

tiossulfatos

Sulfatos- forma mais oxidativa

Doadores de eltron e Fonte de Carbono

hidrognio Lactato Etanol Succionato etc;.

- glicolato - malato - aucares - aminocidos

Escolha

Custo Degradabilidade Baixo peso molecular viabilidade

INTRODUO
Etanol - doador de eletron do artigo

Estequimetria do Etanol

Acetato

Aceptor de eltron Fonte de carbono Oxidao incompleta

INTRODUO

Remoo do Cromo +6 feito em 02 etapas

1 - Cr+6
2 - Cr+3

Cr+3
precipitado

Remoo do Cromo pelas BRS -Integra as duas etapas- metabolismo -Cria um potencial redox -- remoo em pH ideal

2 OBJETIVOS
Objetivo Geral: Estudar o comportamento do etanol como doador de eletron para remover o Cr+6 pela ao das BRS em Reatores Anaerbio com Leito Fixo Objetivos Especficos: 1- Comparar as caractersticas de equilbrio e cinticas de 02 reatores 2- Realizar testes padres de crescimento de BRS e remoo do Cr+6 3 Realizar teste padro de toxicologia utilizando nematides.

2 MATERIAIS E MTODOS
2.1 Bactrias redutoras de sulfato (BRS)
Bactrias utilizadas em experimentos de lote foram cultivadas em frascos de soro fechado usando procedimentos padro para BRS. CRESCIMENTO BACTERIANO
KH2PO4 (0.5 g L1) NH4Cl (1 g L1 ) Na2SO4 (4.5 g L1) CaCl26H2O (0.06 g L1) MgSO47H2O (0.06 g L1) Lactato de sdio (6 g L-1) Extracto de levedura( 1 g L1) FeSO47H2O (0.004 g L1 ) Citrato de sdio.2H2O (0.3 g L1)

Na 2 S (0,5 g L -1 )

20 ml SRB

20 ml SRB

PROCEDIMENTO

2.2 Crescimento de BRS em testes de lote

Monitoramento 40 dias

Matrias

PH-Metro CRISON GLP 22

pH e E h

Frascos de vidro de 200 ml

PAPEL ACETATO DE CHUMBO

H2 produo S

Incubados T= 25 C COND. AGIT.=150 rpm

MTODO TURBIDIMTRICO

SO 4 2 -

2.2 Crescimento de BRS em testes de lote

Testes foram realizados em lotes em frascos de soro, preenchido com 80 mL de meio modificado C (sem lactato e com etanol) e 20 mL de inoculo. Os frascos foram selados e 20 mL de inoculo de bactrias cultivadas em meio C foram adicionados com uma seringa estril, atravs da porta de amostragem.
nmero de factores
Nmero de experimentos
m = nmero de niveles = 2 k = nmero de factores = 2 n = nmero de testes

n = m k =2 2 = 4 testes
por anlise de varincia (ANOVA) com 95% de significncia .

nmero de nveis

2.3 Remoo de Cr (VI) em teste de lote

Testes de lotes com diferena na composio do meio

Teste 1

Teste 2

Teste 3

Teste 4

80 mL de meio modificado C (1,5 g / L de etanol) + 20 mL de inoculo SRB

100 mL de meio modificado C

100 mL de meio modificado C (sem Na2S)

100 mL de gua destilada (branco)

2.3 Remoo de Cr (VI) em teste de lote

Preparo da amostra semelhante ao anterior adic. 5 mL sol. estoque Cr6+ (1 g/ L). Amostra
5 em 5 dias

adio de pontas de metal

Produo de H2S, pH, Eh, SO42e conc. Cr (VI) e Cr total solvel.

Conc. Total de Cr solvel determinado por ICP-OES e Cr (VI) por ensaio de difenilcarbazida.

filtrada Recolheu 5 mL da amostra p/ determinar a conc. de metal residual.

Cada vez 5 mL sol. estoque de Cr6+ foi adic. p/ manter o vol. constante e aumentar conc. de metal.

2.4 Experimentos de Coluna

Equipamento: Duas Colunas de leito fixo uma com SRB inoculado; Altura 1 m; dimetro 0,2 m; volume 6,65 103 m3; Preenchimento: Perlita (V0: 3,5 L) Introduo de soluo contendo sulfato Figura 1 - Coluna de Leito Fixo (3 g L -1) e etanol (1,5 g L-1). Aps aclimatao de biomassa, o Cr (VI) (50 mg L-1) foi tambm introduzido; PH e Eh valores da soluo afluente eram 6,7 0,1 e 200 20 mV, respectivamente Foram monitorados trs sadas da coluna pH, Eh, Resduos de Sulfato e Cromo

Fonte: UFSC, 2010.

2.5 Cultura de Nematdeos e tempo de vida e descendncia

Testes de toxicidade na entrada e sada Coluna de leito fixo:

Cultura de Nematdeos: Estirpe SEK-1 (Cedido pelo Centro de Gentica em Minesota); Suplementado coli - Estirpe OP50 Organismo Modelo: Caenorhabditis elegans Escherichia

2.5 Cultura de Nematdeos e tempo de vida e descendncia

Bioavaliao do Influente e Efluente:
Influente ou Efluente 10x Analises Estatsticas: Software JMP IN5.1.2J Tempo de vida/descendncia: Protocolo de Kaplan-Meier 72 h(obs.) Ovos 16C
Meio de crescimento C. elegans

Teste em triplicata
contagem diria

2.5 Cultura de Nematdeos e tempo de vida e descendncia

Experimento controle (Branco)
Amostra Sinttica (3g/L sulfato) (1,5g/L etanol) Sem o Cromo 10x
SEMELHANTE AO PREPARO ANTERIOR

72 h(obs.) Ovos 16C

Meio de crescimento C. elegans

Teste em triplicata
contagem diria

3 RESULTADOS E DISCUSSO
3.1 Crescimento de BRS em testes de lote.
Lactato: Uma reduo de sulfato de 65 2% em 40 dias. Os resultados de reduo de sulfato e de condies de funcionamento do pH e E h (pH = 7,6 0,4; E h = -330 20 mV) pH obtido utilizando meio C.

remoo mais lenta

diminuio acentuada

lactato

Fig. 1 Sulfatos residuais durante o tempo de crescimento de BRS em lotes usando lactato e etanol.

Etanol: Reduo de sulfato final (60 5% no dia 40) e as condies operatrias do pH e E h (pH = 7,8 0,1 e E h -425 5 mV) confirmou a capacidade de crescer SRB etanol utilizando. A taxa de degradao de etanol foi maior do que a de lactato. O etanol no s adequado para o crescimento SRB, mas tambm parece ser mais rpido que lactato oxidado .

etanol
Reduo de sulfato

Sem reduo de sulfato

Fig. 1 Sulfatos residuais durante o tempo de crescimento de BRS em lotes usando lactato e etanol.

Os efeitos estatisticamente significativos (95%):

Concentrao de etanol teve um efeito negativo sobre a reduo de sulfato. A interao de sulfato e etanol tambm tem efeito negativo sobre a reduo de sulfato. Concentrao de etanol e concentrao de sulfato no afetou significativamente na remoo de sulfato final.

Fig. 2. Sulfatos residuais durante o tempo de crescimento de BRS na experimentao fatorial.

3.2 Reduo do cromo em testes de lotes

Testes realizados com diferentes composies de meio para isolar a contribuio de cada componente na remoo de metal (bioprecipitao e precipitao qumica). Em condies de teste: Cr(VI) foi prontamente reduzido Cr(III) e no foi detectado pelo mtodo difenilcarbazida.

q i = (C b C) dt Bioprecipitao: 39 3% Ppt qumica (Na2S): 21 1% Fenmenos de especiao: 21 3%

Diagrama de Pourbaix
Reduo do cromo em testes de lotes
1 ) Cr3+ / Cr2+ Cr3+ + e- Cr2+ E = - 0, 408V E = E - 0,059log [Cr2+] .: [Cr2+] = [Cr3+] [Cr3+] E = - 0, 408V
2) Cr2O3 / Cr2+ Cr2O3 + 6H+ + 2e- 2Cr2+ + 3H2O E= ? E = E - 0,059 log [Cr2+]2 2 [H+]6

3) 3Cr3+ + 4H2O Cr3(OH)45+ + 4H+ K = [Cr3(OH)45+] [H+]4 [Cr3+]3

4) Cr2O3 / CrO42Cr3+ + e- Cr2+ E1 = -0, 408V Cr2O3 + 4OH- + 3/2 O2 2CrO42- + 2H2O Cr3+ + Cr2O3 + 4OH- + 3/2 O2 + e- Cr2+ + 2CrO42- + 2H2O E2 = ?

E1 = - 0, 408 - 0,059 log [Cr2+] [Cr3+]

(-1)

E2 = E2 - 0,059 log [Cr2+] [CrO42-]2 [Cr3+] [OH-]4

____________________________________________________

0 = 0, 408 + E2 - 0,059 log [Cr2+] [CrO42-]2 [Cr3+] [Cr3+] [OH-]4 [Cr2+] E2 = -0, 408 + 0,059 log [CrO42-]2 - 0,059 log [OH-]4 E2 = -4,658 0,236 pOH E2 = -4,658 0,236 (14 pH) E2 = -7,962 + 0,236pH

3.3 Experimentos de coluna

O crescimento bacteriano na coluna contendo o SRB foi evidenciado pela mudana gradual de cor do enchimento devido formao de precipitados FeS (Fe est presente no meio de C, como FeSO4- 7H2O) de cor preta. O estado estacionrio foi atingido aps o tratamento de cerca de 4 volumes de leito com uma reduo de sulfato mdio final de 65 5% na coluna de inoculao, contra 2 1% na coluna sem o SRB. A reduo de sulfato observado na coluna inoculadas pode ser atribudo a mecanismos de remoo bioativos. No estado estacionrio a reduo completa de Cr (VI) foi obtido na coluna inoculada. Testes de coluna com etanol confirmaram a capacidade de SRB de se utilizar deste substrato e, assim, fazer a remoo de sulfatos e metais de forma eficiente. O Etanol oferece uma alternativa vlida para substratos slidos convencionais, em funo de que substratos lquidos evitam a utilizao de resduos potencialmente prejudiciais como fontes orgnicas para o metabolismo SRB e fenmenos de adsoro.

Tabela 3 Resultados do Experimento de coluna de Leito Fixo

No apresentaram diferena quando foram cultivados no branco

20% individuos vivos

50% individuos vivos

B, INF, EF Antes do tratamento: O Cr(VI) reduziu drasticamente a capacidade dos vermes de se reproduzir. Aps o tratamento: alm da melhoria considervel na sobrevivncia dos animais expostos, houve uma melhoria no potencialmente reprodutivo desses vermes que foi semelhante aos vermes no expostos.

CONCLUSO

A partir dos Resultados pode chegar as seguintes concluses: 1- Etanol- foi usado como doador de eletron e fonte de carbono para crescimento da BRS na remoo do Cr+6

2 - Os teste indicaram que o etanol pode substituir o lactato

CONCLUSO

3 - Pelos estudos o etanol se mostrou mais competitivo que o lactato em termos cinticos; 4- Nos reatores: houve remoo de 65% (+ ou 5%) na remoo de sulfato e 95% (+ ou - 5%) na reduo de cromo atribudo aos

pelos processos metablicos.

CONCLUSO

5- Houve um aumento do nmero de organismos ( nematides) de 20% para 50 % - indicando uma relao com remoo do cromo. OBS: 20%- gua contendo Cr +6 50% - gua aps remoo do cromo.