Vrus da Imunodeficincia Humana- HIV

O vrus da imunodeficincia humana (HIV) o agente etiolgico da imunodeficincia adquirida (AIDS). A infeco pelo HIV causa uma doena progressiva que pode levar destruio do sistema imunolgico. A evoluo da doena caracteriza-se por uma elevada taxa de replicao viral. Nem todas as pessoas apresentam todos os estgios clnicos da doena, e o tempo entre a infeco e a manifestao dos diferentes quadros clnicos pode variar muito, dependendo do indivduo. At o momento foram descritos dois tipos de vrus HIV-1 e HIV-2. Classificao: Famlia : Retrovrus Subfamlia: Lentivirinae Caractersticas: Vrus de RNA fita positiva; Envelopado; Contm enzimas chave como a transcriptase reversa (RT) e a integrase; Apresenta dois RNAs de transferncia que servem como iniciadores para a RT; Estrutura viral: O HIV apresenta um nucleocapsdeo em forma de cone formado pela protena p24. Dentro desse nucleocapsdeo, existem duas molculas idnticas de RNA de fita simples, no covalentemente ligadas, com polaridade positiva, s quais as enzimas virais transcriptase reversa, integrase e protease, assim como a protena do nucleocapsdeo, p6, esto intimamente associadas. A superfcie do vrus formada por espculas constitudas por glicoprotenas presentes no envelope. A glicoprotena de superfcie do vrion (gp120) contm o stio de ligao aos receptores celulares e os principais domnios para neutralizao. Mecanismo de replicao viral: A primeira etapa da replicao do vrus HIV consiste na interao das glicoprotenas do envelope viral com receptores da clula. Depois de se dar a infeco, o HIV dissemina-se por todo o organismo encontrando e ligando-se a potenciais clulas hospedeiras tais como macrfagos, clulas dendrticas ou linfcitos T "helper". Todas estas clulas tm em comum o fato de expressarem um receptor proteico denominado CD4, existindo este na superfcie celular. A glicoprotena de superfcie gp120 do vrus se liga a esse receptor CD4 das clulas. Essa ligao alm de ser um passo crucial para a entrada do vrus nas clulas, tambm interfere com as vias intracelulares de transduo de sinal e promove a apoptose das clulas TCD4+. Por meio dessa interao, a glicoprotena gp120 se liga a um segundo receptor ou co-receptor de quimiocinas denominado CCR5 (expresso em clulas ativadas) ou CXCR4 (expresso em clulas no ativadas). A ligao de gp120 (extracelular) a CD4 e ao co-recptor leva tambm a uma alterao conformacional de

gp41 (transmembrana), permitindo que ela se desdobre e insira suas terminaes na membrana celular, permitindo a fuso do vrus com a clula. Aps o desnudamento do nucleocapsdeo, o complexo da transcriptase reversa liberado no citoplasma. Uma vez no citoplasma, inicia-se a fase precoce da replicao: a RT utiliza o RNA de transferncia do vrus como primer e sintetiza um DNA complementar de fita negativa a partir do RNA viral, criando um hbrido DNA/RNA. Todos os fragmentos de RNA que restam so digeridos. A RT degrada o genoma de RNA e ento sintetiza a fita positiva do DNA. A RT o principal alvo de drogas antivirais e muito susceptvel a erros, fato que aumenta a instabilidade gentica do HIV. O DNA viral fita dupla transportado ao ncleo. A Integrase viral permite a insero do DNA viral no genoma do hospedeiro. Para que esta integrao ocorra, necessrio que a clula esteja ativada, caso contrrio o DNA c pode permanecer no citoplasma ou no ncleo na forma de um DNA circular no integrado. Aps a insero, comea a fase tardia da replicao: o DNA viral transcrito como um gene celular pela RNA polimerase II do hospedeiro. A replicao viral depende da taxa de crescimento celular e da capacidade da clula em reconhecer as regies promotoras e amplificadoras. A poliprotena gp160 sintetizada no retculo endiplsmtico e depois transportada para o complexo de golgi onde clivada gerando gp120 e gp41. pos a clivagem, as glicoprotenas, no covalentemente associadas so transportadas para a membrana plasmtica. As poliprotenas estruturais sintetizadas nos ribossomos livres se renem no citoplasma com os RNAs virais e migram para a membrana plasmtica onde j esto as glicoprotenas virais. Os vrus saem da clula atravs do mecanismo de brotamento. Nesse momento, as partculas virais so imaturas e no-infecciosas. Durante o brotamento, o vrus pode incorporar diferentes protenas do hospedeiro, como as protenas do hospedeiro (incluindo protenas de adeso que podem facilitar a adeso a outras clulas-alvo, assim como pode incorporar certos fosfolipdeos e colesterol. Nas clulas T, os vrions so liberados, pelo processo de brotamento da superfcie celular, no espao extracelular, enquanto em moncitos e macrfagos ocorre o acmulo de vrions em vacolos celulares. No brotamento pode ocorrer lise (ciclo ltico) ou a clula pode continuar a se dividir (ciclo lisognico). A maturao do vrus ocorre no meio extracelular. A protease realiza a clivagem proteoltica dos precursores individualizando as protenas estruturais, de modo que a partcula viral toma a forma caracterstica, apresentando nucleocapsdeo em forma de cone, sendo ento infecciosa. Genes auxiliares do HIV:

Patognese: Tropismo viral por clulas T CD4 e Macrfagos; Os macrfagos so provavelmente o principal reservatrio e meio de distribuio do HIV; Ocorre replicao contnua do vrus nos linfonodos, com subsequente liberao dos vrus e clulas T infectadas no sangue; Reduo no nmero de clulas T CD4: citlise induzida pelo vrus e citlise induzida por clulas T CD8; Perodo de incubao: duas quatro semanas. A capacidade do HIV-1 de infectar um indivduo depende de alguns fatores: Fatores relacionados s caractersticas biolgicas do indivduo: concentrao do vrus, integridade e vulnerabilidade da mucosa envolvida (anal,vaginal ou oral), durao da exposio e amostra viral transmitida. Fatores relacionados s caractersticas comportamentais do indivduo: indivduos com mltiplos parceiros sexuais, falta de uso de preservativos e compartilhamento de seringas contaminadas. Mecanismo de evaso do sistema imune:

Processo da infeco: pos a infeco pelo vrus ocorre sua disseminao para os tecidos linfides. Nessa etapa, a resposta imunolgica agresso sofrida pelo agente viral normal. Devido heterogeneidade gentica que constitui a populao do HIV e s clulas que funcionam como reservatrios para o vrus, os anticorpos neutralizantes no so capazes de eliminar todas as partculas virais, ocorrendo, ento uma replicao persistente no organismo, com o sistema imunolgico tentando debelar a infeco. H uma ativao imunolgica crnica, em que novas partculas virais so produzidas e mais clulas do sistema imunolgico so lanadas na circulao, na tentativa de eliminar esses vrus. Por outro lado, os vrus tambm so capazes de destruir as clulas que normalmente seriam capazes de destru-los. Com isso, h a liberao de citocinas que fazer com que sejam expressas mais molculas que funcionam como co-receptores para o vrus na superfcie de linfcitos, com amplificao da populao viral em vrios ciclos, e leva anos at que o sistema imunolgico do indivduo entre em colapso. Quando isso acontece, comeam a aparecer as manifestaes clnicas da imunodeficincia, com as infeces oportunistas por micro-organismos que se aproveitam da debilidade

imunolgica do organismo.

A infeco primria caracteriza-se por viremia elevada e resposta imunolgica intensa. Aps a infeco primria, a quantidade de vrus diminui devida produo de anticorpos e a soroconverso. medida que o nmero de linfcitos vai diminuindo pelo comprometimento do sistema imunolgico, a carga viral aumenta (quantidade de vrus no plasma). A fase assintomtica dura de meses anose est relacionada com imunodeficincia progressiva. Aps a infeco aguda, apesar do aparente desaparecimento do vrus na circulao, a replicao do HIV continua nos tecidos linfides. Estudos mostraram que o vrus continua sua replicao no perodo de latncia clnica, isso mostra que a infeco persistente crnica, com produo do vrus em todos os estgios da doena. Infeco do sistema nervoso central: Infeco de neurnios e clulas gliais; Substncias e fatores neurotxicos liberados por moncitos e clulas da micrglia infectadas; Promoo de respostas inflamatrias no crebro; O HIV pode causar demncia na fase terminal da doena, e comprometimento neorolgico quando o paciente ainda est na fase aguda da infeco. O HIV pode atingir o SNC e ai persistir por dcadas, podendo causar sintomas de disfuno motora e congnitiva e alterao de comportamento. Outros vrus podem contribuir para a neuropatologia da AIDS. Na ausncia das infeces oportunistas, os princiapsi sintomas clnicos so perda de memria, dificuldade de concentrao, fraqueza nas pernas, movimentos lentos com as moes e depresso, frequentemente acompanhados por alteraes no comportamento. Neuropatologia do HIV: infiltrao dos macrfagos no SNC, formao de ndulos de micrglias (formao slida que, na maioria das vezes, benigna, mas, sim, pode ser um cncer) e formao de sinscios (Conjunto de clulas que se fundem, perdendo parte de sua membrana, e formando uma nica massa citoplasmtica multinucleada), possivelmente resultado da fusao de micrglias e/ou macrfagos, ativao e dano dos astrcitos e perda neuronal. O HIV atravessa a barreira hematoenceflica por um mecanismo ainda desconhecido.

Resevatrios para o HIV:

Os reservatrios para o HIV podem ser macrfagos e moncitos, clulas dendrticas, clulas TCD4+ em repouso e clulas TDC4+ de memria em repouso. Macrgados: importantes reservatrios para o vrus. So infectados logo no incio da infeco e permanecem assim por muito tempo. Por outro lado, a infeco dessas clulas prejudica suas funes imunolgicas virais, como por exemplo a fagocitose, a produo de citocinas e a quimiotaxia. Clulas dendrticas: Retardam a liberao do vrus, carregando as partculas aprisionadas na superfcie ou no seu interior. Clulas dendrticas infectadas migram para os linfonodos, onde transferem vrus para os linfcitos. Clulas TCD4+ quiescentes (em repouso): O HIV penetra nas clulas, mas a transcrio reversa no termina, resultando em uma forma de pr-integrao no citoplasma, que leva latncia. Para que aconteam a integrao do DNA proviral no genoma da clula e a produo de vrus, necessria a ativao celular. Considerando que essas clulas esto em repouso, h o acmulo do DNA do HIV no-integrado. Existem evidncias de que gp120 pode ativar as clulas infectadas para ocorrer a integrao. Linfcitos TCD4+ de memria em repouso: Carregam o provrus integrado no genoma e tambm constituem reservatrios latentemente infectados. Embora as clulas TCD4+ ativadas sejam altamente susceptveis infeco, morrendo rapidamente, algumas dessas clulas podem sobreviver, reverter para um estado de repouso e se tornar clulas de memria, com o prvirus integrado. Esse considerado o mais importante reservatrio para a erradiao da doena. Resposta imunolgica para o HIV: Resposta humoral: Produo de anticorpos que aparecem algumas semanas aps a infeco. Embora a maioria dos anticorpos sejam dirigidos contra restos de vrus que foram degradados, uma parte deles neutraliza partculas virais ntegras atravs da ligao s glicoprotenas na superfcie dos vrus, ou depois da ligao de gp120 ao receptor CD4, impedindo a fuso. No entanto mnimo o efeito dos anticorpos sobre a produo de vrus, considerando que eles no conseguem neutralizar todas as partculas virais circulantes. Durante a fase crnica, poucas evidncias indicam a contribuio dos anticorpos nesse processo de neutralizao. Resposta celular: essencial para limitar a replicao do HIV, com a resposta dos linfcitos T citotxicos CD8+ (CTL) e linfcitos TCD4+ auxiliares. As clulas T CD8+ so encontradas na infeco aguda da AIDS at os estgios iniciais da AIDS, quando toda a resposta imunolgica est comprometida, pois a replicao viral persistente e est continuamente estimulando a resposta imunolgica. Em estgios mais avanados da infeco, ocorre a reduo do nmero dessa clulas, que pode estar relacionada com o aumento da replicao viral. Os linfcitos TDC4+ auxiliares esto presentes em maior

nmero no incio da infeco do que em fases tardias, quando decaem substancialmente, com consequente diminuio dos CTL, culminando na perda do controle da replicao viral. A estimulao crnica persistente pode levar exausto dessas clulas de defesa. (anexo na outra apostila) Epidemiologia: A infeco humana inicial pelo HIV ocorreu por volta de 1930, na frica; O vrus no entanto se disseminou, atravs da migrao de pessoas infectadas, e em 1960 acabou atingindo os centros urbanos; A AIDS foi inicialmente notada em homossexuais do sexo masculino nos EUA, mas se disseminou em propores epidmicas atravs da populao; Em 2003, estimou-se que 5 milhes de novas infeces por HIV ocorriam por ano, com 3 milhes de morte. Manifestaes clnicas: Infeco aguda (2 a 4 semanas aps a infeco): sintomas semelhantes aos da gripe, derivados das respostas imunolgicas desencadeadas pela infeco das clulas linfides. Estabilizao da viremia em nveis variados: definidos pela velocidade de replicao e diminuio da quantidade de vrus. Fase assintomtica: no existem sinais clnicos. Ocorre replicao viral contnua, e debilitao progressiva do sistema imunolgico, com transmisso do vrus. Fase sintomtica inicial: os sintomas podem variar como: febre, cefalia, sudorese noturna, mal-estar, fadiga, diarreia e perda de peso. Podem ocorrer vrias condies dermatolgicas como: herpes, dermatite seborrica etc. Fase sintomtica intermediria: mesmos sintomas da fase anterior, que podem piorar nesse estgio. Alm disso, podem ocorrer tambm, candidase oral ou genital, sinusite, bronquite e pneumonia. Fase tardia: grande risco de contrair pneumonia, encefalite e candidase esofgica Fase avanada: podem ocorrer todas as manifestaes clnicas mencionadas e citomegalovirose disseminada, sarcoma de Kaposi etc. Os outros sintomas que o paciente j apresentava pioram, podendo ocorrer tambm acentuada perda de peso e complicaes neurolgicas. Formas de transmisso: Sexual, sangunea (receptores de sangue, ou hemoderivados e em usurios de drogas injetveis) e vertical, em que a me pode transmitir o vrus para o filho durante a gestao (infeco congnita), parto (infeco perinatal) ou aleitamento (infeco ps-natal). Preveno: As principais estratgias para a preveno e o controle da infeco pelo HIV,

recomendadas pelas autoridades sanitrias so: esclarecimento populao sobre as formas de transmisso da infeco e maneiras de proteo, incentivo ao uso de preservativos, esclarecimento quanto ao uso de agulhas e seringas descartveis, controle do sangue e hemoderivados, adoo de cuidados na exposio ocupacional a material biolgico, com a orientao sobre a utilizao sistemtica das normas de biossegurana e o tratamento de outras doenas sexualmente transmissveis, que podem facilitar a infeco pelo HIV. Diagnstico laboratorial: Realizado em 3 situaes: Identificar indivduos infectados com o objetivo de se iniciar a terapia; Identificar portadores que possam transmitir a infeco; Acompanhar o curso da doena; O HIV pode ser detectado atravs de exames sorolgicos devido suas caractersticas de infeco crnica, no entanto estes exames no so efetivos para a deteco de pessoas infectadas recentemente, devido ao que se chama janela imunolgica, que o perodo em que o indivduo j est infectado mas a quantidade de anticorpos est no limite de deteco do teste empregado. A infeco recente pode ser detectada atravs do antgeno viral p24, da enzima transcriptase reversa ou de uma grande quantidade de RNA viral no sangue. PCR reao em cadeia da polimerase: Tcnica baseada na amplificao do cido nucleico viral. Objetivo: identificar a quantidade de material gentico atravs da sntese de sequncias de DNA em vitro, para quantificar as partculas virais existentes no sangue. O cido nucleico alvo isolado de tecidos, fluidos do paciente ou de culturas de clulas infectadas. Os iniciadores circundam a sequncia especfica do DNA. Quando eles se ligam ao DNA-alvo (hibridizao), a DNA polimerase inicia a replicao da sequncia-alvo (extenso). O tampo fornece as condies adequadas para a atividade da DNA polimerase. Esse processo cclico repetido diversas vezes para amplificar o DNA. A reao realizada num termociclador, o qual aumenta ou diminui a temperatura de acordo com as necessidades do processo para permitir a PCR. O produto amplificado pode ser visualizado aps eletroforese e colorao em gel. Estudos imunolgicos: Nmero absoluto de clulas T CD4; Relao entre clulas T CD4 e CD8; Objetivo: Quantificar as clulas para identificar em que estgio da doena o paciente se encontra. Tratamento:

Medicamentos disponveis: Inibidores da Fuso/penetrao viral Enfuviritida Inibidores nucleosdicos da Transcriptase reversa Zidovudina, Lamivudina Inibidores no-nucleosdicos da RT Viramune Inibidores de Protease Norvir, Invirase Terapia antiretroviral altamente ativa (HAART)