DISCIPLINA DE BIOQUMICA

Prtica: Dosagem Enzimtica de !icose

Introduo
Apesar da existncia de uma grande variedade de mtodos para a determinao da glicemia, hoje a grande maioria dos laboratrios emprega tcnicas enzimticas, timas em preciso, de alto rendimento e relativo baixo custo. stas tcnicas so ainda de execuo muito simples, e compat!veis com e"uipamentos automatizados. # mtodo mais utilizado $ %licose&#xidase '%#()* +ea,es* %licose - ./# - #/ $ 0c. %licur1nico - ./#/ ./#/ - 2&Amino3enazona - 4enol $ 5rod. +osa nzimas* & %licose&oxidase & 5eroxidase

Objetivo
Avaliar em vrios aspectos o teor de glicemico comparando com o valor padro de 67 8 997 mg:dl, sabendo assim atravs de clculos a dosagem da concentrao de glicemia.

Material Utilizado
5ipeta automtica de 97 ;< 5ipeta graduada de 9 ml. =ubos de ensaio >anho&maria spectro3ot1metro +eativo de trabalho 0gua destilada 5adro de glicose 977 mg:dl ?it %licose Amostra de glicose @ soluo A Amostra de glicose @ soluo >

Procedimento
4oram numerados A tubos de ensaio* Bo tubo 9 'branco) 3oi colocado 9 ml do reativo de trabalho e 97 ;< de gua destilada. Bo tubo / 'padro) 3oi colocado 9 ml do reativo de trabalho e 97 ;< do padro de glicose 977 mg:dl. Bo tubo C 'amostra) 3oi colocado 9 ml do reativo de trabalho e 97 ;< da soluo A. Bo tubo 2 'amostra) 3oi colocado 9 ml do reativo de trabalho e 97 ;< da soluo >. Bo tubo A 'apenas para teste) 3oi colocado 9 ml do reativo de trabalho antigo, 3eito no per!odo anterior, e 97 ;D< do padro de glicose 977 mg:dl. #s tubos 3oram colocados em banho&maria a C6EF por 97 minutos e aps as solu,es 3oram colocadas em cubetas e lidas no espectro3ot1metro 8 A7A nm.

Reaes
%licose &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& Ac. %lic1nico - ./#/ %licose oxidase '%#() 4enol - 2&amino&antipirina &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& ./# - Fomposto Fereja 5eroxidase

nzimas* %licose #xidase 5eroxidase

Resultados
=ubo 9 'branco) @ incolor Gsado para zerar o espectro3ot1metro em 7.777 de absorbHncia. Tubos / 'padro) C 'amostra) 2 'amostra) A '+eativo antigo) Colorao cereja cereja cereja cereja Absorbncia 7,/I7 nm 7,29C nm 7,66/ nm 7,2J6 nm

o Flculo da concentrao de glicose nas solu,es A e > Koluo A 977 mg:dl &&&&&&&&&&&& 7,/I7 nm x &&&&&&&&&&&& 7,29C nm xL 926,A mg:dl Koluo > 977 mg:dl &&&&&&&&&&& 7,/I7 nm M &&&&&&&&&&& 7,66/ nm ML /6A,6 mg:dl o Nalores de re3erncia (e 67,7 8 997,7 mg:dl para glicemia de jejum o Onterpretao de dados A glicemia de jejum o exame de escolha para triagem de pacientes na investigao de diabetes mellitus. 5acientes com glicemia de jejum superior 8 927,7 mg:dl em / ocasi,es di3erentes so provveis diabticos. A con3irmao de teste dinHmico de tolerHncia 8 glicose ou curva glicmica.

Concluso
Fom base nas concentra,es de glicose encontradas nas solu,es A e >, podemos concluir "ue caso estas anlises tivessem sido 3eitas em amostras de soro coletadas de pacientes em jejum, "ue estes pacientes so provveis portadores da doena Pdiabetes mellitusQ.

 iblio!ra"ia
http*::members.tripod.com:nedRorSs:bio"u!mica:diagdm.html