INTRODUO O termo cromatografia foi primeiramente empregado em 1906 e sua utilizao atribuda a um botnico russo ao descrever suas experincias

s na separao dos componentes de extratos de folhas. Ela est fundamentada na migrao diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interaes, entre duas fases imiscveis, a fase mvel e a fase estacionria. uma tcnica verstil e de grande aplicao, pois possui uma variedade de combinaes entre fases mveis e estacionrias. Esta tcnica foi praticamente ignorada at a dcada de 30, quando foi redescoberta. A partir da, diversos trabalhos na rea possibilitaram seu aperfeioamento e, em conjunto com os avanos tecnolgicos, levaram-na a um elevado grau de sofisticao, o qual resultou no seu grande potencial de aplicao em muitas reas. A passagem de ter de petrleo (fase mvel) atravs de uma coluna de vidro preenchida com carbonato de clcio (fase estacionria), qual se adicionou o extrato, levou separao dos componentes em faixas coloridas. Este provavelmente o motivo pelo qual a tcnica conhecida como cromatografia (chrom = cor e graphie = escrita), podendo levar errnea idia de que o processo seja dependente da cor. A cromatografia pode ser utilizada para a identificao de compostos, por comparao com padres previamente existentes, para a purificao de compostos, separando-se as substncias indesejveis e para a separao CCD em Camadas Delgada e Fina A cromatografia em camada delgada (CCD) consiste na separao dos componentes de uma mistura atravs da migrao diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfcie plana. O processo de separao est fundamentado, principalmente no fenmeno de absoro. O grande desenvolvimento desta tcnica conseqncia natural das mltiplas vantagens que ela oferece, tais como: fcil compreenso e execuo, separaes em breve espao de tempo, versatilidade, grande reprodutibilidade e baixo custo. Pode ser de aplicao analtica ou preparativa, cuja escala est na dependncia da espessura da camada de adsorvente e da amostra em anlise. Na CCD uma fina camada de adsorvente espalhada sobre uma placa (em geral de vidro, mas outros materiais podem ser usados). Na extremidade desta placa recoberta pelo adsorvente e seca, chamada cromatoplaca a amostra aplicada repetidas vezes com o auxlio de um capilar, obtendo-se pequenas manchas. A placa transferida para uma cuba cromatogrfica contendo o solvente, que ascende pela cromatoplaca. Durante este processo, chamado desenvolvimento do cromatograma, os vrios componentes da mistura so separados. A separao baseada em muitos equilbrios dos solutos entre as fases mveis e estacionrias e resulta das diferenas de velocidade, nas quais os componentes individuais da mistura migram pela placa. Desenvolvido o cromatograma, a placa removida da cuba e deixada para secar, at que esteja livre do solvente. Se os componentes da amostra forem coloridos, manchas dispostas verticalmente na placa sero visveis. Se os componentes da amostra no forem coloridos, deve-se empregar um mtodo de visualizao como por ex.: luz ultra-violeta e vapor de ido. Aplicaes da CCD

- estabelecer a identidade de dois compostos; - determinar o nmero de componentes de uma mistura; - determinar o solvente apropriado para uma separao por cromatografia em coluna; - monitorar uma separao realizada por cromatografia em coluna; - verificar a eficincia de uma separao; - monitorar o andamento de uma reao. Em todas estas aplicaes, a CCD tem a vantagem de utilizar pequenas quantidades de amostras. Fase estacionaria Quanto fase estacionria, distingue-se entre fases estacionrias slidas, lquidas e quimicamente ligadas. No caso da fase estacionria ser constituda por um lquido, este pode estar simplesmente adsorvido sobre um suporte slido ou imobilizado sobre ele. Suportes modificados so considerados separadamente, como fases quimicamente ligadas, por normalmente diferirem dos outros dois em seus mecanismos de separao. - Slica cido silcico amorfo, altamente poroso, seguramente um dos adsorventes mais utilizados em cromatografia. Apresenta carter fracamente cido, que pode ser aumentado pela presena de impurezas cidas. Em geral, a slica empregada na separao de compostos lipoflicos como aldedos, cetonas fenis, cidos graxos, aminocidos, alcalides. Na preparao de placas, mistura-se cerca de 30g de slica com 60-70 mL de gua destilada. Esta quantidade de suspenso suficiente para preparar cinco placas de 20x20 cm, com espessura da camada ao redor de 0,3 mm. - Alumina A alumina , depois da slica, o adsorvente mais utilizado. Tem caractersticas alcalinas, embora possa tambm ser preparada para apresentar caracterstica neutra ou cida. Deve ser sempre considerada a possibilidade de a alumina catalisar diversas reaes orgnicas. A alumina geralmente empregada na separao de compostos lipoflicos e, pelo fato de poder ser preparada com caractersticas cidas, neutras ou alcalinas, bastante til na separao de substncias que apresentam variaes destas caractersticas. Para preparao de cinco placas de 20x20 cm e espessura de 0,3 mm, recomenda-se a utilizao de uma suspenso de 30g de alumina em 40 mL de gua destilada. Fase mvel Em grande parte das analises so utilizados reagentes altamente volteis e de acordo com a polaridade da amostra utilizada. Os mais utilizados so; ter etlico, acido actico glacial, n-hexano, n-propilico, lcool isopropilico, hidrxido de amnio etc.. Modo de separao Por este critrio, separaes cromatogrficas se devem adsoro, partio, troca inica, excluso ou misturas desses mecanismos.

Interpretao de resultados. Sob condies bem estabelecidas, um dado composto percorre sempre uma distncia fixa em relao distncia percorrida pelo solvente. Esta relao chamada valor do Rf e expressa como: Rf = distncia percorrida pela substncia distncia percorrida pelo solvente Quando os parmetros experimentais so especificados, o valor do Rf uma constante, para um dado composto. E ele pode ser usado para auxiliar a identificao de uma substncia.Muitos compostos tm o mesmo Rf, assim como diferentes compostos tem p.f. iguais. Forma Fsica do Sistema Cromatogrfico Subdividida em: Cromatografia em coluna Cromatografia Lquida Clssica CLC para isolamento de produtos naturais e purificao de produtos de reaes qumicas Cromatografia Lquida de Alta Eficincia CLAE para anlises e separaes de uma ampla gama de compostos com alta eficincia, utilizada em anlises de pesticidas, feromnios, isolamento de produtos naturais e sintticos e na produo e controle de qualidade de medicamentos Cromatografia Gasosa de Alta Resoluo CGAR para identificao imediata de substncias presentes na amostra) Cromatografia planar (Cromatografia em Papel CP para a separao de compostos polares; Cromatografia em Camada Delgada CCD tambm para a separao de compostos polares; Cromatografia por Centrifugao Chromatotron).