ARTIGO/ARTICLE

Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 41(5):492-495, set-out, 2008

Formigas como veiculadoras de microrganismos em ambiente hospitalar

Ants as carriers of microorganisms in hospital environments
Rogrio dos Santos Pereira1 e Mariko Ueno2

RESUMO
Existe preocupao sobre as reais possibilidades de agravos sade pblica que possam ser causados pela veiculao de agentes patognicos atravs de formigas urbanas. O presente trabalho teve por objetivo isolar e identicar os microrganismos associados s formigas em ambiente hospitalar. Foram coletadas 125 formigas, da mesma espcie, em diferentes unidades de um Hospital Universitrio. Cada formiga foi coletada com swab embebido em soluo siolgica e transferida para um tubo com caldo Brain Heart Infusion e incubados 35C por 24 horas. A partir de cada tubo, com crescimento, foram realizadas inoculaes, em meios especcos, para isolamento dos microrganismos. As formigas apresentaram alta capacidade de veiculao de grupos de microrganismos, sendo que 63,5% das cepas eram bacilos Gram positivos produtores de esporos, 6,3% eram bacilos Gram negativos, cocos Gram positivos corresponderam a 23,1% das cepas, 6,7% eram fungos lamentosos e 0,5% eram leveduras. Desta forma, pode-se inferir que as formigas podem ser um dos responsveis pela disseminao de microrganismos em ambientes hospitalares. Palavras-chaves: Formigas. Vetores. Microrganismos. Hospital.

ABSTRACT
Concern exists regarding the real possibility of public health threats caused by pathogenic agents that are carried by urban ants. The present study had the objective of isolating and identifying the microorganisms that are associated with ants in hospital environments. One hundred and twenty-ve ants of the same species were collected from different units of a university hospital. Each ant was collected using a swab soaked with physiological solution and was transferred to a tube containing brain heart infusion broth and incubated at 35C for 24 hours. From each tube, with growth, inoculations were made into specic culturing media, to isolate any microorganisms. The ants presented a high capacity for carrying microorganism groups: spore-producing Gram-positive bacilli 63.5%, Gram-negative bacilli 6.3%, Gram-positive cocci 23.1%, lamentous fungi 6.7% and yeast 0.5%. Thus, it can be inferred that ants may be one of the agents responsible for disseminating microorganisms in hospital environments. Key-words: Ants. Vectors. Microorganisms. Hospital.

Formigas so insetos sociais que adaptam-se com facilidade aos ambientes urbanos, instalando-se em residncias e ambientes hospitalares, sua presena pode determinar a disseminao de microrganismos atravs da veiculao mecnica. Sendo assim, existe preocupao sobre as reais possibilidades de agravos sade pblica que possam ser causados pela veiculao de agentes patognicos atravs de formigas urbanas. Entre os insetos sociais, as formigas fazem numerosas relaes parasitrias e mutualsticas e desenvolvem vrias interaes com animais, vegetais, fungos e bactrias3. A disperso das formigas baseada em condies climticas, apresentando sua instalao em ambientes quentes e midos, locais com grande variao climtica os leva a colonizar o ambiente civilizado18. Cerca de 50 espcies esto adaptadas ao ambiente urbano, e cerca de 20 a 30 espcies podem ser

consideradas como praga por causar conito com os interesses do homem4. Os fatores que inuenciam a presena de formigas nos hospitais devem-se estrutura arquitetnica, proximidade a residncias, bem como interferncias climticas, oscilaes trmicas que estimulam a migrao desses insetos para aparelhos eletrnicos em busca de estabilidade trmica2 e/ou embalagens de medicamentos que oferecem condies ideais para formaes de ninhos, alm de alimentos que podem funcionar como atrativo extra2 22. Em levantamento realizado em um hospital na regio sudeste do Brasil, revelou-se a presena de 10 espcies de formigas, sendo a mais abundante Monomorium oricola22. Lise cols13 encontraram 7 espcies de formigas em hospital em Santa Catarina. Levantamentos realizados em doze hospitais do estado de So Paulo revelam infestao por formigas, apresentando maior ndice

1. Departamento de Biologia, Universidade de Taubat, Taubat, SP. 2. Instituto Bsico de Biocincias, Universidade de Taubat, Taubat, SP. Endereo para correspondncia: Dra. Mariko Ueno. Instituto Bsico de Biocincias/UNITAU. Rua Tiradentes 500, Campus Bom Conselho, 12030-180 Taubat, SP. Tel 55 12 3629-7909 e-mail: mariueno@unitau.br Recebido para publicao em 03/12/2007 Aceito em 27/08/2008

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nos berrios e nas unidades de terapia intensiva (UTI) e 16,5% das formigas coletadas apresentavam bactrias patognicas4 5. As formigas possuem capacidade de se deslocarem rapidamente e normalmente percorrem extensas reas, o que sugere, que, alm de constiturem vetores de microrganismos em ambientes intra-hospitalares, podem agir tambm como importantes vias de disperso de resistncia a drogas nestes ambientes17. Tornando-se de alta periculosidade, a presena de formigas em ambientes hospitalares, constitui riscos em potencial na veiculao de microrganismos patognicos que podem causar infeces hospitalares2 4. Entre os artrpodes que podem ser colonizados por cepas bacterianas hospitalares, quando em infestao em ambiente nosocomial, so as moscas, baratas e formigas9. Estes organismos transportam microrganismos de um lugar a outro, podendo promover infeces cruzadas10 15. Sramova e cols 20 descreveram os artrpodes como importantes vetores de microrganismo, destacando que de um total de 116 cepas isoladas, 88% constituem bacilos Gram negativos: Escherichia coli, Enterobacter spp, Klebsiella spp, Citrobacter spp, Proteus spp, Serratia spp, Pseudomonas spp e Acinetobacter spp e 12% constituem cocos Gram positivos tendo como representantes Staphylococcus coagulase negativos. Segundo Boursaux-Eude e Gross3 algumas espcies de formigas, veiculam, em ambiente hospitalar, agentes patognicos como: Serratia marcescens, Citrobacter freundii, Klebsiella ozaennae , Enterobacter aerogenes , Proteus mirabilis , Staphylococcus epidermidis e Yersinia pestis, podendo aumentar o risco de infeco hospitalar. Dois teros de enterobactrias isoladas a partir de artrpode apresentam resistncia a pelo menos 3 grupos de antibiticos, mesmo entre cepas pouco freqentes como Morganela spp e Hafnia spp. Esta multi-resistncia tambm observada entre o grupo dos Gram positivos20. Este trabalho teve por objetivo avaliar a presena bactrias e fungos, associadas s formigas, em quatro setores de um hospital universitrio. MATERIAL E MTODOS Coleta do material. A coleta das formigas foi realizada no Hospital Universitrio da Universidade de Taubat, no perodo de fevereiro a julho de 2005. Swabs umedecidos em soluo siolgica foram utilizados para coletar as formigas, individualmente, em uma mesma trilha. Foram coletados 125 formigas, sendo 25 no Hemoncleo, 40 na Clnica Mdica, 30 na Ortopedia e 30 na Lavanderia, setores nos quais a freqncia de trilhas de formigas, no piso e/ou parede, era alta em relao outras unidades do hospital universitrio . Isolamento dos microrganismos e identicao de microrganismos. Cada formiga foi mergulhada em tubo de ensaio contendo caldo Brain Heart Infusion e incubada a 35C por 24 horas. A partir dos tubos que apresentaram crescimento

foram realizadas semeaduras por esgotamento, em diferentes meios de cultura. Placas contendo gar MacConkey foram incubadas a 35C por 24 horas; placas contendo gar Sabouraud dextrose com clorafenicol, a 35C por 2 a 7 dias, posteriormente a temperatura ambiente por 10 dias; placas contendo gar sangue foram repicadas em duplicata e divididas em srie 1 (os componentes da primeira rplica) e srie 2 (os componentes da segunda rplica). As placas da srie 1 foram incubadas a 35C por 24 horas. As placas da srie 2 foram incubadas a 35C em atmosfera de 5% de CO2 por 48 horas. De acordo com as caractersticas morfotinturiais, seguiuse a identicao especca. Bastonetes Gram negativos foram submetidos srie bioqumica para identicao. Cocos Gram positivos foram submetidos prova da catalase e foram semeados em gar nutriente, com 8% de cloreto de sdio e provas bioqumicas segundo Kloos e Bannerman11. As leveduras foram identicadas segundo Sindrim e Moreira19. Os fungos lamentosos foram repicados em placas contendo gar Sabouraud e incubados temperatura ambiente por 10 dias, para a obteno da colnia gigante. A identicao procedeu-se com a observao de verso e reverso das colnias em especial sua pigmentao. Para cada colnia foi feito um microcultivo e incubado temperatura ambiente por 10 dias. Aps este perodo as lamnulas foram retiradas e colocadas sobre outra lmina estril com uma gota do corante azul de metileno, e sua morfologia foi observada em microscopia de luz. A identicao baseou-se na chave de Famlias Eumycota, segundo Lacaz e cols12. RESULTADOS E DISCUSSO Das amostras coletadas, 123 (98,4%) apresentaram crescimento. Este resultado mostra a possibilidade de veiculao mecnica e/ou biolgica de microrganismos, igualmente aos estudos anteriores descrito por Bueno e Campos-Farinha4; Boursaux-Eude e Gross3; Zarzuela e cols22 e Bueno e CamposFarinha 5. Este fato associado s caractersticas biolgicas das formigas pode defini-las como potenciais veiculadoras de microrganismos e sua infestao em ambiente hospitalar como um risco sade pblica2, bem como em residncias, estabelecimentos de alimentao6, indstrias e laboratrios10. Foram isoladas 208 cepas sendo: bacilos Gram positivos esporulados 63,5%, bacilos Gram negativos 6,3%, cocos Gram positivos 23,1%, fungos lamentosos 6,7% e leveduras 0,5% (Tabela 1).
Tabela 1 - Freqncia absoluta dos microrganismos isolados a partir de formigas. Microrganismos isolados Bacilos Gram positivos Bacilos Gram negativos Cocos Gram positivos Leveduras Fungos lamentosos Total Freqncia absoluta 132 13 48 1 14 208

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Segundo Tresoldi e cols21 a freqncia de microrganismos isolados em infeco hospitalar foi 56,5% de bacilos Gram negativos, 20,9% de cocos Gram positivos e 9% de leveduras, a possibilidade de veiculao de microrganismos e a sua presena no ambiente nosocomial pode agir de forma a manter ou aumentar tais estatsticas. Dentre os cocos Gram positivos 19 (59,2%) cepas foram identicadas como Staphylococcus coagulase-negativos (SCN). Micrococos ou estomatococos, juntos representaram um total de 29 (40,2%) cepas. crescente a importncia dos SCN, atualmente, representa um dos grupos mais isolados em infeces hospitalares14. Staphylococcus epidermidis reconhecido como o principal agente etiolgico de bacteremias, infeces ps-operatrias, infeces do trato urinrio. Foram identicadas 13 espcies de enterobactrias (Tabela 2). As enterobactrias so comuns entre os insetos e so transmitidas de um indivduo para outro de modo horizontal, mas podem ser adquiridas no ambiente, demonstrando assim capacidade de veiculao e manuteno do microrganismo no ambiente.
Tabela 2 - Freqncia absoluta de isolamento das espcies da famlia Enterobacteriaceae. Espcies isoladas e identicadas Hafnia alvei Klebsiella pneumoniae Enterobacter agglomerans Enterobacter cloacae Enterobacter agglomerans Enterobacter sakazakii Serratia liquefaciens Serratia marcescens Total Freqncia absoluta 1 1 1 1 3 1 1 4 13

Apenas uma cepa de levedura foi isolada identicada como Candida tropicalis. Embora o nmero de isolados seja pequeno para uma inferncia biolgica, relevante entender que estes organismos esto amplamente distribudos no ambiente, por apresentarem ampla capacidade de explorao e colonizao de substratos orgnicos vivos ou em decomposio. Sua veiculao em ambiente hospitalar torna-se um risco sade pblica18, dada a grande concentrao de imunodeprimidos1. Foram identicadas 14 espcies fungos lamentosos, conforme apresentada na Tabela 3.
Tabela 3 - Freqncia absoluta dos fungos isolados de formigas. Grupos Espcies isolados Dermattos Epidermopgyton occosum Trichophyton verrucosum Trichophyton rubrum Dematiceos Cladosporium carrioni Aureobasidium pullulans Wangiella dermatitidis Conidiobolus coronatus Fonsecaea pedrosoi Hyphomycetes Aspergillus niger Aspergillus avus Aspergilus fumigatus Monilia sitophita Total Freqncia absoluta 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 2 1 14

Fowler e Bueno10 indicaram alta freqncia acumulada, de microrganismos, isolados de formigas dos gneros: Klebsiella, Serratia e Enterobacter, semelhante aos dados encontrados nesta pesquisa. Estudos na ndia indicam a disseminao tanto de organismos da famlia Enterobacteriaceae bem como da famlia Pseudomonadaceae6. Os bacilos Gram positivos representaram 63,5% dos isolados. A capacidade de formar endosporos, permite a instalao destas espcies em locais de grande instabilidade ambiental. A alta capacidade de adaptao permite entender a relao com as formigas como sendo uma simples sobreposio de nicho, mas como observados no homem, podem estar presentes na microbiota normal deste inseto, neste caso as formigas esto agindo tal qual o homem1 como veiculadores biolgicos deste grupo de organismos ou apenas transportando na forma de endosporos ou clulas vegetativas, mas em condio limitada. A versatilidade torna-os, se no organismos invasivos com alto fator de virulncia conquistada por questes ecolgicas, oportunistas sendo fator de alta relevncia a grande incidncia do nmero de isolados, pois podem estar associados ao grande poder de disseminao promovida pelas formigas, podendo contribuir com o aumento nas infeces hospitalares2 10.

possvel associar as formigas aos fungos devido ao ambiente explorado por estes insetos, que coincide com as condies sicoqumicas propcias para a proliferao destes microrganismos18. Estas condies so, muitas vezes, criadas pelas formigas de forma a conseguir benefcios desta associao, oferecendo situao propcia para a proliferao de fungos de modo geral, devido a semelhana da biologia destes microrganismos8. A constatao destas associaes, tal qual com bactrias, pode ser considerada de grande problema para a sociedade tendo em vista a grande capacidade de adaptao das formigas ao ambiente urbano5 22, pois ela potencializa a capacidade de disperso dos fungos, tanto de forma mecnica transportando seus propgulos, contrados de ambientes contaminados, para locais e/ou objetos no contaminados quanto de forma biolgica, atuando como reservatrios de fungos patognicos ao homem, onde os fungos instalados em sua cutcula disseminam por todo o ambiente. Estudos da contaminao, por fungos, de ambientes hospitalares na Grcia, demonstram que 70,5% dos isolados so do gnero Aspergillus, tendo maior prevalncia de Aspergillus niger, Aspergillus fumigatos, Aspergillus avus16. No Brasil, existe uma prevalncia maior, por caractersticas adaptativas, da espcie Trichophyton rubrum7. Concluiu-se que os resultados obtidos demonstram a grande capacidade das formigas em manter associaes com bactrias: cocos Gram positivos, bacilos Gram negativos e bacilos Gram positivos, da mesma forma e mesmo tempo conseguem manter associadas a fungos leveduriformes e lamentosos. Bem como estes microrganismos podem apresentar multi-resistncias a uma variedade de antibiticos sendo um fator de risco nas infeces hospitalares, quando em infestaes nestes ambientes.

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