Origens e sntese do Acetil-CoA

O Acetil-CoA, componente fundamental

e transversal no metabolismo dos seres vivos, formase a partir do catabolismo das trs biomolculas
principais a nvel energtico.
A partir dos acares (graas ao
intermedirio
piruvato),
por
descarboxilao
oxidativa; a partir dos lpidos que se decompem em
cidos gordos livres, por Beta-oxidao (no ser
aprofundado este mecanismo visto ter sido abordado
anteriormente); a partir das protenas, por
desaminao oxidativa dos aminocidos cetognicos
(entre outros).
Figura 1: Origens e sntese do Acetil-CoA

O mecanismo da descarboxilao oxidativa

realizado sequencialmente, na matriz mitocondrial, por
aco
do
complexo
multienzimtico
Piruvato
Desidrogense (PDH). Este composto: pelas enzimas
Figura 2: Formao de Acetil-CoA atravs do
E1 Desidrogenase Pirvica (grupo prosttico TPP), E2
piruvato
Dihidrolipolitranscetilase
(g.p.
Lipoamida)
e
E3Dihidropolidesidrogenase (g.p. FAD); e pelas coenzimas
Tiamina pirofosfato (TPP), Lipoamida, CoA, FAD, NAD +.
Como se pode constatar pelo valor da energia livre de Gibbs, esta reaco fortemente exergnica,
levando a que no seja reversvel.

Catabolismo dos aminocidos

cetognicos
Os aminocidos cetognicos, por
desaminao oxidativa, podem originar Acetil-CoA e
Acetoacetil-CoA (origina Acetil-CoA por ciso tioltica como
se constata na Fig.3). Observamos na Fig.4 os aminocidos
que geram Acetil-CoA e Acetoacetil-CoA.

Figura 3: Converso Acetoacetil-CoAAcetil-CoA

Aminocidos que formam s Acetoacetil-CoA

A partir da Tirosina, por transaminao, obtm-se para-hidroxifenilpiruvato que
degradado em Fumaril-acetoacetato, que de seguida hidrolisado em Acetoacetato que se degrada em
Acetoacetil-CoA.
Atravs da Fenilalanina, possvel obter Tirosina, que se degrada em AcetoacetilCoA.
Aminocidos que formam Acetoacetil-CoA e Acetil-CoA
A partir da Leucina, por perda dos grupos -amina em reaces de
transaminao, formam-se -cetocidos ramificados que, por ciso tioltica, formam
Acil-CoA. Este d origem a Acetil-CoA e Acetoacetato que se decompe em
Acetoacetil-CoA.
O Triptofano, gera 3-hidroxiantranilato que se degrada em Acetil-CoA.
Por outro lado, o Triptofano degrada-se em Glutanil-CoA que se degrada em
Acetoacetil-CoA.
Figura 4:
Aminocidos
cetognicos

Aminocidos que formam s Acetil-CoA

A partir da Isoleucina, por perda dos grupos -amina em reaces de
transaminao, formam-se -cetocidos ramificados que, por ciso tioltica, formam
acetil-CoA.
A partir da Treonina, por aco da treonina desidrogenase, forma-se o 2-amino-3-cetobutirato, que por

aco de uma ligase gera Acetil-CoA

Ciclo de Krebs Etapas e intervenientes

O ciclo de Krebs vai aproveitar o catabolismo das principais biomolculas para a obteno de energia.
um ciclo anfiblico que se realiza na matriz mitocondrial pois ai que se encontram as principais fontes do seu
substrato Acetil-CoA. O seu objectivo primrio a oxidao completa de Acetil-CoA em CO 2 resultando na
formao de equivalentes redutores atravs de 8 reaces sequenciais.

Anlise sequencial do ciclo de Krebs:

1 reaco: o Acetil-CoA entra no ciclo e
reage com oxaloacetato atravs dos carbono
metilo e do grupo carbonilo respectivamente,
por aco da citrato sintase. Esta enzima
constituda por 2 domnios diferentes, sendo
um grande e rgido e o outro mais pequeno e
flexvel. O oxaloacetato, induz uma alterao
na conformao da parte mais pequena
permitindo ligar a Acetil.CoA, formando-se um
composto intermdio bastante energtico
(citroil-CoA) que rapidamente se transforma
em citrato pela libertao da coenzimaA,
devido a uma nova alterao conformacional
da enzima.
2 reaco: o citrato, por aco da enzima
aconitase transforma-se em isocitrato. A
reaco envolve a formao de um
intermedirio, o cis-aconitato, que se obtm
por desidratao do citrato. Posteriormente,
forma-se isocitrato, por hidratao do cisaconitato atravs da reaco com a mesma
aconitase. Assim o citrato e o isocitrato so
ismeros de posio. A reaco de formao
do cis-aconitato endergnica, logo a
formao de citrato por este, exergnica
(tem tendncia para se dar). No entanto, o
Figura 5: Ciclo de Krebs- etapas e intervenientes
isocitrato est em baixa concentrao na
clula pois consumido rapidamente no prximo passo do ciclo. A aconitase consegue assim captar H 20, sendo
no entanto necessrio a presena Fe2+ ( co-factor).
3 reaco: a formao de -cetoglutarato por descarboxilao oxidativa, implica um conjunto de 3 reaces que
se iniciam por desidrogenao do isocitrato por aco da isocitrato desidrogenase na presena de NAD + (que se
reduz a NADH), formando assim oxalosuccinato. Depois o Mn 2+ liga-se ao grupo carbonilo deste composto,
estabilizando o enol e provocando a libertao de CO 2. Na ltima reaco, d-se uma hidrogenao, com
rearranjo do hbrido de ressonncia.
4 reaco: na formao de succinill-CoA por descarboxilao oxidativa do -cetoglutarato liberta-se novamente
NADH. Esta reaco catalizada pelo complexo multienzimtico -cetoglutarato desidrogenase (-cetoglutarato,
dihidrolipoil transsuccinilase e dihidrolipoil desidrogenase), na presena de coenzimas e grupos proestticos
(tiamina pirofosfato, cido lipico, CoA, FAD e NAD +), activada pelo Ca2+. Esta reaco altamente exergnica
devido energia armazenada na ligao S-CoA. A -cetoglutarato desidrogenase idntica em estrutura e
funo ao PDH.
5 reaco: A succinil-CoA sintetase (constituda por 2 subunidades: alfa e beta) converte o succinil-CoA em
succinato, quebrando a ligao tiol-ster (S-CoA). A parte alfa liga-se ao CoA e a parte beta tem especificidade

para se ligar ao GDP (ADP). Da quebra da ligao tiol-ster resulta uma grande libertao de energia que
utilizada para converter GDP em GTP (na presena do nuclesido difosfato cinase).
6 reaco: o succinato oxidado a fumarato pela aco da succinato desidrogenase. Esta enzima faz parte do
complexo II da cadeia respiratria, estando intimamente ligada membrana mitocondrial interna (esta a nica
enzima do ciclo que no se localiza na matriz mitocondrial). O FAD liga-se covalentemente a esta enzima
reduzindo-se nesta reaco a FADH 2 pois capta os electres libertados pelo succinato. Aps esta reaco de
reduo, os electres so encaminhados para a quinona sendo utilizados para a formao de ATP atravs de
fosforilao oxidativa.
7 reaco: o fumarato hidratado a malato (mais concretamente L-malato) pela enzima fumarase. uma
reaco reversvel em condies fisiolgicas.
8 reaco: a formao de oxaloacetato catalizada pela enzima malato desidrogenase na presena de NAD +,
dando-se a formao de NADH. Esta reaco endergnica no sentido directo, no entanto a baixa concentrao
de oxaloacetato na clula- devido entrada num novo ciclo; e a oxidao de NADH a NAD + pela respirao
mitocondrial obrigam a reaco a progredir no sentido da formao de oxaloacetato.

Caractersticas energticas do ciclo de Krebs

No fim de um ciclo de Krebs completo, que se d segundo a seguinte equao qumica:

possvel obter o seguinte rendimento energtico: 3 molculas de NADH, uma molcula de FADH 2 e uma
molcula de GTP/ATP.
Em termos energticos as molculas de ATP e de GTP so semelhantes e, como tal, a nica razo para
a produo de uma ou de outra no ciclo de Krebs relaciona-se apenas com o tecido onde o ciclo se d, ou seja,
com a afinidade de cada tecido para cada uma das molculas.
Embora em cada ciclo apenas seja produzida uma molcula de GTP/ATP, o rendimento global vai ser
muito superior, pois as 4 molculas reduzidas nas diferentes etapas oxidativas do ciclo de Krebs (NADH e
FADH2) so depois transportadas para a
cadeia
respiratria
onde
atravs
de
fosforilao oxidativa iro gerar mais ATP.

Caractersticas anfiblicas do ciclo

de Krebs

Figura 6: Caractersticas anfiblicas do ciclo de Krebs

Uma das caractersticas do

ciclo de Krebs est relacionada com o facto
de este ser um ciclo anfiblico, ou seja, tem a
capacidade de participar em reaces de
catabolismo e de anabolismo. Por um lado
participa, tal como foi visto anteriormente, no
catabolismo de aminocidos, cidos gordos e
oses, que servem como percursores de vrios
intermedirios do ciclo.
Por outro lado, em caso de
necessidade, alguns intermedirios do ciclo

tambm podem servir como percursores na biossntese de determinados compostos, como se pode observar na
imagem 6. Alguns exemplos importantes so os casos do oxaloacetato e do alpha-cetoglutarato que por
transaminao do origem respectivamente ao aspartato e ao glutamato, que por sua vez so percursores de
outros aminocidos e de bases azotadas. O succinil-CoA tambm tem um papel muito importante, ao ser um
percursor das porfirinas, constituintes do grupo heme.
Todavia, para que um ciclo decorra normalmente necessrio que as concentraes dos vrios
intermedirios se mantenham mais ou menos constantes, e como tal torna-se necessrio repor um dos
intermedirios de cada vez que este sai do ciclo para originar outro composto. Para que isso seja possvel
ocorrem as chamadas reaces anaplerticas, que permitem uma renovao eficiente dos intermedirios em
caso de necessidade. Estas reaces permitem regenerar as concentraes de malato e oxaloacetato a partir do
piruvato e do fosfoenolpiruvato.

Formas de regulao do ciclo de Krebs

A regulao do ciclo de Krebs feita em todas as etapas devido concentrao dos substratos e dos
produtos. Contudo, importante referir o papel que tm as etapas
mais exergnicas (sntese do citrato, descarboxilao do isocitrato e
descarboxilao do alpha-cetoglutarato) nessa mesma regulao,
visto serem consideradas as etapas limitantes do ciclo. Torna-se
necessrio existir um controlo mais eficaz destas etapas, pois
devido s suas caractersticas exergnicas so as que tm mais
tendncia para se dar.
As enzimas participantes nestas 3 etapas so reguladas de
forma alostrica por aco de vrios compostos.
Tambm se deve referir o papel da regulao da converso
do piruvato em Acetil-CoA que, embora no faa parte do ciclo,
influencia o funcionamento deste atravs do controlo da quantidade
de Acetil-CoA que reage com o oxaloacetato. A regulao desta
converso feita de forma alostrica e covalente.
importante referir a regulao covalente do complexo PDH
visto esta ser semelhante do complexo alpha-cetoglutarato
desidrogenase (os dois so estruturalmente semelhantes). Na
Figura 7: Formas
presena de uma grande concentrao de ATP, a enzima E 1 do
de regulao do
complexo sofre uma fosforilao num resduo especfico de
ciclo
serotonina, fazendo com que a protena altere a sua conformao e
consequentemente a sua funo.

Bibliografia:
- Principles of Biochemistry (3 Ed) , H. R. Horton, L. A. Moran, R. S. Ochs, J. D. Rawn, K. G.
Scrimgeour ,
2002, Prentice Hall, Upper Saddle River, NJ 07458;

- Portal de ensino - e-escola/Biologia , Universidade Tcnica de Lisboa,

http://www.eescola.
pt/site/index.asp;
- Entender a Bioqumica (4 Edio) , L. Campos. 2005, Escolar Editora, ISBN: 9789725921838;
- http://www.wiley.com/legacy/college/boyer/0470003790/animations/tca/tca.htm;
-http://www.science.smith.edu/departments/Biology/Bio231/krebs.html.