Manual de Orientação para Coleta, Acondicionamento e

Sistema nico de Sade
Estado de Santa Catarina

Secretaria de Estado da Sade
Laboratrio Central de Sade Pblica
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Rua Felipe Schmidt, 788 - Centro - CEP 88010-002 - Florianpolis/SC
Tel: (0XX 48 3251 7800) - Fax: (0XX 48 3251 7900)
e-mail: lacen@saude.sc.gov.br
MANUAL DE ORIENTAO PARA COLETA, ACONDICIONAMENTO E
TRANSPORTE DE AMOSTRAS BIOLGICAS
Elaborado por Rubrica Data
Marlei Pickler Debiasi dos Anjos 29/10/2012
Rita de Cssia Campos Bertoncini 29/10/2012
Verificado por Rubrica Data
Cristine Ferreira 30/10/2012
Fabiana Girardi 30/10/2012
Sandra Bianchini Fernandes 30/10/2012
Aprovado por
Rubrica Data
Cristine Ferreira 30/10/2012
Eliane Bressa Dalcin 30/10/2012
Referendado por Rubrica Data
Gilberto Alves 30/10/2012
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Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas

SUMRIO
1 Objetivo
2 Campo de aplicao
3 Definies
4 Siglas
5 Condies gerais
6 Condies especficas
7 Responsabilidades
8 Referncias
9 Anexos
A DOC MCT 01 - 01 Procedimentos para coleta, acondicionamento e
transporte de amostras biolgicas
1 OBJETIVO
Padronizar e estabelecer regras e recomendaes quanto coleta, acondicionamento e
transporte de amostras biolgicas para o Lacen.
2 CAMPO DE APLICAO
Este manual aplica-se coleta, acondicionamento e transporte de amostra biolgica nas
unidades de sade do estado, encaminhadas para a gerncia de biologia mdica do Lacen.
3 DEFINIES
Para efeito deste POP aplicam-se as seguintes definies:
a) Amostra biolgica
Parte do material biolgico de origem humana utilizada para anlises laboratoriais.
b) Amostra rejeitada
Amostra biolgica fora das especificaes determinadas pelo Lacen.
c) Requisio de Exame
Formulrio que contm informao suficiente para identificar o paciente e o requisitante
autorizado e fornecer os dados clnicos pertinentes.
d) Unidade de Sade
Estabelecimento de sade destinada a realizar assistncia sade, a uma populao
determinada (hospitais, clnicas, postos de sade, vigilncia epidemiolgica, etc.).
e) Laboratrios de Referncia ou Apoio
Laboratrio de sade pblica e/ou clnico que executa exames em amostras enviadas por
outros laboratrios.
f) Caixa trmica
Caixa para transporte de amostra biolgica (tipo geladeira porttil) de polietileno ou similar,
lavvel, resistente desinfeco e portando a identificao de Infectante ou Risco
Biolgico.
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g) Amostra sob refrigerao
Amostra biolgica conservada na temperatura de 2 a 8C.
h) Amostra congelada
Amostra biolgica conservada em temperatura abaixo de 20C negativos.
i) Amostra em temperatura ambiente
Amostra biolgica conservada na temperatura de 17 a 27C.
4 SIGLAS
EPI Equipamento de Proteo Individual
EPC Equipamento de Proteo Coletiva
BPA-I Boletim de Produo Ambulatorial Individualizado
SINAN Sistema de Informao de Agravos de Notificao
VE Vigilncia Epidemiolgica
PCR Reao em cadeia da Polimerase
IFI Imunofluorescncia Indireta
IFD Imunofluorescncia Direta
TSB Trypticase Soy Broth
ACH gar chocolate
NA No se aplica
5 CONDIES GERAIS
A qualidade dos resultados dos exames laboratoriais est intimamente relacionada fase
pr-analtica, que se inicia desde o preenchimento correto da requisio, preparao do
paciente, coleta e identificao da amostra, armazenamento temporrio da amostra no local
de coleta, transporte ao laboratrio, at o recebimento e cadastramento das amostras no
Lacen.
Esta fase deve ser criteriosamente definida e constantemente monitorada em razo do
impacto significativo das atividades realizadas durante este processo sobre a qualidade do
resultado liberado.
5.1 Requisies
Toda amostra biolgica deve ser encaminhada ao laboratrio acompanhada da requisio
para exames do LACEN devidamente preenchida, acompanhada da Ficha de notificao do
SINAN, quando se fizer necessrio.
Todas as requisies esto disponveis na home page do Lacen, no seguinte endereo
eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br.
As requisies, solicitaes mdicas ou Laudo Mdico para emisso de BPA-I (quando
aplicvel) devem conter as seguintes informaes:
a) dados da Unidade requisitante ou de procedncia da amostra - instituio solicitante (VE
municipal, hospital, clnica, profissional solicitante) com n do CNES, nome do municpio,
telefone para contato;
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b) dados do paciente - nome completo, n do Carto Nacional de Sade,
data de nascimento, sexo, raa, municpio de residncia, nome da me ou responsvel,
endereo e nmero da notificao, quando aplicvel;
c) dados da amostra biolgica coletada;
d) data e hora da coleta da amostra;
e) exame(s) solicitado(s);
f) dados complementares condio clnica/epidemiolgica controle de tratamento, se
comunicante ou contato, manipulador de alimentos, sintomas clnicos e data inicial dos
sintomas, dados vacinais recentes, uso de antibiticos ou antivirais, histrico de viagem
recente, resultado de exames anteriores;
g) data da solicitao do exame;
h) identificao do profissional solicitante (assinatura e carimbo).
Nota: em caso de solicitao dos testes de quantificao da carga viral do HIV e contagem
de linfcitos T CD4
+
/CD8
+
, o mdico deve estar cadastrado no Sistema de Controle de
Exames Laboratoriais (SISCEL).
5.1.1 Exames que devem vir acompanhados das respectivas Fichas de Notificao de
Surto - SINAN:
a) Conjuntivite bacteriana;
b) Faringite estreptoccica / escarlatina;
c) Botulismo.
5.1.2 Exames que devem vir acompanhados do Boletim de Produo Ambulatorial
(Individualizado) BPA-I:
a) Contagem de Linfcitos T CD4
+
/CD8
+
;
b) Quantificao de cido Nuclico - Carga Viral do HIV;
c) Quantificao de RNA do vrus da Hepatite C;
d) Genotipagem do HCV;
e) Genotipagem do HIV;
f) Pesquisa de anticorpos contra o vrus da Hepatite C (Anti-HCV).
Nota: em todos os BPA I devem constar assinatura e carimbo do mdico solicitante.
5.2 Solicitao de kits para coleta e transporte de amostras
A solicitao dos kits para coleta e transporte das amostras biolgicas fornecidos pelo
Lacen dever ser feita mediante solicitao prvia Diviso de Controle da Rede por meio
do fax (48) 3251-7952.
A retirada do kit no Lacen de responsabilidade da Regional de Sade ou VE de cada
municpio.
Para a retirada do material de coleta no Lacen, o solicitante dever encaminhar caixa de
transporte contendo gelo reciclvel para o acondicionamento dos kits.
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A caixa de transporte no deve ser a mesma onde tenham sido encaminhadas amostras
biolgicas de qualquer espcie.
ATENO
5.3 Horrio de recebimento das amostras no Lacen
O horrio de recebimento de amostras biolgicas no Lacen das 07h00 as 19h00 de
segunda sexta-feira.
Para anlises de urgncia (meningites bacterianas, malria, H1N1, e em caso de surtos,
dentre outros) o Lacen trabalha em regime de sobreaviso durante os dias da semana no
perodo das 19h00 as 07h00 e em regime de planto (07h00 as 19h00) nos finais de
semanas e feriados.
5.4 Informaes complementares
Informaes complementares sobre coleta, transporte e encaminhamento de amostras
podem ser obtidas por meio do telefone (48) 3251-7815 - Setor de Recepo, Avaliao e
Cadastro de Amostras - ou nos setores tcnicos pelos telefones:
Setor Telefone Setor Telefone
Geral PABX (48) 3251-7800 SOBREAVISO (48) 9121-7495
Gerncia Tcnica (48) 3251-7813 Controle da Rede (48) 3251-7833
Bacteriologia (48) 3251-7824 Imunologia (48) 3251-827/7828
Biologia Molecular (48)3251-7847 /7846 Micologia (48) 3251-7839
Doenas Tropicais (48) 3251-7834 Tuberculose (48) 3251-7841
Virologia (48) 3251-7829
5.5 Envio das amostras biolgicas ao Lacen
O envio da amostra ao laboratrio deve ser feito em tempo hbil e em condies
adequadas, para que no haja alterao da amostra durante o transporte. Ver anexo A
DOC MCT 01 - Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras
biolgicas.
5.5.1 Acondicionamento da amostra para transporte
No transporte de amostras biolgicas deve-se obedecer rigorosamente as normas de
biossegurana vigentes no pas. Para tanto, deve-se observar o que segue:
a) a temperatura adequada ao transportar cada tipo de amostra. Quando for necessria
refrigerao, as amostras devem ser acondicionadas juntamente com gelo reciclvel. Se
necessrias temperaturas inferiores, utilizar gelo seco;
b) as amostras devem ser encaminhadas dentro de sacos plsticos e acondicionadas em
caixas trmicas impermeveis e higienizveis que garantam a estabilidade das mesmas at
a chegada ao laboratrio (Fig.1);
c) a caixa trmica deve portar a identificao de Infectante ou Risco Biolgico;
d) no colocar as amostras soltas dentro da caixa trmica. Utilizar frasco com parede rgida
para acondicionamento (Fig.2);
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e) acondicionar as amostras de forma a evitar vazamento e contaminao;
f) quando forem enviadas muitas amostras de sangue na mesma remessa, deve-se
acondicion-las em estantes (Fig 3) e envolv-las em papel amassado ou plstico bolha, de
maneira que as amostras no fiquem em contato direto com o gelo. As amostras devem ser
colocadas na estante na mesma ordem das requisies;
g) enviar as amostras de escarro, fezes in natura e urina no frasco original de coleta (Fig 4);
h) as lminas para anlise e/ou superviso devem vir acondicionadas em porta-lmina
plstico (Fig 5 e 6). No devem vir em caixas de madeira ou enroladas em papel;
i) documentos como: ofcios, solicitaes de exames, fichas epidemiolgicas encaminhados
junto com as amostras devem ser colocados em envelope com destinatrio e o remetente.
Estes envelopes devero ser acondicionados em saco plstico e colados na FACE
EXTERNA da tampa, ou na lateral da caixa trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa;
j) caixa trmica deve ser hermeticamente fechada e deve conter a identificao do
destinatrio e remetente, como no exemplo:
Destinatrio: Laboratrio Central de Sade Publica LACEN SC
Rua: Felipe Schmidt, 788, Centro Florianpolis/SC CEP: 88010-002
Remetente: Secretaria Municipal de Sade ou unidade hospitalar, seguida do endereo
completo do municpio, nome da pessoa responsvel pelo envio e telefone para contato.
Figura 1: Modelo de caixa para transporte de amostras
biolgicas (caixa trmica)
Figura 2: Modelo do frasco com parede rgida
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Figura 3: Modelo de estante para transporte de tubos
Figura 5: Modelo de caixa plstica
lminas para superviso (tuberculose, hansenase,
malria)
5.5.2 Condies de transporte
O transporte de amostras biolgicas
em condies de segurana e
observado o que segue:
a) as caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte
e protegidas do sol e de umidade;
b) o motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras
Para isso, o veculo deve conter um kit com EPI: guarda
com escova (caso tenha que recolher material
lcool 70% para limpeza do local e das mos, saco para
c) em caso de acidente com as amostras,
operao devem ser colocados no saco para lixo infectante
para que sejam esterilizados e descartados adequadamente. Neste caso,
responsvel pela remessa das amostras, cuja identificao deve estar na caixa de
transporte (ver item 5.7.1), deve ser avisada do ocorrido.
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de estante para transporte de tubos
Figura 4: Modelo de frasco para
biolgicas como escarro, fezes, urina
plstica para transporte de
(tuberculose, hansenase,
Figura 6: Modelo de frasco para transporte de
lminas
Condies de transporte
O transporte de amostras biolgicas em veculos com circulao de pessoas deve ser
em condies de segurana e em rea separada dos passageiros, sendo que deve ser
s caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte
protegidas do sol e de umidade;
motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras
o deve conter um kit com EPI: guarda-p, luvas de procedimento,
com escova (caso tenha que recolher material derramado), pano de limpeza, um
lcool 70% para limpeza do local e das mos, saco para lixo infectante e fita adesiva;
o de acidente com as amostras, todos os materiais recolhidos e utilizados na
os no saco para lixo infectante bem fechado com a f
dos e descartados adequadamente. Neste caso,
l pela remessa das amostras, cuja identificao deve estar na caixa de
transporte (ver item 5.7.1), deve ser avisada do ocorrido.
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: Modelo de frasco para coleta de amostras
biolgicas como escarro, fezes, urina
: Modelo de frasco para transporte de
minas
com circulao de pessoas deve ser feito
m rea separada dos passageiros, sendo que deve ser
s caixas trmicas devem vir bem vedadas e fixadas para no virar durante o transporte
motorista deve ser orientado de como proceder em caso de acidente com as amostras.
p, luvas de procedimento, uma p
derramado), pano de limpeza, um frasco com
lixo infectante e fita adesiva;
todos os materiais recolhidos e utilizados na
bem fechado com a fita adesiva,
dos e descartados adequadamente. Neste caso, a pessoa
l pela remessa das amostras, cuja identificao deve estar na caixa de
NO
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6 CONDIES ESPECFICAS
A coleta de amostra biolgica bem feita uma etapa muito importante no processo de
realizao do exame pelo laboratrio. Tem como finalidade obter um resultado preciso e de
qualidade, fundamental para uma orientao epidemiolgica e/ou clnica correta.
6.1 Coleta, preparo e identificao da amostra biolgica
A fase anterior coleta deve ser objeto de ateno por parte de todas as pessoas
envolvidas no atendimento com a finalidade de se prevenir a ocorrncia de enganos.
A coleta de amostras de material humano deve ser realizada rigorosamente dentro das
normas de biossegurana vigentes no pas, ocasio em que se deve observar o que segue:
a) ao iniciar o procedimento de coleta, o profissional de sade deve organizar todo o
material de acordo com as amostras a serem coletadas, conferir todos os dados da
requisio e solicitar ao paciente que diga seu nome completo para confirmao dos dados
da requisio;
b) na etiqueta de identificao da amostra deve constar o nome completo do paciente, tipo
de exame e data de coleta;
c) em tubos de sangue deve-se, preferencialmente, utilizar a etiqueta prpria do tubo com
caneta que no borre ou apague;
d) na requisio do exame deve constar o nome completo e telefone do profissional que
efetuou a coleta ou que recebeu a amostra de forma a garantir a rastreabilidade.
6.1.1 Coleta de sangue
No necessrio jejum prolongado para coleta dos exames enviados ao Lacen. Para evitar
lipemia das amostras deve-se obedecer a um jejum de pelo menos 3 a 4 horas antes da
coleta de sangue.
Para as tcnicas de coleta recomendamos seguir as orientaes dos Cursos Telelab:
Tcnicas para Coleta de Sangue e Coleta de Sangue - Diagnstico e monitoramento das
DST, Aids e Hepatites Virais.
a) Sangue total
Coletar o sangue com o anticoagulante recomendado para a realizao do exame, logo
aps a coleta homogeneizar suavemente e identificar corretamente o tubo.
o material de escolha para Contagem de Linfcitos T CD4+/CD8+ e Malria. Ver
orientaes especficas para cada tipo de exame neste manual e no DOC MCT 01 - 01
(anexo A).
b) Soro
Coletar o sangue em tubo sem anticoagulante. Recomendamos a utilizao de TUBO
COM GEL SEPARADOR e ativador de cogulo (tampa amarela) Este contm uma barreira
de gel que est presente no fundo do tubo.
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Aps a coleta, manter o tubo, verticalmente por 30 minutos a temperatura ambiente, no
refrigerar o sangue logo aps a coleta para evitar hemlise, esta etapa muito importante
para que ocorra a coagulao do sangue e retrao do cogulo, evitando a formao de
fibrina e hemlise da amostra.
Apos este perodo centrifugar o tubo com sangue entre 2.500 a 3.000 rpm por 10 minutos
para obteno do soro (sobrenadante).
O tempo entre a coleta e a centrifugao no deve exceder uma hora.
Durante a centrifugao a barreira de gel move-se para cima at a interface entre o soro e o
cogulo, onde forma uma barreira estvel que separa o soro da fibrina e das clulas. Neste
caso, o soro pode ser utilizado pelo laboratrio diretamente no tubo de coleta, eliminando a
necessidade de transferncia de um tubo para outro.
Aps a centrifugao, os tubos com gel devem permanecer por uma hora na posio
vertical, para minimizar o risco de danificar a barreira formada pelo gel, atravs dos
movimentos de vibrao durante o transporte.
Manter as amostras centrifugadas no tubo original de coleta com gel separador sob
refrigerao (2 a 8C) at o acondicionamento correto (sob refrigerao) para envio ao
Lacen.
Este tubo pode permanecer por at cinco dias refrigerados. Excepcionalmente, se
necessrio manter armazenado no local de coleta por perodo maior que cinco dias, mas
nunca mais de 30 dias, recomendamos fracionar o soro para outro tubo de vidro ou
polietileno tamanho 12x75 mm, congelar o soro fracionado (- 20C) e enviar soro congelado.
c) Plasma
O sangue total deve ser coletado em tubo com anticoagulante. Seguir a tcnicas de coleta
e homogeneizao adequada do sangue, para evitar hemlise.
a amostra de escolha para a realizao de testes moleculares como Carga Viral do HBV e
HIV. Obedecer s orientaes de coleta, envio no tubo primrio ou se necessrio separao
de plasma para envio, nas informaes especficas para cada exame que seguem neste
manual e no DOC MCT 01 - 01 (anexo A).
Nota: No sero aceitas amostras com as seguintes caractersticas:
hemlise, lipemia e hiperbilirrubinemia;
mal conservadas (sem refrigerao), transportadas inadequadamente (tubos
quebrados, derramados), e
Tubos sem identificao.
6.1.2 Coleta das demais amostras biolgicas
As orientaes para a coleta das demais amostras biolgicas como escarro, fezes, lquor,
lquido pleural, lavado bronco-alveolar, sangue para hemocultura, secrees e outras
amostras esto descritos no DOC MCT 01 (anexo A) e mais detalhadamente no item 6.2, de
acordo com as orientaes dos setores tcnicos e peculiaridades de cada tipo de exame.
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Para estas amostras, etiquetar o frasco com nome completo e legvel do paciente, data e
hora da coleta, tipo de exame e amostra biolgica;
A etiqueta deve ser colocada no corpo do frasco coletor, nunca na tampa.
Todas as amostras biolgicas devem ser armazenadas at o momento do envio de forma
adequada, obedecendo s orientaes do laboratrio, para que no haja interferncia em
seus constituintes.
6.2 Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras biolgicas
As orientaes para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas esto
descritas no DOC MCT 01 - 01 (anexo A). As informaes abaixo complementam o DOC
MCT 01.
O DOC MCT 01 01 est estruturada em ordem alfabtica por patologia, visando facilitar a
consulta. Para cada patologia est disponvel o nome dos exames realizados no Lacen ou
em Laboratrios de Referncia, a(s) amostra(s) biolgica(s) utilizadas na realizao de cada
exame, volume necessrio para realizao do exame, acondicionamento e temperatura de
transporte, o perodo ideal da coleta e o tempo crtico para a chegada da amostra no Lacen
e prazo mximo de liberao dos exames.
No item a seguir, as patologias com os respectivos exames esto agrupadas por Setor
Tcnico que realiza o exame e as informaes sobre coleta esto descritas
detalhadamente.
6.2.1 Setor de Bacteriologia UO BACTO
Cancro mole
Material necessrio para coleta:
swab de algodo, haste plstica, estril (swab comum);
lmina de microscopia nova, limpa e desengordurada;
Coleta da leso genital
a amostra colhida com swab, do centro da leso, obtendo-se maior quantidade
possvel de secreo ou pus.
com o prprio swab da coleta, preparar dois esfregaos em 2 lminas e identific-las;
deixar secar em temperatura ambiente.
acondicionar as lminas em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra e
exposio poeira e insetos e a luz solar.
Coqueluche
Material necessrio para coleta
swab ultrafino com haste flexvel, estril e alginatado;
meio de transporte: Meio de Regan-Lowe com antibitico (gar carvo com antibitico).
no momento de uso o meio de transporte deve estar em temperatura ambiente, sendo
necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes;
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Coleta da secreo do nasofaringe
antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara e calar as luvas;
retirar o excesso de muco nasal e iniciar a coleta;
introduzir o swab em uma narina do paciente, at encontrar resistncia na parede
posterior da nasofaringe (neste momento o paciente lacrimeja) girar o swab por alguns
segundos, ver Figura 7.
introduzir o swab no tubo com o Meio de transporte Regan-Lowe com antibitico,
deixando-o submerso totalmente no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo.
identificar o tubo com os dados do paciente
Notas:
1) O swab deve ser armazenado, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
2) O meio de transporte deve ser armazenado, antes de sua utilizao, em refrigerador, observando sempre a
data de vencimento. O meio tem validade de 2 meses partir da data de fabricao (como o meio de cultura
contm sangue e antibitico, o prazo de validade dever ser seguido rigorosamente).
3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est
vinculado.
4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a
proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os
comunicantes sadios.
Colonizao de Estreptococo do grupo B em gestante
swab estril alginatado;
meio de transporte utilizado: Meio de Amies com carvo.
Antes de iniciar a coleta, lavar as mos, calar as luvas e iniciar a coleta.
Coleta da secreo vaginal
no deve ser utilizado espculo
a amostra colhida introduzindo o swab no tero distal da vagina, fazendo movimentos
giratrios por toda a circunferncia da parede vaginal
introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente.
Coleta de raspado anorretal
introduzir o swab no orifcio anal e fazer movimentos giratrios por toda a parede distal
do reto
caso o swab toque as fezes, repetir o procedimento com novo swab
introduzir o swab com a amostra no Meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente.
Notas:
data de vencimento.
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Conjuntivite bacteriana
* exame realizado somente em situaes de surto de conjuntivite bacteriana, quando
solicitado pela VE.
swab estril
meio de transporte utilizado: tubo com meio de cultura agar chocolate
no momento de uso o meio de cultura agar chocolate deve estar em temperatura
ambiente, sendo necessrio retir-lo do refrigerador pelo menos 30 minutos antes.
Coleta da secreo da conjuntiva
antes de iniciar a coleta, lavar as mos, colocar a mscara, calar as luvas e iniciar a
coleta
com um swab estril, colher a amostra da regio prxima ao saco conjuntival, no canto
interno do olho, evitando movimentos circulares. conveniente manter, por alguns
segundos, o swab no saco conjuntival, o que ir promover o lacrimejamento e absoro
da secreo pelo algodo
com o swab que foi coletada a amostra, inocular imediatamente no tubo de agar
chocolate, nas condies mais asspticas possveis (abrindo o tubo de agar chocolate
prximo chama do bico de Bunsen) e semear rolando o swab na superfcie inclinada
do meio. Desprezar o swab como resduo infectante. Fechar imediatamente o tubo com
a tampa de borracha e a tampa metlica
identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto
com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas:
data de vencimento.
Difteria
2 swab um para coleta do nasofaringe (swab ultrafino com haste flexvel, estril) e
outro para coleta do orofaringe (swab com haste plstica, estril)
1 abaixador de lngua
2 tubos com Meio de Transporte Amies com carvo
no momento de uso os meios de transporte devem estar em temperatura ambiente,
sendo necessrio retir-los do refrigerador pelo menos 30 minutos antes.
Coleta de secreo de nasofaringe e orofaringe
identificar os tubos com meio de transporte, com N (nariz) e G (garganta) para facilitar o
manuseio e evitar trocas
coleta;
Para o nariz (N) - introduzir o swab ultrafino flexvel e estril na narina do paciente at
encontrar resistncia na parede posterior da nasofaringe (Figura 7). Realizar
movimentos rotatrios. Utilizar o mesmo swab para ambas as narinas
imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com
carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar
firmemente o tubo;
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Para a garganta (G) com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para
baixo e com swab estril, fazer a coleta no redor da superfcie da garganta, passando o
swab pelas amgdalas, vula e toda a parede da garganta (Figura 8). Na coleta em
doentes, o swab deve ser passado cuidadosamente apenas ao redor das leses, para
que no haja descolamento da placa (pseudomembrana) imediatamente aps a coleta,
introduzir o swab no meio de transporte Amies com carvo. Ateno para que o swab
fique submerso no meio de cultura. Fechar firmemente o tubo.
Notas:
1) Os swab devem ser armazenados, antes da sua utilizao, em temperatura ambiente e em local seco.
data de vencimento.
3) Na solicitao de exames dos contatos/comunicantes, acrescentar o nome do doente ao qual est
vinculado.
4) Por ser doena de transmisso respiratria, o uso de mscara e luvas de procedimento essencial para a
proteo do profissional que realiza a coleta e devem ser utilizadas tanto para caso suspeito como para os
comunicantes sadios.

Figura 7: coleta de secreo de nasofaringe Figura 8: coleta de secreo de orofaringe
Doena bacteriana invasiva
amostra biolgica: lquidos orgnicos estreis (lquido pleural, peritoneal, asctico)
procedimento mdico.
Doena diarrica bacteriana (Doena Transmitida por Alimento ou gua, clera)
swab estril
frasco coletor, rgido, boca larga e tampa rosquevel
meio de transporte: Meio de Transporte Cary-Blair.
Coleta das Fezes in natura
coletar de 2 a 4 g de fezes (equivalente a 1 colher de sobremesa) em frasco limpo,
seco, de boca larga e com tampa de rosca, dar preferncia s partes mucopurulentas e
com sangue.
Coleta com swab fecal em Meio de Transporte Cary-Blair
coletar de 2 a 4 g de fezes em frasco limpo, seco, de boca larga
mergulhar o swab no frasco contendo as fezes, dando preferncia s partes
mucopurulentas e com sangue e a seguir introduzir no meio de transporte Cary-Blair.
Fechar firmemente o frasco.
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Coleta com swab retal em meio de transporte Cary-Blair
introduzir o swab no esfncter anal ( 2 cm), fazendo movimentos rotatrios suaves por
alguns segundos para que haja absoro do material. Retirar o swab e introduzir no
Meio de Transporte Cary-Blair. Fechar firmemente o frasco.
Notas:
1) A coprocultura de rotina realizada no LACEN inclui a pesquisa de Salmonella spp, Shigella spp,
Escherichia coli enteropatognicas.
2) A pesquisa de Vibrio cholerae e outros vbrios, E. coli enterohemorrgica O157, Aeromonas spp e
Plesiomonas shigeloides, deve ser solicitada separadamente, pois esses agentes necessitam de mtodos
especiais para seu isolamento e identificao.
3) Quando a coprocultura for realizada no laboratrio local e houver isolamento de Salmonella spp, Shigella
spp, Escherichia coli patognicas e Vibrio cholerae, o microrganismo isolado deve ser encaminhado ao Lacen
para confirmao e encaminhamento da cepa para o Laboratrio de Referncia Nacional.
Faringite estreptoccica / Escarlatina
* exame realizado somente em situaes de surto, quando solicitado pela Vigilncia
Epidemiolgica.
swab de dracon ou rayon, flexvel, estril, com haste de plstico. No usar swab de
algodo comum ou alginatado
meio de transporte: Meio de Transporte Amies com carvo.
Coleta de secreo de orofaringe
coleta;
introduzir na orofaringe do paciente, um swab de dracon ou rayon, evitar tocar outras
reas da cavidade oral com swab, para prevenir contaminao com a flora da orofaringe
coletar a secreo orofarngea, realizando na rea posterior da faringe e na superfcie
das tonsilas, movimentos rotatrios com o swab
introduzir o swab coletado em meio de transporte Amies com carvo
identificar o tubo com os dados do paciente e enviar a Ficha de Investigao de Surto
com as informaes clnicas e epidemiolgicas correspondentes ao caso.
Notas:
data de vencimento.
Febre tifide
a) Exames: Hemocultura e Coprocultura
b) Volume ideal
sangue: adultos: 5 mL de sangue em cada puno (para frasco com 45 mL de meio de
cultura frasco adulto); criana: 1 mL de sangue em cada puno (para frasco com 9
mL de meio de cultura frasco peditrico). Deve ser respeitada a quantidade de sangue
de 1:10 em relao ao meio de cultura.
fezes: coletar 2 a 4 g de fezes in natura, swab fecal ou swab retal .
c) Perodo ideal de coleta
sangue: coletar nas 2 semanas iniciais da doena. Fazer a coleta antes da ascenso
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da temperatura (evitar o pico febril). Paciente com febre constante, fazer a coleta em
qualquer horrio. Paciente em uso de terapia antimicrobiana, colher antes da prxima
dose do antibitico;
fezes: coletar a partir da 2 semana at a 5 semana do incio dos sintomas, no estgio
de convalescena e na pesquisa de portador.
d) Nmero de amostras de sangue e intervalo da coleta
recomenda-se a coleta de 2 a 3 amostras de sangue;
deve existir um intervalo de 15 a 20 minutos entre as coletas, intercalando os stios da
puno (ex.: brao direito, brao esquerdo).
e) Nmero de amostras de fezes e intervalo da coleta
recomenda-se a coleta de 3 amostras com intervalo de 3 dias cada uma;
no caso de portadores assintomticos, particularmente aqueles envolvidos na
manipulao de alimentos: 7 amostras em dias seqenciais.
sete dias aps o trmino do tratamento com antimicrobiano, realizar 3 (trs)
coproculturas com intervalos de 30 dias. Caso uma delas seja positiva, essa srie pode
ser suspensa e o indivduo deve ser novamente tratado.
f) Procedimento para a coleta de sangue:
identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente,
data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra);
retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos;
realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool 70%, e deixar sobre a rolha
uma gaze ou algodo embebido com lcool a 70%. Manter o algodo sobre o frasco at
o momento da puno;
realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
colher a amostra, com seringa e agulha descartveis e transferir para o frasco, sem
trocar a agulha. Coletar um volume de sangue correspondente a aproximadamente 5
10% do volume do meio de cultura;
homogeneizar delicadamente o frasco por inverso.
g) Procedimento para coleta de fezes:
ver orientaes sobre coleta de fezes no item DOENAS DIARRICAS
Gonorria
a) Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: secreo uretral ou 1 jato urinrio.
paciente do sexo feminino: secreo endocervical, secreo uretral ou, no caso de
crianas e mulheres histerectomizadas, secreo do fundo do saco vaginal.
outras amostras: secreo anal e secreo de orofaringe.
b) Tipo de swab utilizado para coleta
secreo uretral: swab de algodo alginatado ultrafino.
secreo endocervical, orofaringe, anal e vaginal: swab de algodo alginatado.
c) Meio de transporte
meio de Transporte Amies com carvo.
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d) Orientaes para a coleta das amostras
Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita
aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias
pelo menos. No estar fazendo uso de antisspticos locais ou cremes vaginais,
antibiticos ou quimioterpicos e no estar menstruada. No ter realizado exames
ginecolgicos com toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o
exame.
Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar.
Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame.
Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.
Coleta da secreo uretral masculina
solicitar ao paciente para retrair o prepcio;
limpar a secreo emergente com gaze estril (no coletar a secreo emergente);
introduzir o swab alginatado ultrafino, cerca de 2 cm, no canal uretral, atravessando a
fossa navicular;
girar o swab, delicadamente, de 8 a 10 vezes para absorver a secreo;
retirar o swab; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina identificada com o
nome do paciente;
proceder a nova coleta para cultura e inocular a amostra em meio de transporte Amies
com carvo.
Coleta da amostra de 1 jato urinrio
caso o paciente no esteja com secreo aparente colher a primeira urina da manh ou
reter a urina por pelo menos 3 horas antes de realizar o exame;
realizar higiene prvia da regio genital;
coletar os primeiros 10 mL de urina (1 jato urinrio) em frasco estril de boca larga com
tampa de rosca.
Coleta da secreo endocervical
introduzir o espculo (no utilizar espculo lubrificado);
limpar, com gaze estril, a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do
tero;
introduzir o swab alginatado cerca de 1cm no canal endocervical, girando-o
delicadamente de 8 a 10 vezes, para absorver a secreo. Cuidado para no tocar a
parede vaginal;
nome do paciente;
com carvo.
Coleta da secreo uretral feminina
fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede
vaginal com o dedo mdio;
introduzir o swab alginatado cerca de 2 cm na uretra;
coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para absorver a
secreo.
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nome do paciente;
com carvo.
Coleta da secreo de fundo de saco vaginal
introduzir o espculo;
coletar a amostra do saco vaginal com auxlio de um swab alginatado;
retirar o swab alginatado; fazer um esfregao fino e homogneo em uma lmina
identificada com o nome do paciente;
com carvo.
Coleta de secreo anal
introduzir o swab alginatado no reto, cerca de 2 cm;
fazer movimentos circulares junto parede retal raspando o material das criptas por 30
segundos, para absorver a secreo. Repetir o procedimento com novo swab, caso o
swab toque as fezes;
retirar o swab alginatado e inocular a amostra em meio de transporte Amies com
carvo.
Coleta de secreo de orofaringe
com auxlio de um abaixador de lngua, pressionar a lngua para baixo e com swab
estril alginatado, fazer a coleta passando o swab pelas amgdalas e faringe posterior;
imediatamente aps a coleta, introduzir o swab no meio de transporte Amies com
carvo. Ateno para que o swab fique submerso no meio de cultura. Fechar
firmemente o tubo.
Hansenase
a) Materiais necessrios para a coleta
lmina para microscopia, nova, limpa e desengordurada, com ponta fosca 26 x 76 mm;
lamparina a lcool 90 GL ou bico de Bunsen, fsforo;
lcool etlico 70GL ou 70%;
gaze no estril e algodo hidrfilo;
lpis ponta vdea;
cabo de bisturi n. 3 e lmina de bisturi n. 15 ou bisturi descartvel;
porta-lminas de plstico para o transporte da amostra;
esparadrapo ou bandagem antissptica;
EPI: luvas de procedimento, mscara, avental;
pina de Kelly curva ou reta para fazer isquemia no local da inciso;
recipiente para descarte do material utilizado.
b) Stios de coleta do raspado intradrmico
Em pacientes com leses cutneas visveis ou reas com alterao de sensibilidade, a
coleta dever ser feita em lbulo auricular direito (LD), lbulo auricular esquerdo (LE),
cotovelo direito (CD) e leso (L). Nas leses planas coletar no centro ou borda interna e
nos ndulos, tubrculos e placas eritematosas marginadas por microtubrculos, coletar
no centro.
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c) Tcnica de Coleta
Para realizar a coleta necessrio que o procedimento ocorra em sala especfica.
importante que ela seja arejada, limpa e com boa iluminao.
Para realizao da coleta, seguir os passos descritos abaixo:
acomodar o paciente confortavelmente;
explicar o procedimento que ser realizado. No caso de criana explicar tambm para a
pessoa responsvel;
observar indicaes dos stios de coleta na solicitao mdica;
manusear a lmina pelas bordas evitando colocar os dedos no local onde a amostra
ser distribuda;
identificar a lmina com as iniciais do nome do paciente, o nmero de registro da
unidade e data da coleta;
no momento de cada coleta fazer antissepsia com lcool a 70 GL ou 70%, dos stios
indicados na solicitao mdica;
com o auxlio da pina Kelly, fazer uma prega no stio de coleta, pressionando a pele o
suficiente para obter a isquemia, evitando o sangramento. Manter a presso at o final
da coleta tomando o cuidado de no travar a pina (Figura 9);

Figura 9: Pregueamento do stio de coleta (isquemia) e inciso para coleta do material
fazer um corte na pele de aproximadamente 5 mm de extenso por 3 mm de
profundidade. Colocar o lado no cortante da lmina do bisturi em ngulo reto em
relao ao corte e realizar o raspado intradrmico das bordas e do fundo da inciso,
retirando uma quantidade suficiente e visvel do material. Se fluir sangue no momento
do procedimento (o que no dever acontecer se a compresso da pele estiver
adequada) enxugar com algodo;
desfazer a presso e distribuir o material coletado na lmina, fazendo movimentos
circulares do centro para a borda numa rea aproximadamente de 5 - 7 mm de
dimetro, mantendo uma camada fina e uniforme;
o primeiro esfregao dever ser colocado na extremidade mais prxima da identificao
do paciente (parte fosca), e o segundo prximo ao primeiro observando uma distncia,
de pelo menos 0,5 cm entre cada amostra e assim sucessivamente. Os esfregaos
devem estar no mesmo lado da parte fosca da lmina (Fig 10);
entre um stio e outro de coleta, limpar a lmina de bisturi e a pina utilizada com
algodo ou gaze embebido em lcool 70 GL ou 70%, para que no ocorra a
contaminao entre eles;
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fazer curativo compressivo e nunca liberar o paciente se estiver sangrando

Figura 10: Distribuio padro dos esfregaos na lmina
d) Fixao do esfregao
a lminas, contendo os raspados intradrmicos, deve permanecer em superfcie plana e
temperatura ambiente, durante 5 a 10 minutos at estarem completamente secos.
aps esta etapa os esfregaos devem ser fixados passando-se as lminas 2 a 3 vezes,
rapidamente, na chama de uma lamparina ou bico de Bunsen, com os esfregaos
voltados para cima. Evitar o aquecimento da lmina durante a fixao, para que no
haja alterao das caractersticas morfo-tintoriais do bacilo; em locais ou dias em que o
ar esteja mais mido, o tempo de secagem do esfregao poder ser maior.
Infeco de pele/ouvido/bipsia
* quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica p/ esclarecimento de surto.
a) Bipsias
procedimento mdico.
b) Leso aberta
no recomendada cultura de leses secas ou crostas;
descontaminar as margens e a superfcie da leso;
proceder nova limpeza com soluo fisiolgica estril;
coletar o material purulento na parte mais profunda da leso utilizando seringa e agulha.
Transferir a amostra para um frasco estril. Se no for possvel a coleta por puno,
utilizar swab com meio de transporte Amies com carvo.
c) Abscesso fechado
fazer anti-sepsia com produto adequado;
aspirar o exsudato com agulha e seringa. Transferir a amostra para um frasco estril.
No usar swab.
d) Pstula e vescula
selecionar uma pstula intacta. Fazer anti-sepsia com produto adequado e puncionar.
Se a leso for seca, com crosta, sem vescula ou pstula evidente, remover o material
superficial aps anti-sepsia e passar firmemente o swab estril sobre a leso.
e) Secreo de ouvido externo
usando um swab limpar o canal do ouvido com anti-sptico seguido de lavagem com
soluo fisiolgica estril;
com outro swab obter material fazendo rotao no canal do ouvido;
introduzir o swab no meio de transporte de Amies.
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Infeco do Trato Urinrio (ITU)
a) Coleta em pacientes do sexo feminino:
paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta
a paciente deve lavar bem as mos com gua e sabo neutro e sec-las com toalha de
papel limpa e descartvel;
deve despir-se, afastar os lbios vaginais e lavar bem a vulva e os lbios vaginais
usando gua morna com sabo, sempre no sentido de frente para trs;
deve enxaguar bem com gua morna, no secar com toalha;
durante todo este processo a paciente deve manter os lbios vaginais separados, e no
tocar a rea limpa com os dedos;
urinar, desprezando a primeira parte do jato urinrio no vaso sanitrio;
colher cerca de 30mL (aproximadamente a metade do frasco) de urina em um frasco
estril, fechando assim que a urina for colhida;
em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa
responsvel na recepo do Lacen.
b ) Coleta em pacientes do sexo masculino:
paciente deve estar sem urinar, por pelo menos duas horas antes da coleta
o paciente deve lavar bem as mos;
afastar o prepcio e desprezar no vaso sanitrio, uma pequena quantidade de urina;
sempre segurando para trs o prepcio, colher cerca de 30mL de urina no frasco estril,
fechando assim que a urina for colhida;
em seguida, a amostra colhida contida no frasco fechado, deve ser entregue a pessoa
responsvel na recepo do Lacen.
Meningite bacteriana
* Nos casos de suspeita de meningites bacterianas e/ou doena meningoccica SEMPRE
deve ser coletado: LQUOR, SANGUE E SORO, mesmo que no haja sintomas de sepse.
a) Coleta de lquor
procedimento mdico
volume ideal: 3 a 5 mL ou coletar o maior volume que as condies clnicas permitirem;
b) Coleta de sangue para hemocultura
Tcnica de coleta:
lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar as
luvas;
realizar a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana, cuidar
para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue
correspondente a aproximadamente 5 10% do volume do meio de cultura;
no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco.
Volume de sangue para cada amostra
adulto: 5 mL de sangue (p/ frasco com 45 mL de caldo TSB)
criana (at 6 anos de idade): 1 mL (p/ frasco com 9 mL de TSB frasco peditrico).
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Inoculao e incubao
identificar os frascos de meio de cultura lquido (TSB ou BHI) com o nome do paciente,
data e hora da coleta e nmero da amostra (se 1, 2 ou 3 amostra);
retirar a parte superior (circular) do lacre metlico dos frascos;
realizar a desinfeco da tampa de borracha com lcool etlico 70%, e deixar sobre a
rolha uma gaze ou algodo embebido com lcool etlico a 70%. Manter o algodo sobre
o frasco at o momento da puno;
transferir o sangue coletado para o frasco, sem trocar a agulha;
homogeneizar delicadamente o frasco por inverso.
c) Soro p/ pesquisa de antgenos bacterianos e PCR
volume ideal: 3 a 5 mL ou no mnimo 1.0 mL;
coletar o sangue sem o uso de anticoagulante e separar o soro.
Para a realizao dos exames, o Lacen fornece um kit de meningite (Figura 11), onde se
encontram as instrues de uso.

Figura 11: Kit de coleta de amostras para meningite
o kit deve ser conservado no refrigerador temperatura de 2 a 8C, antes do uso.
observar a validade dos frascos e o aspecto do meio de cultura agar chocolate (aspecto
mido, superfcie ntegra e sem contaminantes) e do TSB (sem precipitao, turvao
ou contaminao). Caso o kit apresente alguma irregularidade separ-lo para ser
devolvido ao Lacen, com justificativa e solicitao de novo kit.
os kit no utilizados que estiverem vencidos ou prximos do prazo de vencimento de-
vero ser devolvidos ao Lacen.
encaminhar ao Lacen todos os meios semeados (com ou sem crescimento).
d) Orientao para o uso de kit de meningite
no momento da semeadura, os meios de cultura devem estar a temperatura ambiente
(se necessrio manter os frascos de gar chocolate e caldo TSB na mo fechada por
alguns minutos);
romper o lacre central dos frascos e fazer desinfeco das tampas de borracha com
lcool etlico 70%;
agar chocolate: com auxlio de seringa e agulha estreis, introduzir 5 a 10 gotas do
lquor no frasco com meio de agar chocolate (frasco com tarja verde);
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lquor (LCR): colocar o restante do volume de LCR no frasco estril para o lquor
(frasco com tarja azul);
lmina: depositar sobre a lmina 1 gota de lquor centrifugado e deixar secar em
temperatura ambiente. No usar chama do bico de Bunsen para a fixao do esfregao;
frasco com meio de TSB (hemocultura): com auxlio de seringa e agulha estreis,
introduzir 1 mL de sangue direto no frasco para coleta peditrica (frasco com tarja
vermelha). No caso de frasco para coleta de adulto, com 45 mL de meio de cultura,
introduzir 5 mL de sangue. Respeitar sempre a proporo da quantidade de sangue de
1:10 em relao ao meio de cultura.
Soro: colocar 3 a 5 mL de soro no frasco estril para soro (frasco com tarja laranja).
Nota: Se o volume do lquor for muito pequeno, deve-se priorizar o inculo em gar chocolate para
a preservao do microrganismo e colocar a gota do LCR sem centrifugar em lmina de vidro para
a realizao da bacterioscopia pelo mtodo de Gram.
e) Orientao para o caso de envio de lquor in natura (sem kit do Lacen)
realizar puno lombar (procedimento mdico);
identificar um frasco estril e uma lmina com o nome do paciente e tipo de amostra;
acondicionar a amostra no frasco estril;
conservar em temperatura ambiente;
em uma lmina de microscopia nova, depositar 1 gota de lquor, de preferncia
centrifugado e deixar secar a temperatura ambiente. No fazer esfregao.
f) Orientao para encaminhamento de cepas bacterianas
quando a cultura do LCR ou hemocultura for realizada no laboratrio local e houver
crescimento de Neisseria meningitidis, Haemophilus spp e Streptococcus pneumoniae
enviar o microrganismo isolado para confirmao no Lacen.
realizar o repique do microrganismo isolado (cepa pura) no frasco de agar chocolate
(frasco com tarja verde); na falta deste, usar um tubo ou placa de meio de cultura
adequada (gar sangue ou gar chocolate, dependendo do microrganismo isolado).
Incubar em estufa bacteriolgica a 34C - 36 C por 18-24 horas;
identificar o tubo/placa com o nome do paciente e data do repique;
fechar com fita crepe ou film plstico;
encaminhar o tubo/placa em temperatura ambiente, imediatamente aps o perodo de
incubao.
Notas:
1) As cepas enviadas devero ser provenientes de repiques recentes (24 horas de incubao) para evitar que
haja perda da mesma por ressecamento.
2) Ao enviar cepas bacterianas para identificao, o laboratrio local dever especificar qual a amostra
biolgica de origem (sangue ou lquor).
g) Conservao das amostras at o envio
incubar os 02 frascos (agar chocolate e frasco da hemocultura) em estufa bacteriolgica
a 34C - 36 C por 18-24 horas, aps esse perodo, enviar imediatamente ao Lacen, em
temperatura ambiente;
lquor in natura e soro devero ser mantidos no freezer ou congelador (temperatura em
torno de 20 C at a hora de serem enviados ao Lacen. O transporte dever ser feito
com gelo reciclvel;
cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe e manter a temperatura ambiente.
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h) Forma de acondicionamento para transporte
amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que j foram
incubadas por 24 horas: acondicionar os frascos na caixa de transporte de amostras,
em temperatura ambiente (informar esse dado na requisio encaminhada ao Lacen).
Tempo crtico para a chegada destas amostras no Lacen at 48 horas aps a coleta;
amostra semeada em frasco de gar chocolate e frasco de hemocultura que no foram
incubadas por 24 horas: o transporte destas amostras dever ser realizado
imediatamente aps a coleta ou no mximo at 2 horas aps a coleta, em temperatura
ambiente;
amostras de lquor in natura e soro devero ser encaminhadas em caixa trmica com
gelo reciclvel;
a lmina deve ser acondicionada em porta-lminas de plstico rgido para evitar quebra;
cepas bacterianas: fechar o tubo/placa com fita crepe.
Nota: Os frascos que contm as amostras devem ser colocados dentro de um recipiente de paredes rgidas,
a prova de vazamentos e inquebrvel contendo etiqueta com as caractersticas da amostra. Este recipiente
deve ser colocado dentro de outra embalagem, como a caixa de trmica para transporte de amostras, que
deve conter o rtulo de material infectante ou de risco biolgico.
Oftalmia gonoccica
a) Material utilizado na coleta:
swab de algodo alginatado;
meio de transporte Amies com carvo.
b) Orientaes para a coleta das amostras:
afastar a plpebra e limpar a secreo acumulada nos cantos do olho;
coletar material dentro da conjuntiva, com auxlio do swab;
inocular o material, imediatamente, em meio de transporte Amies com carvo;
encaminhar ao Lacen at 8 horas aps a coleta, em temperatura ambiente.
Pneumonia bacteriana
Amostra biolgica
sangue (preferencialmente)
escarro, lavado brnquico, lavado broncoalveolar
Nota: o escarro no considerado ideal para avaliao microbiolgica do trato respiratrio por ser uma
mostra muito contaminada, portanto sangue, lavado brnquico ou lavado brocoalveolar pode fornecer
resultado mais confivel.
a) Sangue
ver procedimento em meningites bacterianas.
b) Escarro
colher, de preferncia, a primeira amostra da manh;
orientar o paciente para enxaguar previamente vrias vezes a boca com gua para
remover a flora bacteriana superficial dessa regio;
respirar fundo vrias vezes e tossir profundamente, recolher a amostra diretamente em
um frasco de boca larga (explicar ao paciente a diferena entre uma amostra obtida
aps tosse profunda e a saliva, a fim de se obter um material de melhor qualidade).
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Requisito: 7.5

c) Lavado brnquico/ lavado broncoalveolar (LBA)
procedimento mdico.
Sfilis
a) Coleta para exame microscpico aps colorao de Fontana Tribondeau
limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril;
friccionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa;
colocar a linfa em 2 lminas previamente identificadas e confeccionar o esfregao.
Deixar secar a temperatura ambiente;
encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente ou at 2 horas aps a coleta.
b) Coleta para exame microscpico em campo escuro
limpar a rea em volta da leso com gaze estril embebida em soluo salina estril;
fricionar a borda da leso com uma lmina de bisturi suavemente at obter uma linfa;
colocar a linfa sobre uma lmina com uma gota de salina, colocar a lamnula;
encaminhar ao setor de bacteriologia imediatamente aps a coleta.
Nota: no usar medicamento tpico na leso nas 12 horas que antecedem ao exame.
Tracoma
* coleta somente em situaes de surto quando solicitado pela Vigilncia Epidemiolgica.
a) Orientaes para a coleta e transporta da amostra:
utilizar lmina prpria para imunofluorescncia direta (IFD): lmina com crculo central.
limpar a secreo externa do olho com gaze estril. Descer a plpebra inferior de
maneira a expor a conjuntiva. Com um swab umedecido, limpar a secreo acumulada
nos cantos do olho. Descartar este swab.
com outro swab estril, coletar a amostra girando o swab vrias vezes para obter
clulas epiteliais em quantidade suficiente para o diagnstico.
transferir a amostra coletada no swab para o crculo central da lmina para
imunofluorescncia, rolando firmemente o swab, tendo o cuidado para no ultrapassar o
crculo.
deixar a lmina secar a temperatura ambiente por 5 a 10 minutos. Embalar a lmina em
papel alumnio e acondicion-la em porta-lmina;
transportar em caixa trmica com gelo;
a lmina, com esfregao fixado, embalada em papel alumnio, pode ser conservada em
geladeira (53C) por at 72 horas antes do envio ao Lacen.
b) Quantidade de amostras a serem coletadas:
Surtos at 30 doentes = 05 amostras
Surtos acima de 30 doentes = 10% do total de doentes
Notas:
1) A lmina deve estar devidamente identificada com as seguintes informaes: nome completo do paciente,
tipo de material coletado, data e hora da coleta.
2) A amostra deve vir acompanhada do formulrio de notificao de surto (SINAN/Net).
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Uretrite e cervicite no gonoccica
Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen).
Preparo do paciente do sexo feminino: a coleta da secreo feminina deve ser feita
aps 3 horas da ltima mico. A paciente deve estar em abstinncia sexual de 2 dias
pelo menos. No estar fazer uso de antisspticos locais ou cremes vaginais, antibiticos
ou quimioterpicos, no estar menstruada. No ter realizado exames ginecolgicos com
toque ou ultrasom transvaginal nas 48 horas que antecedem o exame.
Preparo do paciente do sexo masculino: estar h pelo menos 3 horas sem urinar.
Evitar relaes sexuais e medicamentos tpicos nas 24 horas que antecedem o exame.
Preferencialmente no usar antibitico nos 3 dias que antecedem o exame.
a) Pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais
Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: raspado uretral.
paciente do sexo feminino: raspado endocervical e uretral.
Swab
raspado uretral: algodo alginatado, rayon ou dracon, ultrafino estril.
raspado endocervical: algodo alginatado, rayon ou dracon estril.
Meio de transporte
caldo nutritivo (fornecido pelo Lacen).
Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino
solicitar ao paciente para retrair o prepcio;
limpar a secreo emergente com gaze estril;
introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon, cerca de 4 centmetros no canal
uretral;
girar o swab delicadamente de 8 a 10 vezes para obter o maior nmero de clulas
epiteliais possveis;
retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
desprezar o swab e encaminhar o frasco com caldo nutritivo imediatamente ao setor de
bacteriologia, em temperatura ambiente.
Procedimento para a coleta do raspado uretral feminino
fazer a expresso da secreo das glndulas parauretrais pressionando a parede
vaginal com o dedo mdio;
introduzir o swab alginatado, de dracon ou rayon cerca de 2 cm na uretra;
coletar a secreo girando delicadamente o swab de 8 a 10 vezes para obter o maior
nmero de clulas epiteliais possveis;
retirar o swab; lavar bem o swab no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
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Procedimento para a coleta do raspado endocervical
limpar com gaze a secreo do fundo do saco vaginal e a que recobre o colo do tero;
introduzir o swab alginatado, de rayon ou dracon cerca de 1cm no canal endocervical,
girando-o delicadamente de 8 a 10 vezes, para obter o maior nmero de clulas
epiteliais possveis. Retirar o swab sem tocar as paredes vaginais;
inocular o swab imediatamente no frasco com caldo nutritivo e comprimir contra a
parede do tubo;
b) Pesquisa de Chlamydia trachomatis por IFD
Amostras biolgicas
paciente do sexo masculino: raspado uretral.
paciente do sexo feminino: raspado endocervical e/ou raspado uretral
Swab
swab de dracon ou rayon.
Procedimento para a coleta do raspado uretral masculino e feminino e raspado
endocervical
Ver procedimento de coleta para pesquisa de Ureaplasma e Micoplasma genitais.
Vaginite e vaginose bacteriana
Orientaes para a coleta (coleta realizada somente no Lacen).
a) Exame a fresco:
coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste
plstica (swab comum);
retirar o swab, introduzir em tubo com 1,0 mL de salina estril, previamente identificado.
b) Cultura:
a) introduzir o espculo;
b) coletar a amostra do fundo do saco vaginal com auxlio de um swab de algodo haste
plstica (swab comum);
c) retirar o swab e inocular a amostra imediatamente no meio de transporte Amies com
carvo, identificando o mesmo.
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6.2.2 Setor de Biologia Molecular UO BIMOL

Deteco do vrus INFLUENZA A
(engloba tambm H1N1pandmico 2009)
A sensibilidade e especificidade do mtodo dependem da quantidade e qualidade de
material enviado para a anlise. Por isso, sua coleta e transporte so essenciais para o
diagnstico adequado.
Perodo ideal de coleta: at o 3 dia do incio dos sintomas e eventualmente at o 7 dia.
a) Swab combinado (nasofaringe e orofaringe):
Na tcnica de swab combinado de nasofaringe e orofaringe, deve ser utilizado
exclusivamente swab de rayon (fornecido no kit de coleta).
No deve ser utilizado swab de algodo, pois o mesmo interfere nas metodologias
moleculares utilizadas.
Proceder a coleta utilizando trs swab que sero inseridos um na orofaringe e os dois
outros, um em cada narina.

Tcnica de coleta:
inserir 1 swab na poro superior da faringe (aps a vula) e realizar movimentos
circulares para obter clulas da mucosa, evitando tocar em qualquer parte da boca
(Fig 13).
proceder da mesma forma com os outros dois swab nasais que sero inseridos em
cada narina at atingir o fundo da coana nasal (Fig 12).
inserir os trs swab em um mesmo frasco contendo meio de transporte viral ou
soluo estril de PBS 7,2 suplementado.
quebrar ou cortar as hastes dos swab, fechar e identificar com nome completo do
paciente de forma legvel e com caneta resistente a gua.
manter refrigerado a 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para transporte.

Figura 12: coleta de secreo de nasofaringe Figura 13: coleta de secreo de orofaringe
b) Aspirado de Nasofaringe
utilizar a tcnica de aspirado de nasofaringe quando a unidade de sade dispuser de
frasco coletor de secreo, pois a amostra obtida por essa tcnica pode
concentrar maior nmero de clulas.
Nota: frasco coletor de plstico descartvel acoplado com sonda n 6 e com controle de vcuo (tipo
bronquinho).
A coleta de ANF um processo indolor podendo apenas provocar lacrimejamento reflexo.
Coletores de muco plsticos descartveis ou equipo de soro acoplado a uma sonda so
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preferencialmente recomendados para a obteno do espcime. A sonda preconizada a
uretral n 6 com apenas um orifcio na ponta. O calibre da sonda varivel segundo o
fabricante, devendo ser dada preferncia de maior flexibilidade.
A aspirao pode ser realizada com bomba aspiradora porttil, ou vcuo de parede do
hospital; no utilizar uma presso de vcuo muito forte.
Tcnica de coleta:
inserir atravs da narina at atingir a regio da nasofaringe quando ento o vcuo
aplicado aspirando secreo para o interior do frasco coletor ou equipo. O vcuo
deve ser colocado aps a sonda localizar-se na nasofaringe, uma vez que se no
momento da introduo da sonda houver o vcuo, poder ocorrer leso da mucosa.
Este procedimento deve ser realizado em ambas as narinas, mantendo
movimentao da sonda para evitar que haja presso diretamente sobre a mucosa
provocando sangramento (Fig 14).
alternar a coleta nas duas fossas nasais at obter um volume suficiente,
aproximadamente 1 mL, de ANF.
aps nebulizao com soro fisiolgico a secreo mais fluida e abundante,
facilitando a obteno. No insistir se a coleta no alcanar o volume desejado (mais
ou menos 1 mL), pois poder ocasionar leso de mucosa.
aps aspirar a secreo nasofarngea com o coletor prprio, inserir a sonda de
aspirao no frasco contendo 3 mL de meio de transporte viral ou em PBS pH 7,2
(fornecido pelo Lacen) e aspirar todo o meio para dentro do frasco coletor.
manter refrigerado entre 2 a 8C (no congelar) at o acondicionamento para o
transporte.
Figura 14: coleta de aspirado de nasofaringe

VIROSES RESPIRATRIAS
Programa sentinela de Influenza
As orientaes das tcnicas de coleta devem seguir as mesmas orientaes descritas
acima para deteco do vrus Influenza A.
a coleta deve ser realizada na fase aguda, at cinco dias do incio dos sintomas clnicos.
Quanto mais cedo, maior a chance de detectar o vrus;
o material coletado tem que ser processado at 24 horas aps a coleta por isso deve-se
enviar a amostra para o Lacen logo aps a coleta, manter e transportar em temperatura
de 2 a 8 C (refrigerao);
atualmente esta coleta realizada somente nas Unidades Sentinelas:
Em Florianpolis: UPA Sul, UPA Norte;
Em So Jos: Unidade Sanitria Forquilhinhas
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Teste de Quantificao de Carga Viral do HIV
a) Coleta da amostra
no necessrio jejum ou qualquer preparo especial do paciente. Entretanto, deve-se
evitar a coleta aps ingesto de alimentos gordurosos nas ltimas 3 horas;
coletar 2 tubos de 5 mL contendo EDTA (K2 ou K3 tampa lils);
em recm-nascidos, caso haja necessidade, dever ser utilizado tubos peditricos;
Identificar os tubos com nome, data e hora da coleta;
no utilizar tubos de EDTA COM GEL SEPARADOR;
nunca utilizar tubos de coleta reciclados;
caso seja enviado sangue total, este deve ser conservado em seu tubo original e enviar:
b) Preparo da amostra (plasma), conservao e transporte
adotar precaues para evitar respingos nas luvas, bancadas ou qualquer outro material
utilizado, evitando assim a contaminao pessoal e da amostra;
todo material utilizado deve ser novo e estril (livre de RNAse ou DNAse) , uma vez que
a menor contaminao por outra amostra pode ser amplificada e gerar falso resultado;
para a obteno do plasma, centrifugar o sangue total a 2500 rpm durante 15 minutos.
O plasma no pode ser separado aps repouso espontneo, obrigatria a
centrifugao;
o plasma no pode estar hemolisado e no pode haver vestgios de hemcias;
no submeter o plasma a processos de filtrao ou centrifugao adicionais com o
intuito de diminuir a turbidez;
em seguida a centrifugao, transfira o plasma para tubos estreis (tampas rosqueveis
ou em microtubo de polipropileno tipo eppendorf livres de enzimas (RNAse ou DNAse)
em alquotas de no mnimo 1100 a 1200 ul com auxlio de ponteiras com barreiras e
livre de enzimas, sem ressuspender as clulas;
evitar mltiplos congelamentos-descongelamentos;
para envio tem que ser observado o tempo de coleta de cada amostra. Portanto,
quando houver vrias coletas, o tempo para o transporte deve ser calculado a partir da
primeira amostra coletada;
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado
sem autorizao do Lacen.

Genotipagem do HIV
o manuseio correto das amostras imprescindvel para proteger o RNA viral do HIV-1
de degradao;
seguir as mesmas orientaes de coleta, preparao de amostra (plasma) da Carga
Viral do HIV. Porm deve ser observado:
Sempre transportar o plasma em gelo seco.
Nota: Recomendamos nunca enviar amostras s sextas-feiras, sbados e domingos ou vsperas de feriado
sem autorizao do LACEN.
As amostras devem estar acompanhadas dos Formulrios A e B (disponveis no site
www.aids.gov.br) devidamente preenchidos pelo mdico solicitante (formulrio A) e mdico
de referncia em genotipagem (formulrio B).
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6.2.3 Setor de Doenas Tropicais UO DTROP
Doena de Chagas Aguda (DCA)
Exame microscpico (hemoparasitolgico) para pesquisa de Trypanosoma cruzi. (Ver
Anexo A - DOC MCT 01 - 01).
Este exame dever ser solicitado somente para suspeita de Doena de Chagas em casos
agudos. Devido o Trypanosoma cruzi estar presente no sangue somente nos primeiros 30
dias do incio dos sintomas, necessita-se que aps este perodo sejam solicitados exames
sorolgicos.
Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA)
Todas as coletas devero ser realizadas em ambulatrio mdico referenciado pela Diretoria
de Vigilncia Epidemiolgica.
necessria a realizao do Teste de Montenegro como forma de Triagem.
Leishmaniose Visceral Humana
Para realizao da sorologia dever ser encaminhado o nmero de notificao do SINAN.
Leishmaniose Visceral Canina
Este tipo de exame realizado em ces de circulao em reas endmicas ou para fins
epidemiolgicos. Em reas no endmicas necessrio consultar o Servio de Vigilncia
Epidemiolgica.
Leptospirose
Os exames de microaglutinao somente sero realizados em pacientes com ELISA IgM
leptospirose reagente ou inconclusivos.
Os exames de PCR somente sero realizados em pacientes com suspeita de leptospirose
que foram a bito at o 6 dia de incio dos sintomas.
Malria
Controle de Qualidade das lminas para pesquisa de Plasmodium sp:
Transporte de lminas para Superviso Indireta:
todas as lminas positivas e todas as negativas devem ser encaminhadas ao Setor de
Doenas Tropicais do Lacen para superviso indireta;
devem ser transportadas em porta-lminas;
os formulrios que acompanham as lminas para a superviso indireta no devem ser
colocados junto com as lminas para evitar possveis contaminaes;
importante colocar no formulrio o nome do laboratrio e o municpio de
procedncia;
colocar o formulrio de superviso junto ao porta-lmina, embrulhar e enviar ao Lacen,
devidamente identificado com o endereo do remetente e destinatrio.
Nota: Os formulrios de superviso esto disponveis na home page do Lacen/SC no endereo eletrnico:
http://lacen.saude.sc.gov.br.
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6.2.4 Setor de Imunologia UO IMUNO
No necessrio jejum prolongado para os exames imunolgicos, porm recomendamos
jejum de 3 a 4 horas para evitar lipemia. Amostras intensamente hemolisadas no sero
aceitas.
Para a realizao dos exames de sorologia que utilizam o mesmo material biolgico (soro)
pode ser enviado somente 1 ( um) tubo com no mnimo 2 mL de soro;
Brucelose
Sorologia
Teste de aglutinao bacteriana para a deteco qualitativa e semi-quantitativa de
anticorpos do anti-Brucella no soro humano corado pelo Rosa Bengala.
Este exame detecta a presena de anticorpos anti-brucella no soro de indivduos que
apresentam sintomatologia atual ou pregressa.
Seguir orientaes do Protocolo Estadual de Vigilncia e Manejo Clnico de Brucelose
Humana, material elaborado pelo Grupo Tcnico da Diretoria de Vigilncia Epidemiolgica
de Santa Catarina (DIVE) e Lacen, disponveis nas home page do Lacen e DIVE.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio prpria com
informao de diagnstico ou seguimento sorolgico.
Citomegalovirus, Infeco pelo
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM e IgG na infeco pelo citomegalvrus.
destinado ao diagnstico de casos suspeitos, em doadores de rgos, receptores de
transplantes, pacientes imunocomprometidos e no acompanhamento pr-natal.
Informar esses dados na requisio.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual e acompanhada da requisio especfica.
Contagem de linfcitos T CD4+/CD8+/CD45+
No necessrio jejum do paciente, porm sugerimos que seja orientado ao paciente no
ingerir alimentos gordurosos antes da coleta, para evitar lipemia da amostra.
Coleta de sangue em tubo com anticoagulante EDTA K2 ou K3. Homogeneizar
suavemente para evitar hemlise.
Manter e transportar a temperatura ambiente (20 a 25C). NO
REFRIGERAR.
O exame deve ser realizado no prazo mximo de 48 horas aps a coleta, portanto a
amostra deve chegar ao Lacen dentro do prazo vivel para processamento. Portanto, as
amostras devero chegar ao Lacen em no mximo 40 horas aps a coleta. Caso cheguem
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aps este prazo, sero descartadas.
Cada amostra deve estar acompanhada do Laudo Mdico para emisso de BPA-I com
todas as informaes requeridas de forma legvel. O mdico solicitante deve ser cadastrado
no Sistema de Controle de Exames Laboratoriais SISCEL - do Ministrio da Sade. Para
isto, necessrio nmero de CRM e CPF.
Dengue
Sorologia
Deteco do Antgeno NS1 dengue
Deteco do anticorpo IgM - dengue
Para as amostras de sangue (soro) coletadas com menos de cinco dias de incio de
sintomas sero realizadas a deteco do antgeno NS1 (detectvel at o 9 dia de incio
dos sintomas). As mesmas sero tambm armazenadas a 80C para realizao do
isolamento viral em Laboratrio de Referncia Nacional, caso seja necessrio.
Para deteco de anticorpos IgM, a coleta de sangue deve ser realizada a partir do 6 dia
do incio dos sintomas (febre).
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ ou lipemia, sob refrigerao seguindo orientaes
de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio especfica.
Em caso de bito:
No mximo 12 horas aps o bito, coletar sangue por puno intracardaca e
amostras de fgado, rim, bao e linfonodo por necropsia. Acondicionar este
material isoladamente em frascos estreis, devidamente identificados.
Manter e transportar - 70 C.
Para exame histopatolgico e imunohistoqumica, podem-se coletar fragmentos de tecidos
e acondicion-los isoladamente em frascos com formalina ou em blocos de parafina.
Estes materiais devem permanecer em temperatura ambiente.
Doena de Chagas
Exame complementar para diagnstico da Doena de Chagas ou acompanhamento de
infeco pregressa.
Sorologia
ELISA detecta anticorpos totais (IgM e IgG) anti- Tripanossoma cruzi e
Imunofluorescncia Indireta - Deteco de anticorpos IgG anti- Tripanossoma cruzi
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual, acompanhada da requisio
especfica.
Doena Diarrica - Rotavrus
Deteco do antgeno de rotavrus em fezes lquidas in natura coletadas do 1 at o 4 dia
aps incio dos sintomas.
Amostras coletadas com 6 dias ou mais no contm quantidades de antgeno suficiente
para a realizao de um exame correto, podendo ocorrer exames falso-negativos.
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No coletar amostras em meios que contenham conservantes ou swab retal.
Aps realizada a deteco de rotavrus no Lacen, as amostras so encaminhadas para
Laboratrio de Referncia para pesquisa de Norovrus e Astrovrus.
As amostras devem ser mantidas sob refrigerao e encaminhadas ao LACEN em at 48
horas aps a coleta.
Em caso de surtos, coletar trs amostras de cada local (creche, escola ou local trabalho).
Doenas Exantemticas Sarampo / Rubola / Sndrome da Rubola Congnita e
Eritema Infeccioso (Parvovrus B19)
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM/IgG
As amostras de sangue de caso suspeito, contato com caso suspeito, gestante sintomtica,
gestante assintomtica (contato com caso suspeito), gestante vacinada inadvertidamente e
recm-nascido com suspeita de sndrome da rubola congnita devem ser coletadas
sempre que possvel no primeiro atendimento do paciente. Informar esta condio
epidemiolgica na requisio.
Em pacientes sintomticos, so consideradas amostras oportunas aquelas coletadas entre
o 1 ao 28 dia do aparecimento do exantema. Amostras coletadas aps este perodo so
consideradas tardias. Mesmo assim devem ser enviadas ao laboratrio.
A coleta de segunda amostra ser solicitada pelo LACEN ou DIVE. Esta dever ser
coletada entre duas a 3 semanas aps a primeira ( nas amostras oportunas).
Enviar requisio prpria do laboratrio, sempre informando a data de incio do exantema,
dados vacinais recentes e histrico de viagem.
Amostra:
Soro lmpido, sem hemlise intensa e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
orientaes de armazenamento e transporte deste manual.
Isolamento viral (enviada ao Laboratrio de Referncia Nacional)
Amostras de urina, sangue total e secreo de nasofaringe devem ser coletadas at
o 5 dia a partir do aparecimento do exantema;
Urina Coletar aps higiene ntima, 15 a 10 mL de urina (de preferncia a 1
urina da manh), desprezando o 1 jato. Coletar o jato mdio em frasco estril
e enviar em at 24 a 48 horas sob refrigerao;
Sangue Total coletar 4 a 10 mL de sangue em tubo com anticoagulante. Enviar a
amostra sob refrigerao em at 24 horas;
Secreo de nasofaringe coletar 3 swabs: 2 swabs de secreo com clulas da
parede posterior nasal das duas narinas e 1 swab de orofaringe. Os 3 swabs sero
colocados em meio de transporte viral fornecido pelo LACEN/SC. Enviar em at 24
horas aps a coleta, mantendo sob refrigerao.
Nota: Devem ser priorizadas as seguintes situaes:
Casos importados, ocorrncia de surtos, casos com IgM reagente ou indeterminado.
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Sfilis
Triagem com teste no treponmico: VDRL ou RPR realizado para o ambulatrio do
Hospital Nereu Ramos de Florianpolis em atendimento ao protocolo para acidentes com
material biolgico/violncia sexual.
Testes Confirmatrios repetio do teste no treponmico e realizao da etapa II e
III (testes treponmicos) de acordo com Portaria MS/ n 3.242, de 30 de dezembro de
2011, que dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
especfica.
Toxoplasmose
Sorologia
Deteco de anticorpos IgM/IgG
Teste de Avidez dos anticorpos da classe IgG
Coleta de sangue (soro) para deteco de anticorpos IgM e IgG recomendada em 8 a 10
dias aps incio dos sintomas. Em alguns casos, ttulos altos de IgM podem permanecer
por meses ou anos.
Alm da sorologia pelo mtodo ELISA/ELFA, o Lacen realiza o Teste de Avidez os
anticorpos da classe IgG para elucidao destes casos.
O teste de Avidez de anticorpos da classe IgG um procedimento laboratorial que permite
estimar o perodo aproximado em que ocorreu a infeco toxoplsmica.
Em gestantes, a avaliao deve levar em conta o tempo gestacional e deve-se
correlacionar com os valores obtidos para anticorpos anti-toxoplasma IgM ou IgG em
amostras pareadas. O seguimento sorolgico ficar a critrio clnico.
Amostra: Soro lmpido, sem hemlise e/ou lipemia, sob refrigerao, seguindo as
especfica.
6.2.5 Setor de Micologia UO MICOL
Em Micologia, fica difcil separar as orientaes de coleta por etiologia, uma vez que
normalmente, para uma nica suspeita clnica solicitado anlises de diferentes amostras
biolgicas. Por isso, optou-se por separar apenas por Micoses superficiais e Micoses
Sistmicas, no sentido de orientar o tcnico quanto procedncia da amostra.
Micoses Superficiais
a) Pele
descontaminar a pele com lcool etlico 70% e esperar total evaporao, antes da
coleta;
as amostras de leses de pele como escamas, crostas ou cascas devem ser
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colhidas em placa, preferencialmente com uma lmina de bisturi descartvel ou com
a borda da lmina de vidro de microscopia, muito limpa;
deve-se colher, raspando em vrios pontos da leso, procurando as bordas das
leses mais recentes;
nos casos em que no h escamas aparentes, procura-se raspar bem o local e
retirar o material que for possvel;
a amostra biolgica coletada deve ser acondicionada em placas de Petri estreis
(Figura 15) ou em pedao de papel escuro esterilizado.

Figura 15 Coleta de amostra para exame micolgico
b) Couro Cabeludo
descontaminar o local da leso com lcool etlico 70% e esperar total evaporao,
antes da coleta;
a amostra de leses no couro cabeludo deve ser obtida atravs da raspagem do
local;
a amostra deve conter tocos de cabelo, o contedo dos folculos tapados e as
escamas de pele;
os cabelos da rea tambm podem ser puxados com pina (os cabelos infectados
so facilmente removveis);
c) Cabelos e Plos
descontaminar a pele ou o couro cabeludo com lcool 70% e esperar total
evaporao, antes da coleta;
se a leso for ao longo do cabelo ou plo, como ndulos, por exemplo, esses devem
ser cortados com tesoura;
d) Unha
os fragmentos de unhas alteradas podem ser colhidos, raspando-os com o bisturi ou
com o auxlio de uma tesoura limpa;
material que se deposita embaixo da unha pode ser retirado cuidadosamente com o
bisturi, com um palito (tipo de manicure), previamente esterilizado ou outro objeto
pontiagudo estril;
em casos de paronquia (leses na regio da cutcula), colhem-se as escamas e, se
possvel, o pus, com um swab em salina estril;
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se a leso uma mancha esbranquiada em baixo da unha, raspar por cima da
unha com o bisturi at chegar na parte com a leso; desprezar este material e raspar
todo o contedo da mancha;
Nota: quando o material da leso seco, reduz a contaminao bacteriana e as amostras descritas acima
podem ser estocadas, em placas de petri estreis ou em saquinhos plsticos, por meses, sem perder a
viabilidade do fungo dermatfito.
e) Mucosa oral e orofaringe
para as infeces de boca, o raspado com lmina de bisturi ou esptula, nas partes
afetadas (reas com eritema e/ou placas brancas), melhor do que o swab, se o
material for processado imediatamente;
para o material de leso de mucosa jugal, papilas linguais ou regio tonsilar,
mergulhar o swab estril umedecido em salina estril e enviar o tubo ao laboratrio.
f) Leso de nariz e seios paranasais
as leses podem ser raspadas e colocadas em recipiente estril;
material necrtico e tecidos so obtidos por bipsia;
para as secrees, utilizar swab umedecido em salina estril, fazendo rotao no
local.
g) Ouvido
as infeces fngicas de ouvido so geralmente secas, exceto quanto associadas a
infeces bacterianas;
a raspagem do material sempre melhor para o diagnstico laboratorial, embora o
swab em salina estril tambm possa ser usado.
h) Pus e material de abscesso
se houver escamas ou crostas na parte superficial da leso, estas podem ser
raspadas e colocadas em placas de Petri ou frascos estreis;
aspirado do pus e/ou biopsia so mais apropriados para o exame;
o pus coletado assepticamente de abscessos no drenados com uma agulha
estril em seringa. Aps a coleta, retirar a agulha com uma pina e passar o material
para um frasco estril;
nas leses ulceradas, caso o material tenha que ser colhido com swab (o que no
recomendado), o local deve ser limpo com gaze embebida em salina estril para
eliminar os exsudatos superficiais que so altamente contaminados com bactrias
para ento inserir o swab at a parte mais profunda da leso, evitando encosta-lo na
periferia e na pele adjacente;
se algum gro for visvel no pus, este deve ser includo na amostra.
i) Olho
deve ser solicitado meio de cultura ao laboratrio e o material retirado das reas de
ulceraes e supuraes, coletado pelo oftalmologista deve ser inoculado
imediatamente no meio de cultura;
lgrima e fludos podem ser coletados com pipeta plstica estril (pipeta Pasteur
descartvel Figura 16). O swab no adequado para este tipo de material.
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Figura 16: Modelos de pipeta Pasteur plstica
j) Secreo Vaginal
com auxlio de espculo, coletar o material da leso ou do fundo do saco vaginal
com swab estril;
enviar o swab umedecido em salina estril ao Lacen.
Notas:
1) para todas as coletas descritas acima, colher todo o material disponvel na leso. Quanto mais material
mais viabilidade na visualizao e no crescimento em cultura.
2) todas as vezes que a coleta for com swab, este deve ser umedecido em salina ou gua estril antes da
coleta. Aps a coleta, deve permanecer em um frasco estril com salina suficiente para mant-lo mido at
o procedimento do exame.
Micoses Sistmicas
a) Escarro
preferencialmente deve ser colhido por broncoscopia: lavado ou aspirado brnquico;
quando no for possvel, o escarro deve ser colhido da mesma maneira como
colhido para o exame de tuberculose, no esquecendo da higiene da boca antes da
coleta, para diminuir a contaminao pelos saprfitas da cavidade bucal e da faringe.
Nota: o exame de escarro, (direto e cultura), nem sempre satisfatrio e confivel, por ser uma amostra
muito contaminada. Quando houver a possibilidade do exame sorolgico, deve-se optar pelo ltimo.
b) Aspirado traqueal e secreo obtida por broncoscopia
procedimento realizado por mdico treinado. O material colhido colocado em
recipiente estril.
c) Aspirado gstrico
obtido atravs de sonda nasogstrica pela manh, em jejum;
aspirar cerca de 5 a 10 mL de suco gstrico.
d) Fluidos
pleural, abdominal e sinovial: aspirados ou drenados, so coletados assepticamente
em frasco estril contendo heparina estril 1:1000;
a quantidade de heparina usada varia de acordo com o volume da amostra
(aproximadamente 1 mL por 10 mL de fludo);
em casos de lquido abdominal de pacientes de dilise peritoneal, colher sem
heparina ou em frasco de hemocultura;
e) Urina
A amostra biolgica mais apropriada para o diagnstico de micose do trato urinrio obtida
por sondagem ou citoscopia. Quando no for possvel, e para evitar contaminao com
microrganismos presentes nas reas vizinhas, proceder da seguinte maneira:
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realizar limpeza prvia da regio perineal com gua e sabo;
desprezar o primeiro jato de urina da manh e colher 3 a 5 mL de urina em frasco
estril.
f) Fezes
fazer lavagem prvia da regio anal com gua e sabo;
coletar pores de fezes em recipiente estril com tampa de rosca ou
swab anal umedecido em salina estril e transportado tambm em salina suficiente
para manter o material mido.
g) Lquor (LCR Lquido Cfalorraquidiano)
procedimento mdico;
para exame direto, cultura e prova do ltex so necessrios de 2 a 3mL de lquor.
Nota: no recomendvel que a mesma amostra seja utilizada para os exames bacteriolgicos, micolgicos
ou de tuberculose porque pode haver contaminao. O ideal uma alquota da amostra para cada setor.
h) Sangue (Hemocultura)
Tcnica de coleta:
lavar as mos com gua e sabo, enxaguar bem, enxugar com papel toalha e calar
as luvas;
fazer a anti-sepsia rigorosa do local da puno, deixar agir por 1 minuto. Evitar tocar
no local da puno;
coletar assepticamente no mnimo 5mL de sangue de adulto e 1mL de criana,
cuidar para que no haja bolhas de ar na seringa. Coletar um volume de sangue
correspondente a aproximadamente 5-10% do volume do meio de cultura;
no trocar de agulha antes de injetar o sangue no frasco.
Volume de sangue para cada amostra
recomendado no mnimo duas amostras de cada paciente, sendo uma do brao
direito e outra do esquerdo, ou a critrio mdico.
deve ser respeitada a quantidade de sangue de 1:10 em relao ao meio de cultura,
isto : 5 mL de sangue para 45 mL de meio de TSB -Trypticase Soy Broth e 1 mL de
sangue para 9 mL de TSB (frasco peditrico).
Inoculao
romper o lacre central dos frascos e fazer a desinfeco na tampa de borracha dos
frascos de meio com TSB (frasco de hemocultura) com lcool etlico 70%;
inocular o sangue direto da seringa de coleta no frasco de hemocultura. Misturar
bem (sem agitar) para evitar coagulao.
i) Aspirado de Medula ssea
procedimento mdico;
aspirado de medula ssea coletado assepticamente em frasco estril contendo
heparina estril 1:1000 (0,5 mL de heparina diluda 1:1000);
aceita-se com restrio quando coletado em frasco para hemocultura.
j) Tecido obtido por bipsia, necropsia e peas operatrias
colher assepticamente, utilizando instrumentos estreis;
colocar em recipiente estril com salina;
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no colocar nenhum lquido fixador (por exemplo, formalina);
encaminhar ao Lacen em temperatura ambiente.
k) Sorologias
para as sorologias, as amostras de sangue so coletadas em tubo seco, 5 a 10 mL
so suficientes;
o soro deve ser separado, congelado e encaminhado sob refrigerao.
Nota: para todos os exames de micologia, necessrio constar na requisio a suspeita clnica para que o
laboratrio possa fazer uso dos meios e condies de cultivos mais adequados.
6.2.6 Setor de Tuberculose UO TUBER
Escarro espontneo
a) Orientao
lavar a boca / bochechos;
a coleta deve ser realizada em local arejado, ar livre;
abrir o pote;
forar a tosse: inspirar profundamente;
prender a respirao, escarrar no pote.
b) Comentrios
a 1 amostra coletada na Unidade de Sade no momento da consulta;
a 2 amostra coletada na manh seguinte ao despertar;
coletar em 2 dias consecutivos;
conservar em refrigerao (2a 8C);
transportar ao laboratrio ao abrigo da luz solar.
Escarro induzido
a) Orientao
a sala equipada deve ser equipada com cuidados de biossegurana para evitar
contaminao do ambiente;
acompanhamento de tcnico treinado;
no dia anterior deve-se ingerir muito lquido;
a nebulizao deve ser feita com soluo salina hipertnica a 3%, durante 5 a 20
minutos;
seguir as mesmas instrues do escarro espontneo.
b) Comentrios
indicado quando o paciente tem pouca secreo ou no consegue expelir;
a nebulizao fluidifica a secreo do pulmo e provoca irritao que leva tosse e
expulso do escarro;
amostra menos viscosa e semelhante saliva;
escrever no pote escarro induzido.
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Lavado brnquico, escovado brnquico, lavado bronco-alveolar (LBA), aspirado
transtraqueal
a) Orientao
sob orientao mdica;
uso de broncofibroscpio;
uso de substncia anestsica letal para micobactria;
a sala de coleta deve ter condies de biossegurana para evitar contaminao do
ambiente.
b) Comentrios
procedimento invasivo;
processar imediatamente;
esterilizar o broncofibroscpio;
evitar a contaminao com o trato respiratrio superior;
a coleta da secreo aps o uso do aparelho pode ser recolhida at 2 dias depois.
Fragmentos de tecidos pulmonares
a) Orientao
sob orientao mdica;
usar soluo fisiolgica ou gua destilada;
no usar formol.
b) Comentrios
processar imediatamente;
evitar o ressecamento.
Lavado gstrico
a) Orientao
jejum de 8 a 10 horas;
a coleta deve ser feita logo ao acordar, antes de levantar;
em crianas, a coleta deve ser feita antes de ver a me para evitar deglutio pelo
estmulo visual;
deve ser realizada com sonda nasogstrica fina introduzida pela boca ou nariz;
injetar 10 a 15 mL de soluo fisiolgica;
aps 30 minutos, fazer lavagem gstrica.
b) Comentrios
requer hospitalizao;
crianas: 40% de positividade com evidncia da doena ao RX;
neutralizar o suco gstrico com carbonato de sdio 1mg/1mL de lavado gstrico;
a coleta deve ser feita em 2 dias consecutivos.
Urina
a) Orientao
a coleta deve ser feita aps higiene com gua e sabo neutro;
volume urinrio: toda urina da 1 mico da manh;
aps a coleta, levar imediatamente ao laboratrio.
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b) Comentrios
material rico em microbiota associada;
no aceitar pool de amostras colhidas em 24 horas;
no aceitar volumes inferiores a 40 mL;
coletar de 3 a 6 amostras em dias consecutivos.
Lquido cefalorraquidiano (LCR)
Procedimento mdico (coleta em hospitais).
Lquido pleural, Lquido sinovial, Lquido peritoneal
Procedimento mdico (coletado em hospitais ou clnicas especializadas)
Fragmentos cutneos, sseos e de rgos
Procedimento mdico
Sangue e aspirado de medula
Procedimento mdico
Pus e secrees
a) Orientao
de cavidade fechada: por puno;
de cavidade aberta: com swab;
de preferncia aspirar ou passar o swab na parte mais profunda da leso.
Envio de culturas do Mycobacterium tuberculosis para o LACEN
a) os tubos com a cultura do M. tuberculosis devem ser com tampa de rosca, a prova de
vazamento;
b) para o transporte, este tubo deve ser envolvido com papel absorvente, em quantidade
suficiente para absorver o material e proteg-lo em caso de acidente;
c) o tubo embalado deve ser colocado dentro de um recipiente de paredes rgidas,
inquebrvel a prova de vazamentos, contendo etiqueta com as caractersticas da amostra;
d) este recipiente deve ser colocado dentro de outra embalagem - como caixa de trmica
para transporte de amostras, que deve conter o rtulo de material infectante ou de risco
biolgico juntamente com o nome, telefone e endereo da pessoa que deve ser avisada em
caso de acidente com a(s) cultura(s);
e) completar o espao da caixa com papel amassado ou polibolha, para evitar o movimento
do recipiente contendo a cultura;
f) fechar e vedar bem a caixa;
g) colocar as requisies correspondentes, devidamente preenchidas, dentro de um saco
plstico;
h) vedar bem o saco e fix-lo na FACE EXTERNA da tampa ou na lateral da caixa
trmica. Nunca coloc-los dentro da caixa.
i) identificar com destinatrio e remetente;
j) enviar ao laboratrio.
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6.2.7 Setor de Virologia UO VIROL
Exames realizados no setor:
HBsAg
HBeAg
Anti-HBs
Anti-HBc Total
Anti-HBc IgM
Anti-HBe
Anti-HAV IgG
Anti-HAV IgM
Anti HCV
Marcadores para diagnstico sorolgico das
Hepatite A, B e C
HBV DNA Quantitativo Teste Molecular para indicao e monitoramento do
tratamento da Hepatite B
HCV RNA Quantitativo
Genotipagem do HCV
Testes moleculares para indicao e monitoramento do
tratamento da Hepatite C
Anti-HIV Marcador para o diagnstico sorolgico da infeco pelo
HIV
Imunoblot rpido para o
HIV-1/2 Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1/2
Western blot para o HIV-1
Teste confirmatrio da Infeco pelo HIV-1
HEPATITES VIRAIS SOROLOGIA
Anti-HBs,
Anti-HBc IgM
HBeAg
HBsAg
Anti-HBe,
Anti HBc Total
Anti HAV total
Anti-HAV IgM
Anti-HCV
As seguintes situaes clnicas e epidemiolgicas devem ser consideradas para a
realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais:
Aminotransferases (transaminases) alteradas;
Ictercia aguda e colria;
Exposio percutnea ou de mucosa com sangue e/ou secrees de pessoas
portadoras ou com suspeita de infeco pelo HBV ou HCV;
Contato sexual ou domiciliar com indivduo sabidamente HBsAg reagente;
Contato sexual com indivduo sabidamente HCV reagente;
Contato com indivduo Anti-HAV IgM reagente;
Doadores de sangue e/ou rgos, usurio de hemodilise e ambulatrios de DST.
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Para a realizao do diagnstico sorolgico das hepatites virais so necessrios:
a) Preenchimento da requisio de exame para Hepatites Virais ver tem 5.1 deste
manual.
Assinalar a condio epidemiolgica e/ou clnica do paciente;
Cada condio epidemiolgica ou clnica est relacionada com um perfil de
marcadores sorolgicos. Por isto, de extrema importncia assinalar apenas uma
condio - clnica ou epidemiolgica - para que no haja equvoco na avaliao das
fichas e cadastro dos marcadores que sero realizados pelo laboratrio.
Identificar o profissional solicitante (assinatura e carimbo).
Nota: As requisies incompletas ou com condies clnicas em desacordo com as preconizadas sero
devolvidas e o soro armazenado por 15 dias. Aps este perodo, sero desprezadas.
b) Coleta e preparo da amostra
necessrio jejum de 3 a 4 horas antes da coleta;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na
posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a
3.000 rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao, observar se h hemlise e/ou lipemia.
Amostras com hemlise e/ou lipemia sero descartadas;
As amostras no devero ser fracionadas;
c) Armazenamento e transporte da amostra
Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no
mximo 30 dias;
Transportar as amostras em isopor com gelo reciclvel (gelox) juntamente com
requisio do exame devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em
contato direto com o gelo para evitar hemlise.
d) Procedimentos laboratoriais para Hepatites Virais
CASO MARCADORES
Diagnstico
(Aminotransferases alteradas/ictercia/colria)
Anti HBc Total
HBsAg
Anti -HBc IgM,
Anti- HAV IgM
Anti -HCV (anexar BPA-I)
Monitoramento da Hepatite B aps 6 meses
HBsAg
Anti - HBs
Anti Hbe
HBeAg
Contato domiciliar e/ou sexual com portador de
hepatite B
Anti- HBc Total
Obs.: Caso o Anti-HBc for reagente,
sero realizados outros marcadores.
Contato sexual com portador de hepatite C
Anti-HCV
(anexar BPA-I)
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Paciente Anti-Hbc Reagente
(Exame Realizado Em Banco De Sangue)
Anti- HBs
O teste para verificar eficcia da
vacina (Anti-HBs) no realizado,
exceto nos casos de pacientes com
Anti-HBc reagente e Anti-HBs negativo
que necessitarem do exame para
verificar imunidade;
Recm nascido (RN) de me portadora de
hepatite B
HBsAg
Anti-HBs aos 9 meses e 15
meses de idade
Acidente percutneo/biossegurana/ hemodilise/
doador e receptor de rgos e sangue/ usurios
de drogas injetveis/ transfuso sangunea
Anti-HBc Total
HBs Ag
Anti-HBs
Anti-HCV (anexar BPA-I)
Susceptibilidade hepatite A
Anti-HAV IgG
Os contatos de Hepatite A devem
seguir os mesmos procedimentos para
o diagnstico, pois no existe forma
crnica na infeco pelo vrus A.
Ambulatrio DST/AIDS/HIV
Anti-HBc Total
HBsAg
Anti-HBs
Anti-HCV (anexar BPA-I)
Diagnstico, indicao e monitoramento do
tratamento do HCV
HCV RNA QUANTITATIVO
(ver testes moleculares)
Genotipagem do HCV
Indicao e monitoramento do tratamento do
HBV
HBV DNA QUANTITATIVO
HEPATITES VIRAIS - TESTES MOLECULARES
HCV RNA quantitativo
HBV DNA quantitativo
Genotipagem do HCV
1 - HCV RNA quantitativo
Para a realizao da carga viral do HCV necessrio:
a) preenchimento do Laudo Mdico para emisso do BPA-I - Quantificao de RNA do
vrus da Hepatite C:
Preencher com letra legvel todos os dados referentes instituio e paciente;
Assinalar o motivo pelo qual o exame est sendo solicitado;
Preencher o nmero da Notificao;
Identificar o mdico solicitante (assinatura e carimbo).
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Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume
de 5mL;
No usar HEPARINA como anticoagulante;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio
vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000
rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise
e/ou lipemia sero descartadas;
As amostras no devero ser aliquotadas;
Nunca congelar as amostras;
Identificar o tubo com nome, exame, origem e data da coleta.
Nota: Para evitar contaminaes, nunca abrir o tubo de coleta.
Aps a centrifugao, as amostras devem ser encaminhadas ao Lacen no prazo
mximo de 72 horas. Conserv-las entre 2 e 8 C at o envio ao laboratrio;
O transporte das amostras dever ser realizado em caixas trmicas com gelo
reciclvel entre 2 e 8C at as 5 feiras de cada semana.
d) Procedimentos (Etapas) Laboratoriais para o Diagnstico e Monitoramento do
Tratamento da Infeco pelo Vrus da Hepatite C (Portaria n. 221 de 13 de julho de
2011)
CASO CONDIES
Diagnstico
Sorologia Anti-HCV Reagente
Preencher o laudo para emisso do BPA-I
Indicao De Tratamento
Resultado de Carga Viral detectado (pr-
tratamento)
Monitorar Tratamento (12, 24, 48, 72 e 6
meses aps o tratamento)
Anexar o resultado da Carga Viral anterior
Transmisso Vertical
Acidente Percutneo
A coleta dever ser realizada 12 dias aps
o acidente percutneo.
2 - HBV DNA quantitativo
Para a realizao do HBV DNA Quantitativo necessrio:
a) preenchimento da Ficha de Quantificao de cido Nuclico Carga Viral de HBV:
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Preencher a justificativa do procedimento;
Preencher a data e hora da coleta;
CASO CONDIES
Indicao de tratamento
Dois resultados de HBsAg reagentes com intervalo
mnimo de seis meses (para comprovao de
infeco crnica)
Preencher a Ficha de Quantificao de cido
Nuclico Carga viral do HBV
Monitorar tratamento
Anexar o resultado da carga viral anterior
Preencher a Ficha de Quantificao de cido
Nuclico - Carga viral do HBV
a) Coleta e preparo da amostra
Para cada paciente, coletar 2 tubos de 5 mL com anticoagulante EDTA (tampa
roxa). No utilizar Heparina;
O sangue total dever ser enviado ao Lacen em at 20 horas aps a coleta e at
as 5 feiras de cada semana;
Se as amostras de sangue total no puderem chegar ao Lacen em at 20 horas, as
mesmas devero ser centrifugadas a 3.000 rpm por 10 minutos para a obteno do
plasma;
Separar o plasma, utilizando ponteira com filtro estril e acondicionar em 2
criotubos com tampa de rosca estreis, adicionando 2,0 mL de plasma em cada
criotubo estril;
b) Armazenamento e transporte da amostra
As amostras de sangue total devero ser transportadas em caixas trmicas com
gelo reciclvel entre 2 e 8C. As amostras no devem ficar em contato direto com o
gelo para evitar hemlise;
Para as amostras de plasma acondicionadas em criotubos, acondicion-los em
geladeira em temperatura de 2 a 8 C por no mximo 5 dias aps a coleta. Enviar
em caixas trmicas com gelo reciclvel entre 2 e 8C.
Enviar at as 5 feiras de cada semana.
No congelar as amostras.
3 Genotipagem do HCV
Para a realizao da Genotipagem do HCV necessrio:
a) Preenchimento do Laudo Mdico para Emisso do BPA-I Genotipagem do Vrus
da Hepatite C:
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Coletar a amostra em tubo seco (sem anticoagulante) com gel separador e volume
de 5 mL;
No usar HEPARINA como anticoagulante;
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na
posio vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a
3.000 rpm por 10 minutos;
HIV, Infeco pelo
Para a realizao do diagnstico sorolgico da infeco pelo HIV necessrio:
a) O preenchimento da requisio para exame HIV ver tem 5.1 deste manual
Nota: As requisies incompletas sero devolvidas e o soro armazenado por 15 dias.
Aps este perodo sero desprezadas.
Aps a coleta, aguardar a retrao do cogulo por 30 minutos com o tubo na posio
vertical e em temperatura ambiente (20 a 25C) e centrifugar as amostras a 3.000
rpm por 10 minutos;
Aps a centrifugao observar se h hemlise e/ou lipemia. Amostras com hemlise
e/ou lipemia sero descartadas;
As amostras no devero ser aliquotadas;
Armazenar em geladeira (2 a 8 C) por no mximo 5 dias, ou -20C por no mximo
30 dias;
Transportar as amostras em caixas trmicas com gelo reciclvel juntamente com a
requisio devidamente preenchida. As amostras no devem ficar em contato direto
com o gelo para evitar hemlise.
6.3 Orientaes especficas para a coleta e transporte das amostras para
laboratrios de Referncia
No item a seguir, esto listadas as patologias com as orientaes especficas e detalhadas
de coleta, armazenamento e envio de amostras biolgicas que so encaminhadas para
Laboratrios de Referncia ou Apoio, principalmente em casos de bitos. As orientaes
gerais de coleta e envio esto descritas no DOC MCT 01 - 01(anexo A).
A execuo dos exames encaminhados pelo Lacen de responsabilidade dos Laboratrios
de Referncia e Apoio, sendo que a relao de exames realizados por estes laboratrios
pode sofrer alterao.
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Diante disso, antes da coleta das amostras biolgicas dever ser feito contato prvio com o
Lacen para verificar a possibilidade da realizao do exame e a fim de se estabelecer o fluxo
de encaminhamento das amostras.
Algumas patologias possuem requisies prprias disponveis na home page do Lacen, no
seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br.
Patologia Orientaes especficas para coleta
DCJ
Doena de
Creutzfeldt-
Jakob
Exame deve ser solicitado por neurologistas/clnicos responsveis pelo
acompanhamento dos pacientes.
Enviar ficha de notificao.
Deve acompanhar a amostra, o Termo de Consentimento Esclarecido (TCE)
assinado pelo paciente ou responsvel legal (solicitar no Lacen ou DIVE).
Coleta:
Sangue: Coletar 5 mL de sangue com anticoagulante EDTA ( tampa
roxa).
Enviar sob refrigerao ao Lacen imediatamente aps a coleta.
No Lacen: manter amostra congelada e enviar ao laboratrio de
referncia em gelo seco (no utilizar gelo mido).
Lquor: Coletar 1 a 2 mL em tubo estril, acondicionar e enviar sob
refrigerao;
Amostras Ps-bito:
Encfalo inteiro, fragmentos do crebro (vrias reas do crtex,
ncleos da base, tlamo) cerebelo, tronco cerebral, devem ser
fixados em formol;
Blocos de tecidos as mesmas reas descritas acima
includos em parafina;
Fragmentos biopsiados devem ser fixados em formol ou
includos em parafina.
Dengue, Febre
Amarela ou
outros
arbovrus
Isolamento
viral em cultura
celular
Amostra biolgica: Soro, plasma, sangue total.
Coletar 5 mL de sangue total ou 3 mL de soro ou plasma.
Coleta: at o 5 dia do incio dos sintomas.
Transporte em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo reciclvel
(dentro de 6 horas no mximo).
Conservao em freezer 70C ou nitrognio lquido.
Amostra: Material de necrpsia: sangue do corao, rins,
fragmentos do corao, fgado, pulmo, bao, fragmentos de crebro
(lobo frontal, lobo temporal, ncleos de base, cerebelo), medula
ssea, medula espinhal.
Coleta: coletar em no mximo 8 horas aps o bito;
Colocar as amostras de cada rgo e fragmentos de cada
regio do crebro em tubos separados e devidamente
identificados;
Enviar e conservar em nitrognio lquido, gelo seco ou gelo
reciclvel (dentro de 6 horas no mximo);
Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido.
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Seo: 03
Requisito: 7.5

Febre Amarela
Amostra: Soro ou cogulo, sangue total.
Soro: 3mL. Sangue total: 5mL;
Coleta: at o 4 dia aps o incio dos sintomas;
Tubo criognico transportado em nitrognio lquido ou gelo
seco;
Conservar em freezer 70C ou em nitrognio lquido.
Amostra ps-bito: material de necropsia - fragmentos de tecido
fresco.
Coleta: colher amostras em no mximo 8 horas aps o bito.
Os fragmentos devem ter de 1-2 cm
3
de cada rgo e devem
ser colocados em tubos criognicos estreis.
Hantavirose
ELISA IgM - Soro, plasma ou sangue total
Soro ou plasma: 3mL Sangue total: 6mL
Coleta:
1 amostra: admisso do paciente no hospital;
2 amostra*: algumas horas aps internao;
3 amostra: duas a 3 semanas aps a 2 amostra.
*Somente quando solicitado pelo laboratrio
ELISA IgG - Soro, plasma ou sangue total
Comunicantes: informar que se trata de comunicante e o nome do paciente-
caso.
Amostra: Soro ou plasma: 3 mL Sangue total: 6 mL
Coleta: nos primeiros 7 dias a partir do incio dos sintomas.
Conservao: sob refrigerao por no mximo 24 horas ou congelar a -
20C.
Transporte: refrigerado com gelo reciclvel.
RT- PCR (exame complementar)
Amostra: soro, plasma ou cogulo (coletados em at 7 dias do incio dos
sintomas);
Em caso de bito (at 8 horas aps): fragmentos de pulmo, rim, bao e
fgado (1,5 cm
3
);
Conservao: a - 70C ou em nitrognio lquido;
Transporte em caixa adequada para materiais infectantes, contendo gelo
seco.
Em caso de bito -
Amostra: sangue intracardaco. Coleta: colher amostras em no mximo 8
horas aps o bito.
Fragmento de 1-2 cm de cada rgo em tubo criognico estril.
Material de necropsia: fragmentos de tecido fresco (pulmo ou bao),
Transportar em nitrognio lquido ou gelo seco.
Conservar em Freezer 70C ou nitrognio lquido.
IMUNOHISTOQUMICA
Amostra: fragmentos de rim, pulmo, bao, linfonodo, corao, pncreas,
glndula pituitria, crebro e fgado (1,5 a 2 cm
3
)
Conservao: soluo de formalina tamponada a 10% ou em blocos de
parafina. Transporte em temperatura ambiente (NO REFRIGERAR)
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Manual
Seo: 03
Requisito: 7.5

Raiva Humana
O procedimento de coleta em raspado de mucosa lingual (swab), tecido
bulbar de folculos pilosos, obtidos por bipsia de pele da regio cervical
deve ser feito por profissional habilitado mediante o uso de EPI.
Nota: Solicita-se que seja feito raspado de mucosa lingual e coleta de folculo piloso
antemortem quando possvel ou posmortem, conforme protocolo abaixo:
a) Coleta de Material antemortem:
Coleta de Folculo Piloso:
As amostras de bipsias de pele da regio da nuca (antemortem ou
postmortem) devem ser coletadas com bisturi descartvel. Os bisturis no
devem ser reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um
mesmo paciente.
As bipsias de pele, da regio da nuca (folculo piloso), devem ser
acondicionadas isoladas, separadamente das amostras de Sistema Nervoso
Central, e enviadas congeladas.
Coleta de Saliva (Raspado de Mucosa Lingual):
A saliva deve ser coletada por meio de raspado de mucosa lingual com
utilizao de swab estril.
Acondicionar o swab em tubo hermeticamente fechado e em temperatura
ambiente.
Acondicionar e encaminhar as amostras para laboratrio em caixas
isotrmicas distintas. Identificar todas as amostras adequadamente e enviar
a ficha de investigao do caso de raiva humana.
b) Coleta ps mortem
Coleta de Tecido Nervoso (Crebro, cerebelo e medula):
O rgos di Sistema Nervoso Central (crebro, cerebelo e medula) devero
ser coletados com bisturis descartveis, no devendo estes serem
reutilizados nem mesmo para coletar diferentes amostras de um mesmo
paciente.
Manter e enviar as amostras conservadas sob refrigerao em at 24 horas
aps a coleta, e congeladas, aps este prazo.
Excepcionalmente, pode-se conservar as amostras em soluo salina com
glicerina a 50%, em recipientes de paredes rgidas, hermeticamente
fechados, com identificao de material de risco biolgico juntamente com
cpia da ficha de notificao ou de investigao. No usar formol. A
qualidade do resultado laboratorial depender do estado de conservao da
amostra. Materiais autolisados interferem nas tcnicas laboratoriais, muitas
vezes tornando impossvel a emisso do laudo.
Juntamente com as amostras, devem ser enviadas as fichas epidemiolgicas
completas, onde devem constar os dados do caso suspeito. Quando
enviados dois ou mais fragmentos de tecidos, especificar no pedido e
identificar os mesmos.
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Seo: 03
Requisito: 7.5

6.4 Encaminhamento dos resultados dos exames
Todos os clientes cadastrados que enviam amostras biolgicas ao LACEN (vigilncias
municipais, ncleos de vigilncias hospitalares, etc) podero acessar o resultado dos
exames via on line no seguinte endereo eletrnico: http://lacen.saude.sc.gov.br/.
O LACEN estabelece prazos de liberao dos laudos de exames. Estes prazos esto
disponveis no DOC MCT 01- 01 (anexo A)
Os exames enviados para Laboratrios de Referncia ou Apoio no obedecem ao mesmo
prazo de liberao dos exames realizados no LACEN/SC. Estes prazos esto sujeitos ao
estabelecido pela unidade que realiza os exames.
7 REFERNCIAS
BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso
Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas tcnicas para o diagnstico das
meningites bacterianas. Braslia, DF; Centro de Documentao do Ministrio da Sade,
1986.
_____. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Manual de
microbiologia clnica para o controle de infeco em servios de sade. Braslia, 2004.
Mdulo VII, p. 01-24.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso
Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para o
diagnstico laboratorial de febre tifide. Braslia, DF, 1986.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Aes Bsicas de Sade. Diviso
Nacional de Laboratrios de Sade Pblica. Normas, mtodos e tcnicas para
isolamento e diagnstico das enterobactrias. Braslia, DF, 1985.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa
Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual para controle
das doenas sexualmente transmissveis. Braslia, DF, 1993.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria Nacional de Assistncia Sade. Programa
Nacional de Controle de Doenas Sexualmente Transmissveis/Aids. Manual de
procedimentos bsicos em microbiologia clnica para o controle da infeco
hospitalar. Braslia, DF, 2001.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade Bsica. Departamento de
Vigilncia Epidemiolgica. Guia de procedimentos tcnicos: baciloscopia em
hansenase. Braslia: Editora do Ministrio da Sade, 2010.
_____. Ministrio da Sade. Programa Nacional de DST e Aids. Bayer. Roche. bioMeriux.
Manual de Carga Viral HIV-1. [S.l.: s.n.], [200-]
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Manual
Seo: 03
Requisito: 7.5

_____. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas de Sade. Coordenao Nacional de
DST e Aids. Tcnica para coleta de secrees. 2. ed. Braslia, DF, 1997.
_____. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Coordenao Geral do
Programa Nacional de Controle da Malria. Manual de treinamento em diagnstico
laboratorial de malria. Braslia, DF, 2003.
_____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Comisso Nacional de
Preveno do Clera. Manual integrado de preveno e controle da clera. Braslia, DF,
1984.
_____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Centro de Referncia Professor
Hlio Fraga. Manual de baciloscopia da tuberculose. Rio de Janeiro, 1998, 42p, il.
_____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Coordenao de Controle de
Zoonoses e Animais Peonhentos. Manual de Leptospirose. Braslia, DF, 1995.
_____. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Guia de Vigilncia
Epidemiolgica. 5. ed. Braslia, DF, 2002. vol I e II.
_____. Ministrio da Sade. Fundao Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Evandro
Chagas. Diagnstico parasitolgico da leishmaniose tegumentar americana. Guia
Prtico. 2005.
______.Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de
Vigilncia Epidemiolgica. Manual Nacional de Vigilncia Laboratorial da Tuberculose e
outras micobactrias/Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia em Sade,
Departamento de Vigilncia Epidemiolgica Braslia: Ministrio da Sade, 2008.
______. Ministrio da Sade. PORTARIA MS N 3.242, DE 30 DE DEZEMBRO DE 2011
Dispe sobre o Fluxograma Laboratorial da Sfilis. Braslia, DF, 2011.
______. Ministrio da Sade. Portaria GM/MS n. 2.848 DE 06 de Novembro de 2007.
Publica a Tabela de Procedimentos, Medicamentos, rteses, Prteses e Materiais
Especiais - OPM do Sistema nico de Sade. Braslia, DF, 2007.
______ Ministrio da Sade. SVS/ DEVEP/CGDT/COVEV Coordenao Geral de
Laboratrios, Instituto Pasteur Protocolo de Diagnstico Laboratorial da Raiva Humana.
Braslia, DF; 2006.
______. Ministrio da Sade. Secretaria de Ateno Sade. Portaria n 719, de 28 de
dezembro de 2007. Inclui o campo Raa/Cor, nos Sistemas de Informao Ambulatorial
e Hospitalar-(SIA/SIH/SUS). Braslia, DF, 2007.
______Ministrio da Sade Protocolo Clnico e Diretrizes Teraputicas para Hepatite
Viral C e Coinfeces. Srie A Normas e Manuais Tcnicos, Braslia, DF, 2011.
EVANS, E.C.V.; RICHARDSON, M.D. Medical Mycology: A Practical Aproach. Oxford:
Press, 1989.
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Seo: 03
Requisito: 7.5

LACAZ, C. da Silva; PORTO, E. M; COSTA, J.E. Micologia Mdica. So Paulo: Sarvier,
1991.
OPLUSTIL, C. P. et al. Procedimentos Bsicos em Microbiologia Clnica. 3. ed. Ver. E
ampl. So Paulo: Sarvier, 2010.
SO PAULO (ESTADO). Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de
Pesquisa. Instituto Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre
Vranjac. Treinamento para coleta de secreo nasofaringe para cultura no diagnstico
laboratorial da coqueluche. So Paulo, [2000].
______. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto
Adolfo Lutz. Centro de Vigilncia Epidemiolgica Prof. Alexandre Vranjac. Treinamento de
difteria. So Paulo, [2000].
______. Secretaria de Estado da Sade. Coordenao dos Institutos de Pesquisa. Instituto
Adolfo Lutz. Descrio: Catlogo de Exames (Arquivo total) Atualizado em:
21 Sep 2007.
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Procedimentos para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas
Patologia Exame/
metodologia
Amostra biolgica Perodo ideal
da coleta
Acondicionamento/
volume/ temperatura de
armazenamento e transporte
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
BOTULISMO
Todo caso
suspeito deve ser
notificado e
enviado a
Ficha de
Investigao
Epidemiolgica
Sinan
Investigao da
Toxina
Botulnica por
Bioensaio em
Camundongos
inoculao
intraperitoneal
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
sangue ( soro)
para botulismo alimentar,
intestinal e por ferimento
at 8 dias aps incio
dos sintomas
volume: 10 ml de soro. Coletar
sangue em tubo sem anticoagulante,
deixar a temperatura ambiente para
retrao do cogulo, centrifugar e se
o tubo no tiver gel separador,
aliquotar o soro
manter e enviar sob refrigerao
(2 a 8C)
enviar no prazo
mximo de 24 horas
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
fezes (contedo
intestinal)
para botulismo alimentar
e intestinal
at 3 dias aps incio
dos sintomas
se houver
constipao
intestinal, as fezes
podem ser coletadas
em at 6 dias
15 g ou 15 ml da amostra em frasco
estril, com tampa rosquevel, sem
vazamento
(2 a 8C)
enviar no prazo
mximo de 24 horas
vmito (lavado gstrico)
at 3 dias aps incio
dos sintomas
Cultura
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
fezes (contedo
intestinal)
e intestinal
at 3 dias aps incio
dos sintomas
se houver
constipao
intestinal, as fezes
podem ser coletadas
em at 6 dias
15 g ou 15 ml da amostra em frasco
estril, com tampa rosquevel, sem
vazamento
(2 a 8C)
material do ferimento
para botulismo por
ferimento
antes do uso de
antibiticos
exsudato da parte mais profunda do
ferimento com swab em tubo de
ensaio vedado. Se possvel, enviar
swab em meio de tioglicolato
enviar no prazo
mximo de 30
minutos
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia
Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
BARTONELOSE
IFI - Imuno-
fluorescncia
Indireta
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
sangue (soro)
2,0 ml de soro
(2 a 8C)
at 24 h aps a
coleta, se amostra
refrigerada
aps 24 horas da
coleta, a amostra
deve ser congelada
(-20C)
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
BRUCELOSE
Reao de
soro-
aglutinao
com antgeno
bruclico
sangue (soro)
a partir da 2 semana
de incio de sintomas,
em caso de
exposio e
acompanhamento de
casos positivos aps
tratamento : 3 ms,
6 ms,12 ms, 18
ms, 24 ms
coletar sangue em tubo sem
anticoagulante com gel separador
(tampa amarela)
aguardar 30 minutos a temperatura
ambiente e aps centrifugar para
separao do soro: 3000 rpm 10
minutos
enviar no tubo original na posio
vertical ou fracionar soro para outro
tubo
transportar sob refrigerao (2 a 8C)
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
amostra centrifugada
seja mantida sob
refrigerao ( 2 a
8C)
para perodos
maiores fracionar o
soro e congelar
(-20C)
07 dias
CANCRO MOLE
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram (para
pesquisa de
Haemophilus
ducreyi)
leso genital antes do uso de
antibitico
esfregao em lmina de microscopia
nova, limpa e desengordurada
acondicionar em porta-lmina
manter e enviar temperatura
ambiente
imediatamente
(coleta no Lacen)
05 dias
CAXUMBA
Somente em caso
de surtos
Inibio por
hemaglutinao
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
sangue (soro)
1 amostra (fase aguda) -
IgM
2 amostras (1 na fase
aguda, 2 aps 15 dias) -
IgG
quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica para
esclarecimento de
surto
2,0 ml de soro
(2 a 8C)
NA
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
CPIA NO
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia
Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
CISTICERCOSE
Sorologia
ELISA
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
sangue (soro)
lquor
na suspeita clnica
2,0 ml de soro ou lquor
(2 a 8C)
NA
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
CITOMEGALO-
VRUS, pesquisa
de
Sorologia
(ELISA)
anticorpos IgM
e IgG
sangue (soro) a critrio clnico
(tampa amarela)
minutos
descartar as amostras com hemlise
ou lipemia excessivas
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
15 dias
COQUELUCHE
Cultura
para pesquisa
de Bordetella
pertussis
secreo de nasofaringe
na fase aguda da
doena
antes do incio de
antibitico ou no
mximo at 3 dias
aps o incio do
tratamento
swab alginatado, ultrafino com haste
flexvel em meio de transporte
Reagan Lowe (agar carvo com
antibitico)
ambiente
at 24h aps a coleta 17 dias
COLONIZAO
ESTREPTOCOCO
DO GRUPO B em
gestante
Cultura
para pesquisa
de S. agalactiae
secreo vaginal e
raspado anorretal
35-37 semanas de
gestao
swab em meio de transporte Amies
com carvo
ambiente
coleta no Lacen 09 dias
CPIA NO
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia
Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
CONJUNTIVITE
BACTERIANA
Somente em caso
de surtos
Cultura
para pesquisa
de:
- H. influenzae
biogrupo
aegytius,
- S.pneumoniae
- S. aureus
- S pyogenes
secreo de conjuntiva
quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica para
esclarecimento de
surto
semear a amostra com swab estril
em meio de gar chocolate inclinado
(tubo)
enviar temperatura ambiente
at 30 minutos
ou
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubada a 352C
por 24 h no local da
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio
10 dias
DENGUE
Todo caso
suspeito deve ser
notificado atravs
da ficha de
notificao
(SINAN)
Sorologia
(ELISA),
anticorpos IgM
Isolamento viral
Exame
realizado em
Laboratrio de
Referncia
sangue (soro)
sorologia:
Amostra 1
6 ao 10 dias de
incio dos sintomas
Amostra 2
11 ao 30 dia aps
incio dos sintomas
isolamento viral e
deteco do
Antgeno NS1: do 1
ao 5 dias do incio
dos sintomas (febre)
(tampa amarela)
minutos
tubo
at 48 horas aps a
coleta (se amostra
refrigerada)
para perodos
maiores, fracionar
soro e congelar
(-20C)
amostra para
isolamento viral deve
ser enviada
imediatamente aps
a coleta
07 dias
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
DIFTERIA
Cultura
para pesquisa
de
Corynebacterium
diphtheriae
secreo de orofaringe e
nasofaringe
antes do uso de
antibitico
swab ultrafino em meio de transporte
Amies com carvo para secreo de
nasofaringe
com carvo para secreo de
orofaringe
ambiente
at 24 h aps a
coleta
22 dias
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia
Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
DOENA
BACTERIANA
INVASIVA
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram
Cultura
lquidos biolgicos
estreis (lquido pleural,
peritonial e sangue de
medula ssea)
antes do uso de
antibitico
frasco estril
manter e enviar a temperatura
ambiente
30 minutos,
sendo o mximo
aceitvel em at 2
horas aps a coleta
09 dias
DOENA DE
CHAGAS
Sorologia
(ELISA)
Imuno-
fluorescncia
indireta IgG
IFI
sangue (soro) na suspeita clnica
(tampa amarela)
minutos
tubo.
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).
15 dias
Microscopia
(hemoparasito-
lgico) para
pesquisa de
Trypanosoma
cruzi
sangue total
casos agudos com
at 30 dias do incio
dos sintomas
em tubo com anticoagulante EDTA -
5 ml ( tampa roxa)
(2 a 8C)
at 72 h aps a
coleta, se amostra
refrigerada
05 dias
DOENAS
DIARRICAS
BACTERIANAS
Doena
Transmitida por
Alimentos e gua,
clera
Coprocultura
fezes in natura
no incio da diarria e
antes do uso de
antibitico
2 a 4 g em frasco coletor rgido de
boca larga e tampa rosquevel.
ambiente
at 2 hora aps a
coleta
15 dias
swab fecal ou swab retal
swab em meio de transporte Cary-
Blair
ambiente
at 72 h aps a
coleta
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia
Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
DOENAS
DIARRICAS
VIRAIS
(Rotavrus,
Astrovrus,
Norovrus)
Deteco de
Antgeno -
Rotavrus
(ELISA)
fezes lquidas
excepcionalmente
podero ser enviadas
fraldas descartveis
1 ao 4 dia do incio
dos sintomas
no mnimo 5,0 ml em frasco coletor
rgido de boca larga e tampa
rosquevel
a fralda dever ser forrada com
compressas de gaze antes da
evacuao. Esta deve ser
acondicionada inteira (com as
compressas) dentro de saco plstico
em temperatura
ambiente: at 1 hora
aps a coleta
refrigerado (2 a 8C):
at 48 h aps a
coleta
10 dias
Astrovrus
Norovrus
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
DOENA DE
LYME-SIMILE
ELISA
Western Blot
Exame realizado
em Laboratrio
de Referncia
2,0 ml de soro
(2 a 8C)
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
ERITEMA
INFECCIOSO
Deteco de
anticorpos IgM
e IgG
Anti
Parvovrus B19
(ELISA)
sangue (soro) a partir do 5 dia do
exantema
(tampa amarela)
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores, fracionar o
soro e congelar
(- 20C)
15 dias
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Manual
Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
FARINGITE
ESTREPTOCCI-
CA /
ESCARLATINA
Somente em caso
de surtos
Cultura
para S pyogenes
(estreptococo
beta- -hemoltico
do grupo A)
secreo de orofaringe
quando solicitado
pela VE para
esclarecimento de
surto
Swab em meio de transporte Amies
com carvo
ambiente
at 48h aps a coleta
10 dias
FEBRE
MACULOSA
Imuno-
fluorescncia
indireta - IFI
Exame enviado
a Laboratrio de
referncia
sangue (soro)
02 amostras coletadas
com intervalo igual ou
maior que 15 dias
a partir do 7 dia de
incio dos sintomas.
2,0 ml de soro
(2 a 8C)
at 24 h aps a
coleta se amostra
refrigerada e aps 24
horas a amostra deve
ser congelada
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
FEBRE TIFIDE
pesquisa de
Salmonella Typhi
Hemocultura
sangue total
2 a 3 amostras com
intervalo de 15 a 20
minutos entre as coletas
at a 2 semana da
doena
sangue em meio de cultura lquido
caldo TSB ou BHI
1 ml no frasco peditrico ou 5 ml no
frasco de adulto
transportar temperatura ambiente
at 6 horas OU
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubada a 352C
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio
12 dias
Coprocultura
3 amostras com intervalo
de 3 dias cada uma
a partir da 2 at a 5
semana da doena
Blair
ambiente
at 72 horas aps a
coleta
2 a 4 g em frasco coletor de boca
larga e tampa rosquevel
ambiente
at 2 horas aps a
coleta fezes in natura
CPIA NO
CONTROLADA
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
GRIPE -
Deteco do vrus
INFLUENZA A
(engloba tambm
H1N1pandmico
2009)
Reao em
cadeia da
polimerase
RT - PCR
em tempo real
swab combinado:
2 swab de secreo com
clulas da parede
posterior nasal das 2
narinas e 1 de orofaringe
aspirado de secreo
de nasofaringe:
coletado com frasco
coletor acoplado a bomba
aspiradora
lavado bronco alveolar
at o 3 dia do incio
dos sintomas e
eventualmente at o
7 dia
preferencialmente
antes do uso de
antiviral
os 3 swab so inseridos no mesmo
tubo contendo meio de transporte
viral (fornecido pelo Lacen)
em caso de aspirado SNF: o meio de
transporte aspirado para dentro do
frasco coletor e este encaminhado
ao Lacen
lavado bronco alveolar
coleta em hospital , no mnimo 2 ml
em meio de tranporte viral
(NO CONGELAR)
at 24 horas aps a
coleta
05 dias
GRIPE
VIROSES
RESPIRATRIAS
Programa
sentinela de
Influenza
S para regio da
grande
Florianpolis
Pesquisa do
antgeno por
IFI Indireta
Vrus Influenza
A e B
Virus
Parainfluenza
1, 2,3
Adenovrus
Vrus Sincicial
Respiratrio
swab combinado:
2 swab de secreo com
clulas da parede
narinas e 1 de orofaringe
aspirado de secreo
de nasofaringe: coletado
com frasco coletor
acoplado a bomba
aspiradora
na fase aguda, at o
5 dia do incio dos
sintomas clnicos
os 3 swab so inseridos no mesmo
tubo contendo meio de transporte
viral (fornecido pelo Lacen)
em caso de aspirado SNF: o meio de
transporte aspirado para dentro do
frasco coletor e este encaminhado
ao Lacen
(NO CONGELAR)
at 24 horas aps a
coleta
07 dias
CPIA NO
CONTROLADA
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
GONORRIA
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram
Cultura
para pesquisa
de Neisseria
gonorrhoeae
secreo uretral,
endocervical, anal e
orofarngea
(excepcionalmente
vaginal)
antes do uso de
antibitico
nova, limpa e desengordurada,
acondicionada em porta-lmina
swab estril alginatado em meio de
transporte Amies com carvo
ambiente
imediatamente
(coleta no Lacen)
12 dias
1 jato urinrio
frasco coletor estril, de boca larga e
tampa rosquevel
ambiente
HANSENASE
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Ziehl-Neelsen
para pesquisa
de BAAR
raspado intradrmico
na suspeita clnica
esfregao padronizado em lmina
de microscopia nova, limpa e
desengordurada
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
07 dias
HANTAVIROSE
ELISA -
IgM e IgG
Exame enviado
a Laboratrio de
referncia
sangue total
soro ou plasma
na suspeita clnica
* casos bitos ver
condies
especficas do
manual
sangue total 6 ml
soro ou plasma no mnimo 3 ml
(2 a 8C)
manter sob refrigerao (2 a 8C)
por, no mximo, 24horas, aps este
perodo congelar (-20 C)
imediatamente ou
at 24 horas aps a
coleta
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
HEPATITE VIRAL
(tipo A - HAV)
Marcadores
sorolgicos
anti-HAV Total
anti-HAV IgM
sangue (soro)
na suspeita clnica
coletar sangue em tubo 5 ml sem
(tampa amarela)
ambiente para retrao do cogulo
centrifugar para separao do soro a
3000 rpm 10 minutos
ou lipemia
vertical
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)
10 dias
HEPATITE VIRAL
(tipo B - HBV)
Marcadores
sorolgicos
Imunoensaio
HBsAg
HBeAg
Anti-HBs
Anti-HBc IgM
Anti-HBc Total
Anti - HBe
sangue (soro)
na suspeita clnica
e/ou monitoramento
(tampa amarela)
3000 rpm 10 minutos
ou lipemia
vertical
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)
10 dias
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
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Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
HEPATITE VIRAL
(tipo B - HBV)
HBV (DNA
Quantitativo)
PCR em Tempo
Real
Enviar BPA- I
Quantificao de
cido Nuclico
Carga Viral HBV
sangue total (plasma)
na indicao ou
monitoramento do
tratamento
para cada paciente coletar 2 tubos
de 5 ml com EDTA (tampa roxa)
transportar as amostra sem contato
direto com o gelo reciclvel (2 a 8C)
na impossibilidade da amostra
chegar ao Lacen em at 20 horas, as
mesmas devero ser centrifugadas a
3.000 rpm - 10 minutos
separar o plasma em 2 criotubos
estreis e com tampa de rosca,
utilizando ponteira estril e com filtro,
acondicionar 2,0 ml de plasma para
cada criotubo
aps separao, os criotubos
devero ser refrigerados (2 a 8C)
at o envio
enviar as amostras com gelo
reciclvel (2 a 8C)
nunca congelar a amostra
sangue total:
dever ser enviado
ao Lacen at 20
horas aps a coleta
plasma:
dever ser enviado
no mximo 5 dias
aps a coleta
at 5 feira de cada
semana.
30 dias
HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)
Anti-HCV
Imunoensaio
sangue (soro)
na suspeita clnica
e/ou monitoramento
5 ml de sangue em tubo sem
(tampa amarela)
3000 rpm 10 minutos
ou lipemia
vertical
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)
10 dias
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)

HCV (RNA
quantitativo)
PCR em Tempo
Real
Enviar BPA - I
Quantificao do
RNA do vrus da
Hepatite C
sangue (soro ) na suspeita clnica
e/ou monitoramento
5 ml sangue em tubo sem
No utilizar tubo com heparina
aps a coleta, aguardar a retrao
do cogulo por 3 minutos
3000 rpm 10 minutos
ou lipemia
as amostras no devero ser
manuseadas ou aliquotadas
reciclvel (2 a 8C)
encaminhar no prazo
mximo de 72 horas.
At o envio conservar
entre 2 a 8C
at 5 feira de cada
semana.
.
30 dias
HEPATITE VIRAL
(tipo C- HCV)
Genotipagem
do HCV
Enviar BPA - I
Genotipagem do
Vrus da Hep. C
sangue (soro ) indicao de
tratamento
5 ml sangue em tubo sem
No utilizar tubo com heparina
aps a coleta, aguardar a retrao
do cogulo por 3 minutos
3000 rpm 10 minutos
ou lipemia
as amostras no devero ser
manuseadas ou aliquotadas
reciclvel (2 a 8C)
encaminhar no prazo
mximo de 72 horas.
At o envio conservar
entre 2 a 8C
at 5 feira de cada
semana.
30 dias
(exame
realizado em
laboratrio de
apoio)
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
HIV 1 e 2
Diagnstico da
infeco por
Sorologia
(Imunoensaio)
Imunoblot
Rpido
Western blot
(deteco de
anticorpos)
sangue (soro) a critrio clnico
(tampa amarela)
centrifugar para separao do soro
a 3000 rpm 10 minutos
descartar as amostras com
hemlise ou lipemia
vertical
transportar sob refrigerao
(2 a 8C)
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores (mximo 30
dias) congelar
(-20C)
15 dias
HIV - 1
Monitoramento da
infeco por
Teste de
Quantificao
de Carga Viral
do HIV -1
Genotipagem
do HIV -1
Enviar BPA- I
Quantificao de
cido Nuclico
Carga Viral do
HIV
sangue total ou plasma na indicao ou
monitoramento de
tratamento
sangue total: 2 tubos de 5 ml com
EDTA K
2
ou K
3
- tampa roxa
SEM GEL SEPARADOR
em crianas pode ser utilizado tubo
peditrico
plasma: obter o plasma por
centrifugao e acondicionar em 2
criotubos livre de RNAse e DNAse
(1000 a 1200 ul em cada criotubo)
manter amostras refrigeradas at o
momento do envio
*os criotubos e ponteiras com filtro so
fornecidos pelo Lacen
sangue total:
em temperatura
ambiente (22 a 25C)
por no mximo 6
horas
sob refrigerao
(2 a 8C):
mximo em 24 horas
aps a coleta
plasma:
em temperatura
ambiente (22 a 25C)
por no mximo 6
horas
sob refrigerao
(2 a 8C):
mximo em 5 dias
aps a coleta
20 dias
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
HIV
Monitoramento da
infeco por
Contagem de
Linfcitos T
CD4+/CD8+/
CD45+
Citometria de
fluxo
Enviar BPA- I
especfico
sangue total a critrio clnico
coletar cada amostra em 1 tubo de
coleta de 5ml com anticoagulante
EDTA K
2
ou K
3
e identific-las com
nome completo
caso necessrio, pode ser coletado
em tubo peditrico (EDTA K
2
ou K
3
)
a amostra deve permanecer no tubo
original de coleta, em temperatura
ambiente (20 a 25C) durante
no refrigerar
viabilidade da amostra para incio do
exame: 48 horas aps coleta
prazo mximo de
40 horas aps a
coleta
as amostras sero
recebidas no Lacen
de 2 a 5 feira
15 dias
INFECO
BACTERIANA DE
PELE / OUVIDO /
BIPSIA
Somente em caso
de surtos
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram
Cultura
leso aberta / abcesso
fechado / secreo de
ouvido externo quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica p/
esclarecimento de
surto
swab estril em meio de transporte
Amies com carvo
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
10 dias
bipsia
frasco estril com soluo fisiolgica
(sem formol)
temperatura ambiente
at 2 horas aps a
coleta
CPIA NO
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Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
INFECO DO
TRATO
URINRIO (ITU)
Cultura
quantitativa
urina (jato mdio) antes do uso de
antibitico
cerca de 30 ml em frasco coletor
estril de boca larga, transparente,
tampa rosquevel
temperatura ambiente: at 30
minutos aps a coleta
conservar sob refrigerao (2 a 8C):
at 2 horas
coleta no Lacen 07 dias
KPC
Pesquisa de
K. pneumoniae
carbapenemase
Somente cepas
hospitalares
Cultura
PCR
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
cepa bacteriana isolada NA
semeadura da cepa pura no meio de
agar nutriente inclinado, em tubo
com tampa rosquevel
cepa bacteriana incubada a 352C
por 24 h no local do isolamento
aps incubao, manter e enviar
at 48 horas (24 h de
incubao + 24 h
para transportar)
Sem previso
Enviado para
Centro
Colaborador
LEISHMANIOSE
TEGUMENTAR
AMERICANA
Microscopia
(parasitolgico
de leso)
raspado de leso in print
na suspeita clnica
com exame de
Montenegro positivo
em lmina de microscopia nova
ambiente
at 72 horas aps a
coleta
12 dias
Histopatologia
e PCR
Exames
realizados em
laboratrio de
referencia
aspirado de leso
bipsia em lcool
bipsia em formol
bipsia: enviar em frasco vedado, em
aspirado de leso: manter e enviar
sob refrigerao.
at 72 horas aps a
coleta
CPIA NO
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
LEISHMANIOSE
VISCERAL
HUMANA (LVH)
Imuno-
cromatografia
Imuno
fluorescncia
indireta
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
(tampa amarela)
minutos
tubo
armazenar e transportar sob
refrigerao (2 a 8C) ou congelar
para perodos maiores que 5 dias
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
03 dias
LEISHMANIOSE
VISCERAL
CANINA (LVC)
Sorologia
(ELISA)
Imuno-
cromatografia
de duplo
percurso
(tampa amarela)
minutos
tubo
armazenar e transportar sob
refrigerao (2 a 8C) ou congelar
para perodos maiores que 5 dias
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)

20 dias
CPIA NO
CONTROLADA
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
LEPTOSPIROSE
Sorologia
(ELISA) IgM
Micro-
aglutinao
sangue (soro) a partir do 7 dia
aps o incio dos
sintomas
(tampa amarela)
minutos
tubo
(2 a 8C) ou congelar para perodos
maiores que 5 dias
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao
(2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
09 dias
PCR
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
sangue total
at o 6 dia do incio
dos sintomas
para esclarecimento
de bito
5 ml em tubo com EDTA
(2 a 8C)
at 72 horas aps a
coleta, sob
refrigerao (2 a 8C)
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
LEVEDUROSES
Infeco hospitalar
ou resistncia ao
tratamento
Identificao de
leveduras
Teste de
Sensibilidade a
Antifngicos
(TSAF)
cepa de levedura isolada NA
cepa semeada em meio de cultura
agar Sabouraud
incubar a cepa de levedura isolada
entre 25 a 30C por 48 horas
imediatamente aps
a incubao (repique
de 24 a 48h)
22 dias
CPIA NO
CONTROLADA
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
MALRIA
Microscopia
Hemo-
parasitolgico
para pesquisa
de Plasmodium
spp
sangue total
na fase aguda, a
partir do 1 dia do
incio dos sintomas
5 ml em tubo com anticoagulante
EDTA
(2 a 8C)
imediatamente 04 dias
MANIPULADOR
DE ALIMENTOS,
pesquisa de
portador
Somente em caso
de surtos de
infeco alimentar
Cultura
(p/ S. aureus)
secreo de nasofaringe
quando solicitado
pela VE para
esclarecimento de
surto
com carvo
ambiente
at 48h aps a coleta 09 dias
Cultura de
fezes
(coprocultura)
fezes in natura
antes do uso de
antibitico
2 a 4 g em frasco coletor rgido de
boca larga e tampa rosquevel
ambiente
at 2 hora aps a
coleta
12 dias
Blair
ambiente
at 72 h aps a
coleta
MONONUCLEOSE
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
(tampa amarela)
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao
( 2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(- 20C)
Sem previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
CPIA NO
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
MENINGITE
BACTERIANA
Microscopia
aps colorao
pelo mtodo de
Gram
lquor
antes do uso de
antibitico
esfregao em lmina, do lquor
centrifugado recm puncionado (at
2 horas da coleta)
manter e transportar temperatura
ambiente
at 48 horas aps a
coleta (acompanha o
kit de meningite)
12 dias
Cultura
lquor
gotejar 5 a 10 gotas de lquor no
meio de agar chocolate inclinado
incubarr o meio de agar chocolate
semeado a 352C por 18 a 24
horas logo aps a coleta
transportar o meio de agar chocolate
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubado a 352C
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo
somente lquor in natura (3 a 5 ml)
ambiente
at 2 horas aps a
coleta
sangue
caldo TSB ou BHI
frasco de adulto
incubar o meio lquido a 352C por
18 a 24 horas logo aps a coleta
at 30 minutos OU
at 48 horas aps a
coleta, quando
incubado a 352C
coleta. Encaminhar
imediatamente aps
esse perodo.
Informar esse dado
na requisio
Pesquisa de
antgenos
bacterianos
PCR RT
lquor e sangue (soro) NA
3 a 5 ml de lquor e soro em frascos
estreis
manter congelado (-20C) e
(2 a 8C)
at 48 horas aps a
coleta (acompanha o
kit de meningite)
CPIA NO
CONTROLADA
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
MICOSES
SUPERFICIAIS
Microscopia:
exame direto
Microscopia
aps colorao
pelos mtodos
de Giemsa e/ou
Grocott
Cultura
pele, couro cabeludo,
unha, cabelo, plo e,
mucosa oral
antes do uso de
antifngicos
em placa de Petri estril, placas
descartveis de coleta ou em sacos
plsticos pequenos e nunca
utilizados
ambiente
a amostra
permanece vivel por
muito tempo
30 dias
secreo de ouvido, olho,
pus, abscesso, leso de
nariz e seios paranasais
e mucosa de orofaringe
amostra em frasco estril ou swab
umedecido em salina estril
ambiente at 24 horas aps a
coleta
CPIA NO
CONTROLADA
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Manual
Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
MICOSES
SISTMICAS
Microscopia:
exame direto
Microscopia
aps colorao
pelos mtodos
de Giemsa e/ou
Grocott
Cultura
Imunodifuso
dupla (IDD)
Pesquisa de
antgenos
(prova de
aglutinao em
ltex)
escarro
antes do uso de
antifngicos
em pote de boca larga, transparente,
estril, descartvel, com tampa
rosquevel
manter e transportar sob refrigerao
(2 a 8C)
at 24 horas aps a
coleta
30 dias
tecido obtido por bipsia,
necropsia e pea
operatria
em frasco estril com salina
(no utilizar formol)
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
lquor, lavado ou aspirado
brnquico, lavado
gstrico, lquidos
corporais (pleural,
abdominal, sinovial)
em frasco estril
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
aspirado de medula
ssea
em frasco estril contendo 0,5 ml de
heparina diluda 1:1000
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
sangue
(2 a 3 amostras com
intervalo de 15 a 20
minutos entre as coletas)
caldo TSB ou BHI
frasco de adulto
at 30 minutos aps
a coleta
ou
48 horas aps a
coleta quando
incubado a 35C2C
coleta
sangue (soro)
5 ml em tubo seco
(2 a 8C)
at 48 horas aps a
coleta
CPIA NO
CONTROLADA
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
OFTALMIA
GONOCCICA
Cultura
p/ pesquisa de
N.gonorrhoeae
secreo da conjuntiva
na suspeita clnica,
antes do uso de
antibitico
swab alginatado em meio de
transporte Amies com carvo
ambiente
at 8 horas aps a
coleta
12 dias
PARALISIA
FLCIDA AGUDA
PFA
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
fezes in natura
at 14 dias aps
incio da deficincia
motora
4 a 8 g de fezes em frasco coletor
rgido de boca larga e tampa
rosquevel.
(2 a 8C)
at 3 dias aps a
coleta
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
PNEUMONIA
BACTERIANA
Cultura
lavado brnquico, lavado
bronco-alveolar, escarro
antes do uso de
antibitico
frasco coletor estril rgido de boca
larga e tampa rosquevel
manter temperatura ambiente
(17 a 27C) ou sob refrigerao
(2 a 8C) conforme tempo de
armazenamento
se temperatura
ambiente: at 2 horas
aps a coleta
se conservada sob
refrigerao
at 12 horas aps a
coleta
12 dias
sangue total
caldo BHI ou TSB
frasco de adulto
at 30 minutos OU
48 horas aps a
coleta, quando
incubado a 351C
por 18-24h no local
da coleta
RAIVA
Pesquisa de ttulos
protetores para
raiva
Titulao de
anticorpos
neutralizantes
Exame realizado
em laboratrio
de referencia
sangue (soro)
10 a 14 dias aps a
ltima dose da
vacinao ou aps a
administrao de
dose de reforo
2,0 ml de soro
(2 a 8C)..
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao
( 2 a 8C)
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
CPIA NO
CONTROLADA
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
RAIVA HUMANA
IFD
PCR
Exames
realizados em
laboratrio de
referencia
raspado de mucosa
lingual, bipsia de pele
da regio cervical
na suspeita clnica, o
mais precocemente
possvel
swab estril de raspado de mucosa
lingual acondicionado em tubo
fechado em temperatura ambiente
bipsia de pele da regio cervical
acondicionada em frasco estril,
manter e enviar congelada ( -20C)
imediatamente aps
a coleta
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
RUBOLA
Deteco de
anticorpos
IgM e IgG
Para isolamento
viral, seguir
mesmas
orientaes do
sarampo
(tampa amarela)
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).
07 dias
SARAMPO
Deteco de
anticorpos IgM e
IgG
ELISA
sangue (soro) aconselhvel a
coleta no 1 at 28
dia do exantema
(tampa amarela)
separao do soro a 3000 rpm 10
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
07 dias
CPIA NO
CONTROLADA
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Seo: 03
Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
SARAMPO/
RUBOLA
Isolamento Viral
Exame
encaminhado
para laboratrio
de referncia
secreo de naso
faringe (SNF)
swab combinado:
2 swab de secreo
com clulas da parede
narinas e 1 de
orofaringe
urina
at o 5 dia do incio
do exantema.
coletar 3 amostras de SNF e colocar
em meio de transporte viral fornecido
pelo Lacen (as 3 amostras coletadas
so colocadas em um nico tubo)
urina preferencialmente a primeira
da manh

NO CONGELAR
at 24 horas aps a
coleta
Sem
Previso
Enviado para
Laboratrio
de
Referncia
SFILIS
Microscopia em
campo escuro
leso genital na suspeita clnica
coletar da leso e depositar entre
lmina e lamnula
imediatamente
(coleta no Lacen)
07 dias Microscopia aps
colorao pelo
mtodo Fontana -
Tribondeau
nova e desengordurada
ambiente
Teste No
Treponmico
(triagem)
VDRL
RPR
Testes
Treponmicos
(confirmatrio)
ELISA
FTA Abs

(tampa amarela)
separao do soro a 3000 rpm 10
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C).
10 dias
CPIA NO
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
TRACOMA
Somente em caso
de surtos
Imuno
Fluorescncia
Direta IFD
para pesquisa
de Chlamydia
trachomatis
raspado da conjuntiva
quando solicitado
pela Vigilncia
Epidemiolgica p/
esclarecimento de
surto
esfregao em lmina padronizada p/
IFD, embalada em papel alumnio
se conservada
temperatura
ambiente: at 8 horas
aps a coleta
se conservada sob
refrigerao
(2 a 8C): at 72
horas aps a coleta
15 dias
TOXOPLASMOSE
Deteco de
anticorpos IgM e
IgG
- ELISA.
Deteco de
Anticorpos IgM
- ELFA.
sangue (soro na suspeita clnica
(tampa amarela)
minutos
tubo
at 5 dias aps a
coleta, desde que a
seja mantida sob
refrigerao (2 a 8C)
para perodos
maiores fracionar
soro e congelar
(-20C)
15 dias
Teste de
Avidez
a critrio clnico, em
caso de gestante
com sorologia IgM
reagente
15 dias
CPIA NO
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
TUBERCULOSE
Pesquisa de
BAAR
(Baciloscopia)
Cultura
Teste de
Sensibilidade
escarro
NA
5 a 10 ml em frasco rgido,
transparente, de boca larga, tampa
rosquevel, descartvel
manter e transportar sob
refrigerao (2 a 8C)
at 7 dias aps a
coleta
Baciloscopia:
05 dias
Cultura
convencional:
at 65 dias
Cultura
automatizada
at 45 dias
Teste de
sensibilidade
Convencional:
at 50 dias
aps resultado
da cultura
Teste de
sensibilidade
automatizado:
at 20 dias
aps resultado
da cultura
aspirado brnquico,
lavado brnquico,
escovado brnquico,
lavado bronco-alveolar
em frasco estril
manter e transportar sob
refrigerao (2 a 8C)
at 24 horas aps a
coleta
lquor,lquido pleural,
asctico, sinovial,
pericrdico, peritoneal
em frasco estril
ambiente e ao abrigo da luz
lavado gstrico
(paciente deve estar em
jejum de 8 a 10 horas)
40 ml em pote rgido, estril, de
boca larga, tampa rosquevel,
descartvel
(2 a 8C)
at 4 horas aps a
coleta
urina
40 ml em pote rgido, estril, de
boca larga, tampa rosquevel,
descartvel
(2 a 8C)
CPIA NO
CONTROLADA
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
TUBERCULOSE
Pesquisa de
BAAR
Baciloscopia
Cultura
Teste de
Sensibilidade
sangue, aspirado de
medula ssea
NA
5 ml em tubo com anticoagulante
SPS ou heparina ou em frasco de
hemocultura
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
os mesmos
prazos da
pgina
anterior
pus ou secrees de
cavidades
de cavidade fechada: por puno
frasco estril
de cavidade aberta: com swab
imerso em gua destilada ou
salina
ambiente
fragmentos cutneos,
sseos e rgos (bipsia)
de cavidade fechada: por puno
frasco estril
de cavidade aberta: com swab
imerso em gua destilada ou
salina
ambiente
at 24 horas aps a
coleta
cepa para identificao e
teste de sensibilidade
tubo com meio de cultura, vedado
com tampa rosquevel
ambiente
NA Teste de
sensibilidade
automatizado:
at 20 dias
CPIA NO
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Requisito: 7.5
Patologia Exame/
metodologia
da coleta
Acondicionamento/
Tempo crtico p/
chegada no Lacen
Prazo
mximo de
liberao do
exame
URETRITE E
CERVICITE NO
GONOCCICA
Cultura para
Ureaplasma e
Micoplasma
genitais
raspado uretral e raspado
endocervical
antes do uso de
antibitico
frasco c/ caldo nutritivo
ambiente
coleta no Lacen
09 dias
Imunofluores-
cncia Direta
IFD para
pesquisa de
Chlamydia
trachomatis
esfregao em lmina padronizada p/
IFD, embalada em papel alumnio
ambiente
12 dias
VAGINITE E
VAGINOSE
BACTERIANA
Microscopia
a fresco e aps
colorao pelo
mtodo de
Gram

Cultura
secreo vaginal
antes do uso de
antibitico
swab estril, em tubo com 1,0 ml
de salina estril para exame
fresco
esfregao em lmina de
microscopia nova (confeccionar o
esfregao no momento da coleta)
swab em meio de transporte de
Amies com carvo
ambiente
coleta no Lacen
09 dias
NA No se aplica
CPIA NO
CONTROLADA
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FOR RD 4.3 - 03
Edio/Reviso
01/04
Arquivo eletrnico
POP RD 4.3.pdf
Pgina
1/1
Manual
Seo: 02
Requisito: 4.3
Controle de alterao de documentos
O campo de identificao da edio/reviso refere-se ao documento que est sendo revisado.
Codificao: MCT 01 Edio/Reviso: 01/02
Documento: Manual de orientao para coleta, acondicionamento e transporte de amostras biolgicas
Alterado por: Marlei Pickler Debiasi dos Anjos
Rita de Cssia Campos Bertoncini
Data: 15/10/2012
HISTRICO DE MUDANAS
N do Captulo N da Pgina Sntese da Mudana
Todo o
documento
todas
Nova edio.
Todo o procedimento foi alterado em funo de atualizaes referentes s
constantes mudanas de procedimentos de coleta, armazenamento e
transporte de amostras biolgicas.
Incluso das amostras enviadas para Laboratrios de Referncia e Apoio
Anexo A 01
Incluso de DOC MCT 01 - 01 onde so ordenadas alfabeticamente as
patologias com informaes de exame realizado, amostra biolgica, perodo
ideal de coleta, acondicionamento, volume, tempo de armazenamento e
transporte, tempo crtico para chegada ao Lacen e prazo mximo para
liberao de exames.
Anlise crtica de documento no alterado
Este documento foi analisado criticamente e no houve necessidade de alteraes, ele
continua vigente.
NO SE APLICA
________________________________
Data/Assinatura do revisor
CPIA NO
CONTROLADA

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Estado de Santa Catarina

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