EXTRAO LQUIDOLQUIDO (ELL)

EXTRAO LQUIDOLQUIDO (LLE)

Baseia-se na afinidade da forma lipoflica do analito por um solvente orgnico

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
A quantidade extrada depende do volume de amostra e de solvente extrator e da constante de distribuio K = Vam / Vext Eficincia da extrao = K / (K + ) Aumento do volume do extrator incrementa a frao extrada de um analito em um determinado volume da amostra, mas pode comprometer o efeito de pr-concentrao do analito extrado.

Ocorre partio dos analitos entre a amostra aquosa e o solvente extrator orgnico.

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

Escolha do agente extrator: - maior compatibilidade com a ELL: baixo ponto de ebulio e baixa viscosidade, avaliar a densidade; - seletividade maior: solventes menos polares Inalterado x Metablitos

Escolha do agente extrator: - maior compatibilidade com a ELL: baixo ponto de ebulio e baixa viscosidade, avaliar a densidade; - seletividade maior: solventes menos polares Inalterado x Metablitos

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:

Tipos de solvente
Triagem Mistura de solventes. Anlise direcionada Solvente com maior afinidade pelo analito.
cido hiprico: acetato de etila

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO:
Pureza dos solventes extratores: Adio de agentes estabilizadores, anti-oxidantes, etc. Ex: ter dietlico: 2% de etanol, 2 ppm pirogalol, 1 ppm de butirato de hidroxitolueno para prevenir a formao de perxidos... E mais.. Tipo de agitao (cuidado com a emulso estvel!!!) Remoo do solvente orgnico Adio de sal Efeito do pH

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

Concentrao do extrato:
Fluxo de N2 Acelera a vaporizao sem aumento da temperatura. O2 Oxidar compostos mais sensveis
Obs: Transformar em cloridrato com 50uL de HClc em metanol.

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO Efeito do pH

EFEITO SALTING OUT

= molcula de gua

H CH2 CH N CH3 H

NaCl (cloreto de sdio)

Na+

Cl-

CH2 CH N CH3 H

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
INFLUNCIA DO pH NA HIDROSSOLUBILIDADE/LIPOSSOLUBILIDADE substncias de carter cido. Ex. cido 11-nordelta -9-THC-COOH O
C OH

Extrao cida: pH cido substncias de carter cido prevalecem na forma no ionizada, lipoflica

O C OH OH

H+
CH3 CH3 O O

OH

Forma noionizada
C5H11

CH3 CH3 O C5H11

C O OH

cido 11-nor-delta 9-THC-COOH

OHCH3 CH3 O C5H11

Forma ionizada

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
INFLUNCIA DO pH NA HIDROSSOLUBILIDADE/LIPOSSOLUBILIDADE
substncias de carter bsico. Ex. anfetaminas

Extrao bsica:
pH bsico substncias carter bsico prevalecem forma no ionizada, lipoflica de na

H CH2 CH N CH3 H

H+

H H + CH2 CH N H CH
3

Forma ionizada

Anfetamina

OH-

CH2 CH N CH3 H

Forma no-ionizada

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
INFLUNCIA DO pH NA HIDROSSOLUBILIDADE/LIPOSSOLUBILIDAD urina

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Mtodo
Solvente orgnico
Drogas/ metablitos

O que o pka??

urina

Cuidado com o zwitterion!! Agitao Centrifugao Separao da fase orgnica

extrato

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Extrao sequencial: melhor eficincia sem prejuzo da prconcentrao ??

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Procedimento de ELL para GC ou HPLC

Exemplo: extrao de 100 mL de soluo a 10 g L-1 (K = 50) Extrao simples = 0,909 Vext = 20 mL; Cext = 45,4 g L-1 Extrao dupla: = 0,993 Vext = 4 x 5 mL Cext = 49,7 g L-1 obs. = 100/5 = 20

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Procedimentos alternativos

Antidepressivos tricclicos por HPLC A = sem a extrao ELL; B = aps ELL 1 = desipramina; 2 = nortriptilina; 3 = imipramina; 4 = amitriptilina; 5 = PI

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Procedimentos alternativos

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
LLE miniaturizado: LPME (liquid-phase microextraction)

EXTRAO LQUIDO-LQUIDO
Vantagem:
extremamente simples e rpida

Exerccio
O grfico abaixo apresenta a eficincia de extrao () de um frmaco em urina em funo do pH da amostra para uma situao especifica de extrao. O solvente usado na extrao foi diclorometano. a) Com base no grfico, podemos dizer que o frmaco cido ou bsico? Justifique. b) Qual seria o provvel valor de pKa desse frmaco? Justifique. c) Sabendo que em pH 7, K = 24,5 e = 0,98, qual o volume de solvente usado nessa extrao? d) Determine a concentrao final do frmaco em 2 mL de solvente extrator e em pH 5, sabendo que nesse pH, K = 2 e = 0,80. Adote que a concentrao do frmaco na urina 50 g/L. e) Qual seria a concentrao final do frmaco se a extrao fosse feita em pH 5, com duas repeties e usando 1 mL de solvente extrator em cada uma. Adote que a concentrao do frmaco na urina 50 g/L.
1,1 1 0,9

Desvantagens:
grande volume de solventes descarte do material formao de emulso seletividade sofrvel efeito de pr-concentrao limitado

0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0 2 4 6 pH 8 10 12