C y t o t o x i c i t y o f E x p e r i m e n t a l C a s t i n g A l l o y s E v a l u a t e d b y C e l l C u l t u r e T e s t s

R . G . C R A IG a n d C . T . HA NKS
Sc h o o l o f D e n t i s t r y , U n i v e r s i t y o f M i c h i g a n , A n n A r b o r , M I 4 8 1 0 9 - 1 0 7 8
T h e c y t o t o x i c i t y o f a s e r i e s o f 2 9 e x p e r i m e n t a l a l l o y s a n d s i x
p u r e m e t a l s w a s d e t e r m i n e d w i t h c e l l c u l t u r e t e c h n i q u e s a n d
s u c c i n i c d e h y d r o g e n a s e h i s t o c h e m i s t r y . T h e w i d t h o f a n y r i n g
o f i n h i b i t i o n , o p t i c a l d e n s i t y o f t h e h i s t o c h e m i c a l l y s t a i n e d
c e l l s , a n d a v i s u a l r a n k i n g o f t h e i n t e n s i t y o f t h e b l u e c o l o r o f
t h e s t a i n e d c e l l s w e r e c o m p a r e d f o r d e t e r m i n a t i o n o f c y t o t o x -
i c i t y . T w e n t y - f o u r o f t h e 3 5 m e t a l s a n d a l l o y s ( - 7 0 % ) h a d
t h e s a m e r a n k i n g s b y t h e t h r e e m e t h o d s . O f t h e p u r e m e t a l s ,
A u , P d , a n d T i w e r e t h e l e a s t c y t o t o x i c , f o l l o w e d b y A g , t h e n
Ni , a n d f i n a l l y , C u . Si n g l e - p h a s e a l l o y s w i t h m o d e r a t e l y h i g h
C u a n d w i t h o u t h i g h P d a n d A u c o n c e n t r a t i o n s h a d h i g h c y -
t o t o x i c i t y , a s d i d m u l t i p h a s e a l l o y s , e v e n w h e n t h e y w e r e h i g h
i n A u a n d A g . Hi g h P d w a s m o r e e f f e c t i v e i n m a i n t a i n i n g t h e
b i o c o m p a t i b i l i t y o f a l l o y s c o n t a i n i n g C u t h a n w a s A u . Si n g l e -
p h a s e a l l o y s w i t h c o m p o s i t i o n s t y p i c a l o f t h o s e t o b e u s e d f o r
p o r c e l a i n - f u s e d - t o - m e t a l r e s t o r a t i o n s s h o w e d g o o d b i o c o m p a t -
i b i l i t y , a s d i d t h o s e b a s e m e t a l a l l o y s t h a t f o r m e d a d h e r e n t
o x i d e s u r f a c e l a y e r s .
J D e n t R e s 6 9 ( 8 ) : 1 5 3 9 - 1 5 4 2 , A u g u s t , 1 9 9 0
In t r o d u c t i o n .
T h e c y t o t o x i c i t y o f a s e r i e s o f c o m m e r c i a l d e n t a l c a s t i n g a l l o y s
w a s d e t e r m i n e d b y c e l l c u l t u r e t e c h n i q u e s ( C r a i g a n d Ha n k s ,
1 9 8 8 ) . P h a s e - c o n t r a s t m i c r o s c o p y w a s u s e d f o r e x a m i n a t i o n
o f c e l l m o r p h o l o g y a n d s u c c i n i c d e h y d r o g e n a s e h i s t o c h e m i c a l
r e a c t i o n f o r m e a s u r e m e n t o f a n y r i n g o f i n h i b i t i o n o f f i b r o -
b l a s t s a r o u n d t h e a l l o y s a n d a n y d e c r e a s e i n e n z y m e a c t i v i t y
o f t h e c e l l s i n t h e c u l t u r e m e d i u m . T h a t s t u d y f o u n d t h a t c r o w n
a n d b r i d g e g o l d c a s t i n g a l l o y s a n d a Ni - a n d a C o - b a s e d a l l o y
w e r e m o r e b i o c o m p a t i b l e i n t h e p o l i s h e d t h a n i n t h e a s - c a s t
c o n d i t i o n . P o r c e l a i n - f u s e d - t o - m e t a l a l l o y s w e r e b i o c o m p a t i b l e
i n e i t h e r t h e a s - c a s t o r p o l i s h e d c o n d i t i o n ( C r a i g a n d Ha n k s ,
1 9 8 8 ) .
Si n c e t h e m e t h o d a p p e a r e d s a t i s f a c t o r y f o r e v a l u a t i o n o f
c y t o t o x i c i t y o f a l l o y s i n d i r e c t c o n t a c t w i t h g i n g i v a l t i s s u e s , a
s e r i e s o f 2 8 e x p e r i m e n t a l a l l o y s , s i x p u r e e l e m e n t s ( A u , P d ,
T i , A g , Ni , a n d C u ) , a n d a n 1 8 - 8 s t a i n l e s s s t e e l w e r e t e s t e d
b y : ( 1 ) t h e r a n k i n g o f t h e w i d t h o f a n y r i n g o f i n h i b i t i o n o f
c e l l g r o w t h a r o u n d t h e a l l o y s , ( 2 ) r a n k i n g o f o p t i c a l d e n s i t y
o f t h e h i s t o c h e m i c a l l y s t a i n e d c e l l s , a n d ( 3 ) v i s u a l r a n k i n g o f
t h e i n t e n s i t y o f t h e c o l o r o f t h e h i s t o c h e m i c a l l y s t a i n e d c e l l s .
T h e o b j e c t i v e s o f t h e s t u d y w e r e : ( 1 ) t o e x a m i n e w h e t h e r
c e l l u l a r r e s p o n s e s t o e i t h e r e l e m e n t s o r e x p e r i m e n t a l a l l o y s
m i g h t e x p l a i n t h e c y t o t o x i c i t y o f d e n t a l a l l o y s , ( 2 ) t o r a n k t h e
b i o c o m p a t i b i l i t y o f s o m e p u r e e l e m e n t s f o u n d i n d e n t a l a l l o y s ,
a n d ( 3 ) t o d e t e r m i n e w h e t h e r t h e r e w a s a c o r r e l a t i o n a m o n g
t h e t h r e e m e t h o d s o f e v a l u a t i o n o f c y t o t o x i c i t y o f t h e m e t a l s
a n d e x p e r i m e n t a l a l l o y s .
M a t e r i a l s a n d m e t h o d s .
T h e m e t a l s a n d a l l o y s a n d t h e a t o m i c p e r c e n t a g e o f e l e m e n t s
p r e s e n t a r e l i s t e d i n T a b l e 1 . T h e p e r c e n t a g e s o f t h e e l e m e n t s
R e c e i v e d f o r p u b l i c a t i o n No v e m b e r 8 , 1 9 8 9
A c c e p t e d f o r p u b l i c a t i o n M a r c h 1 , 1 9 9 0
a d d u p t o 1 0 0
+
0 . 1 % , s i n c e t h e v a l u e s c a l c u l a t e d f r o m t h e
w e i g h t p e r c e n t a g e s w e r e r o u n d e d o f f . B a s e d o n t h e p r i n c i p a l
a t o m i c p e r c e n t a g e , t h e r e w e r e 1 5 A u - , 7 P d - , 4 A g - , 1 T i - , 1
C r - , a n d I F e - b a s e d a l l o y s , p l u s p u r e A u , P d , T i , A g , Ni , a n d
C u ; h o w e v e r , w h e n t h e c o n c e n t r a t i o n s w e r e c a l c u l a t e d o n t h e
u s u a l w e i g h t p e r c e n t a g e b a s i s , t h e r e w e r e 1 7 A u - , 5 P d - , 4
A g - , 1 T i - , 1 C r - , a n d 1 F e - b a s e d a l l o y s .
Sa m p l e s w e r e p r e p a r e d a s d i s k s 5 m m i n d i a m e t e r a n d 3
m m t h i c k h a v i n g a s t e m 2 . 5 m m i n d i a m e t e r a n d 1 0 m m l o n g
e x t e n d i n g f r o m o n e f a c e o f t h e d i s k ( C r a i g a n d Ha n k s , 1 9 8 8 ) .
T h e d i s k s w e r e s u c c e s s i v e l y p o l i s h e d w i t h a n a b r a s i v e r u b b e r
w h e e l , a n d t h e n w i t h T r i p o l i a n d r o u g e o n a r a g w h e e l . T h e
p o l i s h e d s a m p l e s w e r e u l t r a s o n i c a l l y c l e a n e d f o r t e n m i n i n
J e l e n k o P o l i s h i n g C o m p o u n d R e m o v e r d i l u t e d 1 : 3 w i t h d i s -
t i l l e d w a t e r , t h e n f o r t e n m i n i n d i s t i l l e d w a t e r , a n d f i n a l l y f o r
t e n m i n i n 9 5 % e t h a n o l . T h e s a m p l e s w e r e p l a c e d i n 2 4 - w e l l
s t e r i l e c u l t u r e d i s h e s , s t e r i l i z e d w i t h e t h y l e n e o x i d e f o r 2 4 h ,
a n d t h e n d e - g a s s e d u n d e r v a c u u m f o r o n e m o n t h p r i o r t o p l a -
t i n g o f t h e c e l l s .
C e l l c u l t u r e t e s t i n g w i t h B a l b / c 3 T 3 c e l l s w a s c o n d u c t e d
a c c o r d i n g t o p r e v i o u s l y d e s c r i b e d m e t h o d s ( C r a i g a n d Ha n k s ,
1 9 8 8 ) w i t h s i x r e p l i c a t i o n s o f e a c h m e t a l . T e f l o n w a s u s e d f o r
n e g a t i v e c o n t r o l s , a n d p l a s t i c i z e d p o l y v i n y l c h l o r i d e w a s u s e d
f o r p o s i t i v e c o n t r o l s . Se v e r a l w e l l s w i t h o u t d i s k s s e r v e d a s
b l a n k s w i t h m a x i m u m c e l l g r o w t h a n d s u c c i n i c d e h y d r o g e n a s e
a c t i v i t y . Su c c i n i c d e h y d r o g e n a s e a c t i v i t y o f t h e c e l l s w a s e v a l -
u a t e d b y d i n i t r o t e t r a z o l i u m c h l o r i d e h i s t o c h e m i c a l s t a i n i n g
( P e a r s e , 1 9 7 2 ) t h r e e d a y s a f t e r c e l l s w e r e p l a t e d .
C y t o t o x i c i t y o f t h e a l l o y s a n d p u r e m e t a l s w a s e v a l u a t e d b y :
( 1 ) m e a s u r e m e n t o f t h e w i d t h o f a n y r i n g o f i n h i b i t i o n a r o u n d
t h e s t a i n e d s a m p l e s ; ( 2 ) d e t e r m i n a t i o n o f t h e o p t i c a l d e n s i t y
( p e r c e n t a b s o r p t i o n ) o f t h e b l u e h i s t o c h e m i c a l l y s t a i n e d c e l l s ,
c o m p a r e d w i t h t h e c e n t e r o f t h e w e l l c o n t a i n i n g n o c e l l s ; a n d
( 3 ) v i s u a l r a n k i n g o f t h e i n t e n s i t y o f t h e b l u e o f t h e h i s t o c h e m -
i c a l l y s t a i n e d c e l l s . T h e w i d t h o f t h e r i n g o f i n h i b i t i o n w a s
r a n k e d 1 t h r o u g h 5 o n a n o n - l i n e a r s c a l e , w i t h 1 b e i n g t h e
s m a l l e s t a n d 5 b e i n g t h e l a r g e s t w i d t h , a s s h o w n i n T a b l e 2 .
T h e o p t i c a l d e n s i t y ( o n a l i n e a r s c a l e ) a n d t h e v i s u a l r a n k i n g
( b a s e d o n e s t i m a t i o n o f a m o u n t o f c o l o r a r o u n d s a m p l e s ) s c h e m e s
a r e l i s t e d i n T a b l e s 3 a n d 4 , r e s p e c t i v e l y , a n d a g a i n a r a n k i n g
o f 1 w a s t h e b e s t a n d o n e o f 5 w a s t h e w o r s t .
R e s u l t s .
T h e r a n k i n g s o f a l l t h e a l l o y s a n d m e t a l s b y t h e t h r e e m e t h -
o d s a r e p r e s e n t e d i n T a b l e 5 . T h e v i s u a l r a n k i n g s w e r e o b -
t a i n e d b y t w o i n d e p e n d e n t o b s e r v e r s ; i n t h r e e i n s t a n c e s o f
d i s a g r e e m e n t , t h e r a n k i n g s w e r e d i s c u s s e d a n d a g r e e m e n t w a s
r e a c h e d . M e t a l s o r a l l o y s n o t r a n k e d t h e s a m e b y t h e t h r e e
m e t h o d s a r e u n d e r s c o r e d . Si n c e t h e d a t a a r e n o n - p a r a m e t r i c ,
t h e r a n k i n g i s n o t a s p o w e r f u l a c o m p a r i s o n a s w i t h p a r a m e t r i c
d a t a . T h e r e f o r e , t h e m o s t c o n s e r v a t i v e r a n k i n g o f t h e c y t o t o x -
i c i t y o f t h e a l l o y s a n d m e t a l s i s g i v e n i n T a b l e 6 , w h e r e t h e y
a r e r a n k e d w i t h t h e h i g h e s t n u m e r i c a l r a n k i n g o f t h e t h r e e
m e t h o d s . T h e s e c o n s e r v a t i v e r a n k i n g s , a l t h o u g h p o s s i b l y u n -
f a i r t o a p a r t i c u l a r m a t e r i a l , p r o v i d e a s a f e t y f a c t o r f o r a l l o y s
u s e d i n p a t i e n t s .
F o r t h e p u r e m e t a l s , A u ( 3 0 ) , P d ( 3 1 ) , a n d T i ( 3 2 ) w e r e
1 5 3 9
1 5 4 0 C R A IG & HA NKS
T A B LE 1
A LLO Y O R M E T A L NU M B E R A ND C O M P O SIT IO N
A T O M IC P E R C E NT O F E LE M E NT S
0 . 1 Ir
0 . 1 Ir
2 . 6 A g
4 . 7 A g
1 . 5 A g
0 . 0 8 R u
2 8 . 1 Ni
0 . 0 4 Ir
1 1 . 5 A g
4 . 7 In
2 5 . 8 C u
2 4 . 8 A g
2 9 . 8 A g
0 . 0 3 Ir
8 . 9 In
1 0 . 3 In
5 . 8 G a
3 . 9 In
0 . 2 Z n
9 . 9 Sn
5 . 5 In
0 . 0 3 Ir
3 . 0 Z n
5 0 . 7 A g
0 . 0 1 R u
0 . 7 In
0 . 6 In
0 . 2 R u
0 . 1 Ir
0 . 3 R u
0 . 0 1 Ir
1 2 . 6 G a
5 . 3 In
0 . 0 1 R u
1 2 . 9 Z n
9 . 0 C d
0 . 0 0 1 R u
0 . 0 7 In
1 . 9 Z n
0 . 7 Sn
3 . 0 G a
1 . 7 Sn
1 5 . 1 C u
1 . 6 Z n
1 . 8 Sn
1 . 8 In
1 8 . 1 C u
0 . 5 R u
1 6 . 7 In
1 . 7 M o 2 . 3 T i
1 . 3 M o 0 . 1 C
0 . 6 Sn
0 . 6 Sn
1 . 1 In
2 . 9 In
2 . 1 In
2 . 8 In
1 . 3 Sn
3 . 2 Z n
2 2 . 0 C u
3 . 1 Z n
3 . 3 Z n
2 7 . 2 C u
8 . 2 C u
0 . 2 Z n
1 2 . 3 G a
1 . 6 Z n
0 . 8 Z n
0 . 9 B
2 . 5 Z n
6 . 8 Z n
1 . 0 F e
1 . 0 F e
0 . 6 Sn
0 . 6 Sn
2 . 7 Sn
1 . 7 M n
1 . 7 M n
2 . 5 C o
0 . 6 C u
1 . 2 Z n
0 . 1 T a 0 . 8 B
2 . 3 Z n
3 1 . 5 C u
2 5 . 3 C u
2 3 . 9 C u
2 . 0 G a
1 0 . 9 C u 7 . 9 G a
2 . 3 G a
1 0 . 6 C u
7 . 5 C u
9 . 0 B e 1 . 9 Si 0 . 8 G a
r a n k e d 1 ( l e a s t c y t o t o x i c i t y ) , A g ( 3 3 ) r a n k e d 2 , Ni ( 3 4 ) r a n k e d
4 , a n d C u ( 3 5 ) r a n k e d 5 . F o r C u , a l l o f t h e c e l l s w e r e n o t
a t t a c h e d . F o r A u , P d , a n d T i , t h e r e w a s n o r i n g o f i n h i b i t i o n .
T h e T i - A l - V a l l o y ( 2 7 ) , 1 8 - 8 s t a i n l e s s s t e e l ( 2 9 ) , a n d t h e
C r - Ni - T i - C o a l l o y ( 2 8 ) e a c h h a d a r a n k i n g o f 1 , a n d t h e s e
a l l o y s w e r e n o t c y t o t o x i c .
O t h e r t h a n p u r e C u , o n l y o n e A u a l l o y ( 8 ) a n d o n e A g a l l o y
( 2 5 ) h a d t h e p o o r e s t r a n k i n g o f 5 , i n s p i t e o f 5 1 . 5 a t . % ( 7 5
w t . % ) o f A u i n a l l o y 8 a n d 5 0 . 7 a t . % ( 4 9 . 5 w t . % ) o f A g ,
3 0 . 3 a t . % ( 2 9 . 2 w t . % ) o f P d , a n d 6 . 2 a t . % ( 1 1 . 0 w t . % ) o f
P t i n a l l o y 2 5 . Sc a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a p h s s h o w e d t h a t
t h e s e w e r e m u l t i p h a s e a l l o y s , a n d a n e x a m p l e i s s h o w n i n F i g .
1 . A t h i r d a l l o y ( 2 4 ) h a v i n g 5 5 . 1 a t . % ( 6 1 w t . % ) A g , 2 2 . 9
a t . % ( 2 5 w t . % ) P d , a n d 1 8 . 1 a t . % ( 1 1 . 8 w t . % ) C u w a s
r a n k e d 4 , a n d i t a l s o w a s f o u n d t o b e a m u l t i p h a s e a l l o y , a s
s h o w n i n F i g . 2 .
In g e n e r a l , a l l o y s w i t h f r o m 3 6 t o 5 0 a t . % A u w e r e r a n k e d
4 ( 1 0 , 1 2 , 1 3 , 1 4 ) a n d c o n t a i n e d f r o m 2 4 t o 3 2 a t . % C u w i t h
T A B LE 2
R A NKING SC HE M E F O R T HE WID T H O F T HE R ING O F
INHIB IT IO N O F C E LLS A R O U ND T HE M E T A LS
R a n k Wi d t h o f R i n g , m m
1 0 . 0 - 0 . 1
2 0 . 2 - 0 . 5
3 0 . 6 - 1 . 0
4 1 . 1 - 2 . 0
5 2 . 1 - 5 . 0
1 2 - 3 0 a t . % A g , 0 - 6 a t . % P d , a n d - 3 a t . % Z n . A l l o y 1 2
c o n t a i n e d 9 . 0 a t . % o f C d .
A l l o y s r a n k e d 3 w e r e A u a l l o y s f r o m 3 2 - 8 1 a t . % A u a n d
A g a l l o y s w i t h 4 2 - 6 3 a t . % A g . A l l o y 1 5 ( w i t h 3 2 . 0 a t . %
A u ) a l s o h a d 8 . 1 a t . % P d a n d 3 0 . 9 a t . % A g , a l t h o u g h i t h a d
2 7 . 2 a t . % C u . A l l o y s 1 1 a n d 7 h a d 4 8 . 3 a n d 5 5 . 0 a t . % A u ,
T A B LE 3
R A NKING O F O P T IC A L D E NSIT Y O F HIST O C HE M IC A LLY
ST A INE D C E LLS
R a n k O p t i c a l D e n s i t y , % *
1 1 2 - 1 5
2 9 - 1 2
3 6 - 9
4 3 - 6
5 0 - 3
*P e r c e n t a b s o r p t i o n .
T A B LE 4
V ISU A L R A NKING O F C O LO R O F HIST O C HE M IC A LLY ST A INE D
C E LLS
R a n k C o l o r
1 D a r k b l u e
2 M e d i u m b l u e
3 P a l e b l u e
4 Li g h t b l u e
5 C o l o r l e s s
0 . 3 F e
1 . 1 C u
A LLO Y
1
2
3
4
S
6
7
8
9
1 0
1 1
1 2
1 3
1 4
1 5
1 6
1 7
1 8
1 9
2 0
2 1
2 2
2 3
2 4
2 5
2 6
2 7
2 8
2 9
3 0
3 1
3 2
3 3
3 4
3 5
9 . 7 P t
6 . 1 P t
6 . 8 P t
1 1 . 6 P t
9 . 3 P t
2 8 . 9 P d
1 6 . 7 A g
3 . 8 P d
1 4 . 2 P d
1 . 4 P t
1 . 9 P d
1 5 . 2 A g
0 . 3 P t
0 . 3 P t
8 . 1 P d
4 3 . 3 P d
5 0 . 2 P d
0 . 5 R u
7 3 . 9 P d
7 1 . 1 P d
2 4 . 9 A g
3 1 . 5 A g
2 2 . 5 P d
5 5 . 1 A g
6 . 2 P t
2 3 . 0 P d
3 . 6 V
1 3 . 6 C r
1 8 . 5 C r
2 . 3 P d
8 . 3 P d
5 . 7 P d
3 . 5 P d
1 5 . 6 P d
1 . 5 A g
2 8 . 3 C u
3 . 9 In
2 6 . 6 A g
2 . 6 P d
1 0 . 1 A g
3 . 4 Z n
3 . 8 P d
6 . 0 P d
3 0 . 9 A g
0 . 1 4 R u
0 . 1 4 R u
1 2 . 7 Sn
0 . 5 R u
0 . 2 R u
0 . 1 R u
0 . 0 5 R u
6 2 . 7 A g
0 . 1 R u
3 0 . 3 P d
4 1 . 7 A g
1 0 . 2 A l
0 . 5 C o
1 1 . 0 Ni
8 3 . 8 A u
8 1 . 5 A u
8 0 . 5 A u
7 7 . 2 A u
6 8 . 8 A u
6 1 . 6 A u
5 5 . 0 A u
5 1 . 5 A u
5 0 . 2 A u
4 9 . 8 A u
4 8 . 3 A u
4 6 . 6 A u
4 2 . 8 A u
3 6 . 6 A u
3 2 . 0 A u
3 6 . 8 A u
3 6 . 4 A u
8 1 . 1 P d
1 . 0 A u
1 . 0 A u
6 3 . 4 P d
5 7 . 3 P d
1 . 6 A u
2 2 . 9 P d
2 . 2 A u
1 1 . 8 A u
8 6 . 2 T i
7 0 . 3 Ni
6 9 . 1 F e
1 0 0 A u
1 0 0 P d
1 0 0 T i
1 0 0 A g
1 0 0 Ni
1 0 0 C u
J D e n t R e s
A u g u s t
1 9 9 0
C YT O T O XIC IT Y O F C A ST ING A LLO YS
T A B LE 5
R A NKING O F A LL M E T A LS A ND A LLO YS B Y T HE T HR E E M E T HO D S
R a n k M e t h o d
1 R i n g o f i n h i b i t i o n
O p t i c a l d e n s i t y
V i s u a l
2 R i n g o f i n h i b i t i o n
O p t i c a l d e n s i t y
V i s u a l
3 R i n g o f i n h i b i t i o n
O p t i c a l d e n s i t y
V i s u a l
4 R i n g o f i n h i b i t i o n
O p t i c a l d e n s i t y
V i s u a l
5 R i n g o f i n h i b i t i o n
O p t i c a l d e n s i t y
V i s u a l
*M e t a l s o r a l l o y s t h a t a r e u n d e r s c o r e d w e r e n o t r a n k e d t h e s a m e b y t h e t h r e e m e t h o d s .
w i t h 2 2 - 2 8 a t . % C u a n d 1 0 - 1 7 a t . % A g . A l l o y 2 , w i t h t h e
h i g h e s t n o b l e m e t a l ( A u , P d , P t ) c o n t e n t o f
-
9 6 a t . % , a l s o
c o n t a i n e d M n , In , Sn , F e , a n d Ir i n q u a n t i t i e s o f 1 . 7 , 0 . 6 , 0 . 6 ,
1 . 0 , a n d 0 . 1 a t . % , r e s p e c t i v e l y .
A l l o y s r a n k e d 2 w e r e h i g h - P d o r h i g h - A u - P d a l l o y s ( 6 5 - 9 4
a t . % ) , w i t h a l l o y s 9 a n d 2 1 h a v i n g 2 5 - 2 7 a t . % A g a n d - 2
a t . % Z n , a n d a l l o y s 1 6 a n d 1 9 h a v i n g 8 - 1 1 a t . % C u . T h e
a l l o y s r a n k e d 1 w e r e n o t e d f o r t h e i r h i g h A u a n d / o r P d c o n t e n t
a n d l a c k o f C u . e x c e p t a l l o y 2 0 , w i t h 1 5 . 1 a t . % C u . w h i c h
a l s o c o n t a i n e d a b o u t 7 1 a t . % P d .
M e t a l o r A l l o y *
1 , 3 , 4 , 5 , 6 , 9 , 1 6 , 1 7 , 1 8 , 2 0 , 2 2 , 2 7 , 2 8 , 2 9 , 3 0 , 3 1 , 3 2
1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 1 6 , 1 7 , 1 8 , 1 9 , 2 0 , 2 2 , 2 7 , 2 8 , 2 9 , 3 0 , 3 1 , 3 2
1 , 4 , 5 , 6 , 1 7 , 1 8 , T 9 , 2 0 , 2 2 , 2 7 , 2 8 , 2 9 , 3 0 , 3 1 , 3 2
7 , 1 1 , 1 9 , 2 1 , 2 6 , 3 3 , 3 4
2 , 3 , 9 , 1 1 , 1 6 , 2 1 , 2 6 , 3 3
2 , 1 3 , 1 5 , 2 3
7 , 1 7 , 1 1 , 1 5 , 2 3 , 2 6 , 3 4
7 , T 1 , T 3 , 2 3 -
1 0 , 1 2 , 1 4 , 2 4
1 2 , 1 3 , 1 4 , 2 4
1 2 , _ , 1 4 , 2 4 , 3 4
8 , 2 5 , 3 5
8 , 2 5 , 3 5
8 , 2 5 , 3 5
D i s c u s s i o n .
T h e c a u s e o f t h e h i g h b i o c o m p a t i b i l i t y o f A u a n d P d w a s
p r o b a b l y t h e i r h i g h n o b i l i t y , w h i l e t h e h i g h b i o c o m p a t i b i l i t y
o f T i w a s p r o b a b l y r e l a t e d t o t h e f o r m a t i o n o f a h i g h l y a d h e r e n t
l a y e r o f T i O 2 o n t h e T i s a m p l e s . T h e l o w e r n o b i l i t y o f A g
m o s t l i k e l y c o n t r i b u t e d t o i t s r a n k i n g o f 2 , a n d t h e l a c k o f a n
a d h e r e n t o x i d e l a y e r o n Ni p l u s i t s l a c k o f n o b i l i t y r e s u l t e d i n
a r a n k i n g o f 4 . T h e r e a d y d i s s o l u t i o n o f C u i n t h e c u l t u r e
m e d i u m c o n t r i b u t e d g r e a t l y t o i t s c y t o t o x i c i t y a n d t h e r a n k i n g
o f 5 ( B u m g a r d n e r e t a l . , 1 9 8 9 ; Le m o n s e t a l . , 1 9 8 8 ; Wa t a h a
e t a . , 1 9 8 9 ) .
T h e h i g h b i o c o m p a t i b i l i t y ( r a n k i n g o f 1 ) o f T i - A l - V ( a l l o y
2 7 ) , 1 8 - 8 s t a i n l e s s s t e e l ( a l l o y 2 9 ) , a n d Ni - C r ( a l l o y 2 8 ) c o n -
t a i n i n g T i w a s p r o b a b l y r e l a t e d t o a p r o t e c t i v e o x i d e l a y e r o f
C r a n d / o r T i . Ho w e v e r , M e y e r e t a l . ( 1 9 8 9 ) s h o w e d t h a t a l l o y s
2 8 a n d 2 9 h a d l o w b r e a k d o w n p o t e n t i a l s o f 0 . 2 - 0 . 3 v o l t f r o m
a n o d i c p o l a r i z a t i o n m e a s u r e m e n t s , a n d t h u s , t h e s e a l l o y s w o u l d
F i g . 1 - Sc a n n i n g e l e c t r o n m i c r o g r a p h ( SE M ) o f a l l o y 8 c o n t a i n i n g 5 1 . 5
A u , 2 8 . 1 Ni , 1 2 . 6 G a , 3 . 9 In , a n d 3 . 8 P d ( a t . % ) . T h e d i s p e r s e d p h a s e
c o n t a i n e d Ni a n d G a , t h e m a t r i x p h a s e c o n s i s t e d o f A u a n d In , a n d P d
w a s s e g r e g a t e d .
T A B LE 6
O V E R A LL R A NKING O F M E T A LS A ND A LLO YS U SING T HE
M O ST C O NSE R V A T IV E ( HIG HE ST ) R A NK
R a n k M e t a l o r A l l o y
1 1 , 4 , 5 , 6 , 1 7 , 1 8 , 2 0 , 2 2 , 2 7 , 2 8 , 2 9 , 3 0 , 3 1 , 3 2
2 3 , 9 , 1 6 , 1 9 , 2 1 , 3 3
3 2 , 7 , 1 1 , 1 5 , 2 3 , 2 6
4 1 0 , 1 2 , 1 3 , 1 4 , 2 4 , 3 4
5 8 , 2 5 , 3 5
F i g . 2 - SE M o f a l l o y 2 4 c o n t a i n i n g 5 5 . 1 A g , 2 2 . 9 P d , 1 8 . 1 C LI, 3 . 0
Z n , 0 . 9 B . a n d 0 . 1 R u ( a t . % ) . T h e l a r g e d a r k a r e a s a r e - 5 9 a t . % A g ,
- 1 9 a t . % P d , - 1 9 a t . % C u , a n d - 3 a t . % Z n . T h e l i g h t , r a t h e r l a r g e
a r c a s a r e h i g h i n P d ( 5 0 - 7 0 w t . % ) , m o d e r a t e i n C u L ( 1 6 - 2 5 w t . % ) a n d
Z n ( 1 2 - 1 9 w t . % ) , w i t h s m a l l a m o u n t s o f A g ( 6 - 1 1 w t . % ) . E u t e c t i c - l i k e
l i g h t a r e a s h a v e A g / C u a n d A g / P d o f - 2 / 1 .
V o l . 6 9 No . 8 1 5 4 1
1 5 4 2 C R A IG & HA NKS
b e e x p e c t e d t o h a v e d i f f e r e n t a n d p o o r e r b i o c o m p a t i b i l i t y u n -
d e r c o n d i t i o n s o f e l e c t r i c a l p o t e n t i a l s . T h e s e d a t a i l l u s t r a t e t h a t
s u r f a c e r a t h e r t h a n b u l k c o m p o s i t i o n i s c r i t i c a l i n t h e e v a l u a t i o n
o f c y t o t o x i c i t y .
T h e h i g h c y t o t o x i c i t y ( r a n k i n g o f 5 ) o f A u a l l o y 8 a n d A g
a l l o y 2 5 w a s m o s t l i k e l y a r e s u l t o f t h e i r b e i n g m u l t i p h a s e
a l l o y s t h a t w o u l d r e d u c e t h e i r r e s i s t a n c e t o c o r r o s i o n . T h i s
s t a t e m e n t i s s u p p o r t e d b y t h e i r l o w a n o d i c p o l a r i z a t i o n b r e a k -
d o w n p o t e n t i a l s o f 0 . 3 - 0 . 4 v o l t ( M e y e r e t a l . , 1 9 8 9 ) . A l l o y
2 4 , a A g - P d - C u a l l o y , w a s a l s o f o u n d t o b e m u l t i p h a s e , a n d
i t h a d a r a n k i n g o f 4 a n d a l o w b r e a k d o w n p o t e n t i a l o f 0 . 3 5
v o l t . T h e u s e o f m u l t i p h a s e a l l o y s o f A u o r A g s h o u l d b e
a v o i d e d i f g o o d b i o c o m p a t i b i l i t y i s t o b e o b t a i n e d .
T h e a l l o y s c o n t a i n i n g 3 6 - 5 0 a t . % A u a n d s m a l l a m o u n t s o f
P d ( < 6 a t . % ) w e r e n o t s u f f i c i e n t l y n o b l e i n t h e p r e s e n c e o f
2 4 - 3 2 a t . % C u a n d 3 a t . % Z n ( a l l o y s 1 0 , 1 2 , 1 3 , a n d 1 4 ) ,
a n d t h u s h a d r a n k i n g s o f 4 . It s h o u l d b e p o i n t e d o u t t h a t a l l o y
1 2 a l s o c o n t a i n e d 9 . 0 a t . % C d , a n e l e m e n t k n o w n t o c a u s e
i n c o m p a t i b i l i t y .
Si n g l e - p h a s e a l l o y s t h a t w e r e h i g h i n A u , a n d e s p e c i a l l y P d ,
w e r e e f f e c t i v e i n p r o v i d i n g c o m p a t i b i l i t y i n t h e p r e s e n c e o f
a b o u t 2 5 a t . % A g , 2 a t . % Z n , a n d 1 5 a t . % C u ( a l l o y s 9 ,
2 0 , a n d 2 1 ) .
A n u m b e r o f t h e a l l o y s ( 1 , 2 , 4 , 5 , 6 , 1 6 , 1 7 , 1 9 , 2 1 , 2 2 )
w e r e r a n k e d 1 o r 2 b y a t l e a s t o n e t e s t m e a s u r e , a n d t h e s e
w o u l d b e u s e f u l f o r p o r c e l a i n - f u s e d - t o - m e t a l r e s t o r a t i o n s , s i n c e
t h e y c o n t a i n e d In a n d s o m e t i m e s Sn f o r m e t a l - c e r a m i c b o n d -
i n g , a n d v e r y l i t t l e o r n o C u t o c o n t r o l c o l o r o f t h e c e r a m i c .
A l t h o u g h s p e c u l a t i v e a t t h i s p o i n t , t h e s e c y t o t o x i c i t y t e s t s
a r e i n t e r p r e t e d t o m e a n t h a t a l l o y s r a n k e d 4 w o u l d n o t b e
r e c o m m e n d e d f o r u s e a s d e n t a l a l l o y s . In a n a r e a w h e r e a
c r o w n c o m e s i n t o c o n t a c t w i t h g i n g i v a l t i s s u e , t h e p r e s e n c e o f
a l l o y s c a p a b l e o f c a u s i n g c y t o t o x i c i t y w o u l d c o n t r i b u t e t o n e -
c r o s i s o f t h e t i s s u e , w h i c h w o u l d b e v e r y d i f f i c u l t t o d i f f e r -
e n t i a t e f r o m t h e e f f e c t s o f b a c t e r i a a n d p l a q u e . A l l o y s r a n k e d
5 s h o u l d b e e l i m i n a t e d f r o m u s e a s d e n t a l a l l o y s . O n t h e o t h e r
h a n d , a l l o y s r a n k e d 1 a n d 2 s h o u l d b e h i g h l y b i o c o m p a t i b l e
a g a i n s t g i n g i v a e . Si n c e t h i s t e s t f o r c y t o t o x i c i t y i s h i g h l y s e n -
s i t i v e , a l l o y s r a n k e d 3 b y o n e m e t h o d w o u l d i n a l l p r o b a b i l i t y
b e b i o c o m p a t i b l e f o r p u r p o s e s o f d e n t a l r e s t o r a t i o n s i f t h e r a n k
w a s t h e s a m e o r l o w e r b y t h e o t h e r t w o m e t h o d s . F o r e x a m p l e ,
a l l o y 2 i s m o s t l i k e l y b i o c o m p a t i b l e , e v e n t h o u g h i t w a s r a n k e d
3 b y t h e r i n g o f i n h i b i t i o n , s i n c e i t w a s r a n k e d a 2 b y t h e v i s u a l
m e t h o d a n d a 1 b y t h e o p t i c a l - d e n s i t y m e t h o d .
T h e d a t a p r e s e n t e d d o n o t p r o v e w h i c h e l e m e n t s a r e c a u s i n g
i n c o m p a t i b i l i t y . T h e y d o s h o w t h a t c y t o t o x i c i t y d o e s n o t c o r -
r e l a t e w e l l w i t h w t . % o r a t . % o f a n y s i n g l e e l e m e n t . F u r -
t h e r m o r e , t h e y s u g g e s t w h i c h e l e m e n t s a n d c o n d i t i o n s s h o u l d
b e i n v e s t i g a t e d b y a n a l y s i s o f t h e c u l t u r e m e d i u m s u r r o u n d i n g
t h e a l l o y s o r m e t a l s . T h e a d v a n t a g e o f t h e r i n g o f i n h i b i t i o n
a n d o p t i c a l - d e n s i t y m e t h o d i s t h a t a q u a n t i t a t i v e v a l u e i s o b -
t a i n e d w h i c h p e r m i t s e a s i e r s t a t i s t i c a l t r e a t m e n t o f t h e d a t a . O f
t h e s e t w o m e t h o d s , t h e o p t i c a l - d e n s i t y m e t h o d i s n o t a s s u s -
c e p t i b l e t o a r t i f a c t s s u c h a s v a r i a t i o n s i n t h e w i d t h o f t h e r i n g
a r o u n d t h e c i r c u m f e r e n c e o f t h e s a m p l e . A l t h o u g h t h e v i s u a l
m e t h o d p r o v i d e s o n l y a r a n k i n g , i t r e s u l t s f r o m a n e s t i m a t i o n
o f o v e r a l l i n t e n s i t y o f t h e s t a i n e d c e l l s a n d m i n i m i z e s t h e i n -
f l u e n c e o f a r t i f a c t s o f n o n - u n i f o r m p l a t i n g o f c e l l s .
A c k n o w l e d g m e n t s .
We a c k n o w l e d g e t h e a s s i s t a n c e o f C h r i s A . E d w a r d s i n p r o -
d u c i n g t h e SE M p h o t o g r a p h s a n d c o n d u c t i n g t h e e l e c t r o n - d i s -
p e r s i v e a n a l y s i s o f t h e a l l o y s . We a l s o e x p r e s s o u r a p p r e c i a t i o n
f o r p a r t i a l s u p p o r t o f t h e s t u d y b y M e t a u x P r e c i e u x Sa M e t a l o r ,
Ne u c h a t e l , Sw i t z e r l a n d .
R E F E R E NC E S
B U M G A R D NE R , J . D . ; LU C A S, L. C . ; a n d T ILD E N, A . B . ( 1 9 8 9 ) :
C e l l C u l t u r e A n a l y s e s o f A l u m i n u m - B r o n z e a n d A l u m i n u m - B r a s s
A l l o y s , J D e n t R e s 6 8 : 3 2 2 , A b s t . No . 1 1 2 3 .
C R A IG , R . G . a n d HA NKS, C . T . ( 1 9 8 8 ) : R e a c t i o n o f F i b r o b l a s t s t o
V a r i o u s D e n t a l C a s t i n g A l l o y s , J O r a l P a t h o l 1 7 : 3 4 1 - 3 4 7 .
LE M O NS, J . E . ; LU C A S, L. C . ; HE NSO N, P . ; a n d HILL, C . ( 1 9 8 8 ) :
B i o c o m p a t i b i l i t y o f C o p p e r B a s e A l l o y s , J D e n t R e s 6 7 : 2 6 2 , A b s t .
No . 1 1 9 6 .
M E YE R , J . M . ; C R A IG , R . G . ; SC HM A LZ , G . ; a n d R E C LA R U , L.
( 1 9 8 9 ) : C o r r o s i o n R e s i s t a n c e a n d B i o c o m p a t i b i l i t y o f So m e Lo w
G o l d D e n t a l C a s t i n g A l l o y s , E u r o p e a n D e n t a l M a t e r i a l s C o n f e r -
e n c e , U n i v e r s i t y o f G l a s g o w , Sc o t l a n d , Se p t . 8 .
P E A R SE , A . G . E . ( 1 9 7 2 ) : Hi s t o c h e m i s t r y ; T h e o r e t i c a l a n d A p -
p l i e d , V o l . 2 , 3 r d e d . B a l t i m o r e : Wi l l i a m s a n d Wi l k i n s C o . , p .
1 3 4 3 .
WA T A HA , J . C . ; C R A IG , R . G . ; a n d HA NKS, C . T . ( 1 9 8 9 ) : A n a l y s i s
o f C u l t u r e M e d i u m f o r E l e m e n t s D i s s o l v e d f r o m C a s t i n g A l l o y s ,
J D e n t R e s 6 8 : 3 2 2 , A b s t . No . 1 1 2 2 .
J D e n l t R e s A u g u s t 1 9 9 0