NITROSILAO : UM NOVO MECANISMO DE RESISTNCIA A INSULINA.

Aluno : Marco Antonio de Carvalho Filho

Orientador : Mrio Jos Abdalla Saad

Departamento de Clinica Mdica FCM - UNICAMP

SNDROME METABLICA
PRESENA DE 3 OU MAIS DOS CRITRIOS ABAIXO

Obesidade abdominal: CA > 102 cm-homem

mulher

> 88

Hipertrigliceridemia: > 150 mg/dL

HDL < 40 mg/dL-homem e < 50 mg/dL-mulher PA > 130 / 85 mm Hg Glicose plasmtica de jejum > 110 mg/dL

Glicose

Captao de glicose (msculo e adipcitos)

Captao de aminocidos (todas as clula Lipognese Insulina

S S S-S S-S Lys

Sntese de glicognio (msculo e fgado)

Efeito anti-liplise

P P P

Diferenciao pr-adipcito Apoptose

adipc

Sntese protica (todas as clulas) Expresso gnica (todas as clulas) Sntese de DNA (todas as clulas)

MECANISMO MOLECULAR DE AO DA INSULINA

insulina
subunidade a S
S-S S S-S

Glicose GLUT 4

ATP
PO4 PO4 P P P PO4

Glicose
TRANSPORTE GLICOSE

subunidade b

PO4

IRS-1/2
PO4 PO4

PI 3 quinase

GLUT 4

AKT

SINT. DE GLICOGNIO LIPOGNESE

ERA PR-AGRICULTURA
Escassez de alimentos
Doenas infecciosas

Evoluo da Populao Indgena na Amrica nos Sculos XVI e XVII

Mxico 1519: 22.000.000 de nativos

1600: 1.000.000 de nativos Peru 1520: 9.000.000 de nativos

1620:

600.000 de nativos

ndios Pima - Mxico

ndios Pima: EUA-Arizona

NITROSILAO

NIROSOTIOIS GSNO

L - ARGININA

NO

NO - SINTASE L - CITRULINA MODULAO + SNO

PROTENA

PROTENA
NITROSILAO SNO ( CISTENA )
MODULAO

OBJETIVOS

Investigar os efeitos de drogas doadoras de NO (GSNO) no metabolismo de glicose, e Snitrosilao de protenas da via de sinalizao da insulina em msculo isolado e tecido muscular de ratos intactos. Investigar se a iNOS , induzida em diversas situaes de resistncia a insulina, est envolvida com S-nitrosilao de protenas da via de sinalizao de insulina e com resistncia a ao celular deste hormnio.

MATERIAIS E MTODOS

-Imunoblotting

-Biotinilao de nitrosocistenas

RESULTADOS MSCULO ISOLADO

CAPTAO DE GLICOSE S-NITROSILAO - IR
C GSNO

ATIVIDADE TIROSINA-QUINASE - IR
CONTROLE
INSULINA

GSNO I/A A I I/A

+ GSNO

SNTESE DE GLICOGNIO
INSULINA

SINALIZAO
CONTROLE GSNO

IR

IRS-1
INSULINA

+ GSNO

pAkt

RESULTADOS TECIDO MUSCULAR

kITT S-NITROSILAO
C GSNO

ATIVIDADE TIROSINA-QUINASE - IR
CONTROLE A I I/A GSNO A I I/A

IR

QUANTIDADE DE PROTENA IRS-1

CONTROLE GSNO

GSNO

GSNO

SINALIZAO
IRS-1
CONTROLE
INSULINA

GSNO

IR ATIVIDADE QUINASE - Akt IRS-1

CONTROLE GSNO

GSNO

INSULINA

Akt
pAkt

RESULTADOS DIETA HIPERLIPDICA

kITT S-NITROSILAO SINALIZAO
C C DH
INSULINA

DH
+

IR

IR

CONTROLE

DH

C C DH
INSULINA

DH
+

iNOS
C DH

IRS-1

IRS-1

IRS-1
C DH C DH
INSULINA

C
+

DH
+

Akt

pAkt

RESULTADOS ob/ob
kITT S-NITROSILAO
C ob/ob ob/ob ASO
INSULINA

SINALIZAO
C
+

ob/ob
+

ob/ob ASO
+

IR

IR

ob/ob

C
ob/ob ASO

ob/ob

ob/ob ASO
INSULINA

C
+

ob/ob
+

ob/ob ASO
+

iNOS
C ob/ob ob/ob ASO

IRS-1

IRS-1

ob/ob

ob/ob ASO
INSULINA

C
+

ob/ob
+

ob/ob ASO
+

IRS-1
C ob/ob

ob/ob ASO

Akt

pAkt

RESULTADOS iNOS-/- X LPS

kITT S-NITROSILAO
C LPS iNOS-/- iNOS-/LPS
INSULINA

SINALIZAO
C
+

LPS
+

iNOS-/+

iNOS-/LPS
+

IR

IR

LPS

iNOS-/-

iNOS-/LPS

LPS

iNOS-/- iNOS-/LPS
INSULINA

C
+

LPS
+

iNOS-/+

iNOS-/LPS
+

iNOS
C LPS iNOS-/iNOS-/LPS

IRS-1

IRS-1

IRS-1
C LPS iNOS-/iNOS-/LPS

LPS

iNOS-/- iNOS-/LPS

C
INSULINA

LPS
+

iNOS-/+

iNOS-/LPS
+

Akt

pAkt

RESULTADOS DIETA HIPERLIPDICA / ROSIGLITAZONA

kITT S-NITROSILAO
C DH ROSI
INSULINA

SINALIZAO
C
+

DH
+

ROSI
+

IR

IR

DH

ROSI

DH

ROSI
INSULINA

C
+

DH
+

ROSI
+

iNOS
C DH

ROSI

IRS-1

IRS-1

DH

ROSI
INSULINA

C
+

DH
+

ROSI
+

IRS-1
C DH ROSI

Akt

pAkt

CONCLUSO
insulina
a S-

S-S S-S

RESISTNCIA A INSULINA
L - ARGININA

SNO

NO
YMXM

NO - SINTASE
L - CITRULINA

IRS-1/2
SNO

Akt
SNO