Espectrometria de Massa Espectrometria de Massa

A espectrometria de massa (EM) uma tcnica

largamente utilizada pelos qumicos na anlise de
molculas de diversas massas molares ( g-pg).
uma tcnica destrutiva.
A grande sensibilidade do mtodo faz com que
seja rotineiramente usado na anlise de
substncias em baixa concentrao, como no caso
do doping, controle de alimentos e medicamentos,
contaminao ambiental, entre muitas outras
aplicaes.
Princpio bsico Princpio bsico
Etapas Etapas
Bombardeamento Bombardeamento das das molculas molculas por por
um um feixe feixe de de eltrons eltrons de de alta alta energia energia
Acelerao Acelerao dos dos ons ons em em um um campo campo
eltrico eltrico ou ou magntico magntico ee separao separao eltrico eltrico ou ou magntico magntico ee separao separao
pela pela razo razo massa/carga massa/carga
Deteco Deteco dos dos ons ons com com determinada determinada
razo razo massa/carga massa/carga
Ionizao Ionizao
Formao de ons positivos Formao de ons positivos
Remoo de um eltron Remoo de um eltron
M + e M + e MM
+. +.
+ 2 + 2ee
M
+.
(on molecular) expressa por m/z
Massa (m) e Carga (z)
Tipos de analisadores Tipos de analisadores
Deflexo em campo magntico (impacto Deflexo em campo magntico (impacto
de eltrons de eltrons EI) EI)
Quadrupolo Quadrupolo Quadrupolo Quadrupolo
Tempo de Vo (TOF) Tempo de Vo (TOF)
Ressonncia de on Cclotron Ressonncia de on Cclotron
EM/EM EM/EM
Analisadores Analisadores
Existem vrios dispositivos para separar Existem vrios dispositivos para separar
ons com razo m/z diferentes ons com razo m/z diferentes
Idealmente o analisador deveria ser Idealmente o analisador deveria ser
capaz de distinguir diferenas de massa capaz de distinguir diferenas de massa capaz de distinguir diferenas de massa capaz de distinguir diferenas de massa
minsculas minsculas
Tipo de analisador Tipo de analisador
Na tcnica de impacto de eltrons (EI) comumente a mais usada, as molculas
gaseificadas so bombardeadas com um feixe de eltrons (70 eV) de alta energia
e aceleradas. Aps a ionizao, as espcies carregadas passam por um campo
magntico, onde so defletidas de acordo com a razo massa/carga (m/z) para um
tubo analisador e detectadas.
Tipo de analisador Tipo de analisador
Filtro de massas quadrupolo
Quadrupolo Quadrupolo
Quatro Quatro bastes bastes sujeitos sujeitos aa uma uma DDP DDP
(quadrupolo (quadrupolo) )
Gerao Gerao de de um um campo campo eletrosttico eletrosttico
oscilante oscilante oscilante oscilante
ons ons atravessam atravessam
na direo Z na direo Z
ons ons com certo m/z tm com certo m/z tm
ooscilao estvel de scilao estvel de ampli ampli- -
t tude ude constante (atingem o constante (atingem o
d detector) etector)
Oscila nos eixos X e Y Oscila nos eixos X e Y
Detector
+
+
- -
TOF TOF (Time of Flight) (Time of Flight)
Aps ionizada, a amostra entra no Aps ionizada, a amostra entra no
tubo e a separao feita baseado tubo e a separao feita baseado
na diferena de velocidade entre as na diferena de velocidade entre as
partculas partculas partculas partculas
Tipos de ionizao Tipos de ionizao
Ionizao qumica (CI): a amostra vaporizada Ionizao qumica (CI): a amostra vaporizada
introduzida no espectrmetro com um excesso de introduzida no espectrmetro com um excesso de
gs (metano, gs (metano, isobutano isobutano ou amnia) ou amnia)
ons primrios ons primrios
ons secundrios reagem com a amostra M ons secundrios reagem com a amostra M
Impacto de eltrons (EI) Impacto de eltrons (EI)
Injeo da amostra Injeo da amostra
Amostra aquecida Amostra aquecida
Vaporizada Vaporizada
Bombardeada com feixe de eltrons Bombardeada com feixe de eltrons
Acelerada para o analisador Acelerada para o analisador
M + e M + e MM
+. +.
+ 2 + 2ee
Desvantagens: Desvantagens:
Limitadas para molculas termicamente Limitadas para molculas termicamente
instveis instveis
1 em 1 x 10 1 em 1 x 10
6 6
molculas ionizadas molculas ionizadas
Insuficiente para amostras com alto Insuficiente para amostras com alto
peso molecular peso molecular
Espectrometria de massa com ionizao Espectrometria de massa com ionizao
por spray de eltrons (ESI) por spray de eltrons (ESI) ligada ligada
sada de um HPLC (CLAE) sada de um HPLC (CLAE)
ESI ESI (Electrospray Ionization) (Electrospray Ionization)
A amostra introduzida em um A amostra introduzida em um
capilar sob alta voltagem capilar sob alta voltagem
Acontece presso atmosfrica Acontece presso atmosfrica Acontece presso atmosfrica Acontece presso atmosfrica
A injeo da amostra muito lenta A injeo da amostra muito lenta
L / seg L / seg
Espectrometria de massa a laser Espectrometria de massa a laser
assistida por matriz (MALDI) assistida por matriz (MALDI)
MALDI MALDI (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization) (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization)
Aplicvel para molculas com alto Aplicvel para molculas com alto
peso molecular peso molecular
Biomolculas Biomolculas
Para molculas termicamente Para molculas termicamente
instveis instveis
A ionizao feita pela incidncia de A ionizao feita pela incidncia de
um laser um laser
Pulsos em comprimento de onda fixo Pulsos em comprimento de onda fixo Pulsos em comprimento de onda fixo Pulsos em comprimento de onda fixo
Utiliza Utiliza- -se matriz para ionizao se matriz para ionizao
Separar as molculas, impedindo a Separar as molculas, impedindo a
formao de dmeros, trmeros... formao de dmeros, trmeros...
Papel da matriz Papel da matriz
Doar um H Doar um H
+ +
Formar o (MH) Formar o (MH)
+ +
Placa da amostra
Espectro de Massa obtido por EI: Espectro de Massa obtido por EI:
M + M + ee MM
++
+ 2 + 2ee
Formao de Formao de on molecular e pico base on molecular e pico base
100 % 100 %
100 % 100 %
100 % 100 %
Espectro de massa de alta resoluo Espectro de massa de alta resoluo
N O
O
O
C
15
H
31
NO
2
MM = 494,2781
Importncia de diferentes tcnicas de ionizao Importncia de diferentes tcnicas de ionizao
Importncia de diferentes tcnicas de ionizao Importncia de diferentes tcnicas de ionizao
Dessoro de campo Dessoro de campo
Importncia de diferentes tcnicas de Importncia de diferentes tcnicas de
ionizao e fragmentao ionizao e fragmentao
Dessoro Dessoro
de campo de campo
Cromatografia gasosa acoplada Cromatografia gasosa acoplada
espectrometria de massa (CG/EM) espectrometria de massa (CG/EM)
OCH
3
I
I
C
15
H
31
MM = 570
Espectro de Massa obtido por EI: Espectro de Massa obtido por EI:
M + M + ee MM
++
+ 2 + 2ee
Formao de Formao de on molecular e pico base on molecular e pico base
100 % 100 %
100 % 100 %
100 % 100 %
Principais istopos estveis de Principais istopos estveis de
elementos mais comuns elementos mais comuns
Intensidade relativa de Intensidade relativa de M + 1 M + 1 e e M + 2 M + 2
em algumas molculas em algumas molculas
Utilizao do pico Utilizao do pico M + M + 1 na 1 na
determinao determinao
da frmula molecular da frmula molecular
Espectrometria de massa de alta resoluo
Regras de fragmentao Regras de fragmentao
Fragmentaes Fragmentaes
on troplio on troplio
Exemplos gerais
de modos de
fragmentao
mais comuns
Rearranjos
Fragmentaes de alcanos Fragmentaes de alcanos
Fragmentaes de cicloalcanos Fragmentaes de cicloalcanos
Fragmentaes de alquenos e alquinos Fragmentaes de alquenos e alquinos
Fragmentaes de terpenos Fragmentaes de terpenos
Fragmentaes de hidrocarbonetos Fragmentaes de hidrocarbonetos
aromticos aromticos
Fragmentaes de lcoois Fragmentaes de lcoois
Fragmentaes de fenis Fragmentaes de fenis
Fragmentaes de teres Fragmentaes de teres
teres aromticos
Fragmentaes de aldedos Fragmentaes de aldedos
Fragmentos de cetonas Fragmentos de cetonas
Cetonas cclicas
Fragmentaes de steres Fragmentaes de steres
Fragmentaes de cidos carboxlicos Fragmentaes de cidos carboxlicos
Fragmentaes de aminas Fragmentaes de aminas
Fragmentaes de amidas Fragmentaes de amidas
Fragmentaes de haletos Fragmentaes de haletos
Intensidade relativa de picos dos Intensidade relativa de picos dos
istopos para vrias combinaes de istopos para vrias combinaes de
bromo e cloro bromo e cloro
Alguns fragmentos comuns no Alguns fragmentos comuns no
detectados detectados
Massas de fragmentos comuns Massas de fragmentos comuns
Alguns modos comuns de fragmentao Alguns modos comuns de fragmentao
por classes funcionais por classes funcionais