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Alimentos que exercem a sua aco primria a nvel do tracto gastro-intestinal, embora com repercusses noutros rgos e sistemas Modulam a microflora do tracto gastro-intestinal, afectando desta forma o estado fisiolgico do hospedeiro

ALIMENTOS PROMOTORES DE SADE

MTSA 2012/2013

Introduo Probitica, Prebitica e Simbitica

A microflora do tracto gastrointestinal

(=microbiota do tracto gastrointestinal) Ecossistema formado por uma grande diversidade de nichos ecolgicos, com muitas espcies bacterianas e um nmero elevadssimo de estirpes Em contacto ntimo com a mucosa intestinal uma das maiores superfcies do corpo humano (250 400 m2)
Microbiota + muco + mucosa gastrointestinal = barreira mucosa (elemento importante do sistema de defesa do hospedeiro contra agentes patognicos e imunognicos que possam existir no lmen intestinal Separa o lmen intestinal, onde se situa a microflora, os resduos orgnicos dos alimentos e secrees (salivares, gstricas, pancreticas, biliares, intestinais) do sistema linftico associado ao intestino (SLAI)

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A sua distribuio no TGI no uniforme:

A microbiota intestinal de cada pessoa to individualizada como a sua impresso digital

Contudo, h um conjunto de cerca de 57 espcies bacterianas que so comuns a todos os seres humanos, dentre as 300 500 espcies que se pensa que o intestino normalmente contm
Pertencem a dois filos bacterianos (Bacteroidetes e Firmicutes)

Atravs das suas actividades metablicas, estes microrganismos desempenham um papel importante na utilizao dos nutrientes contidos nos alimentos, produzem vitaminas (cido flico, vit. K) afectam significativamente o desenvolvimento e o desempenho do sistema imunitrio e tambm outras funes do hospedeiro (ex.: aco sobre as hormonas que regulam o apetite)

O verdadeiro tamanho e a constituio da microflora intestinais no so ainda conhecidos

Proporo Bacteroidetes/Firmicutes

O ecossistema intestinal humano

Ecossistema complexo Contm mais de 50 espcies de bactrias Diversos tipos de ambientes
Clon proximal suprimento abundante de nutrientes; microrganismos com elevada taxa de crescimento; pH do contedo intestinal baixa, porque produzem concentraes elevadas de cidos gordos de cadeia curta Clon distal menor disponibilidade de substratos para o crescimento microbiano; menor taxa de crescimento; pH prximo da neutralidade

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Tracto gastrointestinal do recmnascido

Inoculado pela microflora vaginal e fecal da me durante o nascimento Inicialmente, predominam microrganismos anaerbios facultativos (Escherichia coli, enterococos) Estes microrganismos criam um ambiente altamente redutor, que ir ento permitir o desenvolvimento duma microflora anaerbia estrita

Existem diferenas considerveis na microflora intestinal dos bebs, consoante a sua alimentao:

A flora fecal dos bebs amamentados com leite materno dominada por bifidobactrias, com apenas 1% de enterobactrias A flora fecal dos bebs alimentados com leite de substituio mais complexa
Prevalecem igualmente bifidobactrias, bacterides, clostrdios e estreptococos

Microflora intestinal do adulto

A partir do desmame, comea a estabelecer-se uma microflora intestinal semelhante do adulto Por volta dos 2 anos, esta microflora j se encontra estabelecida A maioria dos elementos da microflora intestinal tm um metabolismo anerbio estrito Existem tambm anaerbios facultativos, mas em nmeros muitissimo mais baixos Os anaerbios predominantes so bacilos Gramnegativos do gnero Bacteroides
Constituem at 30% da flora intestinal

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Tambm presentes nmeros importantes doutros anaerbios:

Bifidobactrias (Bacilos Gram-positivos) Clostrdios (Bacilos Gram-positivos) Lactobacilos (Bacilos Gram-positivos) Cocos Gram-positivos

Em menores propores, encontram-se ainda enterococos, coliformes, metanognicos e bactrias dissimiladoras de enxofre

Duas caractersticas principais da microflora intestinal:

Capacidade de aderirem s protenas do hospedeiro (colagnio, fibrinognio, fibronectina) aderncia como pr-requisito para uma espcie bacteriana persistir no TGI Capacidade de fermentar glcidos

O hospedeiro retira vantagens da sua microflora

Participao na formao da parede intestinal Resistncia colonizao por patgenos Produo de cidos gordos de cadeia curta
Os AGCC desempenham funes fisiolgicas muito importantes: cido actico msculos, funo cardaca e cerebral; cido propinico gluconeognese; cido butrico funcionamento dos entercitos

Produo de vitaminas
Especialmente vit. K e vit. do grupo B

Interaco com o sistema imunitrio mucosal Degradao de compostos xenobiticos*, por possurem enzimas que os atacam
*compostos que podem estar presentes no organismo, embora no seja de esperar que se encontrem l nem sejam produzidos pelo corpo em circunstncias normais (ex.: contaminantes ambientais como as dioxinas)

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Resumo dos efeitos da microbiota intestinal sobre o hospedeiro (Aureli et al., 2011)

Como interage a microbiota com o sistema imunitrio do hospedeiro?

Para que a interaco de comensalismo/simbitica entre microbiota intestinal e hospedeiro possa funcionar, necessrio que o hospedeiro reconhea a sua microflora e desenvolva tolerncia em relao a ela. Para tal,
As bactrias da microflora no apresentam mecanismos de virulncia Algumas bactrias comensais tm a capacidade de suprimir processos inflamatrios

Para que possa haver uma utilizao racional dos probiticos, com verdadeiro impacto sobre as funes fisiolgicas do hospedeiro, necessrio considerar os seguintes aspectos:

Do conhecimento sobre a microflora intestinal probitica

Caracterizao funcional e identificao dos microrganismos a empregar Quantidade de microrganismos a administrar Benefcios que o hospedeiro poder derivar e sua definio de forma clara Segurana do uso dos probiticos

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1 o que so os probiticos?

PROBITICOS DEFINIO
Microrganismos vivos que, ao serem administrados em quantidades adequadas, conferem benefcios para a sade ao seu hospedeiro
Definio da WHO

Notas:
Tambm tm sido atribudos benefcios ingesto de probiticos mortos, destrudos pelo calor A definio no exclui a aplicao dos probiticos noutras reas que no a alimentar (aplicaes dermatolgicas, ginecolgicas, ... )

UM POUCO DE HISTRIA...
Nesta aula, consideraremos apenas os probiticos ingeridos (ingredientes alimentares ou suplementos alimentares) Actuam tendo como interface o tracto gastrointestinal
Modulao da microflora intestinal

Efeitos adverso da microflora do clon envenenamento dos tecidos Envelhecimento Menos tempo de vida Ellie Metchnikoff (1845 - 1916)

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Propostas de Metchnikoff:
Remoo cirrgica do clon aps atingir a idade adulta Consumo de leite fermentado

Metchnikoff tinha razo?

No! A microflora intestinal benfica:
Digesto de fibra Produo de vitaminas Participao na imunidade Proteco do intestino contra patognicos

Sim! Animais isentos de microrganismos tinham vidas ligeiramente mais longas

Uma questo de equilbrio...

Os probiticos podem modificar a composio e algumas das actividades metablicas da microflora intestinal O principal veculo dos probiticos so produtos lcteos
Iogurtes e outros leites fermentados, principalmente

Os probiticos so tambm frequentemente ministrados sob a forma de cpsulas ou ps

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2 Quantidade a administrar
Pouco se sabe sobre este aspecto; possivelmente, depender da espcie/estirpe empregue e do efeito pretendido Mas, a AFSSA considera que a concentrao de probiticos deve ser superior a 10^6 ufc/ml no intestino delgado (leo) e 10^8 ufc/g no clon

3 - Benefcios dos probiticos

Efeitos dos probiticos:

Normalizao da composio da microflora intestinal Imunomodulao Efeitos metablicos diversos

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Normalizao da microflora intestinal

Resistncia colonizao do intestino por patogenes
Supresso dos patogenes endgenos (ex.: diarreia associada a antibiticos) por antibiose

Imunomodulao
Reforo da imunidade inata Equilbrio da resposta imunitria
Alvio das doenas inflamatrias intestinais Alvio dos sintomas de alergias alimentares em crianas

Controlo das doenas inflamatrias intestinais Fornecimento de cidos gordos de cadeia curta e vitaminas (cido flico, p. ex.) mucosa intestinal
Reduo do risco de cancro do clon

Efeitos metablicos
Diminuio das reaces que conduzem formao de mutagnicos no intestino
Reduo do risco de cancro do clon

Hidrlise da lactose
Alvio dos sintomas de intolerncia lactose

Desconjugao dos sais biliares e regulao da sua secreo

Reduo dos nveis de colesterol do sangue

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Porqu probitica?
Homem:
Cuidados perinatais modernos Alimentos menos naturais Condies ambientais mais controladas
Animais: Necessidade de encontrar alternativas aos antibiticos como promotores do crescimento

Probiticos: as promessas
Minorar intolerncia lactose
Lactase bacteriana supre deficincia de lactase intestinal

Probiticos: as promessas
Resistncia a patognicos intestinais
Efeito sobre a secreo de susbtncias imunitrias Resistncia colonizao Alterao dos locais de ligao das toxinas Influncia sobre as populaes microbianas do intestino Aderncia mucosa intestinal inibe aderncia de patognicos Regulao da produo de mucina inibe ligao de patognicos mucosa intestinal

Probiticos: as promessas
Efeito anti-cancro do clon
Ligao aos mutagnicos Inactivao dos carcinognicos Inibio dos enzimas produtores de carcinognicos dos microrganismos do clon Resposta imunitria Influncia sobre a concentrao dos sais biliares

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Probiticos: as promessas
Modulao do sistema imunitrio
Melhoria da resistncia a infeces Alvio de doenas auto-imunes (ex.: artrite reumatide)

Probiticos: as promessas
Alergias
Preveno da entrada de antignios no sangue

Probiticos: as promessas
Colesterol e doenas cardacas
Assimilao do colesterol pelas clulas bacterianas Aumento da secreo de sais biliares Efeito antioxidante

Probiticos: as promessas
Efeito anti-hipertensivo
Inibio da angiotensina

angiotensina

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Probiticos: as promessas
Infeces urogenitais
Adeso s clulas do tracto urinrio e da vagina Resistncia colonizao Produo de inibidores (H2O2, surfactantes)

Probiticos: as promessas
Infeco por Helicobacter pylori
Produo de substncias inibidoras (cido lctico, etc.)

Helicobacter pylori

Probiticos: as promessas
Doena heptica:
Encefalopatia heptica (doena que pode ser fatal) Os probiticos podem ser melhores do que os medicamentos habituais no combate a esta doena

Probiticos: as promessas
Alergias/eczema
Diminuio da inflamao dos tecidos afectados
Degradam alrgenos de origem alimentar Aumentam a concentrao de citoquinas anti-inflamatrias

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Sndrome do clon irritvel

Reduzem a dor abdominal, o inchao e a flatulncia, a obstipao ou diarreia associados a esta condio

Diabetes
Diabetes tipo 1 efeito imunomodulador Diabetes tipo 2 reduo da resistncia insulina atravs do aumento do nmero de clulas NKT no fgado e reduo dos sinais inflamatrios

5 Segurana dos probiticos

Aspecto muito importante Quer os EUA quer a UE tm critrios relativos segurana dos probiticos:
EUA Estatuto de Generally Recognized As Safe (GRAS) UE Qualified Presumption of Safety (QPS)
EFSA. EFSA Scientific Colloquium Summary Report. QPS: qualified presumption of safety of microorganisms in food and feed; 2004. Mattia e Merker, 2008

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Os probiticos na prtica comercial

Os microrganismos envolvidos BAL

Lactobacillus
L. acidophilus L. casei L. fermentum L. johnsonii L. paracasei L. plantarum L. reuteri L. rhamnosus L. salivarius L. lactis
L. acidophilus

Os microrganismos envolvidos bifidobactrias

Outros microrganismos
Leveduras
Ex.: Saccharomyces boulardii

Bifidobacterium
B. lactis B. longum B. breve

Bacillus spp.
B. clausii B. coagulans B. subtilis B. lichenoformis

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Critrios para a seleco de estirpes probiticas:

Critrios para a seleco de estirpes probiticas:

Aspectos gerais:
Origem Segurana

Aspectos fisiolgicos:
Actividade e viabilidade Resistncia a:
Suco gstrico pH Blis Suco pancretico

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Critrios para a seleco de estirpes probiticas:

Administar uma ou vrias estirpes?

Usar duas ou mais estirpes pode ser benfico (tirase partido de sinergias entre elas) e , presentemente, recomendado

Aspectos funcionais:
Aderncia ao epitlio intestinal (?) Antagonismo contra patognicos Estimulao da resposta imunitria Estimulao selectiva das bactrias benficas e supresso das nocivas Efeitos sistmicos benficos

Benefcios provados

Benefcios provados

Comprovados no Homem:
Combate s diarreias Melhor digesto da lactose

Comprovados in vitro ou em ensaios no controlados:

Combate hipertenso Diminuio dos nveis de colesterol Inibio de H. pylori Estmulo da imunidade

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Produtos disponveis
Produtos lcteos
Leites fermentados Iogurtes Produtos para barrar Queijos

Nestes produtos, empregam-se BAL e bifidobactrias Existem alguns tambm com leveduras (Saccharomyces boulardii)

Cpsulas e outras preparaes

Novas reas para o desenvolvimento de probiticos

Produtos de origem vegetal com probiticos
Cereais Sumos de fruta Fruta minimimamente processada (ex.: ma s fatias)

Probitica facto ou fico?

Benfica nalguns casos rea de investigao interessante Investimento promissor

Carnes
salsicharia

Guloseimas
Chocolate Mousse de chocolate Gelados

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Como desenvolver um novo produto probitico?

Prebitica
Prebiticos = substncias no digestveis que produzem efeitos fisiolgicos benficos sobre o hospedeiro atravs da estimulao do crescimento ou da actividade dum certo nmero das suas bactrias indgenas
FAO/WHO, 2002

Efeito dos prebiticos sobre a microflora intestinala

O intestino um ambiente complexo, cuja ecologia influenciada pelo seu contedo microbiano, pelos metabolitos secundrios das bactrias nele presentes (incluindo substncias antimicrobianas), imunomoduladores, molculas ligadas ao quorumsensing e factores associados ao hospedeiro (como as secrees) Por isso, os efeitos dos prebiticos sobre a microflora intestinal so complexos e ainda mal conhecidos Os aspectos que tm sido mais estudados dizem respeito modulao da microflora intestinal por bifidobactrias e lactobacilos Prebiticos aumentam a excreo de bifidobactrias, mas no produzem diferenas significativas sobre os lactobacilos Em recm-nascidos, a suplementao com prebiticos apresentou efeitos imunomodulatrios e reduo da incidncia de alergias em estudos clnicos (Rautava et al., 2002; Viljanen et al., 2005)

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Efeitos fisiolgicos da administrao de prebiticos

Imunomodulao
Resistncia a infeces Diminuio dos problemas com alergias

Natureza qumica e aco

So hidratos de carbono de cadeia curta (oligossacridos), no digestveis, que chegam intactos ao intestino grosso, onde actuam sobre a microflora deste Alteram a composio, o equilbrio, ou ambos, da microflora do lmen e da mucosa intestinal, conduzindo a uma microflora em que predominam as bifidobactrias e os lactobacilos
Efeito selectivo

Esta microflora, considerada mais saudvel, poder conferir ao hospedeiro melhor resistncia a infeces e poder ter propriedades imunomoduladoras

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Os prebiticos tambm funcionam como fontes de carbono e de energia para as bactrias que crescem no intestino grosso, que os fermentam com produo de cidos gordos de cadeia curta
Efeito sobre a microflora do intestino Efeito sobre a sade do hospedeiro Fonte de energia para o hospedeiro

Melhoram a absoro de clcio razes? Ligeiramente laxantes

Prebiticos desafios
No esto estabelecidas as quantidades necessrias para que os prebiticos tenham actividade considervel Muitos dos produtos actualmente disponveis contm apenas pequenas quantidades de prebiticos, no se sabendo se estas quantidades tm realmente algum efeito

Requisitos para que um constituinte/ingrediente alimentar seja considerado prebitico

No ser hidrolisado nem absorvido na poro proximal do intestino Ser um substrato selectivo para um nmero limitado de bactrias comensais, potencialmente benficas, presentes no clon, estimulando o seu crescimento e/ou as suas actividades metablicas benficas Consequentemente, ser capaz de alterar a microflora intestinal, dotando-a duma composio mais saudvel, aumentando, p. ex., os nmeros de bactrias sacarolticas ao mesmo tempo que diminui o nmero de bactrias putrefactivas, como certos clostrdios e as enterobactrias

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Efeitos dos prebiticos

Dum modo geral, observou-se que os prebiticos aumentam as concentraes de lactato e de acetato no clon, sugerindo que sero fermentados pelas BAL e pelas bifidobactrias Tipicamente, na zona terminal do clon, existe muito pouca energia disponvel para o crescimento bacteriano As bactrias encontram-se em carncia nutricional, e a morte bacteriana, com a libertao de aminocidos livres dela resultantes, fornece substratos para a aco das bactrias putrefactivas, com libertao de produtos finais citotxicos Portanto, o equilbrio entre a fermentao (que produz cidos gordos de cadeia curta) e a putrefaco (que origina compostos fenlicos como o indol, o escatol e o cresol) muito importante para o conceito da prebitica

As promessas dos prebiticos

Simbitica
ou Prebitica + probitica Microrganismos vivos + substrato que estimula o seu crescimento Ex.:
Fruto-oligossacrido + Bifidobacterium spp. Lactitol ou lactulose + Lactobacillus spp.

Sinergia entre probitico e prebitico:

Aumento nos nmeros de lactobacilos e bifidobactrias Diminuio dos nmeros de clostrdios e enterobactrias (incluindo Escherichia coli)

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Leite materno alimento funcional preparado pela natureza?

Efeito prebitico, bifidognico
Os bebs amamentados pela me tm microfloras intestinais em que predominam bifidobactrias e lactobacilos Os bebs alimentados com leite de substituio tm uma microflora mista, com menores nmeros de bifidobactrias

O efeito bifidognico do leite materno no pode ser atribudo a uma nica substncia deve-se antes a um conjunto complexo de factores que interagem uns com os outros

Factores bifidognicos do leite materno

Baixa concentrao de protenas e fosfato (em comparao com o leite de vaca)
Fosfatos:
Leite humano: 15 g/l Leite de vaca: 0,9 g/l

Concentraes relativamente altas de nucletidos (praticamente ausentes do leite de vaca) papel bifidognico ? Oligossacridos
Os mais activos so os que contm N-acetil-glucosamina Depois da lactose e dos lpidos, so o 3. mais abundante dos constituintes do leite humano, em concentraes mais de 10 vezes superiores s do leite de vaca
12 14 g/l no leite humano, <1g/l no leite de vaca

Protena total:
Leite humano: 9,0 g/l Leite de vaca: 32,0 g/l

Papel muito importante na determinao da microflora intestinal

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Para estudo:
Lactoferrina
Presente em concentraes elevadas no leite humano (1,3 2,8 g/l) em comparao com o leite de vaca (apenas vestgios) A lactoferrina ou os pptidos resultantes da sua digesto poderiam seleccionar as bifidobactrias porque estas, contrariamente maioria das outras bactrias, no tm requisitos elevados quanto ao ferro

McFarlane et al., 2006 Mattia e Merker, 2008 Quigley et al., 2010 Aureli et al., 2011 Harris et. al., 2012 Murgua-Peniche et al., 2013

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