cidos Nuclicos

Composio e Extrao

cidos nucleicos
Macromolculas encontradas em todas as clulas vivas, constituem os genes
e so responsveis pelo armazenamento, transmisso e traduo das
informaes genticas

A decifrao da estrutura do
cido nuclico por Watson e
Crick
(A
Structure
for
Deoxyribose
Nucleic
Acid),
anunciada na revista inglesa
Nature de 25 de abril de 1953,
foi considerada a contribuio
mais importante no campo da
biologia

Pentoses:

Carboidratos formados por cinco carbonos

RNA

Ribose

DNA

Desoxirribose

Purinas

Bases nitrogenadas:
Compostos cclicos que contm nitrognio

Timina: Presente apenas no DNA

Uracila: Presente apenas no RNA

Pirmidinas

Grupamento Fosfato
Radical derivado da molcula do cido fosfrico,
responsvel pelo carter cido dos cidos nuclicos

DNA
Formado por duas cadeias nucleotdicas torcidas na forma de dupla hlice

Pontes
de
H
mantm filamentos
unidos

Ligaes G-C so
mais estveis

Os tomos de carbono do
grupamento do acar
so numerados de 1 a 5

Ligao fosfodister conecta o

tomo de carbono 5 de uma
desoxiriobose ao tomo de
carbono 3 da desoxiribose
adjacente

Assim, cada ligao de acar

fosfato dita com polaridade
5-3

Os dois filmentos de
DNA tem polaridade
inversa e assumem a
estrutura de dupla
hlice

Pares
de
base
so
estruturas planares uns
sobre os outros dando
estabilidade a dupla hlice

Replicao do DNA
De forma geral:
Dita semiconservativa DNA replicado pela deselicoidizao da dupla hlice e
construo de filamento complementar a partir de cada filamento da
molcula original

Replicao:
Semi-conservativa polimerizao deve ser sempre no sentido 53
DNA antiparalelo ou seja, uma fita corre no sentido 5 3 e a outra no
sentido 3 5

Replissomo

DNA Polimerase
Tipo

Funo

DNA Polimerase I

Catalisa o crescimento da cadeia no sentido

53 Atividade de exonuclease 35 e 53
Preenche pedaos pequenos de DNA durante a
replicao e processo de reparo

DNA Polimerase II

Polimerase alternativa de reparo, mas tambm

pode replicar DNA quando o filamento molde
danificado

DNA Polimerase III

Catalisa o crescimento da cadeia no sentido

nos dois sentidos. a polimerase primria
durante a replicao normal do DNA

RNA
Cadeia unifilamentar de nucleotdeos

 Suas bases nitrogenadas so: C, G, A e U

Mais flexvel e pode formar uma

variedade muito maior de formas
moleculares tridimensionais complexas
do que a dupla hlice de DNA
De modo semelhante a uma
protena mas no a uma molcula
de DNA, pode catalisar importantes
reaes biolgicas
Molculas de RNA que funcionam como
protenas enzimticas so chamadas de ribozimas

Tipos de RNA

RNA mensageiro: RNA informacional intermedirio no processo de

decodificao dos genes em cadeias polipeptdicas. Eles passam a informao do
DNA para a protena

RNA funcionais : O prprio RNA o produto funcional final

RNA transportador (tRNA): responsveis por

trazer o aminocido correto para o mRNA no
processo da traduo

RNA ribossmico (rRNA): so os principais

componentes dos ribossomos, que
so grandes mquinas macromoleculares
que guiam a montagem da cadeia de
aminocidos pelo mRNA e o tRNA

 Classe de RNAs especfica de eucariotas:

RNA pequenos nucleares (snRNA): Parte de um sistema que
processa os RNAs transcritos em clulas eucariotas. snRNA
guiam a modificao de rRNA

Micro RNA: Regulam a quantidade de protena produzida por

um gene
RNA de interferncia: Atuam na proteo do genoma de
animais e plantas inibindo por exemplo a ao de um vrus

Diferenas bsicas entre DNA e RNA

DNA

RNA
Fita Simples

Fita Dupla

Pentose: Ribose

Pentose:
Desoxiribose

Bases nitrogenadas: Adenina,

Uracila. Guanina e Citosina

Bases nitrogenadas:
Adenina,
Timina,
guanina e Citosina

Transcrio
RNA sintetizado no sentido de 5 para 3
Filamento no-molde de DNA chamado de codificante

Dividida em 3 fases:
Procariontes:
Iniciao
RNA polimerase deve reconhecer onde comear a leitura do DNA no incio de
gene, se liga a uma sequncia de DNA chamada de promotor

Promotor : uma sequncia de DNA que sinaliza onde a transcrio deve

comear

Dividida em 3 fases:
Alongamento
A medida que a RNA polimerase se move desenrola o DNA a frente dela e
reenrola o DNA que j foi Transcrito formando a bolha de Transcrio
Bolha de transcrio: Regio unifilamentar de DNA, dentro da qual o
filamento-molde exposto

Dividida em 3 fases:
Trmino:
Alongamento continua at que a RNApol reconhea sequncias especiais que
sinalizam o trmino da cadeia
Existem 2 mecanismos principais de trmino:
Dependente do fator R : Reconhece sinais de trmino da RNA polimerase
Intrnseco: a sequncia de trmino contem cerca
de 40 pb teminando em um trecho rico em GC,seguido por uma calda poli
A

Transcrio em eucariontes
Mais genes a serem reconhecidos e transcritos, alm de mais
DNA no codificante
DNA de procariontes com milhares de genes de eucariontes
dezenas de milhares de genes

DNA E. Coli

1 gene por 1.400 pb

DNA de Humano

1 gene por 100.000 pB

Apresentam 3 RNApolimerases diferentes:

I-transcreve rRNA

II-trancreve mRNA e alguns snRNA

III- transcreve tRNA, snRNA, 5S rRNA Utilizam Fatores Gerais de Transcrio

(GTF)

O cdigo gentico
A estrutura de um organismo e suas atividades fisiolgicas so baseadas em
protenas

A informao gentica para a sntese dessas protenas est no DNA

A informao gentica estocada no DNA por meio de um cdigo (o cdigo

gentico) no qual a sequncia de bases adjacentes determina a sequncia
de aminocidos no polipeptdeo codificado

Sequncias de A, T, G e C so usadas pelas clulas para criar protenas com

sequncias particulares de aminocidos
CDON a sequncia de 3 bases que codifica um aminocido

Propriedades do cdigo gentico:

Universal

No possui vrgulas

Degenerado

Traduo do cdigo gentico

Dogma central da biologia:

A informao gentica, armazenada nos

cromossomos transferida s clulas filhas
atravs da replicao do DNA, expressa atravs
da transcrio em RNAm e traduzida
subsequentemente em cadeias polipeptdicas.

Preparo da clula para traduo:

ETAPAS DA TRADUO
INICIAO

ALONGAMENTO
TERMINAO

Inicio

Alongamento

Alongamento

Trmino

Extrao de cido Nuclicos

Requerimento essencial:
quantidade (rendimento)
pureza
integridade
Etapas na obteno de cidos nuclicos:
Lise fsica ou bioqumica das paredes celulares e
membranas
Purificao dos cidos nuclicos: desnaturao /
inativao de protenas celulares
Precipitao

Separando DNA / RNA / Protenas

Extrao por solventes - precipitao e/ou centrifugao
EX:
Extrao com fenol solvente orgnico; desnatura
protenas; permite isolamento de DNA e protenas
(emprega solubilidade diferencial de protenas, lipdios e
cidos nucleicos no fenol)
3 fases: aquosa (cidos nucleicos)
interface: protenas
camada do fenol

Melhora a qualidade da obteno dos cidos

nuclicos:

Extrao em baixas temperaturas

Incubao
dos
lisados
desnaturantes de protenas

Agentes que retardam atividade das nucleases

com

reagentes