Histologia Humana

Aulas Tericas 1 horrio Aulas Prticas 2 horrio

APOSTILA
EPI Provas Terico e Prtica

Histologia Prtica
Materiais para aula prtica
Avental branco Apostila Lpis 2b Lpis de cor Borracha, apontador

BIBLIOGRAFIA INDICADA

Ttulos da Bibliografia Bsica:

JUNQUEIRA, L. C. U.; CARNEIRO, J. Histologia bsica. 10. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2004. KIERSZENBAUM, A. L. Histologia e biologia celular: uma introduo patologia. 1. ed. Rio de Janeiro: Elsevier, 2004 Fiore, M. Atlas de Histologia. 7 ed RJ. Guanabara Koogan Ttulos da Bibliografia Complementar: Comarck. DH. Fundamenteos de Histologia, 8 ed. RJ: Guanabara Koogan.

QTD. DE EXEMPLARES NO ACERVO DO CAMPUS ANO DA EDIO

2004

2004

1986 ANO DA EDIO 2003

Clculo da N1 = [(PROVA 1 + PROVA 2)/2]+[(Prtica 1+Prtica 2)/2]+ trabalho Data Instrumento Valor 13/03 10/04 13/03 10/04 AVALIAO PARCIAL 1 (N1) AVALIAO PARCIAL 2 (N1) ATIVIDADE PRTICA 1 ATIVIDADE PRTICA 2 Trabalho De 0 a 6,0 De 0 a 6,0

De 0 a 3,0
De 0 a 3,0

1,0

Clculo da N2 = [(PROVA 1 + PROVA 2)/2] + [(Prtica 3+Prtica 4)/2] + T.I.

Data 05/06 05/06 Instrumento AVALIAO PARCIAL 2 (N2) ATIVIDADE PRTICA 4 Valor De 0 a 4,0 De 0 a 3,0 De 0 a 3,0

TRABALHO INTEGRADO
Clculo da N3 = Data 19/6

Instrumento AVALIAO TERICA

Valor De 0 a 10,0

Histologia
Histologia Mayer 1919

histos (grego) tecido - tissu (francs) - tecido

Histria
Bichat (1771-1802), pioneiro da histologia, pai da histologia moderna

Sem o uso de microscpio, examinou mais de 600 corpos e identificou 21 tipos de tecidos humanos
Com o uso do microscpio
4 tecidos bsicos

Histologia
Estudo da estrutura microscpica, da COMPOSIO e das FUNES dos tecidos, rgos e sistemas.

Como so formados os tecidos?

Todos os tecidos presentes nos vertebrados adultos so formados a partir de trs tipos de folhetos germinativos: endoderma, ectoderma e mesoderma. Cada um desses, durante o desenvolvimento embrionrio, responsvel por uma genealogia de clulas especializadas quanto forma e funo.

Relembrando a clula

Clula
1839 Scheiden e Schawann Teoria Celular

1) A Clula a menor unidade bsica de vida onde existe uma

complementaridade entre funo e estrutura

2) As clulas constituem a unidade morfolgica e fisiolgica de

todos os organismos vivos 3) As propriedades de um dado organismos dependem de cada clula 4) As clulas originam unicamente a partir de outras clulas e sua continuidade se mantm graas ao material gentico

Organizao dos Seres Vivos

unicelulares Colnia pluricelulares Tecidos

Formas das clulas

Discides

Corpo Humano 60 X 1012 clulas 200 Tipos

Esfricas

Estreladas

Fusiformes (alongadas)

Biomembranas

integridade celular permeabilidade seletiva - transporte interao clula clula Reconhecimento - Glicocalix

ocludina

caderina Desmoglena e Desmocolina

conexina

intregrina colgeno

Filamentos Intermedirios

Microtbulos

Filamentos Actina

Filamentos Intermedirios

Microtubulos Sustentao estrutural Arcabouo celular Ancora o ncleo Membrana Celular Rigidez Sustentao da MP Movimento organelas Movimento de clios de e flagelos Filamentos Actina

R E S U M O

Mitocndria

Observado 1840 - Grego mitos= alongado e chondrion = granulo

Pode ser esfrica 0,2 a1 m de e 2 a 8 m de compr.

Quantidade varivel ( clula vegetal ) dispersas no citoplasma

Constitudo de 2 membranas e 1 matriz Composio Qumica: DNA circular e enzimas Biogenese: a partir de organelas pr-existentes

Complexo de Endomembranas

Retculo Endoplasmtico Rugoso ou Granular (RER)

Apresenta ribossomos associados RER clulas - sntese protica

Pode formar uma estrutura contnua com o REL

Participa da sntese protica

Retculo Endoplasmtico Liso ou Agranular (REL)

No Apresenta ribossomos associados

clulas - sntese de Hormnios esterides (cl Leydig no testculo),

degradao de glicognio (hepatcitos), detoxicao, sntese de colesterol e funes

especficas
Envoltrio nuclear

Lisossomo

Enzimas/Substrato: nucleases RNA/DNA glicosidades grupamento fosfato

fosfatases DNA catepsinas protenas arilsulfatases carboidratos complexos e polissacardeos colagenases steres de sulfato fosfolipases - fosfolipdeos
eliminado

Corpo residuais

endocitose

lisossomo
CG

RE

Complexo de Golgi (CG) 1898 Camilo Golgi

Sistemas de Membranas lisas que formam vesculas e sculos achatados paralelos

Localizado prximo ao ncleo ou centro da clula Cisternas 4 a 8 sem comunicao Transporte RE CG - vesculas transportadoras

26
2

So estruturas cilndricas, geralmente encontradas aos pares.

Os pares participam da diviso celular, orientandoo deslocamento dos cromossomos para as clulas que esto sendo formadas.

Nuclolo
estrutura

celular mais facilmente visvel

corpsculo esponjoso desprovido de membranas contato direto com suco nuclear

tamanho e forma depende do estado funcional

funo biognese ribossomos

Cromatina
Polmero linear de nucleotdeos unidos por ligao fosfodiester

Atua na clula como Membrana Celular

Porto

R E S U M O

Atua na clula como Ncleo Computador Atua na clula como

Mitocndrias
Energia Atua na clula como Reticulo Endoplasmtico Time de construo

Atua na clula como Departamento de Empacotamento e envio

Complexo de Golgi

Que tipo de equipamentos sero utilizados por ns?

Microscpio ptico (at 2000 X)

Microscpio eletrnico (at 100 milhes de X);

Microscopia ptico

Poder de resoluo a capacidade de separar os detalhes

Como preparado o material de estudo das aulas prticas?

Espalhamento

Epiderme da Cebola

Procedimentos bsicos em histologia

Estudo das clulas
in vitro em cortes histolgicos Esfregao e Espalhamento Decalque Bloco de tecido Fixao Impregnao Micrtomo 5 a 10 m Montagem Colorao
Corantes bsicos: Eosina Corantes cidos: Hematoxilina

Preparao dos tecidos

FIXAO

Os principais objetivos da fixao so:

a) Inibir ou parar a autlise tecidual;

b) Coagular ou endurecer o tecido e tornar difusveis as substncias

insolveis;

c) Proteger, atravs do endurecimento, os tecidos moles no manuseio e

procedimentos tcnicos posteriores;

d) Preservar os vrios componentes celulares e tissulares;

e) Melhorar a diferenciao ptica dos tecidos;

f) Facilitar a subseqente colorao

Formol 10%, liqudo de BOUIN e o lquido de Helly

 Desidratao
Visa retirar a gua dos tecidos, a fim de permitir a impregnao da pea com parafina. Para isto, a pea submetida a banhos sucessivos em lcoois de teor crescente (ex.: lcool a 70%, 80%, 90% e 100%).

gua e etanol (50%)

gua e etanol (75%)

gua e etanol (80%)

gua e etanol (100%)

 Diafanizao
Visa impregnar a pea com um solvente de parafina. O mais usado o xilol.

Etanol e xilol (50%)

Etanol e xilol (75%)

Etanol e xilol (80%)

Etanol e xilol (100%)

 Impregnao
Tem a finalidade de permitir a obteno de cortes suficientemente finos para serem observados ao microscpio. Para isso os tecidos devem ser submetidos a banhos de parafina a 60C, no interior da estufa. Em estado lquido, a parafina penetra nos tecidos, dando-lhes, depois de solidificada, certa dureza.

Xilol e parafina/resina (50%)

Xilol e parafina/resina (75%)

Xilol e parafina/resina (80%)

Xilol e parafina/resina (100%)

 Incluso
a passagem da pea que estava na estufa para um recipiente retangular (forma) contendo parafina fundida que, depois de solidificada temperatura ambiente, d origem ao chamado bloco de parafina.

 Microtomia
a etapa em que se obtm delgadas fatias de peas

includas na parafina, atravs de um aparelho chamado micrtomo, que possui navalha de ao. A espessura dos cortes geralmente varia de 5 a 10 um (micrmetros). (1 um = 0,001 mm)

 Extenso - Montagem da lmina

Os cortes provenientes da microtomia so enrugados. Para desfazer estas rugas, so esticados num banho de gua a 58C, e pescados com uma lmina. Leva-se ento, estufa a 37C, por 2 horas, para que se d a colagem do corte lmina, pela coagulao da gelatina contida na gua quente.

- Colorao
- Tem a finalidade de dar contraste aos componentes dos tecidos, tornando-os visveis e destacados uns dos outros. a) Eliminao da parafina - banhos sucessivos em xilol. b) Hidratao - executada quando o corante utilizado solvel em gua. c) Colorao - os corantes so compostos qumicos com determinados radicais cidos ou bsicos que possuem cor, e apresentam afinidade com estruturas bsicas ou cidas dos tecidos. Usa-se hematoxilina, corante bsico, que se liga aos radicais cidos dos tecidos, e eosina, corante cido que tem afinidade por radicais bsicos dos tecidos.

Ncleos das clulas qual corante usar???? -predominam substncias cidas (DNA), so basfilos, ou seja, coram-se pela hematoxilina (corante bsico de cor roxa); E o Citoplasma das clulas qual corante usar????
- predominam substncias bsicas (protenas estruturais), acidfilo, corando-se pela eosina (corante cido de cor rosa).

Desidratao - visa retirar a gua, quando os corantes utilizados forem solues aquosas, a fim de permitir perfeita visualizao dos tecidos, pois a gua possui ndice de refrao diferente do vidro. Para isto usam-se banhos em lcoois de teor crescente. Diafanizao - a diafanizao feita com xilol, a fim de tornar os cortes perfeitamente transparentes. Montagem - a etapa final da tcnica histolgica, e consiste na colagem da lamnula sobre o corte, com blsamo do Canad, que solvel em xilol e insolvel em gua. A lamnula impede que haja hidratao do corte pela umidade do ar ambiente, permitindo ento que estas lminas se mantenham estveis por tempo indefinido.

Fotomicrografia de cortes histolgicos corados por HE Hematoxilina-Eosina.

Lminas de tecido sseo

Lminas sseas so confeccionadas de duas maneiras
Preparao por desgaste.

Desgaste polimento com lixa

Osso em crescimento, disco de cartilagem.

Radioautografia de rgos de ratos que foi injetado com 3H-fucose.

Radioautografia de rgos de ratos que foi injetado com H3-timidina.

Fotomicrografia de intestino delgado corado por imunohistoqumica.

Reao Feulgen

Citoqumica / Histoqumica

Como iremos interpretar as imagens visualizadas?

Os cegos e o elefante Poema de Sake

Eram seis homens do Industo, ao saber muito inclinados, que o elefante foram ver, (apesar de todos cegos) a fim de que, atravs da observao, pudessem satisfazer suas mentes.

O primeiro acercou-se do elefante E, acontecendo tocar O forte e vasto flanco, Logo comeou a exclamar: Abenoai-me! Mas o elefante a uma parede muito se parece.

O segundo, sentindo a presa, Gritou: Oh, o que temos c to Redondo, liso e agudo? Para mim est claro, Esta maravilha de elefante muito parecida com uma lana.

Os demais versos narram a experincia dos outros quatro cegos e, como cada um tocasse diferente parte do corpo do animal, seu conceito de um elefante diferia muito do outro companheiro.

Eles eram como jovens microscopistas que estudam cortes simples e imaginam o todo a partir de partes simples com muitas falsas concepes. Especialmente se nunca aprenderam A raciocinar em trs dimenses.

Vertical

Fotomicrografia de pele corada pela Gomori.

Fotomicrografia de pele corada pelo HE Hematoxilina Eosina.

Exerccio

Vamos memorizar e colocar os nomes das partes?

1. 2. 3.

O que diz a Teoria Celular? O que uma clula? Qual a principal ferramenta utilizada para o estudo das clulas? 4. O que diferencia um ser unicelular de um multicelular? 5. Por que os seres vivos possuem clulas de diferentes formatos? 6. Quais so as trs partes bsicas de uma clula? 7. Qual a principal caracterstica da Membrana Plasmtica? 8. Em quais clulas podemos encontrar a parede celulsica? 9. Onde encontramos as organelas. Quais so e suas funes? 10. Ao observar uma clula no microscpio pode-se perceber a existncia de cloroplastos. Esta clula : ____________. 11. Por que os cloroplastos so importantes para as plantas? 12. Onde iremos encontrar uma maior quantidade de mitocndrias: nas clulas dos nossos msculos ou da nossa pele? Justifique.