CCM CMB - MIP Disciplina de Bacteriologia Gnero Pseudomonas

Pseudomonas
CARACTERSTICAS GERAIS As espcies do gnero Pseudomonas so bacilos Gram-negativos, aerbios e mveis. Possuem necessidades nutricionais mnimas, sobrevivendo em uma grande variedade de ambientes. Encontram-se amplamente distribudas no solo e na gua, e podem tambm fazer parte da microbiota normal do trato intestinal e pele de 3 a 5 % da populao.

Figura 1: Pseudomonas sp: bacilos Gram-negativos

Adaptado de:

www.bact.wisc.edu/Bact330/lecturepseudomonas

Pseudomonas aeruginosa o principal patgeno humano do grupo, podendo causar infeces oportunistas especialmente em pacientes imunocomprometidos, como vtimas de queimaduras, pacientes com cncer ou fibrose cstica. Crescem facilmente mesmo em condies desfavorveis aos outros microrganismos e possuem resistncia intrnseca e adquirida aos antimicrobianos mais comuns, sendo causa freqente de infeces nosocomiais. uma bactria invasiva e toxignica. O conhecimento das caractersticas da P. aeruginosa e de seus mecanismos de patognese muito importante para os profissionais de sade. FATORES DE VIRULNCIA Os fatores de virulncia so os fatores prprios das bactrias utilizados para produzir as infeces. Estes fatores podem ser estruturais (ex: fmbrias) ou produzidos e liberados para o meio (ex: enzimas e toxinas). Como principais fatores de virulncia de P. aeruginosa podemos citar (Figura 2): Fmbrias ou pili que se extendem a partir da superfcie celular; Flagelo que confere mobilidade; Cpsula polissacardica com ao anti-fagocitria, importante para escapar do Sistema Imune do hospedeiro; Proteases que destroem protenas da matriz extracelular; Fosfolipase C que hidrolisa a lecitina, um fosfolipdio da membrana celular das clulas animais; Hemolisina que promove morte celular, principalmente entre as clulas de defesa; Toxina A que promove necrose tecidual por interromper a sntese de protenas nas clulas, mecanismo semelhante ao da toxina diftrica; Endotoxina (lipopolissacardeo LPS) presente na membrana externa, responsvel pelas manifestaes sistmicas.

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Adaptado de : Baron's Medical Microbiology 4th edition, 2000.

PATOGENIA A infeco por P. aeruginosa facilitada pela presena de uma doena de base, como neoplasias malignas e fibrose cstica, ou por uma falha no sistema de defesa inespecfico do hospedeiro (ex: perda da barreira fsica da pele nos pacientes queimados ou com escaras e perda da integridade tecidual nos pacientes em uso prolongado de cateteres intravenosos ou urinrios). Para causar a doena, a bactria precisa inicialmente se fixar pele ou s mucosas do paciente, atravs de suas fmbrias e outras estruturas superficiais. Em seguida ela prolifera e coloniza a rea, driblando as clulas de defesa atravs da produo da cpsula polissacardica e da hemolisina. A partir do local onde a P. aeruginosa foi introduzida, ela invade o tecido subjacente e atinge a corrente sangnea. Os fatores de virulncia que permitem a invaso tecidual so a fosfolipase C, a toxina A e o flagelo (entre outros). O LPS responsvel nesta fase pelas manifestaes sistmicas: febre, choque, oligria, leucocitose ou leucopenia, coagulao intravascular disseminada (CID) e sndrome da angstia respiratria do adulto (SARA). Os sinais e sintomas especficos da infeco por pseudomonas dependem do rgo ou tecido onde o microrganismo se instalou inicialmente, este patgeno oportunista pode colonizar virtualmente qualquer tecido. MANIFESTAES CLNICAS Infeces de feridas traumticas ou cirrgicas e queimaduras, produzindo um exsudato azul-esverdeado devido a liberao de dois pigmentos, a piocianina (azul) e pioverdina (verde); Meningite, quando introduzida por puno lombar; Infeco do trato urinrio, quando introduzida por cateteres urinrios e outros instrumentos ou solues de irrigao das vias urinrias; Pneumonia necrotizante, pelo uso de respiradores contaminados;

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Otite externa branda dos nadadores, j que a bactria amplamente encontrada em ambientes aquticos; Otite externa maligna (invasiva) em pacientes diabticos; Infeco ocular aps leso traumtica ou procedimentos cirrgicos; Sepse fatal, principalmente em lactentes e indivduos muito debilitados (pacientes com leucemia e linfoma que foram submetidos a radioterapia ou quimioterapia, pacientes com queimaduras muito graves); Ectima gangrenoso, necrose hemorrgica da pele que ocorre na sepse por P. aeruginosa.

Figura 3: Stios de infeco por P. aeruginosa.

Adaptado de: Baron's Medical Microbiology 4th edition, 2000.

Figura 4: Infeco ocular causada por P. aeruginosa devido ao uso prolongado de lente de contato, desrespeitando as instrues de limpeza das lentes.
Adaptado de:

www.eyecasualty.co.uk/maincontent1/cornealinfections.html

DIAGNSTICO Amostras: leses cutneas, exsudato, urina, sangue, LCR e escarro, dependendo do local da infeco. Esfregao: presena de bacilos Gram-negativos.

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Cultura: pode ser utilizado o gar-sangue ou meios para o crescimento de bacilos Gram-negativos entricos. A incubao pode ser feita a 42C, o que inibe o crescimento de outras espcies de Pseudomonas. Na cultura podem ser observados os seguintes aspectos: Colnias circulares e lisas, com produo de pigmento azul (piocianina) e/ou esverdeado fluorescente (pioverdina); Hemlise (no cultivo em meio gar-sangue); Odor caracterstico.

Figura 5: Crescimento de P. aeruginosa em agar nutriente. Note a produo de pigmento azul-esverdeado que se difunde no meio, conferindo a placa uma colorao caracterstica.
Adaptado de:

www.bmb.leeds.ac.uk/.../ug/ugteach/icu8/uti/pyocyanin.html

Testes de atividade bioqumica: a reao da oxidase e o metabolismo de diversos substratos permitem diferenciar a P. aeruginosa das outras espcies de pseudomonas. Em geral, a identificao da P. aeruginosa baseia-se na morfologia das colnias, na positividade da oxidase, na presena de pigmentos caractersticos e no crescimento a 42C. TRATAMENTO de extrema importncia a realizao de um ANTIBIOGRAMA para determinar a sensibilidade da cepa isolada aos antimicrobianos, tendo em vista o aumento das cepas multiresistentes, principalmente no ambiente hospitalar.

Figura 6: Antibiograma. Note halos de inibio que podem indicar sensibilidade aos antimicrobianos que impregnam certos discos, e ausncia de halos ao redor dos outros discos que revelam resistncia ao antimicrobiano usado no teste.
Adaptado de:

http://gold.aecom.yu.edu/id/micro/directsensi.htm

As principais medidas teraputicas para P. aeruginosa so: Associao de penicilina ativa contra P. aeruginosa (ticarcilina ou piperacilina) + aminoglicosdeo (gentamicina, amicacina ou tobramicina);

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Aztreonam, imipenem, quinolonas mais recentes (ciprofloxacina); Cefalosporinas de 4 gerao (ceftazidima).

EPIDEMIOLOGIA E CONTROLE A P. aeruginosa um importante agente de infeces hospitalares, sendo responsvel por 15% das bacteremias causadas por bactrias Gram-negativas. Cresce em vrios aparelhos e substncias, principalmente em ambientes midos, como: respiradores, tubulaes, pias, banheiras, alimentos, desinfetantes e medicaes com validade vencida, etc. As medidas de controle da infeco por pseudomonas incluem utilizao de materiais estreis, evitando sua contaminao durante a manipulao; realizao cuidadosa de tcnicas asspticas; lavagem das mos antes e depois de manipular o paciente; realizao de controle peridico da qualidade da gua e dos alimentos; evitar uso indiscriminado de antimicrobianos de amplo espectro para evitar a seleo de cepas resistentes. A vacina contra pseudomonas confere alguma proteo contra a sepse quando administrada a pacientes de alto risco (queimados, imunossuprimidos, pacientes com fibrose cstica ou leucemia).