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Diferentes abordagens no emprego da anlise de varincia em experimentos com medidas repetidas no tempo
Janete Pereira Amador (UFSM) janeteamador@.hotmail.com Joo Eduardo da Silva Pereira (UFSM) jesp@smail.ufsm.br Angela Pellegrin Ansuj (UFSM) angela@smail.ufsm.br Fernando de Jesus Moreira Junior (UFSM) fmjunior@smail.ufsm.br

Resumo O objetivo deste trabalho estudar o uso de diferentes abordagens da anlise de varincia univariada aplicada a experimentos nutricionais com sunos envolvendo medidas repetidas no tempo. A anlise de varincia foi aplicada para um experimento inteiramente casualizado em esquema fatorial para os diferentes perodos experimentais que foram de 7 semanas. As variveis estudas foram: a influncia de 5 nveis de energia e protena na rao sobre o ganho de peso, consumo e converso alimentar. Os resultados mostraram que nenhuma das abordagens da anlise de varincia utilizada identificou influncia nos nveis de energia digestvel (ED) sobre as variveis de estado, bem como para o efeito da protena bruta (PB) sobre o consumo acumulado. Quanto aos nveis de PB sobre as variveis ganho de peso e converso alimentar apresentou diferena significativa para os perodo, 35, 42, 49, 56, 63 e 70 dias.A anlise em parcelas subdivididas mostrou diferena significativa no ganho de peso para o nvel de 24% e na converso alimentar 20 e 24% de PB. Palavras-chave: Anlise de varincia, Experimentos nutricionais, Medidas repetidas no tempo. 1. Introduo Devido importncia da suinocultura dentro do agronegcio, na economia nacional como gerao de capital promovendo divisas a nvel nacional e internacional, se faz necessrio o desenvolvimento de tcnicas eficientes para melhor ainda mais o desempenho desta atividade econmica. Uma das formas pelas quais se pode melhorar o desempenho da suinocultura o desenvolvimento de tcnicas corretas de avaliao do sistema produtivo. Na indstria, devido a problemas de custos operacionais e mo-de-obra, a prtica comum, em experimentos nutricionais trabalhar com valores acumulados para controlar o desempenho das variveis de estado. Desta forma, os dados referentes a essas variveis so obtidos por uma pesagem no incio e no final do perodo experimental, fato que gera perda de informao. Por isso, esse trabalho tem por finalidade utilizar diferentes abordagens de anlise de varincia a fim de determinar os fatores positivos e negativos de cada abordagem e verificar se essas tcnicas fornecem subsdios para monitorar experimentos cujo comportamento das variveis altera-se ao longo do tempo. 2. Reviso bibliogrfica 2.1. Experimentos fatoriais Conforme Anderson & Bancroft (1962), quando se estudam, simultaneamente, dois ou mais fatores, cada um com diferentes nveis, tm-se os experimentos chamados fatoriais. Os experimentos fatoriais no so desenhos experimentais, e sim um modo particular de combinar os nveis dos fatores em estudo.

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De acordo Werkema & Aguiar (1996), em um arranjo fatorial cada rplica completa do experimento possui todas as combinaes dos nveis dos fatores investigados. Dessa forma, se existem a nveis do fator A e b nveis do fator B, cada rplica contm todos os ab tratamentos. 2.2. Experimento em parcelas subdivididas O esquema do experimento em parcelas subdivididas apresentado, dentre outros, por Kempthorne (1962) Steel & Torrie (1960), como sendo uma variao do experimento fatorial em T e T tratamentos, onde os tratamentos T das parcelas so dispostos em qualquer tipo de delineamento, sendo os mais usados os em blocos casualizados e em quadrados latinos e os T das sub-parcelas so dispostos ao acaso dentro de cada parcela. Snedecor & Cochran (1967) apresentam consideraes sobre o experimento em parcelas subdivididas, e mostram ser vantajoso seu uso, se os efeitos de T e da interao T x T so de maior interesse que os efeitos de T. Afirmam ainda que o aumento da preciso de T e da interao T x T se obtm mediante a reduo da preciso de T. 2.3. Anlise de varincia Conforme Markus (1973), na experimentao, so freqentes as situaes nas quais, em vez de dois, so vrios os produtos ou processos que competem entre si. O problema consiste ento na comparao de mais de duas mdias. Nestes casos a tcnica indicada a anlise de varincia. A anlise de varincia (ANOVA) uma tcnica algbrica que permite particionar a soma de quadrados dos desvios entre cada uma das N observaes que compem uma amostra, e as mdias das mesmas, em nmero finito de somas de quadrados. O nmero de partio das somas de quadrados est diretamente relacionado com a estrutura do modelo estatstico utilizado para descrever a varivel resposta (ANDERSON & BANCROFT, 1962). Johonson & Leone (1976) destacam algumas premissas que devem ser observadas para utilizar a anlise de varincia como, a resposta da varivel que est sendo analisada deve seguir uma distribuio normal de probabilidade e os tratamentos das respostas obtidas devem apresentar varincias iguais. 2.4. Anlise de varincia em parcelas subdivididas Conforme Sampaio (1998), quando um efeito temporal introduzido em um esquema fatorial, geralmente, ele participa do ensaio como sub-parcelas. Sendo assim, preciso policiar a extenso do tempo testado, grandes amplitudes podem ameaar a homocedasticidade exigida pela anlise de varincia. Se isto ocorrer, ou se analisam os tempos separadamente, desaparecendo as sub-parcelas ou adota-se a transformao de dados. Box (1950) discute o problema de observaes sucessivas na mesma parcela em um esquema fatorial. Ele acha vlida uma anlise simples, em parcelas subdivididas, se puder supor que as observaes tm as mesmas varincias e as mesmas covarincias para todas parcelas. Para verificar a hiptese de homogeneidade entre as matrizes de varincias e covarincia, das variveis de estado, utiliza-se o Teste de Esfericidade (VONESH, E. F. & CHINCHILLI. V. M., 1997). 3. Metodologia Foram estudados 75 leites com 21 dias de idade, recm desmamados, durante 7 semanas. Os animais foram pesados no incio, durante intervalos de sete dias e no final do experimento. Assim gerou-se sete medidas para cada varivel de estado (peso vivo,

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consumo, converso alimentar - quanto o animal consome para ganhar 1 kg de peso), em instantes sucessivos de tempo que corresponderam ao perodo de produo (42 dias). As variveis de estado foram obtidas em funo das variveis de controle: idade (medida em dias), nveis nutricionais de protena bruta (PB), (medido em percentagem) presente na rao e nveis nutricionais de energia digestvel (ED), (medidas em kcal ED/kg). O delineamento utilizado foi inteiramente causalidade, sendo as fontes de variao os nveis de PB e ED. Estes nveis foram dispostos em esquema fatorial (dois fatores com cinco nveis cada), resultando 25 tratamentos. A unidade experimental empregada foi a baia (com trs animais cada). Os tratamentos desenvolvidos no experimento encontram-se no quadro 1.
kcal ED/kg PB% 16 18 20 22 24 3325 T1 T2 T3 T4 T5 3400 T6 T7 T8 T9 T10 3475 T11 T12 T13 T14 T15 3550 T16 T17 T18 T19 T20 3625 T21 T22 T23 T24 T25

QUADRO 1 - Tratamentos desenvolvidos no experimento

3.1. Procedimentos adotados para a anlise estatstica dos dados 3.1.1. Anlise de varincia no final do perodo de creche Para o clculo da ANOVA no foi possvel considerar as interaes entre fatores, pois os dados correspondiam apenas as mdias de cada tratamento, onde esses eram formados de trs animais por baia. Sendo assim, no houve graus de liberdade para o clculo das interaes. 3.1.2. Anlise de varincia em cada perodo de creche Para as comparaes entre as mdias foi utilizado o teste de Tukey. Para o clculo da ANOVA foi utilizado, tanto nos resultados obtidos no final do perodo como em cada perodo, o modelo matemtico a seguir: Yij = + PBi + EDj + (PB*ED)ij + ij onde: Yij = resposta observao submetida ao i-simo nvel de PB e j-simo nvel de ED;

= mdia geral dos efeitos;

PBi = efeito do i-simo de PB; EDj = efeito do j-simo nvel ED; PB*EDij = efeito da interao entre o do i-simo de PB e o j-simo nvel ED; ij = erro aleatrio associado a observao Yij. 3.1.3. Anlise de varincia em parcelas subdivididas As parcelas (unidade primria) so os nveis de energia e protena e as sub-parcelas (unidade secundria) so os perodos. O teste de Tukey foi utilizado para a comparao entre mdias.

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Para o clculo da ANOVA foi utilizado o modelo a seguir descrito: Yijk. = + PBi + EDj + tempok + (PB*ED)ij + dijk + (PB*tempo)ik + (ED*tempo)jk + ijk, onde: Yijk= resposta da observao submetida ao i-simo nvel de PB e j-simo nvel de ED no perodo k

= mdia geral dos efeitos;

PBi = efeito do i-simo de PB; EDj = efeito do j-simo nvel ED; tempok = efeito do perodo k; (PB*ED)ij = efeito da interao entre o do i-simo de PB e o j-simo nvel ED; dijk = erro aleatrio associado a parcela principal; (PB*tempo)ik = efeito da interao do i-simo nvel de PB com o perodo k; (ED*tempo) jk = efeito da interao i-simo nvel de ED com perodo k; ij = erro aleatrio total. 4. Resultados 4.1. Anlise de varincia no final do perodo experimental Foram utilizados os valores acumulados das variveis de estado para os 49 dias de durao do experimento. Os resultados mostram que a anlise de varincia no foi sensvel para identificar diferena significativa quanto ao aumento nos nveis de protena bruta (PB) e de energia digestvel (ED) no ganho de peso, converso alimentar e o consumo de rao. 4.2. Analise de varincia para cada perodo experimental Quando a ANOVA foi realizada para cada perodo experimental, em alguns perodos, foi possvel verificar que o ganho de peso e a converso alimentar foram influenciados pelos nveis de PB. Os perodos nos quais os nveis de PB foram significativos correspondem s idades dos leites aos 35, 42, 49, 56 e 63 dias. Esses perodos com as respectivas variveis e nveis de PB encontram-se nas tabelas 1, 2, 3, 4, e 5.
Nveis de PB (%) Parmetros 16 18 20 22 24 1,896 ab 0,509 26,81 5 CAM (kg) 2,094ab 2,444a 1,718b 1,956ab Desvio padro (kg) 0,220 0,372 0,210 0,298 Coef. de variao (%) 10,50 15,22 12,22 15,23 Casos 5 5 5 5 (p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente.

TABELA 1 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) aos 35 dias.

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Na tabela 1, verifica-se que os animais que receberam rao contendo nveis de 16, 20, 22 e 24% de PB apresentaram uma CAM semelhante. J o nvel de 18% foi o de pior converso alimentar.
Nveis de PB (%) Parmetros CAM (kg) Desvio padro (kg) Coef. de variao (%) Casos 16 2,318a 0,324 13,977 5 18 2,086ab 0,132 6,327 5 20 1,778b 0,085 4,780 5 22 1,754b 0,229 13,123 5 24 1,876ab 0,371 19,776 5 2,476ab 0,336 12,235 5

GPM (kg) 2,220b 2,472ab 2,966a 3,008a Desvio padro (kg) 0,481 0,157 0,410 0,312 Coef. de variao (%) 21,666 6,351 10,519 13,630 Casos 5 5 5 5 (p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente.

TABELA 2 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) e do ganho de peso (GPM) aos 42 dias.

A Tabela 2 indica que os nveis de 20 e 22% apresentam os melhores resultados da CAM. Enquanto que o nvel de 16% foi o de pior converso alimentar. O mesmo comportamento ocorreu com a varivel GPM.
Nveis de PB (%) Parmetros 16 18 20 22 24 1,814b 0,128 7,056 5 5,234a 0,509 9,724 5 CAM (kg) 2,416a 2,030ab 1,926ab 2,200ab Desvio padro (kg) 0,218 0,158 0,228 0,451 Coef. de variao (%) 9,023 7,832 11,380 20,500 Casos 5 5 5 5 GPM (kg) 3,762b 4,708ab 5,066a 4,866ab Desvio padro (kg) 0,220 0,372 0,210 0,298 Coef. de variao (%) 5,904 7,901 4,145 6,099 Casos 5 5 5 5 (p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente.

TABELA 3 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) e do ganho de peso (GPM) aos 49 dias.

Conforme a tabela 3, os nveis de 18, 20 e 24% de PB apresentaram, nesse perodo, os melhores resultados para a converso alimentar. Para o GPM os nveis de 20 e 24% de PB foram os que apresentaram o maior aumento, embora esses nveis, no diferiram dos nveis de 18 e 22%.
Nveis de PB (%) Parmetros CAM (kg) Desvio padro (kg) Coef. de variao (%) Casos 16 2,222a 0,143 6,435 5 18 1,990ab 0,140 7,035 5 20 1,848b 0,162 8,766 5 22 1,926b 0,109 5,659 5 24 1,810b 0,156 8,618 5

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GPM (kg) 6,086b 7,220ab 7,808a 7,558ab Desvio padro (kg) 0,903 0,608 0,924 0,402 Coef. de variao (%) 14,837 11,875 11,834 5,318 Casos 5 5 5 5 (p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente.

8,338a 0,757 9,078 5

TABELA 4 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) e do ganho de peso (GPM) aos 56 dias.

A Tabela 4 mostra que os nveis de 20, 22 e 24% de PB foram os que apresentaram a melhor a converso alimentar. Para o GPM os nveis de 20 e 24% de PB foram os que tiveram o maior aumento de peso, mesmo que esses nveis no diferiram dos nveis de 18 e 22%.

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Nveis de PB (%) Parmetros 16 18 20 CAM (kg) 2,214a 2,016ab 1,858b Desvio padro (kg) 0,197 0,119 0,098 Coef. de variao (%) 8,897 5,902 5,274 Casos 5 5 5 GPM (kg) 9,348b 11,114ab 12,12a Desvio padro (kg) 0,903 0,608 0,924 Coef. de variao (%) 9,659 5,470 7,623 Casos 5 5 5 (p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente 22 1,896b 0,119 6,276 5 11,446ab 0,402 3,512 5 24 1,842b 0,131 7,111 5 11,940a 0,757 6,340 5

TABELA 5 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) e do ganho de peso (GPM) aos 63 dias.

A tabela 5 mostra que os melhores resultados para a CAM e GPM foram obtidos com os nveis de 20, 22 e 24% de PB. Para o GPM os nveis de 20 e 24% de PB foram os responsveis pelo aumento peso, embora no diferindo dos nveis de 18 e 22%. 4.3 Anlise de varincia em parcelas subdivididas Para verificar a hiptese de homogeneidade entre as matrizes de varincias e covarincia, das variveis de estado, realizou-se o Teste de Esfericidade por meio do critrio de Mauchlys. Os resultados para as variveis: consumo acumulado o valor do teste foi de 0,0336516 com aproximao para a distribuio do Qui-quadrado = 47,88, P (X2 > x2) = 0,00001; para o ganho acumulado o valor do teste foi de 0,0015599, com aproximao tambm para a distribuio do Qui-quadrado = 91,12 P (X2 > x2) = 0,00001; e para a converso alimentar o valor do teste foi de 0,0300323 com aproximao para a distribuio do Qui-quadrado = 49,42 P (X2 > x2) = 0,00001. As 3 variveis foram testadas com 14 graus de liberdade. Nenhuma das variveis de estado analisadas apresentou resultado significativo. Por isso, no existe homogeneidade entre nas matrizes de varincia e covarincia. Assim, optou-se por analisar os tempos separadamente eliminando as sub-parcelas. A anlise utilizando parcelas subdivida mostrou que existe diferena significativa para os nveis de protena bruta em relao converso alimentar e o ganho de peso. J a varivel consumo no teve seu comportamento influenciado pelos tratamentos. A tabela 6 mostra os resultados das variveis ganho de peso e converso alimentar para os diferentes nveis de protena bruta.

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Parmetros CAM (kg) Desvio padro (kg) Coef. de variao (%) Casos GPM (kg) Desvio padro (kg) Coef. de variao (%) Casos

16 2,199a 0,286 13,005 30 6,554b 5,515 84,162 30

Nveis de PB (%) 18 20 2,106ab 1,876b 0,283 0,212 13,437 11,300 30 30 7,186ab 5,558 77,344 30 7,533ab

22 1,954ab 0,294 15,046 30 7,377ab 5,318 72,088 30

24 1,863b 0,259 13,902 30 7,782a 5,607 72,050 30

5,203
69,069 30

(p < 0,05) mdias seguidas de letras diferentes, diferem estatisticamente. TABELA 6 Evoluo cumulativa da converso alimentar mdia (CAM) e do ganho de peso (GPM) dos 35 aos 70 dias.

Verificou-se que os nveis de 20 e 24% de PB apresentaram a melhor converso alimentar. J para o ganho de peso o nvel de 24% de PB teve melhor ganho. Verificouse, tambm, que o coeficiente de variao, para todos os perodo analisados, foi alto para a varivel ganho de peso. Isto ocorreu devido ao aumento das varincias de um perodo para o outro, conforme Sampaio, 1998. 5. Concluso Os resultados mostraram que nenhuma das abordagens utilizadas identificou influncia dos nveis de energia digestvel (ED) sobre as variveis de estado. Resultado semelhante foi encontrado para o efeito da protena bruta (PB) sobre o consumo acumulado que tambm no apresentou diferena significativa. A vantagem de se utilizar a abordagem considerando o perodo total do experimento, a economia de mo-de-obra para coleta dos dados, bem como diminui o estresse causado aos animais por motivo das pesagens. No entanto, esse mtodo mostra-se ineficiente, pois no se tem um valor intermedirio das variveis. Alm disso, quando se trabalha com unidades experimentais que esto sujeitas a medidas repetidas no tempo, o efeito dos tratamentos pode apresentar alteraes. A anlise para cada perodo possibilitou detectar algumas diferenas significativas aos 35, 42, 49, 56, 63 e 70 dias, em relao aos nveis de PB. Quanto ao ganho de peso e converso alimentar os melhores resultados foram obtidos nos nveis 20, 22 e 24% de PB, respectivamente, nos perodos 42, 49, 56 e 63 dias. O fator positivo dessa anlise poder verificar o comportamento das variveis em perodos distintos do processo produtivo. Sendo que em algum desses perodos pode trazer informaes relevantes para melhorar o setor produtivo. O fator negativo de no poder monitorar periodicamente o processo a fim de verificar se houve alterao nas variveis de estado. Dessa forma no h como interferir no processo quando essas variveis apresentam-se fora de controle. A anlise por parcelas subdivididas apresentou diferena significativa para os nveis de PB de 20 e 24% sobre a varivel converso alimentar e 24% para a varivel ganho de peso. Este resultado vem ao encontro dos resultados obtidos quando a anlise de varincia foi feita por perodo experimental. O fator negativo dessa tcnica de no

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poder acompanhar o desenvolvimento do animal passo a passo, alm de apresentar restries estatsticas relacionadas s pressuposies de homogeneidade nas matrizes de varincias e covarincias. Observou-se que a ANOVA empregada para cada perodo experimental e para parcelas subdivididas mostrou-se eficiente para determinar diferenas significativas entre os tratamentos. No entanto, a ANOVA no seria a tcnica apropriada quando se utiliza dados longitudinais, pois esse tipo de dados no atendem a duas pressuposies bsicas requeridas pela ANOVA: a falta de casualizao entre os tratamentos e as pocas de avaliao; e a no independncia de erros devido ao fato das medidas serem tomadas sobre as mesmas parcelas ao longo do tempo. Alm disso, no permite que se monitore o processo produtivo periodicamente, impossibilitando intervir quando este encontra-se fora de controle. Neste caso, sugere-se que estudos posteriores sejam realizados utilizando-se tcnicas de anlise multivariada tais como o emprego de modelos lineares generalizados e anlise de curvas de crescimento. 6. Bibliografia ANDERSON, R. B. & BANCROFT, T. A. Statistical theory in research. New York: McGraw-Hill, 1962. 422 p.
BOX, G. E. P. Problems in the analysis of growth and wer curves. Biometrics. v. 6, p. 362 89, 1950. JHONSON, L. J. & LEONE, F. C. Statistical and experimental design in engineering and the physical sciences. v. 2, 2 ed. New York: John Wiley & Sons, 1976. 1081 p. KEMPTHORNE, O. The Desing and analysis of experiments. New York: Robert & Krieser, 1962. 631 p. MARKUS, R. Elementos de estatstica aplicada. Porto Alegre: Faculdade Agronomia UFRGS, 1973. 328 p. SAMPAIO, I. B. M. Estatstica Aplicada Experimentao Animal. Belo Horizonte: Fundao de Ensino e Pesquisa em Medicina Veterinria e Zootecnia, 1998. 221 p.

SNEDECOR, G. W. & COCHRAN, W. G. Statistical Methods. 6 ed. Ames: The Iowa State University Press,1967. 593 p. STEEL, R. G. D. & TORRIE, J. H. Principles and procedures of statistics. Nova York: McGraw-Hill, 1960. 481p. VONESH, E. F. & CHINCHILLI. V. M. Linear and nonlinear models for the analysis of repeated measurements. New York: Marcel Dekker, 1997. 250 p.
WERKEMA, M. C. C. & AGUIAR, S. Planejamento e Anlise de Experimento: Como Identificar e Avaliar as Principais Variveis Influentes em um Processo. Belo Horizonte: Fundao Cristiano Ottoni, 1996. 294 p.

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