Você está na página 1de 40

Amostragem e substncias de referncias

Marta Maria D.C. Vila

Etapas Crticas do Processo Analtico


Definio do problema analtico

Escolha do mtodo analtico AMOSTRAGEM


Tratamento da AMOSTRA Anlise Qumica

Avaliao dos resultados

Amostragem
Amostragem o processo de retirada de um nmero apropriado de itens de uma populao com a finalidade de determinar caractersticas AMOSTRA
Amostras devem ser REPRESENTATIVAS

Poro representativa de um lote heterogneo que represente a totalidade do material de interesse.

Amostragem
Quanto e como amostrar Caractersticas do produto a ser analisado Tcnicas e procedimentos envolvidos
Plano de amostragem

Aspectos legais(atendimento a normas tcnicas e legais)

Amostragem
Exigncias legais devem considerar: Atendimento dos regulamentos das BPF e Controle de Qualidade
(RDC 17/2010; Normas NBR ISO/IEC 17025/2001)

Planos de amostragem devem conter: Definio da unidade de amostra Forma de seleo Tamanho da amostra

Amostragem
Plano de amostragem - planos especficos existem recomendados por sociedades ou associaes profissionais ou entidades internacionais (AOAC, ISO, etc).
Laboratrios ou indstrias possuem instrues definidas ou protocolos prprios de amostragem para diferentes tipos de amostras.

Plano de Amostragem
Tamanho, nmero e localizao pontos de coleta
Procedimentos escolhidos para reduo da amostra bruta para amostra laboratorial Tipo de recipiente e como limp-lo

Proteo contra contaminao antes e aps amostragem

Nmero de amostras
O TAMANHO DA AMOSTRA depende do nmero de anlises, mas independe do tamanho do lote, visto que a representatividade est mais relacionada com a QUALIDADE do que com a quantidade amostral.
Qualidade da amostragem depende das condies da coleta, forma de armazenamento, transporte, etc,

Nmero de amostras
DIFERENTES CARACTERISTICAS DAS FORMAS FARMACUTICAS
NMERO DE TESTES REALIZADOS NO CQ DE UM NICO MEDICAMENTO OU COSMTICO NMERO MNIMO DE UNIDADES A SER UTILIZADO EM CADA TESTE.

Nmero de amostras
Produto em processo: quantidade suficiente para realizar todos testes e contraprova.
Produto acabado: quantidade suficiente para realizar duas vezes todos os testes mais reteno.
Reteno: na embalagem original . A quantidade de amostra deve ter pelo menos o dobro das unidades requeridas para efetuar todas as anlises previstas em compndios oficiais.

Bulas, rtulos, materiais de acondicionamento embalagem: tabelas de amostragem (ABNT, Militar Standard)

Nmero de amostras
O plano de amostragem deve ser otimizado com relao a finalidade a que se destinam os resultados analticos e com relao custo/benefcio.
Normalmente o nmero de amostras a serem tomadas de forma geral as seguintes frmulas:

n ou

n +1

Onde n=total do produto

Cdigos de Amostragem- Tipo Military Standard (empregadas para controle de atributos)

TABELA Military Standard 105D


Tabela de amostragem para inspeo por atributos
NVEL DE ACEITAO Defeitos Defeitos Maiores Menores 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 3 2 4 2 6 3 8 4 11 1,0 % 4,0 %

Tamanho do Lote 02 a 15 16 a 25 26 a 90 91 a 150 151 a 500 501 a 1.200 1201 a 10.000 10.001 a 35.000 35.001 a 500.000 500.001 ou mais NQA =

Amostra 2 3 5 8 13 20 32 50 80 125

Defeitos Crticos 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 0,4 %

Defeitos de Aparncia 1 1 2 2 3 4 6 8 11 15 6,5 %

CLASSIFICAO E DESCRIO DOS DEFEITOS


Defeitos crticos e maiores
1- Defeitos crticos Defeitos que possam colocar em risco a sade ou a vida dos usurios do produto ou de quem est manipulando o material.

Defeitos menores e de aparncia


3- Defeitos menores Defeitos que possam impedir a utilizao normal da fita ou causar uma reduo do rendimento no processo de blistagem e/ou envelopamento.

2- Defeitos maiores Defeitos que possam alterar o rendimento do processo ou impedir que o material realize a funo a que se destina.

4- Defeitos de aparncia Defeitos que no reduzem materialmente a utilizao do material, no comprometendo o aspecto visual e a apresentao comercial do produto.

Nmero de amostras
Pode ainda depender de determinaes legais. Ex: Para teste de segurana biolgica estabelecidos para procedimento de inspeo. Sorteio aleatrio de uma amostra para anlise microbiolgica (Mtodo de Inoculao Direta ou Filtrao em membrana)
Amostra contaminada lote todo rejeitado

Farmacopia Brasileira, parte 1, 1988

Formas de Amostragem
Amostragem Probabilstica ou aleatria (Populao homognea, com mesma probabilidade de escolha) Casual simples (aleatria, elementar, randmica): sorteios ou tabelas (tabelas de nmeros aleatrios) Aleatria sistemtica ou estratificada Conglomerados (clusters)

Amostragem No Probabilstica Material contnuo A esmo, convenincia ou no intencional Intencional (julgamento)

Frequncia de Coleta
Frequncia instantnea: nica amostra no ponto de coleta
com quantidade suficiente para anlise

Frequncia instantnea / composta: coletas nicas


em vrios pontos

Frequncia randmica: ocasies diferentes, mas no


ordenadas manh/tarde/ manh/noite

Frequncia coleta acumulada: no mesmo ponto,


mesmo recipiente ao longo do tempo

Frequncia espaada:acumulada:ordenada de ocasies, em


vrios pontos e agrupadas num nica amostra

Preparo amostra para anlises laboratoriais

Lote

Amostra bruta representativa


Fora do laboratrio

Amostra de laboratrio homognea


Dentro do laboratrio

Alquota

Alquota

Alquota

Cuidados Gerais
Verificar a integridade das embalagens de matrias primas:
lacre no violado comparar pedido e nota fiscal conferir o rtulo

Lotes distintos devem ser amostrados separadamente

Cuidados Gerais
Identificao da amostra (documento no processo de qualidade);
Preservao da amostra ( reduo de temperatura, de oxignio, luz, de umidade); Equipamento de amostragem adequados (limpeza, resistncia, etc.).

Preparo da Amostra
Inicia-se coma reduo do tamanho da amostra. Poro (ou alquota) de uma amostra para a realizao da anlise, geralmente no laboratrio.

http://www.ufjf.br/baccan/files/2011/07/Aula-8-Preparo-de-amostras-1a-parte_2S-2011-Modo-deCompatibilidade.pdf

Preparao da Amostra
A preparao da amostra a etapa decisiva em todos mtodos de anlise. Depende de: Propriedades fsico-qumicas do analito; Concentrao do analito na amostra; Natureza da matriz; Compatibilidade dos mtodos de solubilizao e extrao com o sistema;
Tipo de instrumento utilizado na analise (detector utilizado).

Preparo da amostra
Antes da quantificao ou identificao a amostra precisa ser submetida a etapas que visam SEPARAR OS COMPONENTES DE INTERESSE.
Preservao

Etapas

Reduo do tamanho das partculas Isolamento do analito

Preservao
As amostras devem ser submetidas a cuidados para que no sofram alterao de seus componentes de interesse PROCESSOS QUIMICOS Reaes fotoqumicas Oxidaes Precipitaes PROCESSOS FISICOS Volatilizao Adsoro em superfcies Difuso PROCESSOS BIOLOGICOS Biodegradao Reaes enzimticas

Reduo do tamanho das partculas


Alguma desintegrao da amostra necessrias (exceto para materiais j pulverizados, lquidos ou pastosos).
Amostras secas Moinhos de martelos, bolas ou almofarizes.

Amostras liquidas (homogeneizao) Agitadores, banhos ultrasom

Amostras midas Liquidificadores, moedores.

Remoo do analito de interesse

Preparo da amostra
A amostragem o passo mais importante dentro do contexto da obteno do resultado final. Preparo da amostra corresponde a 30% de erros nas anlises e cerca de 60% do tempo de uma anlise.

Oliveira, E. Sample preparation involve digestion, extraction and preparation of the analytes before the analysis, so this step is time limiting, requiring ca. 61% of the total time to perform the complete analysis, and is responsible for 30% of the total analysis error. J. Braz. Chem. Soc. 14 (2003) 174

Amostras slidas (alguns cuidados)


Garantir homogeneidade e evitar perdas ou contaminaes;
Determinar os pontos de amostragem (histrico ou investigao); Adequar frasco em funo do sistema analtico; Expressar resultado em base seca; Fazer quarteamento.

Amostras Gasosas (alguns cuidados)


Evitar perdas por vazamentos ou evaporao;
Equipamentos de medida de vazo calibrados;

Determinar o ponto de coleta; Realizar purga (no mnimo 3x o volume do duto ligada da tubulao principal at o ponto de amostragem);

Amostras lquidas (alguns cuidados)


Evitar perdas ou contaminaes; Adequar o frasco de coleta em funo da temperatura, inerticidade ou do sistema analtico (qumico ou microbiolgico). Preservao das amostras durante coleta, transporte e armazenagem. Determinar o ponto de coleta (profundidade, local, etc.)

Anlise Qumica

Analises Qumicas
Os resultados de medies qumicas so teis somente quando podem ser comparados:

- Outros resultados;

- Dentro certos limites de confiana.

Substncias de referncias so empregadas como a base para estabelecer a qualidade de medidas analticas.

So necessrios na realizao de testes e anlises como:

identificao

Impurezas ou compostos relacionados

Testes de conformidade do sistema

Dosagem de teor

Substncias de Referencia
Padres de referncias so substncias altamente purificadas, usadas para o teste de vrios materiais, sejam eles drogas vegetais ou drogas convencionais.

Os Padres de referncia so amostras extremamente caracterizadas de frmacos, excipientes, impurezas, produtos de degradao, suplementos dietticos, reagentes compendiais e calibradores de desempenho.

Altssima pureza Fornecido por: USP, OMS, Sigma, EP, Farmacopia Europia, Farmacopia Britnica, INCQS Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade - Brasil

Tipos

Substncias de referncias primrias.

Substncias de referncias secundrias.

Substncias de referncias certificadas.

Referncia primaria

Substncia que amplamente reputada como possuindo as qualidades apropriadas dentro de um contexto especfico e cujo valor aceito sem requerer comparao com uma outra substncia qumica.

Referncia Secundria

Substncia cujas caractersticas so atribudas e/ou calibradas por comparao com uma substncia de referncia primria. Denominadas padres operacionais.

Referncia Certificada

Os CRMs (materiais de referncias certificados) representam a gerao dos Padres de Referncia de qualidade excepcional. Eles passam por testes adicionais e anlise estatstica baseados em metrologia para atender aos critrios rgidos da USP e s diretrizes estabelecidas pela ISO (International Organization for Standardization).

RDC 17/2010. BPF


Traz recomendaes explcitas sobre padres de referncia: devem ser utilizados padres de referncia oficiais ou, na ausncia desses, padres de referncia devidamente caracterizados (art. 187); padro de referncia no adquirido de uma farmacopeia reconhecida deve ser cuidadosamente caracterizado atravs de procedimentos analticos qualitativos e quantitativos mais extensos do que os utilizados para controlar o frmaco ou o medicamento a fim de garantir sua identidade, teor, qualidade, pureza e potncia (art. 188); devem ser utilizados e armazenados de acordo com as recomendaes do fabricante (art. 197)

Referncia Certificada
Solicitao

Indstria produtora Laboratrio de pesquisa

Informaes sobre o material rota de sntese processos empregados reagentes, catalisadores processo de purificao

Definido uma Substncia Qumica de Referncia


O primeiro passo, ao definir uma substncia qumica de referncia, sempre sua identificao.

Empregam-se

Espectroscopia de ressonncia nuclear (RMN)

Espectrometria de massas (EM)

O segundo passo examinar sua pureza.

Empregam-se

Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE) Cromatografia Gasosa (CG)

Referncias
Farmacopia Brasileira, parte 1, 1988 Gil, E. S. (org.) Controle fsico-qumico de medicamentos,Editora Uniderp: Campo Grande, 2005 qualidade de

Leite F., Amostragem: fora e dentro do laboratrio, Campinas , 2005

Editora tomo:

Soares, L.V. Curso bsico de instrumentao para analistas de alimentos e frmacos, Editora Manole Ltda: Barueri, 2006